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表达barstar基因及bar基因的转基因油菜的研究 被引量:40
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作者 彭仁旺 周雪荣 +3 位作者 王峻岭 方荣祥 陈正华 莽克强 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期74-79,共6页
从细菌Bacilusamyloliquefaciens染色体DNA中克隆了barnase抑制剂barstar的基因,构建了带有TA-29基因5′调控区(-1300-+3)与barstar基因编码区、CaMV35S启动... 从细菌Bacilusamyloliquefaciens染色体DNA中克隆了barnase抑制剂barstar的基因,构建了带有TA-29基因5′调控区(-1300-+3)与barstar基因编码区、CaMV35S启动子与除草剂抗性基因bar两个表达框架的植物表达质粒pBBS。以“双低”油菜“5-4”的子叶柄为受体,通过农杆菌介导的遗传转化,获得了在含有10mg/L卡那霉素和20mg/LPPT的筛选培养基上再生的转基因植株。PCR分析结果表明,barstar基因已整合到油菜染色体上;Northernblot检测表明,barstar基因及bar基因在转基因植物中得到了正确的调控与表达。以转基因油菜“5-4”为父本授粉给表达barnase基因的雄性不育植株,不育株能正常结实。 展开更多
关键词 barstar基因 抗除草剂基因 转基因 油菜
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烟草绒毡层特异启动子TA29、解淀粉芽孢杆菌Barstar基因的克隆与测序
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作者 邵寒霜 李继红 郑学勤 《热带生物学报》 1999年第3期1-4,共4页
以基因组DNA 为材料,分别对普通烟绒毡层特异启动子TA29 和解淀粉芽孢杆菌Barstar 基因的编码序列进行了克隆和全序列分析。结果表明,TA29 全长1526bp ,含有TATAbox;Barstar 基因的编码序列... 以基因组DNA 为材料,分别对普通烟绒毡层特异启动子TA29 和解淀粉芽孢杆菌Barstar 基因的编码序列进行了克隆和全序列分析。结果表明,TA29 全长1526bp ,含有TATAbox;Barstar 基因的编码序列全长273bp,包括起始密码子ATG 和终止密码子TGA。 展开更多
关键词 烟草 绒毡层特异启动子 解淀粉芽孢杆菌 barstar基因 克隆 测序
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Transfer and Detection of barstar Gene to Maize Inbred Line 18-599 (White) by Particle Bombardment 被引量:1
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作者 SUN Qing-quan ZHANG Ying +2 位作者 RONG Ting-zhao DONG Shu-ting ZUO Zhen-peng 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第6期652-656,共5页
In China, the purity of maize hybrid strain is discomforting to the development of seed industrialization. Finding a new method for reproduction of maize hybrid strain is necessary. In this study, using particle bomba... In China, the purity of maize hybrid strain is discomforting to the development of seed industrialization. Finding a new method for reproduction of maize hybrid strain is necessary. In this study, using particle bombardment, barstar gene was transferred into maize inbred line 18-599 (White), which is an antiviral and high quality maize inbred line. By molecular detection of the anther of transgenic maize, two plants transferred with barstar gene were gained in this study, which are two restorer lines. The two plants showed normal male spike, and lively microspores. But the capacity of the two restorer lines should be studied in the future. The aim of this study is to find a new method of reproduction of maize hybrid strain using engineering restorer lines and engineering sterility lines by gene engineering technology. 展开更多
关键词 MAIZE inbred line barstar gene particle bombardment transgenic plant molecular detection
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Barnase在大肠杆菌中的分泌表达和诱导条件优化 被引量:3
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作者 林中叶 谢友坪 +2 位作者 敬科举 凌雪萍 卢英华 《生命科学研究》 CAS CSCD 2008年第3期242-246,共5页
从解淀粉芽孢杆菌中PCR分别扩增解淀粉芽孢杆菌核糖核酸酶barnase基因及其抑制剂barstar基因,采用将barnase基因置于barstar基因保护下的克隆策略,以pET-22b(+)质粒为基础,构建大肠杆菌分泌型表达质粒.IPTG诱导表达目的蛋白后将培养基... 从解淀粉芽孢杆菌中PCR分别扩增解淀粉芽孢杆菌核糖核酸酶barnase基因及其抑制剂barstar基因,采用将barnase基因置于barstar基因保护下的克隆策略,以pET-22b(+)质粒为基础,构建大肠杆菌分泌型表达质粒.IPTG诱导表达目的蛋白后将培养基蛋白进行SDS-PAGE分析并从诱导温度、IPTG诱导浓度和诱导时间三方面初步优化诱导表达条件. 展开更多
