糙皮侧耳BAG家族蛋白鉴定及其基因表达模式分析

在NCBI、JGI数据库检索糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)BAG蛋白(PoBAGs),对其进行生物信息学分析,并测定不同发育(菌丝、原基、子实体)阶段和高温(42℃)、低温(4℃)胁迫时PoBAG基因的表达情况,分析其表达模式。结果表明:共检索到3个(分别命名为PoBAG-1、PoBAG-2、PoBAG-3)具有BAG结构域的蛋白,其中,PoBAG-1、PoBAG-2还分别含有1个IQ基序和类泛素化结构域;PoBAG-1、PoBAG-3为亲水性不稳定蛋白,且亲缘关系较近,可能主要定位于细胞核和细胞质中;PoBAG-2为亲水性稳定蛋白,与其他具有类泛素化结构域的BAG蛋白具有较近的亲缘关系,可能主要定位于线粒体和细胞质中。与菌丝相比,3个PoBAGs在原基和子实体中相对表达量均显著上调;与对照(25℃)相比,42℃高温胁迫时,PoBAG-1、PoBAG-3相对表达量极显著上调,PoBAG-2显著下调;4℃低温胁迫时,PoBAG-1和PoBAG-2相对表达量显著上调,PoBAG-3显著下调。研究结果为进一步解析BAG家族蛋白在糙皮侧耳生长发育以及温度胁迫响应过程中的功能提供参考。

bag-1、bcl-2和bax在非小细胞肺癌中的表达和意义及其与化疗多药耐药相关性的研究

背景与目的bag-1、bcl-2和bax均为凋亡相关蛋白,在肿瘤诊断、病情进展、转移潜能和耐药性以及预后评价等方面具有潜在价值。本研究拟研究bag-1、bcl-2和bax蛋白在非小细胞肺癌中的表达以及与非小细胞肺癌发生发展的关系,并且探讨其与肺癌化疗耐药的相关性。方法采用免疫组化SP法对140例非小细胞肺癌组织(其中40例为新辅助化疗1个-2个周期后手术的非小细胞肺癌患者组织)与15例支气管扩张组织的石蜡切片标本进行bag-1、bcl-2和bax蛋白表达的检测。结果非小细胞肺癌组织中bag-1、bcl-2蛋白表达水平高于肺良性病变组织(P<0.05),bax蛋白的表达水平低于肺良性病变组织(P<0.05);bag-1、bcl-2和bax蛋白表达水平与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、组织学分类、P-TNM分期及淋巴结转移等均无明显相关性(P>0.05),但是bag-1与肺癌细胞分化程度相关,分化越差,bag-1阳性表达率越高(P<0.05);非小细胞肺癌中bcl-2蛋白表达与bag-1蛋白表达明显正相关(r=0.371)(P<0.01),bcl-2与bax蛋白呈明显负相关(r=-0.225)(P<0.01);新辅助化疗使bag-1和bcl-2蛋白表达水平都有一定水平的增高,但bax蛋白表达水平没有显著变化。结论非小细胞肺癌组织中存在bag-1、bcl-2蛋白的高表达和bax蛋白的低表达;bag-1蛋白表达水平与非小细胞肺癌的分化程度有密切关系;非小细胞肺癌组织中bag-1表达水平与bcl-2间存在非常显著正相关,bcl-2与bax间存在显著负相关;本研究未观察到bag-1、bcl-2和bax与肺癌多药耐药性间的相关性。

Bag-1蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测Bag-1蛋白在口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,探讨其在不同分化的OSCC中表达的差异及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法S-P法检测52例OSCC及20例正常的舌黏膜组织中Bag-1蛋白的表达,数据采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验。结果:Bag-1蛋白在病理分级的高分化组阳性表达率为50.00%、中分化组阳性表达率为76.19%、低分化组阳性表达率为93.33%,三者之间对比有显著性差异(P<0.05),与正常对照组有显著性差异(P<0.01);在临床分期为早期(Ⅰ级+Ⅱ级)组中阳性表达率为55.55%,晚期(Ⅲ级+Ⅳ级)组中阳性表达率为82.35%,二者之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:Bag-1蛋白的表达与OSCC的病理分级和临床发展关系密切,并且检测该指标有助于OSCC的早期诊断。

