重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠sIL-2R和IFN-γ的变化

目的研究日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗对小鼠脾细胞 s IL- 2 R和 IFN- γ的影响。方法第 1次实验采用 1× 10 6 和 1× 10 8CFU疫苗皮下免疫 BAL B/ C鼠 ,免疫后 8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染 ,感染后 6周剖杀小鼠 ,同时设有 PBS对照组。第 2次实验用 1× 10 6 CFU疫苗皮下和静脉注射分别免疫小鼠 ,于免疫后 0、4、8、10、14和 16周各剖杀 4只 ,分离脾脏 ,用 Sj2 6或 Con A刺激脾细胞 ,用 EL ISA法检测脾细胞上清液中 s IL 2 - R和 IFN -γ含量。结果疫苗免疫 ,尾蚴攻击后 ,s IL- 2 R和 IFN- γ水平显著升高 ;动态观察发现 s IL- 2 R和 IFN- γ分别于免疫后 8～ 10周和 4～ 8周达最高水平。结论日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗可加强宿主 Th1反应 ,促进 Th1细胞分泌 IL- 2和 IFN- γ,它们与免疫细胞相互作用 。

人外周血卡介苗(BCG)特异性中央型和效应型记忆CD4^+ T细胞的特征

目的:探讨正常人外周血BCG特异性记忆T细胞的特征。方法:分离PPD-和PPD+正常人PBMCs,与BCG进行培养,采用ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-γ的水平,ELISPOT法检测分泌IFN-γ的细胞数,利用流式细胞仪在单个细胞水平上检测细胞表面分子及细胞内因子IFN-γ和IL-2的表达及其关系。结果:当BCG刺激后,PPD-正常人PBMCs不产生或只产生少量的IFN-γ,而PPD+者IFN-γ产生的量和细胞数均明显增加(P<0·05)。流式细胞检测分析的结果表明,当BCG刺激后,主要是CD4+而非CD8+T细胞表达IFN-γ和IL-2,两者相比具有显著差异。在CD4+T细胞中单独产生IFN-γ的细胞占大多数,其次为IFN-γ和IL-2双阳性细胞,只产生IL-2的细胞占少数。此外,85%~95%以上的CD4+IFN-γ+T细胞为CD45RO+,其中60%以上的细胞为CCR7+,其余的为CCR7-。同样地,80%~95%左右的细胞为CD62L-。结论:BCG可以诱导抗原特异性记忆CD4+T细胞的产生,其中大多数为中央型记忆CD4+T细胞,少数为效应记忆CD4+T细胞,提示其在预防和控制结核分枝杆菌感染中发挥重要作用。

BCG对变态反应性鼻炎小鼠的TH细胞免疫影响研究

目的:观察BCG对变态反应性鼻炎小鼠的TH细胞免疫的影响并探讨其机制。方法:30只昆明小白鼠随机分为对照组,变态反应性鼻炎组及干预组,干预组造模前及后5d分别以BCG皮内注射干预,造模2周后采用流式细胞仪分析测定外周血Th1/Th2细胞之比,ELISA试剂盒IL.4、IL-10、IFN-γ水平。结果:造模组外周血中IL-4、 IL-10较正常对照组明显升高,而IFN-γ水平降低(P<0.05);与造模组相比,治疗组外周血中IL-4、IL-10水平下降, IFN-γ水平升高(P<0.05);造模组外周血Th1/Th2比值较正常对照组下降(P<0.05);与造模组比较,干预组Th1/Th2比值升高(P<0.05)。结论:Th1/Th2失平衡是变应性鼻炎发病的重要机理,BCG能调节变态反应性鼻炎小鼠的T细胞免疫,干预变应性鼻炎的发病。

