大豆BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建

【目的】构建具有大豆蛋白酶抑制剂BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体,并将其转入根癌农杆菌中,为大豆品质改良奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆大豆蛋白酶抑制剂BBi基因的正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GFP基因片段,分别连入克隆载体pMD18-T Vector中。然后根据植物中ihpRNA原理,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,将组成RNAi载体的4个目的片段分别连入其中,然后利用冻融法转化根癌农杆菌,并进行PCR鉴定。【结果】PCR扩增得到组成RNAi载体的4个目的片段,分别构建成重组克隆载体和ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,并转化得到含有p7αP-GFP-BBiS的农杆菌EHA101和EHA105。【结论】成功构建了具有BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,BBi基因的ihpRNA表达框架成功转入到农杆菌中。

V-M-BBI模型下儒家价值观对消费行为的影响

在我国农村地区,儒家价值观作为一种内隐性的因素影响着农民的购物行为。采用实证分析的方法,对农民儒家价值观、购买动机进行了因子分析,探究了儒家价值观、购买动机、农民彩电购买行为三者之间的关系,在验证V-M-BBI模型的基础上,证明了人口统计学变量在模型中的调节作用。研究成果对于企业进行农村市场细分和品牌价值观的传递有借鉴意义。

BBI 608的合成

以1，4-萘醌为起始原料，经Thiele—Winter反应，水解、氧化后得2-羟基-1，4-萘醌，再与3，4-二溴丁酮环合反应后，氧化得抗癌药物小分子2-乙酰基-锕，9H-萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮（BBI608），总收率18．99％。目标化合物结构经ESI—MS、^1HNMR确证。

BBI生物碱的结构研究

双苄基异喹啉类生物碱(Bisbenzylisoquinoline,BBI)在植物界中分布很广,现已在13科41属139种高等植物中分离出该类生物碱。我国有9科17属植物含有这种生物碱,从应用价值看主要集中在防己科、毛茛科和小檗科三个类群植物中。Guha等总结了1977年以前报道的186种成分,按结构分26类。Schiff接续Guha总结了1978～1981年间38种新成分和1982～1985年间32种新成分。鉴于BBI生物碱具有抗菌、抗炎、抗癌、降压、肌肉松弛和调节免疫功能等广而强的生理活性,植物资源又如此丰富,因此国际上对其研究很活跃。国内文献曾介绍了Guha的总结,着重于化学降解法,而大量应用的光谱法很少报道。为此,仅就BBI生物碱的结构研究方法简述如下。

AM-CATV光纤传输系统中BBI外调制器的非线性及其预失真补偿技术

对ＡＭ－ ＣＡＴＶ（调幅有线电视）光纤传输系统中平衡桥干涉型（ＢＢＩ： Ｂａｌａｎｃｅｄ ＢｒｉｄｇｅＩｎｔｅｒｆｅｒｏｍ ｅｔｅｒ）外调制器的非线性特性进行了理论分析，在此基础上介绍了最佳偏置点的稳定控制技术以消除ＣＳＯ项，对三阶非线性项ＣＴＢ，则给出了电子预失真补偿的理论分析、电路设计及实验结果。

绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI诱导肺腺癌A549细胞凋亡

研究了绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI对人肺腺癌A549细胞增殖抑制作用和对肺腺癌A549细胞凋亡的影响.结果显示:绿豆BBI对人肺腺癌A549细胞的增殖有明显抑制作用,绿豆BBI可以促使人肺腺癌A549细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡.说明绿豆BBI能抑制人肺腺癌A549细胞增殖、诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,为绿豆BBI抗肿瘤效应提供了依据.

BBI阻断LPS对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的抑制作用

目的探讨大豆来源的蛋白酶抑制剂(BBI)是否能阻断脂多糖(LPS)对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的下调作用及其机制。方法用CCK8试剂盒检测LPS和BBI对HT-29细胞的毒性作用。用BBI预处理HT-29细胞6 h,再用LPS刺激,分别用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞紧密连接蛋白(ZO-1,Occludin)、TLR4及MyDD8的表达;通过Western Blot检测NF-κB的激活。结果LPS 1 000 ng/mL和BBI1 000μg/mL对HT-29细胞均无毒性作用。LPS可显著地上调HT-29细胞TLR4表达,且上调作用具有时间与剂量效应;能明显下调紧密连接蛋白的表达,其下调作用与LPS浓度成正比;能明显激活NF-κB,且具有剂量效应;LPS对HT-29细胞的这种作用可被BBI显著地抑制。结论通过抑制LPS诱导的肠道上皮细胞TLR4的表达和NF-κB的活化,BBI能显著地阻断LPS对肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的抑制作用。

