B7-CD28/CTLA-4在银屑病的研究进展

以B7-CD28 /CTLA-4分子为主的共刺激通路是T细胞活化增殖的必要条件。银屑病是一种T细胞介导的炎症性自身免疫性疾病,患者体内存在着免疫学异常,皮损中亦有T淋巴细胞的浸润及活化。近年来的研究表明,B7-CD28 /CTLA-4共刺激通路在银屑病的发病中可能起重要的作用,利用CTLA-4Ig、抗CD80单抗治疗银屑病取得了较好疗效。

协同刺激分子B7-CD28/CTLA-4与自身免疫病

T细胞需要两组信号刺激才能充分活化,一组由MHC抗原肽和TCR结合后提供;另一组由抗原递呈细胞提供的协同刺激信号。T细胞上的CD28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4[(Cytotoxic T lym-phocyte-associatedantigen 4,CTLA-4(CD152)]与抗原递呈细胞上的B7(B7-1,B7-2)是目前发现的最为重要的协同刺激分子,它们在自身免疫病患者T细胞及抗原递呈细胞上有异常表达,且参与致病过程。

关节炎中B7:CD28CTLA-4共刺激途径的实验研究

目的 :探讨B7:CD2 8 CTLA 4共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法 :经牛II型胶原诱导SD大鼠建立关节炎动物模型 ;采用CTLA 4Ig作为负性调节因子 ,分析其对关节炎大鼠中特异性体液反应和组织病理学表现的影响。结果 :CTLA 4Ig可阻止SD大鼠发生胶原诱发性关节炎 ,降低大鼠对BIIC的体液免疫反应。结论 :B7:CD2 8 CTLA 4共刺激信号在诱发T细胞介导的自身免疫病中起作用 ,CTLA 4Ig具有潜在的治疗作用。

CD28/CTLA-4:B7在特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞中的表达及意义

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)的表达及意义。方法:采用免疫荧光标记和流式细胞术检测41例ITP患者和40例健康对照者外周血CD3+CD28+细胞、CD3+CD152+细胞、CD80+CD19+细胞和CD86+CD19+细胞分别占淋巴细胞的比例及血小板表面相关抗体水平,进行2组对比、分析。结果:与正常对照组相比,急性ITP患者外周血CD3+CD28+细胞和CD3+CD152+细胞差异无统计学意义(P>0.05),CD80+CD19+细胞增多(P<0.05),CD86+CD19+细胞显著增多(P<0.01),慢性ITP患者CD86+CD19+细胞增多(P<0.05);急性ITP患者外周血CD86+CD19+细胞较慢性ITP患者增多(P<0.05);与正常对照组相比,急性ITP患者PAIg's、PAIgG和PAIgM水平显著增高,慢性ITP患者PAIgG水平增高;CD80、CD86表达与PAIgG水平之间存在显著的相关性(均P<0.01)。结论:ITP患者外周血B淋巴细胞上CD86和CD80表达均异常,可能与其发病相关。

单纯多发性肌炎的临床、病理和CD28/CTLA-4:B7表达的研究

目的 研究单纯多发性肌炎 (SPM)的临床、病理特征和CD2 8/CTLA 4 :B7表达及其发病机制。方法 回顾性总结 14 1例SPM患者的临床资料 ,收集 6例治疗前症状高峰期PM病人的外周血 ,单色流式细胞术 (FCM)检测外周血淋巴细胞协同刺激分子CD2 8、CTLA 4、B7 1、BB 1和B7 2的表达 ,并与正常健康者对照。结果 本组主要表现肌无力、肌痛或肌捏痛 ,肌酸激酶 (CK)等血清肌酶谱增高 ,肌电图呈肌源性损害。肌肉病理主要表现为肌纤维变性坏死和再生 ,散在萎缩 ,肌内膜炎症细胞浸润。SPM组外周血淋巴细胞CD2 8、CTLA 4、B7 1、B7 2的表达增加 ,FCM显示CTLA 4及B7 1的平均荧光强度各自与对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,CD2 8及B7 2也有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,BB 1在SPM组与对照组表达量均极少。结论 肌肉病理检查是诊断SPM的重要依据 ,协同刺激分子CD2 8/CTLA 4 :B7可能是SPM发病的重要环节。

