BACTEC MGIT960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用

目的 探讨 BACTEC MGIT 960系统、分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法 对31例脊柱结核标本分别应用 BACTEC MGIT 960及罗氏培养基培养,对所得分离株行IS986扩增及16S rRNA PCR-SSCP分析进行菌种鉴定,并与常规方法对照。结果 BACTEC MGIT 960系统、罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87％、61.29％,两者平均报告时间分别为11.3d、26.7d;分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论BACTEC MGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。

Versatrek 240与Bactec 960在分枝杆菌快速培养中的对比分析

目的:评价Versatrek 240型快速自动检测分枝杆菌系统的临床应用价值。方法:应用120例临床标本以及分枝杆菌标准菌株H37Rv(ATCC 27294)同时接种Versatrek 240的MYCO培养瓶和Bactec 960的MGIT培养瓶后,观察两种仪器在阳性率、报阳时间上的差别。结果:Versatrek 240和Bactec 960的阳性率分别为42.5%和40.8%,报阳平均时间分别为12.1天和11.4天。结论:在分枝杆菌液体快速培养中Versatrek 240在培养阳性率、报阳时间上与Bactec 960的符合性非常好。因此,Versatrek 240与Bactec 960也是非常适合专业结核病防治机构使用的先进的仪器。

贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的应用

目的评估贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的效果。方法收集浙江大学医学院附属杭州市胸科医院2021年10月-2021年11月疑似结核病患者痰标本共216份。对每份标本分别进行贝索系统和Bactec 960系统快速培养,分析两种方法的阳性检出率、阳性报告时间及污染率。结果贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌的阳性检出率及阳性报告时间上差异均无统计学意义(P>0.05),污染率均为7.41%,在质控要求范围。结论贝索系统较Bactec 960系统操作简单,阳性检出率和阳性报告时间两者一致性较高,污染率均容易控制,故贝索系统是比较理想的结核分枝杆菌快速培养方法,值得临床推广应用。

Xpert MTB/RIF与BD BACTEC MGIT960分枝杆菌全自动快速液体培养监测仪在辅助诊断结核分枝杆菌感染的价值

目的:探讨Xpert MTB/RIF与BD BACTEC MGIT960分枝杆菌全自动快速液体培养监测仪在辅助诊断结核分枝杆菌感染的价值。方法:回顾性选取500例本院2021年5月~2024年2月就诊的疑似结核分枝杆菌感染患者,分别采用Xpert MTB/RIF与BD BACTEC MGIT960分枝杆菌全自动快速液体培养。比较2种方法对诊断结核分枝杆菌感染的单独、联合检测价值,并比较不同用药时间、用药种类及耐药结果。结果:经临床培养结果显示,500例疑似结核分枝杆菌感染患者确诊384例,其中肺结核282例,肺外结核102例;经Xpert MTB/RIF检测确诊361例,经BD BACTEC MGIT960检测确诊355例,经联合诊断结果确诊378例;联合诊断灵敏度、准确度高于单独检测,漏诊低于单独检测(P<0.05);BD BACTEC MGIT960检测用药时间>3个月的利福平(含利福霉素类)耐药性病例数高于Xpert MTB/RIF(P<0.05)。结论:Xpert MTB/RIF与BD BACTEC MGIT960分枝杆菌全自动快速液体培养对于结核分枝杆菌感染都具有较高诊断价值,为临床早期筛查诊断、检测药敏提供参考依据,以制定相应干预方案。

噬菌体法与BACTEC-960检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的比较研究

目的建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定乙胺丁醇(EMB)耐药性,探讨其在结核分枝杆菌(MTB)EMB耐药性测定中的应用价值。方法应用PhaB测定138株MTB临床分离株EMB耐药性,并与BACTEC960药敏试验结果比较,对耐药性测定结果不符合的菌株测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果138株MTB临床分离株,BACTEC960测定敏感114株,耐药24株;PhaB测定敏感118株、耐药20株。两种方法测定均为敏感112株,均为耐药18株。共计130株两法测定药敏结果相符,符合率942%;结果不符8株,不符合率58%。如以BACTEC960药敏结果为判断标准,则PhaB检测EMB耐药性的敏感性为750%(18/24),特异性为982%(112/114),阳性预测值为900%(18/20),阴性预测值为949%(112/118),准确性为942%(130/138)。结论PhaB检测EMB耐药性只需3d时间,操作简便,不需特殊仪器设备,可作为MTB的EMB耐药性快速筛选方法。

