改良B-NHL-BFM-90方案治疗儿童青少年伯基特淋巴瘤的疗效分析

背景与目的:伯基特淋巴瘤是高度恶性非霍奇金淋巴瘤,进展快,常伴骨髓和中枢侵犯,死亡率高。CHOP方案疗效差,生存率低。伯基特淋巴瘤的最佳化疗方案仍需要积极探讨。本研究总结中山大学肿瘤防治中心近年来采用改良B-NHL-BFM-90方案治疗儿童青少年伯基特淋巴瘤的疗效和生存率。方法:从1999年10月至2006年11月,31例20岁以下经病理确诊的伯基特淋巴瘤患者入组。年龄1.5～20岁,中位年龄5岁;男性20例(64.5%),女性11例(35.5%)。临床分期(StJude分期):Ⅰ期1例(3.2%),Ⅱ期6例(19.4%),Ⅲ期8例(25.8%),Ⅳ期16例(51.6%),Ⅲ/Ⅳ期患者占77.4%。根据临床分期、治疗反应和LDH水平,将患者分为低危组、中危组和高危组。采用改良B-NHL-BFM-90方案治疗,药物包括cyclophosphamide、vincristine、ifosfamide、etoposide、adriamycin、HD-methotrexate、vindesine、dexamethasone、cytarabine/HD-cytarabine和鞘内注射。结果:31例患者中1例于诱导前期死于肿瘤溶解综合征。30例可评价疗效。30例中25例(83.3%)完全缓解,3例(10.0%)部分缓解,2例(6.7%)进展。1例复发。治疗期间大部分患者发生Ⅲ/Ⅳ度骨髓抑制,经积极对症支持治疗可恢复,不影响下一疗程治疗。中位随访33个月(3～98个月),全组3年无事件生存率86.0%;Ⅰ/Ⅱ期100%,Ⅲ/Ⅳ期82.1%;低危组100%,中危组92.0%,高危组70.0%。结论:改良B-NHL-BFM-90方案可明显改善儿童青少年伯基特淋巴瘤的疗效和生存率,毒性可耐受,但需要在有经验的肿瘤中心和血液科中应用。

改良B-NHL-BFM-90方案治疗儿童青少年间变T细胞淋巴瘤的疗效分析

背景与目的:儿童青少年间变大细胞淋巴瘤侵袭性较强,最佳的治疗策略和方案仍需要探讨。本研究总结采用改良B-NHL-BFM-90方案治疗的儿童青少年间变T细胞淋巴瘤疗效和生存率,探讨该治疗方案的临床推广价值。方法:从2002年10月至2008年1月,18例16岁以下经病理确诊的初治间变T细胞淋巴瘤患者入组,采用改良B-NHL-BFM-90方案治疗,药物包括cyclophosphamide、vincristine、ifosfamide、etoposide、adriamycin、HD-methotrexate、vindesine、dexamethasone、cytarabine或HDcytarabine,同时每个疗程鞘内注射一次。结果:15例(83.3%)完全缓解(complete remission,CR),3例(16.7%)部分缓解(partial remission,PR),总有效率100%。中位随访31个月(4～68个月),全组3年无事件生存率(event-free survival,EFS)(87.4±8.4)%;Ⅰ/Ⅱ期患者为100%,Ⅲ/Ⅳ期患者为(85.1±9.7)%;低危组100%,中危组(88.9±10.5)%,高危组(80.0±17.9)%。治疗期间大部分患者发生Ⅲ/Ⅳ度骨髓抑制,积极对症支持治疗后均恢复。1例Ⅳ期患者CR后行自体造血干细胞移植生存至今。2例患者分别于停止治疗3个月和5个月后复发死亡。结论:改良B-NHL-BFM-90方案是治疗儿童青少年间变T细胞淋巴瘤的有效方案,其毒性患者可耐受,但需要在有经验的肿瘤中心和血液科中应用。

剂量调整B-NHL-BFM95方案治疗儿童非霍奇金淋巴瘤临床研究

目的探讨改良B-NHL-BFM95方案治疗儿童非霍奇金淋巴瘤的临床疗效和毒副反应。方法入组20例经病理确诊的14岁以下非霍奇金淋巴瘤患者,均接受改良B-NHL-BFM95方案治疗,未行放疗。结果近期疗效：18例（90.0%）CR,2例（10.0%）PD。治疗期间大部分患者出现Ⅲ、Ⅳ度骨髓抑制,经对症处理恢复正常,不影响下一步治疗。中位随访55个月,全组3 a无事件生存率80.0%,Ⅰ~Ⅱ期100.0%,Ⅲ~Ⅳ期60.0%;低危组100.0%,中危组85.7%,高危组50.0%。结论改良B-NHL-BFM-95方案治疗儿童非霍奇金淋巴瘤,特别是低、中危儿童非霍奇金淋巴瘤疗效显著,毒副反应可耐受。