共刺激分子CD_(28)/CTLA-4:B7在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞中的表达

目的探讨CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)共刺激分子在强直性脊柱炎(AS)患者的外周血淋巴细胞上的表达异常与免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞仪检测69例AS患者和50例健康对照者CD28和CTLA-4在外周血CD3+、CD4+T和CD3+、CD8+T细胞上的表达及CD80和CD86在CD19+B细胞上的表达。用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果AS患者CD3+、CD4+T和CD3+、CD8+T细胞上的CD28和CTLA-4,CD19+B细胞上CD80和CD86的表达较正常对照组显著增高(P<0.05);AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P<0.01)。结论AS患者T细胞上表达过量的CD28,与B细胞的B7结合,激活T、B细胞,产生大量免疫球蛋白,同时刺激激活的T细胞表达CTLA-4,使T细胞不能充分表现效应功能。

CD_(28):CTLA-4/B7协同刺激分子在脓毒症发病机制中的作用

脓毒症发病机制非常复杂,内容涉及感染、炎症、免疫、凝血及组织损害等一系列基本问题,并与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关。T细胞功能失调与脓毒症发病密切相关。CD28:CTLA-4/B7是T细胞重要的协同刺激分子,对调节免疫具有非常重要的作用,可能在脓毒症发生和发展中起着关键作用。

实验性自身免疫性重症肌无力大鼠CD28/CTLA-4:B7表达水平的研究

目的探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)CD28/CTLA4B7的表达水平。方法健康、雌性Lewis大鼠24只,随机分为正常组、EAMG组、完全福(氏)佐剂(CFA)对照组。EAMG组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射丁(氏)双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体蛋白乳剂1mL,第4周再次注射上述乳剂免疫大鼠。CFA对照组只接受等量的CFA皮下注射。初次免疫后7周分离PBMC,应用RTPCR和流式细胞术分析方法,分别进行CD28、CTLA4mRNA及B71、B72蛋白表达水平检测。结果(1)正常组大鼠PBMCCD28、CTLA4mRNA表达水平较低,尤其CTLA4mRNA仅有极少量表达;前二者在EAMG组大鼠表达水平均明显增加(P<0001),而正常组和CFA对照组之间表达水平差异无显著性(P>005)。(2)正常大鼠B71、B72在PBMC上仅少量表达而EAMG组表达明显增加(P<0001),正常组与CFA对照组比较差异均无显著性(P>005)。结论EAMG大鼠存在PBMCCD28/CTLA4B7协同刺激分子的表达异常,CD28/CTLA4B7共刺激通路可能参与了机体异常免疫反应的诱导与维持,在重症肌无力(MG)的发生过程中发挥重要作用。

自身反应性T细胞及共刺激分子CD28／CTLA-4／B7、CD40／CD40L和ITP

血小板抗原特异性自身反应性T细胞的活化在特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制中起着关键性作用,T细胞的活化除需要抗原递呈细胞表面MHCⅡ抗原复合物外还需要共刺激分子(第二信号),主要包括CD28／CTLA-4／B7和CD40／CD40L。本文就自身反应性T细胞和共刺激分子CD28／ CTLA-4／B7、CD40／CD40L在ITP中的作用机制及潜在的治疗价值作一综述。