BACTECMGIT960系统培养分枝杆菌时污染菌的分析

目的通过分析不同标本,经BACTEC MGIT 960系统培养后出现的污染菌种类、污染率,寻找降低BACTEC MGIT 960系统培养的污染率方法,提高分枝杆菌培养的阳性率。方法对2011年8月-2012年3月本院送检的各类标本,经BACTEC MGIT960系统培养后产生的污染菌,用常规普通细菌培养鉴定方法和16S rRNA核酸测序进行菌种鉴定,并对污染菌种类、来源和前处理方法进行分析。结果 2 518份临床标本,污染222例,总污染率为8.8%(222/2 518)。共分离出13种菌株:以革兰阳性球菌和棒状杆菌属为主。常见标本的污染率:痰11.4%(153/1 347),尿液13.5%(30/223)、脑脊液0.5%(1/182)、脓液5.1%(8/157)、穿刺液1.9%(4/206)。结论 222例污染标本中细菌,以革兰阳性菌为主,多为口腔、皮肤和环境中正常菌群。规范正确的标本采集、寻找对革兰阳性菌杀灭更有效的方法,或者在培养液中加入合适的抗生素将成为进一步研究的重点。

4种检测技术对艾滋病合并肺结核的诊断效能比较

目的比较痰涂片抗酸染色镜检(简称"涂片法")、BACTEC MGIT 960液体培养法(简称"MGIT960培养法")、RNA恒温扩增技术快速检测法(简称"TB-SAT法")、Gene-Xpert MTB/RIF检测法(简称"Gene-Xpert法")在进行艾滋病合并肺结核患者痰标本病原学检测中的诊断效能。方法收集2020年1-12月重庆市公共卫生医疗救治中心感染科收治的艾滋病合并肺结核患者107例为研究对象,采集患者的痰标本同时进行4种实验室检测技术检验,比较4种检测技术的诊断效能。结果TB-SAT法阳性率(35.51%)高于涂片法阳性率(30.84%),但差异无统计学意义(χ^(2)=0.764,P=0.382),MGIT960培养法阳性率(51.40%)高于涂片法阳性率(30.84%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.246,P=0.001);MGIT960培养法阳性率(51.40%)高于TB-SAT法阳性率(35.51%),差异有统计学意义(χ^(2)=5.496,P=0.019);Gene-Xpert法阳性率(49.53%)低于MGIT960培养法阳性率(51.40%),但差异无统计学意义(χ^(2)=0.075,P=0.078);Gene-Xpert阳性率(49.53%)高于TB-SAT法阳性率(35.51%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.302,P=0.038)。涂片法灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为52.72%、92.31%、87.88%和64.87%,与MGIT960培养法Kappa值为0.445,两者一致性中等;TB-SAT法灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为67.27%、98.07%、97.36%和73.91%,与MGIT960培养法Kappa值为0.648,两者具有较高的一致性;Gene-Xpert法灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别90.91%、94.23%、94.34%和90.74%,MGIT960培养法Kappa值为0.851,两者一致性良好。结论Gene-Xpert法的诊断效能较高,并且与MGIT960培养法检测结果具有良好的一致性,建议在诊断艾滋病合并肺结核时优先选用Gene-Xpert法。

应用BACTEC960系统与改良罗氏培养基从肺外标本分离培养分枝杆菌的效果比较

目的:比较BACTEC 960系统与改良罗氏培养基对肺外标本中分枝杆菌的分离培养效果。方法:应用上述两种方法,分别对382份肺外标本进行分离培养。结果:两种方法的总阳性率为7.33%。BACTEC 960系统培养阳性率为6.54%,平均报告时间14.3 d,污染率4.95%;改良罗氏培养基培养阳性率为3.93%,平均报告时间26.8 d,污染率2.12%。结论:对肺外标本中分枝杆菌的分离培养,BACTEC 960系统较改良罗氏培养基更为高效,但污染率略高。