单克隆IgH基因重排检测在B-NHL诊断和随访中的意义

目的 评价单克隆IgH基因重排检测在恶性淋巴瘤 (B NHL)临床中的应用价值。方法 用半巢式PCR检测单克隆IgH基因重排。病例组为B NHL ,包括 6 9例石蜡包埋组织切片、治疗前 16例骨髓和 2 9例外周血、阳性者治疗后复查骨髓和外周血 ;对照组为 10例慢性淋巴结炎、3例T NHL和 2例HD。结果 对照组均阴性。病例组 :切片中单克隆IgH基因重排阳性率为 6 3.8% (44 / 6 9) ;骨髓和外周血阳性率分别为 43 .8%(7/ 16 )和 41.4% (12 / 2 9) ,细胞形态学检查未见异常细胞者阳性率分别为 33 .3% (3/ 9)和 31.3% (5 / 16 )。 16例同时采集骨髓和外周血者 ,阳性率分别为 43 .8% (7/ 16 )和 37.5 % (6 / 16 ) ,两者无统计学差异。治疗前单克隆IgH重排阳性者 ,6例完全缓解 (CR)后转阴 ,处于持续缓解状态 ,1例临床缓解后 13个月仍阳性 ,现在继续随访中 ,另 1例CR后持续阳性者 ,6个月后复发。结论 切片、骨髓和外周血中检测单克隆IgH基因重排可以作为B

化疗前后B-NHL淋巴瘤IgH基因重排变化的研究

目的B-NHL是我国较多见的肿瘤之一。通过对B-NHL患者化疗前后IgH基因重排变化的观察,探讨IgH基因单克隆重排带对B-NHL的诊断价值及能否作为B-NHL化疗缓解后的分子指标之一。方法对20例B-NHL初治化疗前及化疗缓解后患者用两种PCR方法进行IgH基因重排物的检测,同时用10例非淋巴瘤肿瘤组化疗前及化疗缓解后患者及10例健康人以作对照。结果20例初治化疗前B-NHL患者18例检测到IgH基因单克隆重排带,化疗缓解后此18例中1例IgH基因单克隆重排带转阴,另出现2或3克隆性重排带各2例,总变化率为27.8%,余未变化。2例IgH基因单克隆重排带阴性者化疗后依然阴性。对照的非淋巴瘤肿瘤组化疗前及化疗缓解后患者及健康人IgH基因单克隆重排带均为阴性,患者治疗后也未见改变。结论IgH基因单克隆重排带,可以作为B-NHL及其微小残留灶克隆性变化的辅助诊断指标之一。

对B-NHL淋巴瘤相关基因突变联合检测的研究

目的探讨联合检测IgH基因单克隆性重排带及BCL-2IgH(MBR)融合基因,对B-NHL淋巴瘤诊断及化疗前、后微小残留灶克隆性变化监测的意义。方法采用上述两种靶基因突变检测的PCR方法各两种,检测B-NHL组患者及非淋巴瘤肿瘤组患者各30例,观察化疗前、后的检出阳性率及变化,同时设健康对照30例。结果联合两种方法对B-NHL淋巴瘤治疗前患者WBC基因组DNA中的IgH基因96·6%呈单克隆重排带,化疗后原来单克隆重排带者有1例转阴,2例转为2克隆性,2例转为3克隆性;两组对照阴性。B-NHL淋巴瘤患者中38·3%BCL-2/IgH(MBR)融合基因阳性,非淋巴瘤肿瘤组患者为10·0%,健康人为6·6%;联合两种方法对B-NHLBCL-2IgH(MBR)的总检出阳性率为38·3%。结论联合检测IgH基因重排及BCL-2/IgH(MBR)融合基因可提高B-NHL的诊断率,IgH基因单克隆重排带在B-NHL,化疗前后检测对监测B-NHL微小残留灶克隆性变化有一定意义。