共刺激分子CD28/CTLA-4-B7与1型糖尿病

CD2 8/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 (CTLA) 4与B7的相互作用是T细胞活化的重要调节因子 ,在自身免疫性疾病的发生、发展中起着不同的作用。其中 ,CD2 8 B7的过度表达是自身免疫性 1型糖尿病发生的重要原因之一 ;而CTLA4可使CD2 8 B7共刺激信号中止 ,是T淋巴细胞活化的负性调节信号。因此 ,运用B7单克隆抗体阻断CD2 8 B7通路或通过加强B7 CTLA 4作用来抑制自身免疫活性T细胞 ,有可能成为治疗该病的新手段。

CD_(28):CTLA-4/B7及CD_(40)/CD_(40)L与多发性硬化

共刺激分子CD28:CTLA-4/B7及CD40/CD40L对T细胞的活化、调节、B细胞的增殖、分化具有重要作用,共刺激分子在多发性硬化中的表达发生明显变化,它们对多发性硬化的发生、发展起着重要的促进作用,选择性阻断共刺激分子可控制疾病的发展,对多发性硬化治疗具有重要的意义。本文综述了CD28:CTLA-4/B7和CD40/CD40L生物学特性、功能,在多发性硬化的发生、发展中的作用以及相关的治疗前景。

参麦注射液对气阴两虚型非小细胞肺癌患者B7、CD28、CTLA-4表达的影响

目的:观察参麦注射液对气阴两虚型非小细胞肺癌患者B7、CD28、CTL-4(CD152)表达的影响。方法:将150例气阴两虚型非小细胞肺癌患者随机分为两组,各75例,对照组予一般对症治疗,治疗组在一般对症治疗的基础上加用参麦注射液,分别比较治疗前后血常规、肝肾功能及CD4、CD8、CD28、CTLA-4(CD152)、B7(CD80、CD86)表达的影响。结果:治疗15天后两组间血常规、肝肾功能均无明显差异,两组间治疗前各免疫指标均无统计学差异,具有可比性;两组间治疗后比较提示CD4、CD8、CD28、CD152 P<0.05,有统计学差异;治疗组治疗前后组内比较除CB86无统计学差异外,其余均具有统计学差异,P<0.05;对照组治疗前后组内比较除CD28无统计学差异外,其余均具有统计学差异,P<0.05。结论:参麦注射液应用于气阴两虚型非小细胞肺癌患者能够改善患者免疫功能。

消水散对人胃癌小鼠腹膜移植模型B7/CD28/CTLA-4协同刺激通路及腹水微环境的影响

目的 研究消水散对人胃癌小鼠腹膜移植模型B7/CD28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)协同刺激通路及腹水微环境的影响。方法 2019年4月至2020年5月,在湖南省中医药研究院动物中心实验室,采用腹腔注射人胃癌细胞MGC803建立人胃癌小鼠腹膜移植模型,共分为模型组、消水散低、中、高剂量组,另取正常小鼠为对照组,每组10只。通过行为学观察及测定血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)含量评估模型质量,影像学方法评估恶性腹水情况,流式细胞仪及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测B7-1、B7-2、CD28及CTLA-4表达量及其mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹膜组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果 正常小鼠的阳虚症状积分为(0.00±0.00)分,血清ACTH水平为(103.46±10.13)ng/L、CORT水平为(81.34±9.21)μg/L、T3含量为(178.52±15.86)ng/L、T4含量为(213.59±16.97)μg/L和TSH含量为(10.84±1.15)mIU/mL。与对照组相比,模型小鼠阳虚症状积分[(7.84±1.59)分]显著增加(P<0.05),血清ACTH[(71.09±6.42)ng/L]、CORT[(43.42±7.14)μg/L]、T3[(103.77±13.24)ng/L]、T4[(127.64±13.25)μg/L]、TSH含量[(8.14±1.02)mIU/mL]显著降低(P<0.05)。模型组小鼠的腹水量为(5.18±0.46)mL、瘤体积为(1.23±0.12)cm3、瘤重为(1.73±0.15)g、B7-1 mRNA水平为(1.06±0.10)、B7-2 mRNA水平为(1.04±0.11)、CD28 mRNA水平为(0.97±0.08)、CTLA-4 mRNA水平为(1.03±0.09)、TGF-β1含量为[(181.73±15.26)pg/g]和IL-10水平为[(68.74±6.03)pg/g]。与模型组相比,消水散低、中、高剂量组小鼠的腹水量[(4.03±0.41)、(3.24±0.25)、(2.33±0.27)mL]、瘤体积[(0.93±0.09)、(0.49±0.05)、(0.16±0.02)cm3]、瘤重[(1.42±0.13)、(0.79±0.11)、(0.27±0.08)g]、CTLA-4 mRNA水平[(0.83±0.07)、(0.42±0.05)、(0.16±0.02)]、TGF-β1[(152.69±12.39)、(131.45±11.68)、(107.26±10.52)pg/g]、IL-10[(51.65±5.38)、(34.28±2.73)、(27.13±2.64)pg/g]表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05),B7-1[(2.13±0.22)、(4.56±0.51)、(7.29±0.68)]、B7-2[(1.95±0.14)、(4.32±0.41)、(6.83±0.63)]、CD28[(2.02±0.15)、(3.94±0.28)、(7.11±0.84)]mRNA水平逐渐增加(P<0.05)。结论 消水散可抗人胃癌移植瘤恶性腹水作用,可能与抑制CTLA-4表达,促进T细胞激活,改善机体免疫抑制及腹腔免疫微环境有关。