创伤对小鼠热应激蛋白Bag家族基因表达的影响

以小鼠为研究对象,探讨创伤条件下热应激蛋白Bag家族基因在创伤愈合组织中的表达情况。选用巴比西小鼠,建立创伤应激模型,提取创伤愈合组织RNA,经Real-Time PCR检测其表达情况。结果表明:创伤应激时Bag家族基因表达全部下调,其中Bag3、Bag4下调差异显著(P<0.05);对Bag家族各基因进行聚类分析结果显示Bag3与Bag4可聚为一类。说明Bag家族基因在创伤愈合过程中的表达差异可能与细胞凋亡与炎症反应存在一定的联系。

植物BAG蛋白家族的结构及其功能特征综述

在酵母、动物和植物中,BAG(The Bcl-2–associated athanogene)蛋白家族是一类进化上高度保守的分子伴侣辅助因子,其家族成员在植物逆境响应、生长发育和程序化死亡等方面发挥了多种细胞功能。结合近年BAG蛋白家族的研究进展,从该家族的基本结构、细胞功能及作用机制3个方面进行综述。

胃腺癌中Bag-1蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨Bag-1蛋白在正常胃黏膜和胃腺癌组织中的表达,及其与胃腺癌临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学法,分别检测20例正常胃黏膜、60例胃腺癌组织标本中Bag-1蛋白的表达。结果:Bag-1蛋白在胃腺癌组织中表达阳性率显著高于正常胃黏膜组织(P<0.05),并且其表达水平与肿瘤分化程度有关。结论:Bag-1基因与胃腺癌细胞的凋亡有关,其高表达在胃腺癌的发生发展过程中发挥重要作用。

BAG-1和VEGF在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨BAG-1和VEGF在乳腺癌组织中表达,以及它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学(ElivisionTMplus)方法对40例乳腺癌组织与20例乳腺良性病变组织(乳腺纤维瘤及乳腺囊性增生病各10例)中BAG-1和VEGF的表达进行检测。结果BAG-1在乳腺癌和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别是77.5%(31/40)、15.0%(3/20);VEGF在乳腺癌和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别是82.5%(33/40)、35.0%(7/20)。乳腺良、恶性病变组织中BAG-1和VEGF的阳性表达率比较,均有显著性差异(P<0.05)。BAG-1和VEGF的表达与乳腺癌的组织学类型、临床分期、雌激素受体、孕激素受体无关(P>0.05),但与腋窝淋巴结转移相关(P<0.05)。结论BAG-1和VEGF参与了乳腺癌的发生发展过程,两者可以作为判断乳腺癌生物学行为的参考指标。

BAG-1、CDK4蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的:探讨BAG-1、CDK4蛋白在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化SP法对80例结直肠癌组织、40例结直肠腺瘤组织及25例癌旁正常结直肠组织中的BAG-1、CDK4进行检测。结果:BAG-1、CDK4在结直肠癌中过度表达,阳性率分别为80.0%(64/80)和65.0%(52/80),并且BAG-1、CDK4与肿瘤的分化程度成反比。有淋巴结转移的结直肠癌BAG-1、CDK4的阳性率分别为96.7%(29/30)和83.3%(25/30),无淋巴结转移的结直肠癌阳性率分别为70.0%(35/50)和54.0%(27/50),两者比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。侵及浆膜层者CDK4蛋白表达阳性率明显高于未侵及浆膜层者,阳性率分别为71.4%(40/56)和35.3%(12/34),差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:BAG-1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;CDK4的过度表达还与浸润深度密切相关;结直肠癌的发生机制涉及BAG-1、CDK4调节环路中多个基因的异常。