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者细胞增殖和凋亡相关指标检测结果分析

目的:分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin's lymphoma,B-NHL)患者细胞增殖和凋亡相关指标的检测结果。方法:分别检测72例B-NHL患者的经病理诊断证实的病灶组织石蜡包埋标本(实验组)和50例淋巴结反应性增生患者的淋巴结石蜡标本(对照组)的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,BCL-2)表达情况,并分析其与病理因素的关系。结果:实验组PCNA阳性细胞百分率及XIAP、BCL-2阳性率均显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ-Ⅳ期B-NHL患者PCNA阳性细胞百分率显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05);不同病理因素B-NHL患者XIAP和BCL-2阳性率并无明显差异(P>0.05);PCNA低阳性表达组无进展生存期显著长于PCNA高阳性表达组(P<0.05);XIAP^+组与XIAP-组无进展生存期并无显著差异(P>0.05);BCL-2^+组与BCL-2^-组无进展生存期亦无显著差异(P>0.05)。结论:增殖因子PCNA与凋亡因子XIAP、BCL-2均参与了B-NHL的发生,其中PCNA阳性情况对临床分期有明显影响。

B细胞淋巴瘤Survivin和COX-2的表达及意义

目的探讨Survivin和COX-2在B细胞型非霍奇金淋巴瘤的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测Survivin和COX-2在57例B-NHL和25例良性淋巴结病变组织中的表达。结果Survivin和COX-2在B-NHL中的阳性表达率分别为54.4%(31/57)和45.6%(26/57),明显高于对照组(P<0.01)。Survivin和COX-2在B-NHL患者的表达呈正相关(χ2=27.71,P<0.01)。Survivin的表达与淋巴瘤侵袭性及PS、LDH、IPI等显著相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别、临床分期、肿瘤的首发部位均无关(均为P>0.05)。COX-2蛋白与侵袭性及分期Ⅲ/Ⅳ期有关(P<0.05)。结论Survivin蛋白在B-NHL患者组织中高表达,与NHL的恶性程度及COX-2正相关性提示Survivin参与了B-NHL的恶性增殖的生物学行为,并表明Survivin和COX-2在B-NHL中的协同作用。

新疆石河子地区125例B细胞性非霍奇金淋巴瘤的临床病理分析

按照2001年世界卫生组织（WHO）淋巴瘤最新分类标准,分析和总结新疆石河子地区125例B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的临床病理组织学及免疫组化特点,以探讨其在B-NHL的诊断和鉴别诊断中的价值。依据2001年WHO淋巴瘤新分类标准,运用临床病理形态观察及免疫组化对125例B-NHL进行临床病理研究。125例B-NHL患者发病平均年龄为47.6岁（1.5岁～81岁）,男女发病比例为2.4∶1。发生部位以淋巴结内为最常见（占60%）,其次为胃肠道（占20%）,还可见于涎腺等部位。按WHO分类,本组125例B-NHL确定了9个类型,未观察到淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区B细胞淋巴瘤、毛细胞白血病和B-前淋巴细胞白血病,其中最常见的3个类型依次是：弥漫大B细胞淋巴瘤（45例,36%）,滤泡淋巴瘤（40例,32%）,粘膜相关淋巴组织结外边缘区细胞淋巴瘤（22例,17.6%）。一些B-NHL的亚型有特异性免疫表型,对诊断和鉴别诊断有所帮助。病理形态是淋巴瘤诊断的基础,免疫表型在诊断和分型中起重要作用,二者与临床特征结合可使多数淋巴瘤得到明确诊断。

IgH基因克隆性重排检测在B细胞淋巴瘤诊断中的应用

目的建立B-NHL临床诊断中Ig H基因克隆性重排检测基本方法。方法应用PCR方法,采用IgHFR3A引物,检测了7例B-NHL及4例反应性增生的淋巴结石蜡样本中IgH基因重排情况。结果黏膜相关型边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)3例中有2例(2/3),弥漫大B细胞淋巴瘤2例中2例(2/2),滤泡淋巴瘤1例中0例(0/1),套细胞淋巴瘤1例中1例(1/1)检测到IgH基因的克隆性重排。总检测率为5/7(71%),4例淋巴结反应性增生病例病例均为IgH基因的多克隆性重排。结论PCR-FR3A在鉴别淋巴组织肿瘤性或反应性增生和最终确诊B-NHL上是一项有效的辅助方法。

3例美罗华鞘注治疗中枢神经系统非霍奇金淋巴瘤临床分析

目的探讨美罗华鞘注治疗中枢神经系统非霍奇金淋巴瘤的有效性和安全性。方法3例（1例原发，2例继发）具有中枢神经系统侵犯和对化疗耐药的复发性非霍奇金B细胞淋巴瘤（B细胞NHL）患者，接受了鞘内注射美罗华（intrathecal rituximab，IT RTX）治疗；采用RTX递增剂量20～50mg，每周1次，连续6～8周用药。结果在应用药物第2～3周后患者临床症状明显改善，脑脊液（CSF）中淋巴细胞清除，治疗后2个月行头颅MRI扫描显示，脑膜或者脑实质内淋巴瘤浸润性病灶明显缩小或者消失。结论结果表明IT RTX方法治疗难治／复发性中枢神经系统B细胞NHL是安全、有效的。