支气管哮喘在卡介菌多糖核酸治疗后IFN-γ、IL-4、IL-5的变化

目的 探讨支气管哮喘患者应用卡介菌多糖核酸 (PNBCG)注射液治疗之后 IFN-γ、IL - 4、IL - 5的血清值的变化。方法 110例哮喘患者被随机分为卡介菌多糖核酸组、糖皮质激素治疗组和常规治疗组。卡组患者注射PNBCG注射液 0 .5 mg/ d× 90 d。结果 卡组治疗后 IFN-γ的血清值明显增高 ,是治疗前的 1.919倍 (95 % CI:2 82 .19;4 8.72 ) (p<0 .0 1)。 IL - 4、IL - 5的血清值明显降低 ,分别是治疗前的 0 .4 4倍 (95 % CI:1.4 2 ;0 .31) (p<0 .0 1)和0 .5 3倍 (95 % CI:2 1.12 ;- 4 .71) (p<0 .0 1)。结论 支气管哮喘患者在用 PNBCG后 IFN-γ的血清值升高 ,IL - 4、IL

西替利嗪联合卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者细胞免疫功能及TNF-α、IgE、IFN-γ的影响

目的观察西替利嗪联合卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者细胞免疫功能及TNF-α、IgE、IFN-γ的影响。方法将102例慢性荨麻疹患者随机分成观察组和对照组,各51例。对照组口服盐酸西替利嗪片。在对照组的基础上,给予观察组患者肌注卡介菌多糖核酸注射液治疗。两组患者均持续治疗6周,观察两组患者治疗前后的荨麻疹症状及体征总积分、细胞免疫指标及TNF-α、IgE、IFN-γ的变化,以及不良反应发生情况和复发率。结果疗后,两组患者的症状及体征总积分以及CD8+、TNF-α和IgE水平均显著下降(P<0.05),且观察组的上述指标低于对照组(P<0.05)。两组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IgE水平在治疗后均明显上升(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);。此外,两组患者的不良反应发生率无明显差异(P>0.05),而观察组的复发率明显低于对照组(P<0.05)。结论西替利嗪联合卡介菌多糖核酸可明显改善慢性荨麻疹患者的细胞免疫功能,并有效降低TNF-α、IgE水平和复发率,以及提升IFN-γ水平,使临床疗效得到显著提升,值得在临床中推广应用。

哮喘患者IgE基因表达及卡介菌多糖核酸治疗作用

目的 :体外刺激IgE胚系基因的表达 ,观察卡介菌多糖核酸 (BCG -PSN)对IgE产生的影响 ,阐明其作用机理。方法 :通过对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC)进行体外培养 ,培养体系中加入IL - 4和抗CD4 0单抗 ,模拟IgE胚系基因合成的适合环境。在治疗组中加入 (BCG -PSN)或地塞米松 ,观察各培养组细胞生长的差异。通过总细胞抽提RNA后逆转录成cDNA ,进行PCR扩增 ,以半定量的方法比较不同培养组在IgEε胚系基因和IFN -γ基因表达。结果 :1)IL - 4和抗CD4 0单抗的协同作用可刺激哮喘患者PBMC的生长和转化 ,BCG -PSN组对该体系的细胞生长无抑制作用 ,地塞米松组对细胞生长和转化有显著抑制作用。 2 )BCG -PSN组和地塞米松组均对IgEε胚系基因表达有抑制作用 ,两种治疗组及空白组之间在抑制基因表达程度上无显著差异。 3)BCG -PSN组的抑制作用是部分通过IFN -γ表达增加实现的。结论 :BCG -PSN与地塞米松均可抑制哮喘患者 (PBMC)IgEε胚系基因表达 ,前者不同于后者 ,其部分通过IFN

