一株狂犬病病毒减毒株CTN-181的表型特性研究

目的全面了解狂犬病病毒减毒株CTN-181的表型特征,并与其亲本株CTN-1进行比较。方法将CTN-181株病毒在BHK21细胞中培养,观察其细胞病变和空斑形成特性;用细胞培养的病毒以脑内、肌内和口腔的方式接种不同周龄的小白鼠,同时脑内接种家兔和豚鼠,以同法接种其亲本株CTN-1进行毒力比较。另外,将病毒在BHK21细胞连续传10代,在乳鼠脑内传3代观察其弱毒特性的稳定性。结果 CTN-181株在BHK21细胞上培养出现较CTN-1株明显的细胞病变、较高的空斑滴度。CTN-181株对家兔、豚鼠脑内接种不致病,对4周龄以上的小鼠任何途径接种均不致病,而其亲本株CTN-1株对这些动物均致病或致死。CTN-181株通过细胞传10代和乳鼠脑内传3代后减弱的毒力未回升,无弱毒返祖现象。结论 CTN-181是一株减弱且稳定的减毒株,其弱毒的表型特征与WHO推荐用于制备动物和犬的口服疫苗株SAG2相似。

狂犬病病毒减毒株CTN-181毒力减弱的分子基础研究

目的了解CTN-181弱毒株的全长基因结构及其毒力减弱的分子基础。方法将CTN-181的全长基因进行测序并与4株减毒疫苗株和5株街毒株进行全序列基因比对,与CTN-181株的母株CTN-1进行不同区段蛋白基因中的替换位点比较。结果全长基因比较显示,CTN-181株与其他9株狂犬病病毒的核苷酸和氨基酸同源性为81.4%～93.3%和86%～97%。与CTN-1母株比较,CTN-181株存在12处核苷酸和7处氨基酸突变,氨基酸突变位点发生在N157(N→S),M187(Q→P),G276(L→V),G333(R→Q),G336(N→D),G389(E→K)和L1061(S→N)。结论 CTN-181存在7处氨基酸突变,可以认为是其毒力减弱的分子基础,其中在G蛋白内的4个位点的氨基酸突变最为重要。