理气舒心片中染色剂金胺O检测方法研究

目的:建立理气舒心片中染色剂金胺O的检测方法。方法:色谱柱为OMNI-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.033 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(30∶70),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为436 nm。结果:金胺O在0.967~8.703μg·mL^(-1)范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为95.01%(RSD=2.3%,n=6),精密度、重复性和溶液稳定性良好,方法检出限为0.092μg·g^(-1)。6家生产企业共38批样品中发现有1家企业的5批样品中检出金胺O,含量在1.06~4.63μg·g^(-1)。结论:该方法操作简便、灵敏度好、准确度高,可用于理气舒心片中金胺O的检测。

液相色谱-串联质谱法同时测定蒲黄、黄柏和石斛中的金胺O

目的:建立中药材蒲黄、黄柏和石斛中可能存在的染色剂金胺O的检测方法及阳性样品中金胺O的定量测定方法。方法:采用HPLC-MS/MS二级质谱对中药材蒲黄、黄柏和石斛中含金胺O的阳性样品进行定量测定,并进行方法学验证。质谱采用电喷雾正离子扫描(ESI+),二级质谱全扫描模式(production ion mode),母离子m/z 268.1,子离子扫描范围m/z 100~280。C18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.9μm),柱温40℃,以2%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),进样量5μL,外标定量。结果:金胺O在0.776~7.760μg质量范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.99991),平均回收率为100.9%(RSD=1.4%)。结论:本方法具有良好的精密度、重现性和稳定性,线性关系良好,可用于中药材蒲黄、黄柏和石斛中金胺O的检测。

超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法检测凉茶中的碱性嫩黄O

建立了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(Ultra Performance Liquid Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS)测定凉茶中碱性嫩黄O的快速分析方法。以乙腈作为提取剂,样品经过涡旋混合、超声提取12 min和高速离心后,所得上清液用微孔滤膜过滤,采用UPLCMS/MS进行测定,以外标法定量。在质量浓度为0.10~20.00 ng·mL^(-1)时,碱性嫩黄O具有良好的线性关系,相关系数为0.9998,方法检出限为0.5μg·kg^(-1),定量限为1.0μg·kg^(-1)。添加水平为2.0~25.0μg·kg^(-1)时,样品加标回收率为86.7%~95.5%,相对标准偏差为3.5%~3.9%。该方法精密度好,准确度高,方便快捷,适用于凉茶中碱性嫩黄O含量的测定。

高效液相色谱法同时检测食品中的碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T染料含量

建立了食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T染料含量的高效液相色谱检测方法。样品经碱化甲醇提取,提取液在碱性条件下用二氯甲烷萃取,浓缩后用酸化甲醇溶解并用甲醇饱和正己烷萃取净化后经高效液相色谱分离、检测。本方法检测限分别为碱性橙0.02mg/kg、碱性嫩黄O0.03mg/kg、碱性桃红T0.004mg/kg。6种食品样品加标回收率实验所得回收率为72.3%～96.5%,相对标准偏差(RSD)为0.3%～8.8%(n=6),三种染料在0.05～2.5μg/ml浓度范围内均呈良好的线性关系,线性回归系数(r)均大于0.9998。

高效液相色谱法同时测定食品中7种非食用色素

建立了高效液相色谱法同时测定食品中7种非食用色素(碱性嫩黄O、碱性橙、酸性橙Ⅱ、酸性金黄、玫瑰红B、对位红、苏丹红Ⅰ)的方法。依次采用乙腈、甲醇和碱性甲醇提取豆制品和肉制品;采用乙腈和70%乙腈依次提取调味品。采用SunFireTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-50 mmol/L乙酸铵水溶液(H3PO4调至pH 4.5)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,测定波长为450和520 nm。7种非食用色素的在各自相应浓度范围内线性相关系数均大于0.998;检出限(LOD)在0.01～0.1 mg/L之间;定量限(LOQ)在0.18～1.2 mg/kg之间。平均回收率均大于80%;相对标准偏差(RSD,n=3)在2.0%～5.7%之间。