卡介苗接种预防毛细支气管炎婴儿日后发生喘息的探讨

为观察卡介苗 (BCG)单用或联用干扰素γ(IFN_γ)和维生素A(VitA)对毛细支气管炎 (毛支 )患儿结核菌素纯蛋白衍化物 (PPD)皮肤试验、喘息发作及单核细胞源性细胞因子白细胞介素18(IL_18)水平的变化。给予44例毛支患儿单独BCG或合并IFN_γ/VitA治疗 ,于治疗前和3个月后进行PPD皮试 ,测定外周血单个核细胞体外产生IL_18的水平。随访时间平均1年 ,观察喘息发作情况。未接受BCG接种的19例毛支婴儿作为对照组。结果BCG接种后PPD平均硬结直径大于干预前及毛支对照组恢复期 ,以合并IFN_γ、VitA治疗组更为突出。BCG接种组1年内喘息发作频率低于对照组恢复期。干预后IL_18水平明显升高 ,尤以合并IFN_γ、VitA治疗组为高 ;PPD皮试强度与IL_18水平呈正相关。提示BCG可促进毛支患儿PPD皮试阳转率 ,增强IL_18活性 ,具有预防毛支患儿日后发展为哮喘的作用。IFN_γ。

卡介苗Ag85B对小鼠膀胱癌治疗作用及机制的研究

目的探讨卡介苗(BCG)Ag85B蛋白对小鼠膀胱癌的抑癌效应及免疫机制。方法采用T739小鼠皮下膀胱癌模型,肿瘤局部皮下注射BCG Ag85B蛋白,并用BCG和生理盐水作对照,观察各组的肿瘤重量和存活期,利用ELISA方法检测各组的3种主要细胞因子的水平,电镜和光镜观察各组肿瘤细胞的坏死和凋亡情况,利用流式细胞技术检测各组肿瘤细胞凋亡和细胞增殖周期。结果BCG Ag85B组小鼠肿瘤瘤重显著低于其它两组,其差异有统计学意义(P<0.05),该组小鼠存活天数显著长于其它2组,P<0.05;该组小鼠血清中白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ的水平明显高于其它2组,P<0.05;电镜和光镜下观察Ag85B组坏死明显增加。细胞增殖指数下降,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论BCG Ag85B蛋白对T739小鼠膀胱癌具有抑制作用,并能延长荷瘤鼠的生存期,不论从细胞因子水平和光镜与电镜观察坏死和凋亡情况,还是从细胞凋亡和增殖情况来看Ag85B蛋白均优于卡介苗。

灭活卡介苗经皮接种预防毛细支气管炎患儿发生哮喘的临床研究

目的:评价灭活卡介苗经皮接种预防毛细支气管炎患儿哮喘的效果并探讨其作用机制.方法:将85例毛细支气管炎患儿随机分为常规治疗组(常规组)与灭活卡介苗治疗组(卡介苗组),常规组仅给予常规治疗;卡介苗组在常规治疗的基础上,加用灭活卡介苗经皮接种治疗.观察患儿治疗前及治疗半年后的IFN-γ、IL-4、IgE的变化,并随访2～2.5年,于患儿3岁时统计哮喘的患病率.另设20例健康体检者作为正常对照组.结果:①治疗前卡介苗组和常规组IL-4与IgE均高于正常对照组,IFN-γ低于正常对照组,差异有显著性(P＜0.01);卡介苗组与常规组比较差异无显著性(P＞0.05);②卡介苗组治疗后IL-4与IgE低于治疗前,IFN-γ较治疗前升高,差异有显著性(P＜0.01),且IFN-γ水平与正常对照组差异无显著性(P＞0.05).常规组治疗前、后IL-4与IgE水平差异无显著性,但IFN-γ水平治疗后有所下降,差异有显著性(P＜0.01).③患儿3岁时,卡介苗组哮喘患病率明显低于常规治疗组(8.89%vs 42.5%,P＜0.005).结论:灭活卡介苗能刺激毛细支气管炎患儿IFN-γ生成增多,下调IL-4水平,诱导Th1细胞的优势分化,调节Th1/Th2平衡,可降低毛细支气管炎后婴幼儿哮喘的患病率.