荧光PCR熔解曲线技术在结核病耐药诊断中的应用价值

目的探讨荧光PCR熔解曲线法对痰样本的利福平和异烟肼相关耐药基因的检测效能。方法回顾性分析2019年7月—2020年7月沈阳市第十人民医院收取的254例痰样本检验结果,以BACTEC MGIT 960液体药敏(以下简称MGIT 960药敏)为参考标准,评价熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性的效能。结果与MGIT 960药敏结果比较,利福平耐药检测的敏感性、特异性和Kappa值分别为89.6%、95.6%和0.83;异烟肼耐药检测的敏感性、特异性和Kappa值分别为81.5%、98.9%和0.85。在初治患者中具有较好的一致性,优于复治患者。结论应用熔解曲线法检测患者痰样本的利福平和异烟肼相关耐药基因,与MGIT 960药敏法比较具有较好的敏感度、特异度和一致性,可快速检测出患者的耐药情况和耐多药结核病(MDR-TB)患者,为临床患者尤其是初治患者提供快速有效的化疗参考方案。

BACTEC MGIT 960在二线抗结核药物药敏试验应用中的效果评价

目的评价BACTEC MGIT 960进行4种二线抗结核药物药敏试验的效果。方法用MGIT 960对结核分枝杆菌临床分离菌株进行二线抗结核药物卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果 111株结核分枝杆菌临床分离株用MGIT 960法与L-J比例法卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺药敏符合率分别为95.5%(106/111)、93.7%(104/111)、97.3%(108/111)、85.6%(95/111)。与比例法药敏结果比较,MGIT 960药敏检测的敏感度、特异度和准确性,卷曲霉素分别为80.0%、97.0%、95.5%,卡那霉素分别为92.3%、93.9%、93.7%,氧氟沙星分别为95.3%、98.5%、97.3%,乙硫异烟胺分别为100%、81.2%、85.6%。MGIT 960完成药敏试验的时间平均为8.3 d,L-J法平均为26.2 d,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT 960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病患者的早期诊断和治疗。

BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种初步鉴定及药敏中的应用

目的评价BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种鉴定及药敏中的应用价值。方法显微镜观察BACTEC MGIT 960系统分离的162株分枝杆菌在液体培养基中的形态,传统生化和核酸检测法同时鉴定分枝杆菌属菌种,分析细菌形态与菌种之间的关系;应用BACTEC MGIT 960系统对分离的141株结核分枝杆菌进行药敏试验。结果 162株分枝杆菌属在MGIT液体培养基中呈索条状、分枝状、点粒状和分散状4种形态;呈索条状132株分枝杆菌属均为结核分枝杆菌,呈点粒状10株和分散状6株分枝杆菌属均为非结核分枝杆菌;对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药率分别为9.9%、14.2%、9.2%和6.4%,总耐药率18.4%,同时耐利福平和异烟肼的为8.5%;药敏平均检测时间为9.3 d。结论 BACTEC MGIT 960系统可快速将分枝杆菌属初步鉴定为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌,能快速准确获得临床一线抗结核药物的药敏结果。

改良抗酸染色法对儿童结核性脑膜炎诊断价值分析

目的:探讨改良抗酸染色法在儿童结核性脑膜炎诊断中的价值。方法:应用BACTEC MGIT 960培养法、离心涂片法、改良抗酸染色法同时对30份临床诊断为结核性脑膜炎的儿童的脑脊液标本进行检测。结果:BACTEC MGIT 960培养法、离心涂片法及改良抗酸染色法的阳性率分别为13.3%(4/30)、3.33%(1/30)、56.7%(17/30)。改良抗酸染色法与BACTEC MGIT 960培养法、离心涂片法比较差异均有统计学意义(P<0.005)。结论:改良抗酸染色法诊断儿童结核性脑膜炎阳性率明显提高,值得临床推广应用。