HPLC法同时测定食品中酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的含量

建立了同时检测食品中酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O两种非食用色素HPLC方法。样品经V(甲醇):V(水)=70:30超声提取,经C_(18)小柱净化后上样。色谱条件采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为V(甲醇):V(50 mmol/L乙酸铵)=50:50溶液,流速1.0 m L/min,检测波长450 nm,柱温35℃。结果表明:酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O在进样浓度2.5~12.5μg/m L内呈良好的线性关系,线性方程分别为Y=2×10~6X-1 240.1(r=0.999 9),Y=7×10~6X-5 284.2(r=0.999 6),二者检出限分别为0.120和0.032 mg/kg,在5类食品中的加标回收率分别为80.33%~90.47%和80.17%~102.64%。经方法学评价和抽样分析,该方法简便准确,重复性好,可作为食品安全检测中同时检测酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O参考方法。

水产品中碱性嫩黄O残留量的液相色谱-串联质谱测定

建立了水产品中碱性嫩黄O工业染料残留的高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定方法。样品经甲醇超声提取、旋转蒸发浓缩、过滤后，在正离子电喷雾离子源（ESI^＋），多反应监测（MRM）模式下进行测定。方法线性范围为2．5-100μg·L^-1，在添加水平为S．O～20．0μg·kg^-1时的平均回收率为78．9％～92．1％，相对标准偏差小于11％，定量限为0．5μg·kg^-1。

固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法同时检测食品中的6种工业染料

建立了超高效液相色谱一串联质谱（UPLC-MS／MS）同时检测食品中6种工业染料含量的方法。样品用含50％甲醇和1％甲酸的50mmol／L乙酸铵溶液进行提取、WAX弱阴离子交换固相萃取柱进行净化后，采用多反应监测（MRM）模式进行检测，基质曲线外标法定量。其中酸性橙Ⅱ采用负离子模式检测，其余5种染料采用正离子模式检测。碱性橙Ⅱ、罗丹明B、碱性嫩黄O、罗丹明6G、碱性桃红T的定量限为1．6μg／kg，酸性橙Ⅱ为6．0μg／kg；碱性橙Ⅱ、罗丹明B、碱性嫩黄O、罗丹明6G、碱性桃红T的线性范围为1．0～100．0μg／L；酸性橙Ⅱ的线性范围为5．0～100pg／L，线性相关系数均大于0．999。6种染料的回收率为70．3％～109．2％；相对标准偏差（RSD）为2．6％～14．1％。本方法灵敏度高，操作简单高效，适合于食品中6种非法添加工业染料的定量及确证分析。

固相萃取-液质联用同时检测豆制品中4种红黄色系工业染料

目的以WAX固相萃取柱净化处理,建立豆制品中违禁添加色素碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O、酸性橙Ⅱ和罗丹明B的前处理方法。方法利用电喷雾离子源(ESI),碱性橙、碱性嫩黄和罗丹明B采用正离子模式,酸性橙采用负离子模式,建立正负离子切换的多反应监测(MRM)的检测方法。结果碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O的检出限为1.0g/kg,酸性橙Ⅱ和罗丹明B的检出限为0.5g/kg,方法回收率为84.295.1%,相对标准偏差(RSD)小于4.5%。结论建立的液质联用方法具有快速、灵敏、准确等优点,可用于豆制品中上述4种非法添加的红黄色系工业染料的同时测定及确证。

高效液相色谱-二极管阵列法测定豆制品中碱性嫩黄O的含量

研究了以高效液相色谱-二极管阵列法测定豆制品中的碱性嫩黄O含量的检测方法。采用Hypersil ODS-C18色谱柱,以4:6(V/V)的甲醇-0.5%乙酸铵溶液作流动相,流速1.0mL/min,用二极管阵列检测器于436nm波长下进行检测,并以保留时间和三维光谱图相似性系数进行定性。方法线性范围为0.25-50μg/mL(r=0.9999),在5.0g 样品中加入250μg标准物质的回收率及相对标准偏差(RSD)分别为95.0%(n=6)和1.5%(n=6)。

