B-myb C-myc在肝细胞性肝癌中的表达及临床意义

目的:检测肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中B-myb及C-myc蛋白的表达情况,探讨其在肝癌发生、发展及转移中的作用。方法:采用免疫组化法检测60例肝癌组织及60例癌旁肝组织中B-myb和C-myc的表达情况。结果:B-myb、C-myc在癌组织中的阳性率分别为56.67%和53.33%,而在癌旁组织中的阳性率分别为36.67%和35.00%,癌组织与癌旁组织比较差异有显著性(P<0.05)。B-myb在肝癌组织中的表达与临床分期、肝外转移、术后复发肿瘤个数及包膜完整相关(P均<0.05);C-myc在肝癌组织中的表达与门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤分化程度及包膜完整相关(P均<0.05)。B-myb与C-myc在癌组织中的表达正相关。结论:B-myb及C-myc蛋白的过表达,可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力,与肝癌的发生、发展密切相关。

B-myb在人肝细胞癌中表达的生物学意义及与cyclin D1相关性的研究

目的:研究人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中B-myb及细胞周期素D1(cyclin D1)的表达,探讨其与肿瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组化法检测60例肝癌组织及癌旁肝组织中B-myb和cyclin D1的表达情况。结果:B-myb、cyclin D1在癌组织中的阳性率分别为56.67%和50%,而在癌旁组织中的阳性率分别为36.67%和31.67%,癌组织与癌旁组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。B-myb在人肝癌组织中的表达与临床分期、肝外转移、术后复发及肿瘤个数相关,而与门静脉癌栓、肿瘤直径、血清AFP水平及肿瘤分化程度无明显相关性。cyclin D1在人肝癌组织中的表达与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤个数及肿瘤分化程度相关,而与肿瘤直径及血清AFP水平无明显相关。在癌组织中B-myb与cyclin D1的表达呈正相关。结论:肝癌组织中B-myb及cyclin D1高表达,可促使肝癌细胞增殖,与肝癌的发生发展密切相关。

实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞肝癌中B-myb的表达及其临床意义

目的建立B-myb mRNA表达量检测的实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)系统,检测肝细胞肝癌(HCC)中B-myb的表达并分析其临床意义。方法用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例正常肝组织中B-myb mRNA的表达情况。结果B-myb mRNA在肝癌组织(0.0375±0.0168)及癌旁肝组织(0.0353±0.0128)中的表达水平明显高于在正常肝组织(0.0265±0.0099)中的表达水平(P<0.05),而在肝癌组织及癌旁肝组织中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。B-myb在人肝癌组织中的表达与临床分期、肝外转移及术后复发明显有关,而与门静脉癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系。结论该方法克服了传统PCR只能定性检测而不能定量检测的缺点,为研究B-myb在HCC中的表达提供了定量方法。B-myb可能与肝癌的发生、发展有关。

胃肠胰神经内分泌肿瘤组织中B-MYB和APOBEC3B的表达及临床意义

目的:探讨胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastrointestinal tract-pancreas neuroendocrine neoplasm,GEP-NEN)组织中B-MYB和APOBEC3B的表达及临床意义。方法:收集行ESD或手术切除的GEPNEN组织样本126例,其中NET 67例,NEC 59例。应用免疫组织化学方法检测B-MYB和APOBEC3B在GEP-NEN组织中的表达,分析其临床病理特征的相关性。结果:B-MYB在肿瘤旁正常的胃肠胰组织中几乎不表达,在GEP-NET和GEP-NEC中高表达,高表达率分别为77.6%(52/67)和64.4%(38/59),差异有统计学意义(P=0.001);APOBEC3B在肿瘤旁正常的胃肠胰组织中几乎不表达或弱表达,在GEPNET和GEP-NEC中高表达,高表达率分别为91.1%(61/67)和38.9%(23/59),差异有统计学意义(P=0.000)。多因素分析显示B-MYB和APOBEC3B的表达与患者年龄、肿瘤部位均无关,与肿瘤组织学分类有关。经Spearman等级相关分析显示,B-MYB和APOBEC3B在GEP-NEN组织中的表达呈正相关(r=0.465,P=0.000)。结论:B-MYB促进APOBEC3B蛋白的表达可能参与GEP-NEN的发病。

B-myb在早期乳腺癌蛋白表达的意义及其与ER、Ki-67的相关性研究

目的探讨B-myb、ER及Ki-67在早期乳腺癌组织中蛋白表达及其相互关系。方法用免疫组化二步法检测76例早期乳腺癌患者乳腺癌组织中B-myb、ER及Ki-67的蛋白表达,并进行统计学分析。结果B-myb、ER、Ki-67在乳腺癌组织中的阳性率分别为38.16%、43.42%、42.11%。B-myb蛋白表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄无关(P>0.05),与ER、Ki-67的蛋白表达呈正相关(r=10.831、r=4.209,P<0.05)。单因素分析和多因素分析结果均显示B-myb与预后无关。结论B-myb蛋白表达与早期乳腺癌患者的预后无关;与ER、Ki-67蛋白表达有关,提示B-myb在早期乳腺癌内分泌治疗、化疗的敏感性或疗效预测方面可能有一定应用价值。