卡介菌多糖核酸、γ-干扰素联合调Q激光治疗尖锐湿疣的疗效对比

目的:探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)或γ-干扰素(γ-IFN)联合调Q激光治疗尖锐湿疣的效果并比较差异。方法:84例尖锐湿疣患者随机分为卡介菌多糖核酸治疗组(BCG组)和γ-IFN治疗组(IFN组),在调Q激光处理患处后分别肌肉注射BCG-PSN或γ-IFN治疗。比较两组的治愈率、、淋巴细胞的变化、复发率和不良反应之间的差异。结果:BCG组(88.10%)的治愈率高于IFN组(61.90%),χ2=7.683,P=0.006;治疗后两组患者出现CD3+T细胞增多、CD4+T细胞增多、CD8+T细胞减少、CD4+/CD8+比值升高(P<0.05),BCG组的变化较IFN组大(P<0.05);BCG组(14.28%)复发率明显低于IFN组(33.33%),χ2=4.086,P=0.043;两组不良反应发生率的差异无统计学意义,χ2=0.491,P=0.483。结论:从治愈率和复发率的角度比较,BCG-PSN的治疗效果优于γ-IFN。

卡介菌多糖核酸对毛细支气管炎喘息反复发作的预防作用

目的 探讨卡介菌多糖核酸 (BCG PSN)对毛细支气管炎患儿喘息反复发作的预防作用及机制。方法 4 0例毛细支气管炎患儿随机分为干预组和未干预组 ,并取 2 0例健康体检者作正常对照。干预组 (19例 )在毛细支气管炎愈后 3个月给予BCG PSN注射液 1ml(含卡介菌多糖 0 .35mg,核酸不低于 30 μg)肌注 ,每周 2次 ,共 2 4次 ,而未干预组 (2 1例 )在毛细支气管炎愈后未予以干预作空白对照。于干预前及干预后 1年用ELISA法测定 3组外周血单个核细胞培养上清中IFN γ ,IL 4及血清IgE含量 ;并随访 1年 ,观察喘息发作情况。结果 与正常对照组比较 ,两组毛细支气管炎患儿干预前IFN γ水平和IFN γ/IL 4降低 ,而IL 4 ,IgE水平增高 (P <0 .0 1)。BCG PSN干预 1年后 ,干预组IFN γ水平 [(986 .95± 36 3.2 0 )ng/L]和IFN γ/IL 4 (16 .0 3± 7.11)较干预前[(76 8.4 3± 2 88.0 7)ng/L ,9.11± 4 .2 7]升高 ,而IL 4 [(5 9.73± 16 .0 4 )ng/L]、IgE[(4 8.0 5± 19.5 7)kU/L]水平较干预前降低 [(81.6 6± 2 1.92 )ng/L ,(15 5 .35± 76 .2 5 )kU/L](P <0 .0 1) ,且IFN γ水平与正常对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;干预组患儿 1年内有两次和 /或以上喘息发作者 (15 .8% )较未干预组婴儿 (5 2 .4 % )少 (P <0 .0 5 )。

卡介菌多糖核酸对小鼠血清IL-2、IFN-γ水平及免疫功能的影响

目的:探讨卡介菌多糖核酸对小鼠血清IL-2、IFN-γ水平的影响。方法:选用BALB/c裸鼠作为免疫缺陷动物模型,将50只裸鼠随机分为卡介菌多糖核酸高、中、低剂量组,阳性药物组和裸鼠正常对照组,另选用10只正常小鼠作为空白对照组。观察卡介菌多糖核酸对小鼠血清IL-2、IFN-γ水平的影响。结果:卡介菌多糖核酸高、中剂量组和阳性药物组均能明显提高裸鼠血清IL-2的水平(P<0.05或P<0.01);卡介菌多糖核酸高、中、低剂量组和阳性药物组均能显著提高裸鼠血清IFN-γ的水平(P<0.05或P<0.01)。结论:卡介菌多糖核酸可以提高裸鼠血清IL-2、IFN-γ的表达水平,通过增强其表达提高裸鼠的免疫功能。