乙肝疫苗无、弱应答与B7-CD28及IL-12、IL-10的相关性

目的 研究乙肝疫苗无、弱应答与B7 CD2 8分子及IL 1 2、IL 1 0的相关性。方法 分离并培养乙肝疫苗强应答和无、弱应答者PBMCs ,以PHA或rHBsAg刺激。用流式细胞术检测培养细胞CD80、CD86及CD2 8的表达 ;酶标法检测上清IL 1 2、IL 1 0的水平 ;MTT法检测细胞增殖反应。结果 rHBsAg刺激后 ,无、弱应答组与强应答组比较 ,CD80和CD86的表达率、IL 1 2和IL 1 0水平、细胞增殖反应均降低 ,差异显著 ;但CD4+、CD8+细胞CD2 8的表达率无显著差异。PHA刺激后 ,上述指标在2组之间均无显著差异。结论 乙肝疫苗无、弱应答者一般的细胞免疫功能正常。抗 HBs低下与CD80、CD86表达及IL 1 2、IL 1 0产生不足等有关 ,但无T细胞CD2

阻断B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号对致敏小鼠免疫功能的影响

本研究旨在通过阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其免疫功能的变化,为应用于异基因骨髓移植的免疫耐受提供实验依据。将致敏的BALB/c小鼠分成4组:①CTLA4Ig+anti-CD154鼠源性同型对照抗体;②anti-CD154单克隆抗体+CTLA4Ig鼠源性同型对照抗体;③CTLA4Ig+anti-CD154单克隆抗体;④CTLA4Ig及anti-CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。正常BALB/c小鼠应用CTLA4Ig及antiCD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。给予每只小鼠CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体或相对应的同型对照抗体各500μg,于移植前7天尾静脉输注,每组小鼠各5只。移植当天处死各组小鼠,应用流式细胞仪检测脾细胞中CD19+CD69+B细胞数量、CD44high/CD62Lhigh及CD44high/CD62Llow/-T细胞数量。用流式细胞仪或ELISA法检测血清中抗体及细胞因子的变化。结果表明:小鼠致敏后CD19+CD69+B细胞数量与正常小鼠相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),阻断B7/CD28或/和CD40/CD154共刺激信号通路后可见抑制效应(P<0.01),两者同时阻断具有协同作用(P<0.01)。小鼠致敏后记忆性T细胞CD44high/CD62Lhigh及效应性T细胞CD44high/CD62Llow/-与正常相比亦明显增多(P<0.01)。阻断共刺激信号通路后可使其明显抑制,CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体联合应用具有协同效应(P<0.01)。各组小鼠细胞因子及IgG、IgM抗体均无明显差异(P>0.05),但血清中致敏抗体检测显示致敏后特异性抗体升高,阻断共刺激信号通路后其明显被抑制(P<0.01)。结论:阻断B7/CD28或CD40/CD154共刺激信号途径均能抑制致敏小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能;同时阻断有协同作用。