Bag-1、HSP70蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌中的表达和意义

目的:探讨Bag-1和热休克蛋白70(HSP70)在宫颈上皮内瘤变中的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,对64例宫颈上皮内瘤变(CINⅠ-Ⅱ39例,CINⅢ25例)及36例宫颈鳞癌组织的Bag-1和HSP70蛋白进行检测,以20例正常宫颈鳞状上皮作对照。结果:(1)Bag-1在CINⅠ-Ⅱ组、CINⅢ和宫颈鳞癌组的阳性表达率分别为48.72%(19/39)、80.00%(20/25)、83.33%(30/36),宫颈上皮内瘤变及宫颈癌各组阳性率高于正常宫颈鳞状上皮阳性率(P<0.05)。CINⅢ和宫颈鳞癌组的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)HSP70在CINⅠ-Ⅱ组、CINⅢ组和宫颈鳞癌组的阳性表达分别为48.72%(19/39)、72.00%(18/25)、86.11%(31/36),各组阳性表达率均高于正常宫颈鳞状上皮(P<0.05)。CINⅢ组和宫颈鳞癌组的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。(3)在宫颈鳞癌组织中Bag-1与HSP70之间存在正协同作用(r=0.393,P=0.016)。结论:Bag-1和HSP70在CIN和宫颈鳞癌中的过表达提示它们在宫颈鳞癌的发生、发展起促进作用。Bag-1与HSP70之间存在相关性,说明宫颈鳞癌的发生、发展是多基因调控的过程。

Bcl-2、Bag-1、Bax在乳腺浸润性导管癌中的表达

目的探讨Bcl-2、Bag-1、Bax表达对乳腺浸润性导管癌影响。方法采用SP免疫组化染色法检测收集128例患者癌组织和癌旁组织中的Bcl-2、Bag-1、Bax表达情况。结果经过检测,癌组织中Bcl-2、Bag-1、Bax表达的阳性率分别为73.4%、89.8%、80.5%,明显高于癌旁组织中Bcl-2、Bag-1、Bax的表达率57%、59.4%、65.6%。经过统计学检验后差异具有统计学意义(P<0.05);经过卡方检验Bcl-2、Bag-1、Bax阳性表达与各个病理参数的相关性检验,得出Bcl-2、Bag-1与肿瘤的直径有关(P<0.05)。相关性分析得出,Bcl-2、Bag-1呈现正相关性(r=0.63,P<0.05)。结论 Bcl-2、Bag-1在乳腺浸润性导管癌中高表达,起着重要的作用。

热休克蛋白70和bag-1蛋白在恶性肿瘤中的表达

目的观察恶性肿瘤中bag-1蛋白和热休克蛋白70(HSP70)的表达及其与肿瘤间的联系。方法69例临床胃肠道组织标本(54例癌组织,15例为非癌组织),运用RT-PCR及免疫组化的方法检测HSP70和bag-1在癌组织及癌旁正常组织的表达。结果96.3%的癌标本bag-1表达阳性,明显高于正常对照组(P<0.01)。bag-1表达与癌分化程度相关(r=0.887,P<0.05)。同时检测的HSP70发现,大多数癌标本表达HSP70,并明显高于正常组织(P<0.01),实验未发现HSP70与bag-1表达间的差异(P>0.05),也未见HSP70表达水平与癌分化程度间的相关性。结论HSP70和bag-1在胃肠道恶性肿瘤中的高表达与肿瘤的发生有一定的关系,且bag-1与肿瘤的预后有密切关系。