宫颈上皮脱落细胞B-myb基因表达和临床意义

目的 分析不同宫颈液基细胞学(TCT)检测和HPV检测结果的宫颈上皮脱落细胞B-myb基因表达差异,以探讨B-myb基因在宫颈癌筛查中的作用。方法 收集315例宫颈病变患者的宫颈上皮脱落细胞标本。根据TCT结果分为正常细胞组(NC组)118例,不能明确意义的非典型鳞状细胞组(ASCUS组)61例,可疑非典型鳞状病变细胞组(ASCH组)46例,低度鳞状上皮内病变组(LSIL组)43例,高度鳞状上皮内病变组(HSIL组)30例,宫颈癌组(SCC组)17例。根据HPV检测结果分为HPV16+和/或HPV18+组[A组,包含有HPV16+和/或HPV18+,且合并其他基因型HPV+的多重感染者]83例,其他基因型的HPV+组(B组)78例,HPV-组(C组)154例。分析TCT结果分组和HPV检测结果分组间的B-myb基因表达量差异。结果 TCT检测结果组间宫颈脱落细胞B-myb基因表达量差异:ASCUS组、ASCH组、LSIL组、HSIL组、SCC组均明显高于NC组(P<0.05);LSIL组、HSIL组、SCC组均明显高于ASCUS组、ASCH组(P<0.05);HSIL组、SCC组均明显高于LSIL组(P<0.05);SCC组明显高于HSIL组(P<0.05)。HPV检测结果组间宫颈脱落细胞B-myb基因表达量差异:A组、B组明显高于C组(P<0.05),A组明显高于B组(P<0.05)。结论 HPV16/18感染会引起B-myb基因表达异常,引起细胞周期调节异常而使细胞异常增殖,最终引起宫颈组织的癌变。故检测宫颈上皮脱落细胞中B-myb基因表达量改变可能是宫颈癌更有效的筛查指标。

长脾脏酪氨酸激酶对乳腺癌细胞中细胞周期蛋白D1、ID1、B-myb和Fral基因表达的抑制作用

目的筛选乳腺癌中长脾脏酪氨酸激酶[Syk(L)]作为转录抑制因子下调的靶基因,探讨 Syk(L)在乳腺癌中的抑癌机制。方法采用 CLONTECH 公司的 Adeno-X^(TM)表达系统构建 Syk的腺病毒载体,感染不表达 Syk 的乳腺癌细胞系 MB231,以腺病毒 LacZ 作为对照,采用 cDNA 微阵列方法筛选 Syk(L)、Syk(S)调节的基因 ID1、Cyclin D1、Fral 和 B-myb 的表达;并采用 Northern 杂交的方法验证 cDNA 微阵列结果。结果在乳腺癌细胞中,转录抑制因子 Syk(L)可下调癌基因 ID1、CyclinD1、Fra1和 B-myb 的表达,Northern 杂交证实了 Syk(L)对它们的调节。结论抑癌基因 Syk(L)通过特异性下调癌基因 Cyclin D1、ID1、B-myb 和 Fra1的表达抑制乳腺癌的发展。

B-Myb稳定过表达H1299细胞株的构建与分析

B-Myb是Myb家族的成员之一,在细胞周期和癌变过程中具有重要作用。但其在肺癌中的作用及其分子机制仍不清楚。为了研究B-Myb在肺癌中的作用,构建了B-Myb稳定过表达的H1299肺癌细胞株。流式细胞术和MTT检测的结果表明,B-Myb稳定过表达导致G1期细胞减少,S期细胞增加进而促进细胞增殖;克隆形成实验及Transwell的结果表明,B-Myb稳定过表达显著增强H1299细胞的克隆形成、侵袭及迁移能力。定量RT-PCR检测结果表明,B-Myb稳定过表达显著提高了细胞周期基因CCNA1的表达水平;对CD97和MTSS1等细胞运动相关下游基因的表达则无明显影响。该研究成功构建了B-Myb稳定过表达细胞株,发现了B-Myb过表达可促进肺癌细胞的增殖、侵袭迁移及克隆形成能力,为进一步研究奠定了基础。