BBI抑制LPS诱导的肠道上皮细胞炎性因子的表达

目的探讨大豆来源的胰蛋白酶抑制剂(BBI)对LPS诱导的肠道上皮细胞炎性因子表达的抑制作用及其机制。方法用MTT法检测LPS和BBI对肠道上皮细胞的毒性作用。先用BBI预处理肠道上皮细胞,再用LPS刺激,采用实时荧光定量PCR检测细胞内炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-8和MCP-1)的表达,通过NF-κB-luc荧光素酶质粒和蛋白质印迹法(Western Blot)检测NF-κB的活性。结果 LPS最大浓度(10 000 ng/mL)和BBI最大浓度(1 000μg/mL)对细胞均无毒性作用。LPS处理可显著地上调肠道上皮细胞炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-8和MCP-1)的表达,其上调作用和LPS的浓度成正相关;LPS处理肠道上皮细胞3 h后炎性因子表达最高,随时间延长有所下降;LPS对肠道上皮细胞炎性因子的上调作用具有剂量和时间效应;BBI预处理肠道上皮细胞6 h时,BBI对LPS诱导肠道上皮细胞炎性因子表达的抑制作用最明显,且具有剂量效应。结论通过对肠道上皮细胞内NF-κB的抑制,BBI能够显著地抑制LPS诱导炎症因子的表达。

香蕉BBI型蛋白酶抑制剂(MaBBI1)的诱导、变性和复性

BBI(Bowman-Birk protease inhibitor)是一种富含半胱氨酸的植物蛋白酶抑制剂,其抑制的蛋白酶主要包括胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶等丝氨酸蛋白酶。以从香蕉(Musa acuminata L.cv.Brazilian)根中提取的总RNA逆转录成的c DNA为模板,根据NCBI公布的野生型马来西亚蕉(Musa acuminata subsp.Malaccensis)BBI基因(收录号:XM_009415512)的序列设计引物,克隆了1个BBI型蛋白酶抑制剂基因(MaBBI1)。MaBBI1基因大小为381 bp,编码126个氨基酸,包括12个半胱氨酸(9.5%),将该基因构建到载体p GEX-6P-1上转化大肠杆菌Rossetta菌株进行重组蛋白GST-MaBBI1的诱导表达。在IPTG诱导3 h后,一个预测分子量为40.8953 ku的GST-MaBBI1融合蛋白被大量表达。IPTG诱导后的GST-MaBBI1融合蛋白是不溶的并累积成包涵体,通过对包涵体进行变性和复性的方法得到可溶的GST-MaBBI1融合蛋白,为进一步在体外研究该蛋白的功能奠定基础。

BBI生物碱核磁共振谱特征

概括介绍了双苄基异喹啉类生物碱的两种基本类型berbamine系列和bebeerine系列(头接头与尾接尾;头接尾与尾接头)的~1H-NMR和^(13)C-NMR谱特征。

俄语人称代词TbI和BbI

人称代词由于能直接表示一些人与说话人之间的关系,所以,在不同场合,它具有非常丰富、多样的表情与感情意味。比如,教师、作者、演讲者为了表示自己也是全体听课学生中的一分子,号召读者或听众去参加一个共同的工作,经常使用代词,以表达第一和第二人称代词的概括意义。教师在课堂上对学生讲话时就经常用:

新型BBI防水剂的生产与应用

一、前言 BBI防水剂是一种新型的长效强力水泥防水剂,是长春市建筑材料工业学校申彦奎同志1989年5月研制成功的。1990年7月6日通过吉林省科学技术成果鉴定,获得发明证书。产品经过珲春市饲料添加剂厂、齐齐哈尔朝中电池厂等单位试用,证明可以满足蓄水池、地下室、建筑基础、卫生间等建筑防水工程使用要求。并由吉林省珲春市东龙防水剂厂组织生产。于1991年5月通过省级新产品鉴定。