Bag-1、Bcl-2在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨Bcl-2蛋白和Bag-1蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达变化以及与宫颈癌临床病理特征之间的关系和临床意义。方法:采用免疫组织化学S-P法,分别检测子宫肌瘤经手术切除的15例正常宫颈组织、45例宫颈癌组织标本中Bcl-2和Bag-1蛋白的表达。结果:Bag-1蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织阳性表达率分别为7%、78%(P<0.05),Bcl-2蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织阳性表达率分别为14%、69%(P<0.05)。在宫颈癌组织中,Bag-1表达与淋巴结转移有关(P<0.05),Bcl-2的表达与临床病理特征无关(P>0.05)。宫颈癌中Bag-1蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关。结论:Bag-1、Bcl-2蛋白过表达对宫颈癌的发生、发展均起重要作用,Bag-1表达水平与宫颈癌的转移有关,可作为预测宫颈癌转移潜能的新的生物学指标。Bcl-2与Bag-1之间的抗凋亡作用呈正相关,两者在肿瘤发生、发展中的抗凋亡作用相互增强。

编码拟南芥含BAG结构域蛋白的原核表达载体构建

生物信息学分析显示,拟南芥基因At5g62390编码一种钙调素结合蛋白,在其钙调素结合结构域有一个BAG(Bcl-2-associated athanogene)结构域存在,与钙调素结构域部分重叠.为了从实验上进一步研究该蛋白的钙调素结合特征及BAG结构域在钙调素结合中可能的调节作用,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增不同结构域编码区的cDNA序列,构建到原核表达载体pET32-a中.测序分析表明:目的序列已正确克隆到表达载体上,为进一步表达目的蛋白及其不同结构域用于生化功能鉴定打下了基础.

食叶草的营养价值及其在肉羊瘤胃中降解特性研究

本试验旨在研究食叶草的营养价值及其在肉羊瘤胃中的降解特性,为食叶草在反刍动物饲粮中的应用提供依据。在采用化学分析法测定食叶草常规营养成分含量的基础上,采用尼龙袋法,以装有瘤胃瘘管的3头成年肉羊为试验动物,测定食叶草中4种常规营养成分在2、4、6、12、24、36、48 h时的瘤胃降解率和降解参数。结果表明:新鲜食叶草中初水分含量为91.12%,食叶草干物质(DM)中有机物(OM)含量达到96.99%,粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)含量分别为31.43%和2.45%,中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)含量分别为31.75%和25.45%,钙(Ca)、磷(P)含量分别为0.51%和0.40%。食叶草DM、CP、NDF、ADF 48 h的瘤胃降解率分别为81.05%、82.88%、60.70%、58.57%,有效降解率分别为56.13%、58.93%、36.36%、34.94%。综上可知,食叶草的CP含量较高,NDF和ADF含量较低,主要营养成分在肉羊瘤胃中有较高的降解率,可作为优质饲草来源在反刍动物养殖中推广。

移动尼龙袋法对常用饲料蛋白质小肠消化率的研究

文章旨在研究反刍动物常用饲料的干物质和粗蛋白质小肠消化参数,为科学配制日粮提供依据。试验选用3头装有瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的干奶牛,采用移动尼龙袋法研究了饲料瘤胃非降解蛋白在小肠中的消化吸收。结果表明,在瘤胃发酵16h后,蛋白类饲料的干物质与粗蛋白降解率高于粗饲料和能量饲料。豆粕、棉籽粕、菜籽粕、花生饼、麻籽饼、亚麻籽饼、膨化大豆、DDGS、啤酒糟、玉米、苜蓿、羊草和全株玉米青贮的干物质小肠消化率依次是:0.69、0.35、0.38、0.74、0.11、0.40、0.80、0.52、0.35、0.67、0.14、0.09和0.03;蛋白质的表观小肠消化率依次:0.91、0.80、0.71、0.92、0.64、0.79、0.96、0.70、0.89、0.61、0.61、0.61和0.63。由此可见,不同饲料瘤胃降解和消化特性不同,过瘤胃蛋白为小肠提供的可消化吸收蛋白质的潜力也不同。