伪品人工牛黄中染色物质的鉴定

目的建立伪品人工牛黄中染色物质鉴定方法。方法采用TLC法对人工牛黄中非法添加染色物质的种类进行分析,并用HPLC-DAD法对染色物质进行确定,进一步用HPLC-MS法对染色物质进行验证。结果伪品人工牛黄样品中检出金橙Ⅱ、金胺O和胭脂红。结论伪品人工牛黄中掺有化工原料,且掺入的色素对人体有害。

高效液相色谱法同时测定黄花鱼中4种禁用黄色工业染料

采用高效液相色谱法同时测定黄花鱼中4种工业染料(碱性嫩黄O、橙黄G、碱性橙Ⅱ和皂黄)。以Kromasil C_(18)柱为分离柱,以不同体积比的甲醇、水和20 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,在波长430nm处进行测定。上述4种染料的线性范围依次为0.05~2.0 mg·L^(-1),1.0~15.0 mg·L^(-1),0.1~5.0 mg·L^(-1)及0.4~15.0mg·L^(-1)。方法的检出限(3S/N)在0.0025~0.05μg·kg^(-1)之间。以黄花鱼样品为基体进行回收试验,测得回收率在96.4%~98.1%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.3%~2.5%之间。

表面增强拉曼散射法快速检测饮料中碱性嫩黄O

基于表面增强拉曼散射光谱(surface-enhanced raman spectroscopy,SERS)技术建立饮料中碱性嫩黄O定性、定量快速检测方法。通过基质空白对照进行梯度浓度的碱性嫩黄O的SERS检测发现,在780 cm^(-1)处具有明显的碱性嫩黄O特征峰,特征峰强与碱性嫩黄O浓度呈现良好的线性关系,其中碳酸饮料中碱性嫩黄O和功能性饮料中碱性嫩黄O检测的线性范围分别为2.5~20μg/L与5~60μg/L,最低检出限分别为2.5μg/L和5μg/L,回收率分别为98.4%~104.1%,101.1%~102.7%,相对标准偏差均小于5%。该方法重现性较好、全程分析时间短、前处理方法简便、操作简单便、设备便于携带,可有效用于饮料中碱性嫩黄快速检验监督。

薄层色谱-表面增强拉曼光谱法快速检测染色掺伪的西红花

目的建立一种薄层色谱-表面增强拉曼光谱法对染色掺伪的西红花进行检测。方法将乙醇溶液润湿的西红花按压在表面喷有银溶胶的薄层板上,然后对按压区域进行表面增强拉曼散射(SERS)检测。依次对润湿剂的浓度、银溶胶的喷洒时间和喷洒量等因素进行优化。结果成功检测经金胺O、新品红、柠檬黄和胭脂红4种常见染料染色的西红花药材。结论薄层色谱-表面增强拉曼光谱法可实现对染色西红花简单、快速、灵敏的检测要求,并满足现场快速检测的需求。

高效液相色谱-串联质谱法同时检测辣椒制品中4种工业染料

为了同时检测辣椒制品中碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O、罗丹明B和对位红,利用超声提取结合液相色谱-串联质谱法,采用XTerra C18柱分离,以甲醇和含0.1％甲酸的5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱.在正离子模式下采用多反应监测（MRM）方式进行检测,采用基质曲线外标法进行定量.辣椒制品用乙腈-水超声提取,离心后取上清液进样分析.结果表明,碱性嫩黄O、罗丹明B的线性范围均为0.2～10 μg/L,碱性橙Ⅱ、对位红的线性范围均为2～100 μg/L,且线性相关系数均大于0.99.4种工业染料的检出限为0.03～0.60 μg/kg,回收率为90.1％～116.0％,相对标准偏差为5.6％～14.8％.该方法选择性强,灵敏度高,且样品处理操作简单,适合于食品中4种非法添加工业染料的同时测定及确证分析.