卡介苗作用大鼠膀胱肿瘤细胞/正常移行上皮细胞后TNF-α、IL-10、IFN-γ的检测及意义（英文）

目的:观察卡介苗(BCG)单独作用膀胱肿瘤细胞、正常膀胱移行上皮细胞及其代谢产物作用上述细胞后细胞生长情况及各自细胞培养液上清液中细胞因子(TNF-α、IL-10、IFN-γ)浓度的变化,探讨其在卡介苗治疗膀胱肿瘤中可能的作用机制。方法:构建大鼠膀胱肿瘤模型,并原代培养大鼠膀胱肿瘤细胞及正常膀胱移行上皮细胞。分别用BCG,普通培养液和细胞培养的代谢产物作用上述细胞。酶联接免疫吸附剂测定法(ELISA法)检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)的浓度。结果:ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-10的浓度改变有显著差异,而IFN-γ的浓度无显著差异。结论:BCG可以直接刺激肿瘤细胞自身分泌细胞因子(TNF-α、IL-10)参与调节抑制肿瘤细胞的生长。

卡介苗干预对哮喘小鼠肺组织IL-17A表达的影响及可能机制研究

目的:观察卡介苗干预对哮喘小鼠肺组织IL-17A的表达、气道炎症的影响,并探讨可能机制。方法:按随机数字表法,24只昆明小鼠分为正常对照(A组),模型组(B组),卡介苗(BCG)干预组(C组)。C组小鼠每周一次皮内注射BCG 0.025 mg,连续3次。首次皮内注射4周后,第1、8、15天每只小鼠分别给予鸡卵清蛋白(OVA)与氢氧化铝混合腹腔注射,第22天给予1%OVA溶液雾化吸入激发。激发后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数及分类计数。肺组织HE染色行支气管粘膜下炎症评分。酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测肺组织匀浆中的IL-17A和IFN-γ水平。结果:与正常对照组比较,BCG干预小鼠BALF中白细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数均高于显著增高,低于模型组小鼠。BCG处理小鼠支气管粘膜下炎性细胞浸润程度较模型组小鼠明显降低(P<0.01),比A组明显(P<0.01)。与对照组相比,模型组和BCG组小鼠肺组织匀浆中的IFN-γ显著相抵,在模型组小鼠更明显,IL-17A浓度增高,在模型组小鼠更明显(P<0.05)。结论:BCG干预可抑制气道炎症,可能通过上调Th1型免疫反应增加IFN-γ浓度、减少IL-17A在哮喘小鼠肺组织中表达,减少中性粒细胞的募集活化。

ESAT-6/CFP-10融合蛋白诊断结核性感染和结核病的研究

目的::探讨ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)释放IFN-γ反应及其对结核性感染和结核病的诊断价值。方法:选取健康对照组(34例),密切接触组(19例)和结核病组(39例)3组对象,按其有无卡介苗(BCG)接种各分成两个2组共6小组:健康对照组BCG未接种者(15例)、健康对照组BCG接种者(19例)、密切接触组BCG未接种者(6例)、密切接触组BCG接种者(13例)、结核病组BCG未接种者(7例)和结核病组BCG接种者(32例)。分离PBMC并分别与PPD和ESAT-6/CFP-10融合蛋白共同培养5d,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养上清液中IFN-γ,观察6组对象IFN-γ释放反应。结果:PPD刺激后,健康对照组BCG未接种者与密切接触组BCG未接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.01),而3组BCG接种者之间结果差异无统计学意义(P>0.05)。ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激后,健康对照组、密切接触组、和结核病组3组总阳性率分别为0%,21.1%,87.2%,阳性率明显增加。健康对照组BCG未接种者与密切接触组BCG未接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.05);健康对照组BCG接种者与密切接触组BCG接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:ESAT-6/CFP-10融合蛋白为结核杆菌特异性抗原,能够区分BCG接种和结核病,在结核性感染和结核病的诊断中有应用价值。