BAEE法测定重组水蛭素的生物活性

目的建立重组水蛭素的生物活性测定方法。方法用BAEE（N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯）作底物，通过测定反应体系中未被水蛭素抑制的凝血酶的量，来间接测定水蛭素抗凝血酶的活力。结果重组水蛭素的生物活性测定曲线在3．2～12．8ATU之间线性关系良好，回归方程为Y=-0．0348X＋0．7，r=0．9993。结论BAEE法经济、便捷、准确可靠、重现性好，适宜作为该品种的生物活性测定方法。

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对BAEE的降解

以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯（ｂｅｎｚｏｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，ＢＡＥＥ）为底物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｆｒｏｍＥｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ，ｅ－ＰＡ）的酶学性质．酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ－１．测定了构成ｅ－ＰＡ的大，小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明，大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多，但比小亚基小约１０倍，即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级．大小亚基的Ｋｃａｔ比较接近，分别是全酶的１／６和１／３．研究了８种抑制剂对ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ活性的影响，其中ｐｅｐｓｔａｔｉｎ和Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）对酶促反应有激活作用，ＴＰＣＫ，ＴＬ－ＣＫ，ＰＭＳＦ，ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ和ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ对其有不同程度的抑制作用，ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的活性没有影响．对ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性和ｅ－ＰＡ的纤溶活性之间作了比较．

一种测定蚯蚓纤溶酶活力的简易方法

在全面考查温度、底物浓度、酶浓度和酶促反应时间等条件的基础上，改进了用合成底物BAEE测定蚯蚓纤溶酶的方法。该法重复性好，测试条件易于控制，可用于蚯蚓纤溶酶生产的质量控制。

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂（e—PA）对BAWEE的降解

以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯为氏物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂的酶学性质，酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降２解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ＾１。测定了构成了ｅ－ＰＡ的大，小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ。。结果表明，大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多，但比小亚基小约１０倍，即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级。

IL-2对抗精子抗体大鼠精子顶体酶活力的影响

目的 研究IL 2对抗精子抗体阳性大鼠的精子顶体酶活力的影响。方法 精子顶体酶的活力检测采用BAEE ADH联合法。结果 抗精子抗体 (AsAb)阳性大鼠精子顶体酶的活性显著降低 ;IL 2可显著降低AsAb阳性大鼠精子顶体酶的活性 (P <0 .0 0 1) ;AsAb阳性精子的SOD酶活性降低 (P <0 .0 0 1) ;IL 2可使精子中的SOD酶活性降低 (P <0 .0 0 1) ,增强了氧自由基的产生。结论 IL 2对精子顶体酶活性有显著影响。

电位滴定法测定胰激肽释放酶活力测试条件探讨

本文用ＦＩＰ推荐的方法，以具有国际单位的参照品为标样，滴定液为０．０１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ标准溶液，考查了以ＢＡＥＥ为底物的电位滴定法测定胰激肽释放酶活力的实验条件，通过正交试验得出直观和方差分析的结果，依据酶活力单位高、ＳＤ和ＲＳＤ％较小的原则，求出酶活力测定的最适条件是：酶反应温度为２５℃；缓冲液为０．００１５ｍｏｌ／ＬＮａ２Ｂ４Ｏ７－０．２５ｍｏｌ／ＬＮａＣＬ－２×１０（－４）ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ，ｐＨ为８．００；反应液中酶浓度为０．４８ＩＵ／ｍｌ；底物浓度为５×１０（－３）ｍｏｌ／Ｌ；胰蛋白酶抑制剂浓度为１２５μｇ／ｍｌ。胰激肽释放酶活力测定的实验数据的相对标准偏差小于５％。

蛇毒抗栓酶制剂的临床应用体会

近几年来,我院应用蝮蛇毒抗栓酶2号、3号(Svate-2、Svate-3),治疗1109例脑血栓病患者取得满意疗效。Svate-3是在Svate-2基础上改进了生产工艺,由于提高了纯度,其毒副反应明显低于Svate-2。Svate-2的LD50为2.06(TAME单位/kg),Svate-3为4.85(TAME单位/kg),Svate-2的酶活力单位为68usp(BAEE法),Svate-3为96usp(BAEE法)。 本组1109例患者用SVate-2和3,临床应用中常见毒副反应见附表。

工业生产中木瓜蛋白酶的活性检测方法比较

对不同来源的木瓜蛋白酶用三种不同方法测定其活性 ,结果表明从酪蛋白为底物的紫外分光光度法操作简便、成本低廉 ,适于酶纯化过程中的活性比较和木瓜蛋白酶系列产品及国内商品酶的活性测定 ;以BAEE为底物的光学法反应稳定 ,重复性好 ,适于酶学性质的理论研究和出口商品酶的活性测定 ;以酪蛋白为底物的茚三酮显色法 ,虽然操作烦琐 ,但所需仪器简单 ,测定结果误差较小 ,因此在条件简陋的地区也可以来用此法测定木瓜蛋白酶的活性。