高强度聚焦超声对B7-CD28共刺激通路的影响

目的:探讨高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)是否通过影响B7-CD28共刺激通路使T细胞活化,血清IL-2水平升高,引起抗肿瘤免疫反应。方法:采用原位移植法构建大鼠骨肉瘤模型后,用HIFU治疗机进行辐照,分别在治疗后即刻、2天、5天、15天行流式细胞术,检测脾细胞中CD4+CD28+、CD4+CD28-、CD80+、CD86+细胞亚群所占的比例,ELISA检测血清IL-2水平,行病理组织学观察HIFU治疗后的大鼠的肺部转移灶情况。同时设立阴性对照、正常对照、空白对照组。结果:HIFU各组CD4+CD28+、CD4+CD28-、CD80+细胞亚群比治疗前明显增高(P<0.05或P<0.01);CD86+细胞亚群在HIFU治疗后即刻、2天有增高,均无统计学意义,而治疗后5天、15天有降低;HIFU各组IL-2水平比治疗前明显增高(P<0.05或P<0.01)。与正常组相比,HIFU各组上述细胞亚群明显增高(P<0.05或P<0.01);HIFU各组IL-2水平均有明显增高(P<0.05或P<0.01)。与HIFU对照组(2、5天)相比,HIFU组(2、5天)各细胞亚群均增高(P<0.05或P<0.01);HIFU后5天IL-2水平有显著差异(P<0.05)。HIFU治疗后骨肉瘤大鼠肺部转移灶比治疗前明显减少或消失。结论:HIFU治疗骨肉瘤后激活B7-CD28通路可能是免疫功能提高的机制之一。

胃癌患者B7-CD28共刺激通路的研究

目的 探讨胃癌患者外周血中CD28+T细胞数量和患者胃癌原代细胞表面B7的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常。方法 采用流式细胞术检测胃癌患者外周血中CD28+T细胞与胃癌患者原代细胞B7分子的表达,并与胃良性疾病作比较。结果 胃癌患者CD28+T细胞数低于对照组(P<0. 01)。胃癌患者原代细胞表面B7 -1(CD80)、B7- 2(CD86)表达水平低于对照组(P<0. 01)。结论 胃癌患者外周血T细胞低表达CD28分子,胃癌细胞低表达B7分子,从而影响B7- CD28共刺激通路,使T细胞不能有效地清除肿瘤。

共刺激分子CD28:CTLA4/B7在实验性自身免疫性重症肌无力中的作用

目的研究共刺激分子CD28：CTLA4/B7在实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）发病中的作用。方法将雌性Lewis鼠随机分为EAMG组和对照组;EAMG组采用人工合成的Rα97-116肽段3次法免疫Lewis鼠,对照组同期注入等量的PBS;3次免疫接种后采用流式细胞术检测CD28、B7-2、B7-1、CTLA4在外周血、淋巴细胞、单核细胞中的表达。结果EAMG组大鼠成模率75%;与对照组比较,外周血CD28、B7-2B7-1、CTLA4的表达明显增加（P〈0.05-0.01）;EAMG组大鼠外周血CD28、CTLA4主要在淋巴细胞表达及B7-1、B7-2在淋巴细胞、单核细胞表达显著增加（P〈0.05-0.01）。结论EAMG大鼠存在共刺激分子CD28：CTLA4/B7表达异常,共刺激分子CD28：CTLA4/B7可能参与了EAMG的发生、发展。