BACTEC MGIT 960用于结核分枝杆菌快速培养的初步评价

目的评价BACTEC MGIT 960系统快速分离结核分枝杆菌及药敏试验的效果。方法对临床拟诊结核病患者痰样本,采用直接涂片萋-尼法抗酸染色显微镜检、BACTEC MGIT 960和改良罗氏(L-J)培养法进行检测,并对分离到的结核分枝杆菌进行药敏试验。比较其分离的阳性率、培养及药敏所需的时间。结果共对634例拟诊结核病患者痰样本进行了检测,MGIT960培养的阳性率(51.7%)明显高于L-J法(37.7%),直接涂片法阳性率最低(14.7%)。MGIT960和L-J法的污染率分别为4.9%和4.4%。MGIT960和传统的L-J法的检出时间分别为12.0 d和32.0 d。MGIT960和L-J法对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的药物敏感性检出时间分别为9.0 d和36.5 d。结论 BACTEC MGIT 960可以明显提高分离培养阳性率、缩短培养和药敏试验的时间。

不同检测结核分枝杆菌方法比较及应用价值分析

目的探究不同检测结核分枝杆菌方法比较及应用价值。方法选取2019年1月-2020年6月本院收治的疑似肺结核患者痰标本425例。分别采用荧光二极管直接涂片法、酸性罗氏培养法、Bactec MGIT 960培养法,以临床诊断作为金标准,分析三种方法诊断效能,并分析三种方法联合检测的诊断效能。结果临床诊断肺结核247例,非肺结核178例,LED直接涂片法检测灵敏度、一致率分别为(22.27%、0.160),酸性罗氏培养检测灵敏度、一致率分别为(31.98%、0.254),Bactec MGIT 960培养检测灵敏度、一致率分别为(43.62%、0.390),Bactec MGIT 960培养敏感度和一致率最高,其次为酸性罗氏培养、LED直接涂片法。三种方式联用检测敏感度、一致率(49.80%、0.401)高于LED直接涂片法与酸性罗氏培养联用(34.8%、0.276)、酸性罗氏培养与Bactec MGIT 960培养联用(43.72%、0.361)。结论Bactec MGIT 960培养法检测灵敏度最高,其次为酸性罗氏培养、LED直接涂片法,而三种方式联用检测可提高检测敏感度及与临床诊断一致率。

实时荧光聚合酶链反应和结核培养仪法对非痰液标本结核杆菌检测的比较

目的评估比较实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)和结核培养仪(BACTEC960)法在检测非痰液标本中结核分支杆菌的特异性和灵敏度。方法对34例临床可疑患者用BACTEC960法和FQ-PCR技术2种方法作阳性检出率比较。结果FQ-PCR诊断肺外结核病的特异度为95%,灵敏度为14·3%。BACTEC960法诊断肺外结核病的特异度为100%,灵敏度为21·4%。结论BACTEC960法诊断结核病的特异性和灵敏度与国内外文献报道较一致,而实时荧光PCR技术诊断结核病的特异性和灵敏度与国内外文献报告有较大差异,明显低于平均阳性检出率。

利用BACTEC 960分枝杆菌分析系统对分枝杆菌进行快速菌型鉴定方法的研究

目的:探索一种快速的分枝杆菌菌型鉴定方法。方法:用BACTEC 960分枝杆菌系统(960)和传统的改良罗氏培养基法(L-J法),对分枝杆菌标准菌株及临床分离菌株,同时进行菌型鉴定的对照研究,确定本法进行菌型鉴定的最佳药物浓度及具体优势。结果:本法进行快速菌型鉴定所需药物浓度为:噻吩-2-羧基肼(TCH)5.0μg/mL,对硝基苯甲酸(PNB)500μg/mL。进行快速菌型鉴定所需时间平均为6.7天,较L-J法平均提前23.3天。结论:本法明显缩短了分枝杆菌进行菌型鉴定的时间,为临床对分枝杆菌感染的菌型提供快速的诊断依据,并及时指导临床用药。

荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物耐药性的诊断价值

目的 评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物(卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素)耐药性的诊断价值。方法 收集2018年1月~2019年5月在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院收治的培养阳性且具有荧光PCR熔解曲线和BACTEC MGIT 960药敏结果的205例资料。以BACTEC MGIT960药敏结果为金标准,评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物耐药性的诊断价值。结果 荧光PCR熔解曲线法敏感而BACTEC MGIT960药敏耐药的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为1、9、1、1例。荧光PCR熔解曲线法耐药而BACTEC MGIT960药敏敏感的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为2、1、2、0例。两种技术方法的总体符合率,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为98.54%、95.12%、98.54%、99.51%。荧光PCR熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是96.96%、98.84%、94.12%、99.42%、0.946,对异烟肼耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是80.43%、99.37%、97.37%、94.61%、0.851,对氟喹诺酮耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是93.33%、98.94%、87.50%、99.47%、0.895,对二线注射类药物耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是85.71%、100.00%、100.00%、99.50%、0.921。结论 荧光PCR熔解曲线法对利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物的耐药性有较好的辅助诊断价值,适合临床结核病患者的早期耐药性筛查。

培养管硅胶显色法直接检测结核菌吡嗪酰胺耐药性

目的:利用培养管硅胶显色法直接检测临床涂阳痰标本中结核分枝杆菌(MTB)吡嗪酰胺(PZA)药物敏感性,并对该方法进行临床应用评价。方法:对2016年6月-2017年10月在南通市第六人民医院就诊的158例肺结核患者涂阳痰标本进行预处理,利用Bactec MGIT960与培养管硅胶显色法同步进行PZA药物敏感性检测,并对检测结果进行比较。结果:以Bactec MGIT960检测PZA药物敏感性结果为判断标准,培养管硅胶显色法灵敏度、特异性、符合率分别为96.8%、95.9%、96.7%。报告结果平均时间为(24.5±2.0)d,同Bactec MGIT960检测时间相仿,报告时间与痰中MTB菌量及活力有相关性。结论:培养管硅胶显色法可以替代Bactec MGIT960直接对临床涂阳痰标本进行PZA药物敏感性检测,结果可靠,操作简便,成本低廉,满足临床快速诊断的需要,适合推广使用。

MGIT960系统快速检测结核分枝杆菌药物敏感性的应用评价

[目的]评价液体培养及快速药敏检测技术(BACTEC MGIT 960系统)检测结核分枝杆菌对一线、二线8种抗结核药物敏感性的效果。[方法]用BACTEC MGIT 960系统对结核分枝杆菌临床分离株进行一线、二线8种抗结核药物的药物敏感性试验,以传统的L-J比例法药敏试验作对照,从结果报告时间和符合率等方面进行评价。统计学分析分别采用配对t检验和Kappa检验。[结果]用MGIT 960法与L-J比例法同时对202株结核分枝杆菌临床分离株进行一线药物异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的药物敏感性检测,该两种方法对此4种药物的符合率分别为98.0%(198/202)、96.5%(195/202)、94.1%(190/202)和83.7%(169/202);而该两种方法对77株结核分枝杆菌临床分离株进行二线药物卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药物敏感性检测符合率,分别为87.0%(67/77)、93.5%(72/77)、97.4%(75/77)和68.8%(53/77)。MGIT 960法完成一线、二线药物药敏试验的时间中位数分别为11d和8d,而比例法规定判读时间为28 d,二者检测时间差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]与传统比例法相比,BACTEC MGIT 960系统能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对一线、二线抗结核药物的敏感性,有利于耐药结核病的早期诊断和治疗。

结核分枝杆菌异烟肼耐药性的噬菌体测定技术研究

目的建立噬菌体生物扩增法快速测定异烟肼(INH)耐药性的方法,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)INH耐药性测定中的应用价值。方法用PhaB法检测167株MTB临床分离株INH耐药性,并与Bactec-960测定结果比较,分析PhaB法的敏感性、特异性和准确性。结果0.2μg/ml INH与菌液37℃作用48h后,通过噬菌体检测,以噬菌斑减少95%为最适判断标准,噬菌斑减少高于95%的判为敏感株,噬菌斑减少低于95%的为耐药株。以Bactec-960测定结果为判断标准,则PhaB的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率分别为96.4%、96.4%、93.1%、98.2%和96.4%。结论PhaB检测INH耐药性具有很高的敏感性和特异性,与Bactec-960的符合率达96.4%,只需3d时间,且操作简便、不需特殊仪器设备,可作为MTB的INH耐药性快速筛选方法。