IgH基因重排在B淋巴瘤微小残留病中的应用

目的 探讨IgH基因重排在B细胞淋巴瘤临床诊治中的应用。方法 应用半巢式PCR技术对IgH基因的CDRⅡ区和CDRⅢ区进行基因重排检测。共检测 4 5例骨髓标本。其中正常标本 8例 ,淋巴瘤标本 37例 (B细胞淋巴瘤 2 7例 ,T细胞淋巴瘤 10例 )。结果 8例正常标本未检测到FR2A或FR3A的重排 ;2 7例B细胞淋巴瘤中 ,2 3例 (85 .2 % )可检测到FR2A或FR3A重排 ,其中FR2A重排 16例 (5 9.3% ) ,FR3A重排 2 0例 (74 .1% ) ,FR2A、FR3A均有重排者 13例 (48.1% ) ;10例T淋巴瘤中FR2A重排 1例 ,FR3A重排 3例。骨髓穿刺检查 :2 7例B淋巴瘤中 5例原幼淋细胞 >5 % ,FR2A和FR3A阳性各 4例 ;2 2例原幼淋细胞 <5 %者 ,FR2A阳性 12例 ,FR3A阳性 16例。

Rituximab对紫杉醇诱导人B淋巴瘤细胞株凋亡的增敏作用

目的基于对CHOP(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松)联合化疗方案治疗侵袭性淋巴瘤疗效的不尽人意,本文研究利妥昔单抗(Rituximab)对新一代化疗药物Paclitaxel的化疗增敏作用,并探讨其可能的作用机制。方法(1)体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率:以药物浓度为横坐标,抑制率为纵坐标绘出细胞增殖抑制曲线,比较单药和两药协同作用曲线,若联合作用曲线左移表示有协同作用,右移表示有拮抗作用。(2)Western blot测定:Daudi、Ramos、Raji和Na-malwa细胞经Rituximab20μg/ml作用24小时后检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。结果(1)XTT法测定Paclitaxel单药及与Rituximab联合作用对各细胞株增殖抑制率:对Daudi、Namalwa、Ramos和Raji细胞株,Rituximab对Paclitaxel的细胞毒作用有明显的增敏作用;(2)Western blot测定:在Namalwa和Raji细胞株中,经Rituximab作用24小时后,可见Bcl-2蛋白表达下调。结论(1)单药Rituximab对Paclitaxel有明显的化疗增敏作用。(2)在Namalwa和Raji细胞株,经Rituximab作用24小时后可见Bcl-2表达下调,可能是Rituximab增敏的机制之一。

姜黄素调节B淋巴瘤细胞p300和HDAC1的研究

p300是一种具有组蛋白乙酰化酶活性的转录辅助因子,HDAC1是一种组蛋白去乙酰化酶。本研究查明姜黄素对B-NHL细胞株Raji细胞增殖的影响,并探讨这种影响与p300以及HDAC1转录调节表达的关系。以不同浓度(6.25-50μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,用MTT法检测细胞生长抑制率,Annexin-V-FITC/PI双标流式细胞术检测细胞的凋亡率和应用RT-PCR和Westernblot法检测Raji细胞中HDAC1和p300的mRNA表达和蛋白含量的变化。结果表明:姜黄素对Raji细胞抑制作用呈明显的时效和量效关系。24小时的IC50为25μmo/L;姜黄素能够诱导Raji细胞凋亡,凋亡率为14.38%-61.18%,并呈浓度依赖性。姜黄素明显抑制HDAC1和p300的活性和表达。在IC50浓度时,随着时间的延长,其p300和HDAC1mRNA表达和蛋白含量逐渐降低,呈时间依赖性,与对照组相比有显著性(P<0.05)。结论:姜黄素对B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞具有抗肿瘤细胞的增殖作用,并促进其凋亡。姜黄素能够抑制转录共激活因子p300及组蛋白去乙酰化酶HDAC1活性和表达,可能是其作用机制之一。