金胺O荧光染色在石蜡组织切片麻风病诊断中的应用

目的为了验证金胺O荧光染色法应用于石蜡组织切片麻风杆菌检测的可行性。方法用金胺O荧光法对6例确诊为麻风病的病理组织切片进行染色,并与抗酸染色结果进行对比。结果荧光染色法6例结果均为阳性,在暗背景下麻风杆菌显示明亮淡绿色荧光;在菌量较少荧光染色片中寻找单根麻风杆菌,较抗酸染色片更为容易。结论金胺O荧光染色法可用于石蜡组织切片麻风病的诊断,麻风杆菌单根散在时比抗酸染色法有一定优势。

高效液相色谱法测定中药中的五种禁用黄色工业染料

建立了反相高效液相色谱法同时测定五种中药中的五种工业染料（金胺O、橙黄G、金橙II、碱性橙II和皂黄）的方法。色谱柱为Kromasil C18（4．6 mm＆#215;250 mm,5μm）；检测波长为430 nm；温度30℃；流动相为甲醇-水-乙酸铵（20 mmol.L-1）,梯度洗脱；流速1．0 mL.min-1。金胺O、橙黄G、金橙II、碱性橙II和皂黄的方法检出限分别为（0．05、0．5、0．2、0．1和0．2μg.mL-1）（S/N=3）。样品的平均加标回收率为92．28-109．1%, RSD为0．56-1．5%。在供试品蒲黄和黄芩中检出工业染料金胺O。方法可用于五种常见中药中相关非法添加染料的检测。

LC-MS/PAD法测定非法染色的中药蒲黄和黄芩饮片中金胺O

目的:建立快速、准确、高灵敏度的中药饮片中非法用金胺O染色的专属性检测方法。方法:采用LC-MS/PAD法,离子源为ESI源,正离子检测,通过相对分子质量、二级质谱碎片信息、液相色谱保留时间和PAD图谱4方面信息,对蒲黄、黄芩片中金胺O进行定性检测。结果:10批受试中药饮片中均检测到金胺O。结论:该方法选择性强、灵敏度高,可作为判断中药饮片是否经金胺O进行染色处理的有效检测方法。

表面增强拉曼光谱法快速鉴别非法染色的关黄柏药材

目的采用表面增强拉曼光谱法(SERS)对非法染色的关黄柏进行快速检测。方法采用原位还原法制备的银胶纸作为SERS基底,擦拭经乙醇溶液润湿的关黄柏,银胶纸的擦拭区立即进行SERS检测。本文先后对硝酸银的浓度、银胶纸的增强效果及稳定性等因素进行考察和优化。结果成功鉴别经0.01 mg·m L-1金胺O染料染色的关黄柏。结论表面增强拉曼光谱法可实现对染色黄药材的快速、简单、灵敏和无损的鉴别。

基于双定性原则的高效液相色谱-二极管阵列检测法分析中药组分

双定性是根据样品的保留时间和吸收光谱的特征峰进行复合定性的一种新方法。该文基于自行设计及组装的二极管阵列检测器,构建了一套液相色谱-二极管阵列检测系统。采用该色谱系统分别对6种中药饮片中的非法添加物金胺O和枣仁天麻胶囊中的有效成分五味子醇甲进行了分离及定性研究。结果显示,在蒲黄饮片和枣仁天麻胶囊样品色谱图中均存在与目标检测物保留时间接近的色谱峰,进一步通过吸收光谱的特征峰比对,均排除了目标物存在的可能。应用结果证明,基于保留时间/吸收光谱的双定性原则,可以有效排除样品中杂质的干扰,避免假阳性结果,为中药组分研究提供了参考方法。