关键词 barnase基因 barstar基因 大肠杆菌 分泌表达
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转基因抗草丁膦油菜籽检测方法研究 被引量:11
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作者 潘良文 沈禹飞 +2 位作者 陈家华 胡永强 陶军 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期57-59,62,共4页
应用PCR技术 ,测试抗草丁膦杂交油菜籽中转入的外源抗草丁膦除草剂基因 (BAR)、雄性不育基因 (BARNASE)和恢复基因 (BARSTAR) ,通过对PCR产物进行克隆和测序 ,建立了检测转基因抗草丁膦油菜籽的技术和方法。
关键词 转基因油菜籽 抗草丁膦除草剂基因 雄性不育基因 恢复基因 PCR 农产品安全
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大豆胰蛋白酶抑制剂和脂肪氧化酶基因双价RNAi表达载体的改造及转化 被引量:7
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作者 王丹 付永平 +1 位作者 王丕武 马建 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第12期85-89,105,共6页
【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAM... 【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAMBIA3301的质粒DNA为模板,利用CaMV35S启动子的上游引物和CaMV35S终止子的下游引物,PCR扩增含有除草剂抗性基因bar的整个表达原件,然后将其插入到pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi中,构建以除草剂为筛选标记的双价RNAi表达载体,并通过花粉管通道法转化至大豆吉农18、吉农28和吉农27 3个品种中,对转基因植株进行PCR、Southern杂交、RT-PCR分子水平检测和除草剂抗性检测。【结果】质粒PCR和酶切鉴定以及测序结果表明,双价RNAi植物表达载体pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar构建成功。将其转入到大豆中,分别获得吉农18、吉农28、吉农27T1代籽粒47,25和86粒,以及T2代转基因植株50株。RT-PCR结果表明,转基因株系中脂肪氧化酶和胰蛋白酶抑制剂mRNA积累受到明显抑制。【结论】获得了转pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar的T2代转基因大豆。 展开更多
关键词 大豆 胰蛋白酶抑制剂 脂肪氧化酶 花粉管通道法 除草剂
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质体转化开创作物杂种优势利用新途径 被引量:3
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作者 李新奇 袁隆平 +1 位作者 肖金华 邓启云 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第6期751-755,共5页
普通核雄性不育性能够满足对理想不育系选育的要求,是水稻等作物杂种优势利用的理想遗传元件。只要能解决其不育系繁殖问题,是理想的杂种优势利用方式。通过普通核雄性不育性的可育基因质体转化,将可育基因转移到存在于细胞质中的质体... 普通核雄性不育性能够满足对理想不育系选育的要求,是水稻等作物杂种优势利用的理想遗传元件。只要能解决其不育系繁殖问题,是理想的杂种优势利用方式。通过普通核雄性不育性的可育基因质体转化,将可育基因转移到存在于细胞质中的质体基因组中,可创造普通核雄性不育系的保持系,繁殖出普通核雄性不育系,从而实现三系法利用杂种优势;利用可产生雄性不育性的基因如TA29-barnase通过质体转化,向质体基因组中转移,产生由细胞质中转基因雄性不育基因控制的雄性不育系,任何常规品种都能作为其保持系,转barstar可育基因系(或常规品种)作为恢复系(或父本),可同样实现三系法利用杂种优势。上述两种途径都是创造植物杂种优势利用的新途径。 展开更多
关键词 质体转化 作物 杂种优势利用 普通核雄性不育性 保持系 转基因雄性不育性 TA29-barnase基因
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表达barnase基因的重组棉铃虫核型多角体病毒的构建及其杀虫活性研究 被引量:1
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作者 朱应 齐义鹏 +1 位作者 刘映乐 朱反修 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期169-177,共9页
将含有 barnase基因与杆状病毒多角体基因 ( ph)的重组转座载体 p Fb- Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒 ( Ha NPV)的穿梭载体 Hanpvid转座并提取重组穿梭载体 DNA转染棉铃虫细胞 ,得到重组棉铃虫病毒 r Ha- Bar.其分子杂交证... 将含有 barnase基因与杆状病毒多角体基因 ( ph)的重组转座载体 p Fb- Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒 ( Ha NPV)的穿梭载体 Hanpvid转座并提取重组穿梭载体 DNA转染棉铃虫细胞 ,得到重组棉铃虫病毒 r Ha- Bar.其分子杂交证明 ,昆虫细胞中有 r Ha- Bar的 bar基因转录本存在 ,并能表达产生 33k D的多角体蛋白和 1 2 k D的 barnase.在平板上 ,barnase能降解RNA,出现清晰的降解圈 .r Ha- Bar对三龄棉铃虫幼虫的毒力比野生型 Ha NPV的 LD50 减少 2 0 % ,LT50 减少 30 % .用 barnase的拮抗基因 barstar构建了具有 Neo抗性、并能稳定表达 barstar的棉铃虫转化细胞 AM1 - NB.以携带 barnase基因的重组病毒 r Ha- Bar分别感染转化细胞和正常细胞 ,48h子代病毒在转化细胞中的产量比在正常细胞中高 2 3倍 ,72 h高 1 60倍 . 展开更多
关键词 棉铃虫 rHaBar 转座子介导 病毒杀虫剂 杀虫活性
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