Fas及FasL基因蛋白在非霍奇金B细胞淋巴瘤中的表达

目的通过对Fas及FasL基因蛋白在非霍奇金B细胞淋巴瘤(non-Hodgkin'sBcelllymphoma,B-NHL)及良性淋巴结反应性增生中的表达的研究,探讨Fas及FasL蛋白的表达在B细胞淋巴瘤发病中所起的作用及意义。方法对确诊为B细胞淋巴瘤的125例石蜡标本及40例良性淋巴组织石蜡标本用免疫组化方法进行Fas及FasL蛋白表达的检测。结果Fas表达在细胞膜。FasL表达在细胞浆。B细胞淋巴瘤中Fas蛋白阳性总表达率为66.40%,FasL蛋白阳性总表达率为64.80%。良性淋巴组织中Fas蛋白阳性表达率为60.00%,FasL为62.50%。淋巴瘤组与良性淋巴组织之间Fas及FasL蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。但阳性细胞在良恶之间分布部位不同。淋巴瘤组内各亚型之间蛋白表达差异有显著性(P<0.05)。高恶组表达高于低恶组。DLBL(弥漫大B细胞淋巴瘤)及FCL(滤泡细胞淋巴瘤)组表达高于SLL(小细胞淋巴瘤)组。Fas及FasL的蛋白表达与性别、年龄、部位无关。结论Fas及FasL的表达与B细胞淋巴瘤的类型及恶性程度有关。Fas及FasL蛋白表达的检测不能作为鉴别良恶性的一个指标,但Fas及FasL蛋白的检测,有助于判断B细胞淋巴瘤的恶性程度,有助于指导临床治疗淋巴瘤。

P63蛋白和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤的表达

目的:探讨P63蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达及在其发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SP法检测43例B-NHL患者和10例反应性增生淋巴组织(RH)中的P63蛋白和PCNA的表达水平。结果:P63蛋白在43例B-NHL中的阳性表达率为82.7%(36/43),而在反应性淋巴结组织中的表达率为40.0%(4/10);PCNA在B-NHL表达的阳性率为100.0%,而在反应性淋巴结组织中的表达为30.0%(3/10);且两者在各种类型的B-NHL之间的表达有显著性差异(P<0.01),进一步分析P63及PCNA与B-NHL的恶性程度发现,两者的表达与恶性程度呈正相关(分别为P<0.01和P<0.05)。结论:P63蛋白和PCNA高表达于B-NHL,P63蛋白可能作为癌基因参与B-NHL的发生并促进细胞增殖。

Pho-P38与Ki67在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的研究Pho-P38在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织(BcellNon-Hodgkin’sLymphoma,B-NHL)和反应性淋巴组织增生中的表达和肿瘤增殖活性的关系,探讨Pho-P38在淋巴瘤发生发展中的作用以及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法(S-P法),检测20例B细胞侵袭性淋巴瘤、20例惰性淋巴瘤、10例反应性增生淋巴结组织中Pho-P38、Ki67的表达。结果惰性淋巴瘤组织中Pho-P38和Ki67的阳性表达率分别是24.3%±13.6%,22.3%±13.2%,显著低于它们在侵袭性淋巴瘤的阳性表达率,P<0.01;Pho-P38在反应性淋巴结增生和B-NHL中的表达与Ki67基本一致,两者呈正相关(γ=0.79,P<0.01)。结论Pho-P38和Ki67的表达与B-NHL的细胞增殖和恶性程度密切相关,提示Pho-P38在淋巴瘤的恶性增殖过程中发挥重要作用,可成为药物治疗作用的靶点。

利妥昔单抗联合化疗治疗侵袭性B细胞性非霍奇金淋巴瘤20例临床分析

目的：观察利妥昔单抗联合CHOP方案治疗侵袭性B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的疗效与毒副反应.方法：入选项者均为经病理学证实的侵袭性B-NHL患者,共20例,化疗方案：R-CHOP方案：利妥昔单抗（Rituximab）375mg/m2,静点（Ⅳ）,第一天（d1）,环磷酰胺（CTX）750mg/m2,Ⅳ,第三天（d3）,表阿霉素（EPI）60mg/m2,Ⅳ,d3,长春新碱（VCR）1.4mg/m2 Ⅳd3（最大2mg）,强的松（PDN）60mg/m2口服（po）,第三天至第17天（d3～d17）,21天为一周期.结果：入组20例患者中,男14例,女6例,中位年龄46岁,治疗总周期数77个,平均3.85周期,完全缓解（CR）12例（60%）,部分缓解（PR）6例（30%）,总有效率（CR＋PR）90%,稳定（SD）1例（5%）,进展（PD）1例（5%）.主要不良反应为骨髓抑制、脱发、恶心、呕吐、发热等.结论：利妥昔单抗联合化疗治疗侵袭性B细胞性非霍奇金淋巴瘤安全有效.可做为该病的一线治疗方案.