套袋对枇杷果实PAL、PPO、POD活性和可溶性蛋白质含量的影响

以解放钟枇杷套袋后的果实为试材 ,在果锈发生严重期至成熟期 ,每隔 10 d定期测定套袋果与不套袋果果实中 PAL、PPO、POD活性及可溶性蛋白质含量。结果表明 ,套袋后 ,果实中的 PAL、PPO、POD活性提高 ,可溶性蛋白质含量下降 ;PAL、PPO、POD活性的提高 ,可抑制果锈的发生 ;PAL 活性提高有利于套袋果实的着色 ;

乳清蛋白膜对花生储藏品质影响研究

采用乳清蛋白涂膜与乳清蛋白包袋对花生仁的储藏效果进行试验,发现乳清蛋白涂膜可显著降低花生仁在储藏期间脂肪氧化,储藏效果最佳,而包袋组对花生仁储藏效果略好于对照组。两个试验组的花生仁过氧化值分别低于对照组38%～68%、0.5%～21%,酸价比对照组分别低7%～11%、1%～4%。

饼粕类饲料蛋白质降解率的研究

５头带瘤胃和真胃瘘管的绵羊饲喂由基础饲料和蛋白质补充料豆饼、芝麻粕、大豆粕、花生粕、处理豆饼、黄豆粉组成的日粮，用体内法测得７种日粮的蛋白质瘤胃降解率（％）分别为６７．８９、６９．８２、６６．５６、７０．７０、６３．０３、７２．１７、８０．０５；相应蛋白质补充料的降解率（％）为４８．３３、４９．１８、５１．２６，６０．７７、３１．７０、６８．２２。用尼龙袋法估测上述蛋白质补充料的蛋白质降解率（Ｋ＝０．０３３）分别为（％）７５．７７、６６；３６、６７．６４、７５．１２、３５．５１、９０．２５；饼粕饲料蛋白质体内法测定的降解率与尼龙袋法估测的结果相关关系为：Ｙ＝７．９５＋０．６５×（ｒ＝０．９４，ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）。

应用移动尼龙袋法和三步法评定反刍家畜常用饲料的蛋白质小肠消化率

本研究选用3头装有永久瘤胃瘘管和十二指肠“T”型瘘管的阉牛，采用移动尼龙袋法和三步法测定了15种饲料蛋白质的小肠消化率。结果表明，移动尼龙袋法测得的玉米蛋白粉、菜籽粕、豆粕、棉籽粕、花生饼、小麦麸、黄玉米、啤酒糟、米糠、玉米胚芽饼、酒糟蛋白、苜蓿、羊草、玉米秸秆和玉米青贮中蛋白质小肠消化率分别为90．60％、82．31％、96．32％、80．62％、95．58％、67．89％、89．86％、74．33％、58．65％、79．79％、90．42％、40．00％、44．88％、35．52％、10．52％。同时将三步法与移动尼龙袋法测得的消化率进行线性回归分析，结果显示．不同种类饲料蛋白质小肠消化率差异很大（10％～96％），作为一种简便、可靠的体外酶解评定方法．三步法与移动尼龙袋法呈线性正相关[Y=1．1851X-5．9468，n=15，R^2=0．8912；其中Y代表移动尼龙袋法所测饲料瘤胃非降解蛋白质的小肠消化率（％），X代表三步法所测的消化率结果（％）]。

牦牛瘤胃内饲料蛋白质降解率的研究

用瘤胃尼龙袋技术测定了１１种常见饲料在牦牛瘤胃内的降解率。根据饲养水平，瘤胃食糜的外流速度估计为０．０６７／ｈ。测定结果表明，玉米、豌豆秸粉、菜籽饼、豌豆、鱼粉、曲拉、肉骨粉、青稞、甲醛鱼粉、甲醛菜籽饼和麸皮的粗蛋白（ＣＰ）降解率分别为０．６８、０．５６、０．４４、０．８５、０．４９、０．５５、０．８１、０，８３、０．３８、０，４８和０．７９，干物质（ＤＭ）降解率依次为０．６８、０．３０、０．４９、０．７３、０．５０、０，５４、０，５９、０．８２、０．３２、０．４９和０．７４。