BBI防水剂施工技术

简要阐述了ＢＢＩ防水剂的原材料组成．产品配方、生产工艺和产品质量，具体介绍了采用该防水剂的防水层施工操作程序，列示了防水层施工简图。

大豆KTi基因和BBi基因双价RNAi表达载体的构建

以KTi基因的ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GUS-KTiS为模板,采用PCR技术克隆含有KTi基因的完整ihpRNA构件,并将其克隆到pMD18-T载体,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并进行序列比对;然后以BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS为基础,利用限制性内切酶BstⅪ单酶切,将KTi基因的完整ihpRNA构件连入其中。最后利用冻融法转化根癌农杆菌,并进行PCR鉴定。结果表明:PCR扩增得到含有KTi基因的完整ihpRNA构件,构建成重组克隆载体pMD18-T-KRNAi,并构建成双价ihpRNA种子特异性表达载体pKTi-BBi-RNAi,并转化得到含有pKTi-BBi-RNAi的农杆菌EHA105。成功构建同时具有大豆胰蛋白酶抑制剂KTi基因和BBi基因的双价RNAi种子特异性表达载体,KTi基因和BBi基因的ihpRNA表达框架成功转入农杆菌中。

品牌 浴火重生 2009中国BBI品牌“奥斯卡”评选出炉

一年前的此时,发端于美国金融业次贷危机的金融危机迅速席卷各地,并逐渐演化为一场全球范围内的经济危机,将各国新一年的经济预期都带入下行通道。借助奥运东风插上翅膀准备腾飞的中国经济也像是被踩了一脚急刹车,突然间被悲观的情绪所笼罩。

Zhang Fang—a Student at the BBI

UNIVERSITY student Zhang Fang looks gentle and refined, but she is also frank and quick-witted. She was born in Chongqing of Sichuan Province. Her father is a comic dialogue performer and her mother was once a ballerina. Zhang Fang was imperceptibly influenced

Bi_2O_3制备方法的研究现状及发展趋势

综述了Bi2O3粉体的制备方法和原理,对比了各制备方法的优缺点,指出了各种方法中存在的问题,并提出了Bi2O3制备方法的发展趋势。

儒家价值观对农民购买彩电行为的影响

在我国农村地区,儒家价值观作为一种内隐性因素影响着农民的购物行为。本文在实证研究的基础上对农民价值观、购买动机进行因子分析,探究儒家价值观、购买动机、农民彩电购买行为三者之间的关系;在验证V-M-BBI模型的基础上证明了人口统计学变量在模型中的调节作用。本研究对于企业进行农村市场细分和品牌价值观的传递有借鉴意义。

小麦Bowman-Birk型蛋白酶抑制因子的克隆表达及其抑制鱼糜凝胶软化的效果研究

为探究重组小麦(Triticum turgidum)Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)抑制活性特征及其对鲢鱼肌原纤维蛋白自溶反应的抑制效果,采用TA克隆技术克隆小麦BBI成熟肽基因片段,并对原核表达的小麦BBI蛋白进行镍亲和层析纯化,利用SDS-PAGE、TSK-GEL G2000SWxl高效液相色谱检测诱导及纯化效果。在测定重组小麦BBI对胰蛋白酶的抑制活性的基础上,进一步通过SDS-PAGE分析了重组BBI对鲢鱼肌原纤维蛋白自溶反应的抑制作用。结果表明,经双酶切鉴定证实成功获得了BBI成熟肽基因片段,该基因与野生二粒小麦BBI相关基因(GenBank登录号EU346892.1)序列相似性为99.63%。目的蛋白在SDSPAGE及TSK-GEL G2000SWxl高效液相色谱分析中,分别表现为单一带和单一峰,产物得到有效纯化,分子量约10.5kD。该重组小麦BBI对胰蛋白酶有明显的抑制活性。添加量5μg·mg-1重组BBI可显著抑制鲢鱼肌原纤维蛋白(尤其是肌球蛋白重链)在pH 7.5,50℃下的自溶。

木防己属植物中生物碱成分的研究概况

本文对木防己属植物中发现的吗啡碱类、阿扑菲碱类、苯甲基异喹啉碱类、异喹啉酮类、原小蘖碱类、刺桐碱烷类及其它结构类型共90余个生物碱成分进行了简要综述,同时探讨了它们在该属植物中的分布、生物活性、结构类型及其民间医疗用途。