乳腺癌组织中Cyclin D1、MYBL2表达及其对预后影响的研究

目的:检测乳腺癌组织中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Myb相关蛋白B(MYBL2)表达,并分析其对预后的影响。方法:回顾性选取2015年1月至2019年12月本院确诊为乳腺癌且进行初次乳腺癌手术切除患者的乳腺癌石蜡组织标本185例,取癌组织和癌旁正常组织采用免疫组化二步法测定Cyclin D1、MYBL2表达并比较,分析癌组织中二者的相关性以及蛋白表达与临床病理特征的关系,进行Kaplan-Meier生存分析,Cox回归分析预后不良的影响因素。结果:癌组织Cyclin D1、MYBL2阳性表达率、二者同时阳性表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05);癌组织Cyclin D1、MYBL2表达呈正相关(P<0.001);双侧患病、Ⅲ~Ⅳ期、未/低分化患者的癌组织Cyclin D1、MYBL2阳性表达率、二者同时阳性表达率均分别高于单侧患病、Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化患者(P<0.05);患者随访期间死亡率为20.00%,且癌组织Cyclin D1、MYBL2阳性表达患者无病生存时间(DFS)和总生存时间(OS)均短于阴性表达患者(P<0.05),二者同时阳性表达患者的DFS和OS均短于二者非同时阳性表达患者(P<0.05);癌组织Cyclin D1、MYBL2阳性表达者死亡率均高于Cyclin D1、MYBL2阴性表达者(P<0.05),二者同时阳性表达患者死亡率高于二者非同时阳性表达者(P<0.05);随访期间患者的预后不良发生率为60.54%,双侧患病、Ⅲ~Ⅳ期、未/低分化、三阴性乳腺癌、癌组织Cyclin D1和MYBL2阳性表达均为患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论:乳腺癌组织Cyclin D1、MYBL2蛋白阳性表达率、二者同时阳性表达率高,与临床病理特征及预后均有关。

Mda-7/IL-24和C-myb在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中Mda-7/IL-24和C-myb的表达水平及其临床意义。方法:收集72例DLBCL患者的瘤组织及36例正常淋巴结组织;通过半定量逆转录PCR及免疫组化技术分别从mRNA及蛋白水平检测各组织中Mda-7/IL-24与Cmyb的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及国际预后指数(IPI)之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者无进展生存期之间的关系。结果:与正常淋巴结组织相比,DLBCL组织中Mda-7/IL-24 mRNA的表达水平明显降低,而C-myb mRNA的表达水平则明显增高(P<0.01);72例DLBCL患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb mRNA表达水平呈明显负相关(r=-0.43,P<0.01);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者无进展生存期较短(P均<0.05)。结论:DLBCL组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达呈明显负相关,Mda-7/IL-24低表达或C-myb高表达是DLBCL患者临床预后较差的指标。

Hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化

目的:探究hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化的机制。方法:运用real-time PCR检测hsa-miR-150在永生化CD19+B细胞和OCI-Ly10细胞中的表达,利用Western blotting和免疫荧光细胞化学检测hsa-miR-150靶基因c-myb的表达;通过LipofectamineTM2000脂质体法将含有重组慢病毒质粒的病毒上清转染OCI-Ly10细胞(Ly10-control组和Ly10-miR-150组);对新构建的细胞亚系,通过MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡;运用real-time PCR、免疫荧光细胞化学和Western blotting检测Ly10-control和Ly10-miR-150的B细胞分化相关基因及c-Myb的表达;利用干扰片段干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,运用real-time PCR和Western blotting检测干扰效率及干扰后转录调节因子BCL6和浆细胞分化开关蛋白PRDM1的表达。结果:(1)CD19+B淋巴细胞的hsa-miR-150表达量明显高于OCI-Ly10细胞(P<0.05);c-Myb在OCI-Ly10细胞中表达较强,而在CD19+B淋巴细胞表达较弱。(2)OCI-Ly10细胞经转染hsa-miR-150后,B细胞分化相关基因的表达都明显发生了变化,B细胞特异性激活蛋白(PAX5)和BCL6表达下调(P<0.05);干扰素调节因子4(IRF4)、PRDM1和X盒结合蛋白1(XBP1)的表达上调(P<0.05);和对照组相比,c-Myb在Ly10-miR-150细胞中表达明显下调(P<0.05)。(3)干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,BCL6表达明显下调,而PRDM1表达明显上调。结论:(1)hsa-miR-150过表达对OCI-Ly10细胞抑制增殖和诱导凋亡作用非常明显。(2)过表达hsa-miR-150可诱导该瘤细胞向末端B细胞方向分化,作用机制可能与下调其靶基因c-myb的表达有关。

GDNF在精原干细胞中对H19和A-myb表达的调控研究

目的通过研究胶质细胞神经源性营养因子(GDNF)对H19和A-myb表达的调控,探讨GDNF调节精原干细胞自我更新的分子机制。方法采用混合酶消化和差速贴壁法从出生后6 d的小鼠睾丸中分离、鉴定并培养精原干细胞。用GDNF分别刺激精原干细胞和经磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路抑制剂LY294002预处理的精原干细胞后,采用RT-PCR技术检测细胞H19和A-myb的表达。结果相关鉴定分析证实分离培养的细胞为精原干细胞。RT-PCR检测结果显示:GDNF刺激下的精原干细胞的H19和A-myb表达均显著上调,而经LY294002预处理的精原干细胞在GDNF刺激下其H19和A-myb的表达无明显变化。结论在体外培养的小鼠精原干细胞中,GDNF通过PI3K/Akt信号通路上调H19和A-myb的表达。