Bcl-2在大鼠肾上腺髓质增生组织中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Bcl-2在大鼠肾上腺髓质增生组织中的表达及其意义。方法:A组0.1%利血平1mL/(kg·d)皮下注射6周诱导大鼠肾上腺髓质增生15只,B组正常大鼠15只作对照组,应用免疫组织化学方法检测Bcl-2在大鼠增生肾上腺及正常大鼠肾上腺中的表达情况。结果:免疫组织化学结果显示,Bcl-2在大鼠肾上腺髓质增生中表达阳性染色分光密度值(OD值)为0.30±0.03,对照组Bcl-2OD值为0.18±0.02,两者比较差异存在显著性(P<0.05),且Bcl-2在大鼠肾上腺髓质中的表达与髓质增生程度呈正相关。结论:Bcl-2基因的凋亡抑制作用在大鼠肾上腺髓质增生发生发展中有重要意义。

2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉对大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察脑缺血再灌注后2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。方法:采用线栓法建立SD大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组和用药组(2-BFI 3 mg/kg)。于再灌注24 h后断头取脑,用免疫组化染色法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:用药组Bcl-2阳性细胞数明显高于模型组(P<0.01),Bax阳性细胞数明显低于模型组(P<0.01)。结论:2-BFI于脑缺血再灌注后立即给药能显著上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达。

Bcl-2蛋白与Bak蛋白肽片段复合物的三维结构模建与分析

目的:探讨抗肿瘤药物新靶点Bcl-2蛋白与底物蛋白的相互作用。方法:以同源模建的方法构建Bcl-2蛋白与底物Bak蛋白的肽片段的复合物的三维结构,并对此结构模型的合理性进行验证。比较复合物结构模型中Bcl-2的活性腔与自由状态结构的差异,分析它与底物肽相互作用的重要位点和残基,并计算它与两类抑制剂的分子对接。结果:构建的Bcl-2复合物结构模型合理,通过比较发现模建的结构模型中活性腔特别是α3前后的部位与自由状态有较大的结构变化,蛋白活性腔侧部的一些酸性碱性极性残基及底部的一些疏水残基对于结合底物蛋白并发挥功能非常关键,这些结果与生物学残基突变实验数据得到了较好的相互验证。结论:本研究构建了合理的Bcl-2蛋白与底物Bak蛋白肽片段的复合物的三维结构。

单眼剥夺大鼠视觉系统三级神经元Bcl-2表达的研究

目的 研究敏感期内和敏感期末单眼剥夺大鼠视觉系统三级神经元凋亡抑制基因Bcl 2表达规律及意义 方法 缝合 2周龄及 6周龄大鼠单侧眼睑 30d,切取视网膜中央区、外侧膝状体和视皮质 17区,行Bcl 2免疫细胞化学染色并对结果进行计算机图像分析。 结果 敏感期内剥夺眼较正常大鼠在视网膜节细胞层、同侧外侧膝状体相应输入层(A1层)和视皮质 17区(Ⅳ层)Bcl 2蛋白表达的免疫阳性神经元胞浆染色变淡(P<0 05), A1层、Ⅳ层的免疫阳性神经元数目减少(P<0 05),视网膜节细胞层免疫阳性神经元数目未见明显改变(P>0 05);敏感期末单眼剥夺大鼠视觉系统Bcl 2变化与对照组比较差异无显著性(P>0 05)。 结论 敏感期内单眼剥夺大鼠视觉系统视网膜节细胞层、外侧膝状体A1层和视皮质 17区Ⅳ层Bcl 2表达均降低,提示Bcl 2对视觉系统的作用可能是弱视发生的分子生物学基础之一。

PTEN基因沉默对BMSC氧糖剥夺模型的保护作用及其对Bcl-2凋亡通路的影响

目的研究RNA干扰沉默第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)基因对骨髓间充质干细胞(BMSC)氧糖剥夺模型的保护作用,并探讨其对Bcl-2敏感的凋亡通路的影响,分析其保护作用的机制。方法体外分离培养BMSC并鉴定,通过脂质体法转染PTEN基因特异的siRNA沉默PTEN基因;RT-PCR检测PTEN基因的表达;制备体外氧糖剥夺模型观察PTEN基因的沉默对细胞的保护作用。Western blot检测Bcl-2蛋白表达的变化。结果成功培养BMSC并鉴定。RT-PCR检测结果显示siRNA成功干扰了PTEN基因的表达,流式细胞仪检测结果显示PTEN基因沉默后的细胞对氧糖剥夺模型有较强的耐受能力,Western blot检测结果显示Bcl-2蛋白明显增多。结论 PTEN基因的沉默使BMSC更能耐受氧糖剥夺的环境,增强了细胞的存活能力,其机制可能是通过Bcl-2敏感的凋亡通路抑制细胞凋亡。

芹菜素对人前列腺癌裸鼠移植瘤Bax和Bcl-2表达的影响

目的:探讨芹菜素对人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法:通过皮下种植PC-3细胞建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,成瘤后随机分为4组:对照组(DMSO+NS,0.2 mL/d)、芹菜素低剂量组(12.5 mg.kg-1.d-1)、芹菜素中剂量组(25 mg.kg-1.d-1)、芹菜素高剂量组(50 mg.kg-1.d-1),每组6只,每日腹腔注射1次,共28次。应用免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达变化。结果:免疫组织化学法结果显示,芹菜素中、高剂量组能促进Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,两组与对照组和低剂量组相比差异有统计学意义(P<0.05)。但芹菜素低剂量组Bax和Bcl-2蛋白的表达和对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中、高剂量组芹菜素能上调前列腺癌裸鼠移植瘤Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。

c-myc与Bcl-2在大鼠抗Thy1.1系膜增生性肾炎肾小球内的表达

目的 :探讨 SD大鼠抗 Thy1.1系膜增生性肾炎实验模型肾小球内 c-myc与 Bcl-2的表达在其发病机理中的作用。方法 :用 SD大鼠胸腺细胞免疫新西兰白兔 ,制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清 (ATS) ,再将 ATS经尾静脉注射给 SD大鼠 ,诱导其发生系膜增生性肾炎 (Ms PGN)。用 HE和 PASM染色法计算肾小球内细胞数 ,用免疫组化法系膜区 c-m yc及Bcl-2的表达。结果 :实验组和对照组大鼠肾小球内均有 c-myc和 Bcl-2不同程度的表达 ;实验组肾小球内 c-myc和 Bcl-2的表达均明显多于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :在大鼠 Ms PGN实验模型中 ,c-m yc及 Bcl-2的高表达参与了肾小球系膜增生的发病机理。

联合转染Survivin和Bcl-2反义寡核苷酸对裸鼠胆囊癌生长的抑制作用

目的探讨联合转染Survivin和Bcl-2反义寡核苷酸(AsODN)对裸鼠胆囊癌生长抑制作用。方法建立裸鼠胆囊癌皮下移植瘤模型,选择36只裸鼠随机分为3组:对照组、正义寡核苷酸(sODN)组和AsODN组,裸鼠瘤体内分别注射PBS、Survivin和Bcl-2sODN、Survivin和Bcl-2AsODN,12d后处死裸鼠,测量瘤体体积及质量,计算抑瘤率;苏木精-伊红染色观察瘤体组织学变化;免疫组织化学方法检测Survivin及Bcl-2蛋白的表达。结果AsODN组裸鼠瘤体平均体积显著低于对照组、sODN组(F=24.469,q=8.802、7.569,P<0.01),其体积抑瘤率为55.53%,sODN组为9.90%;AsODN组裸鼠瘤体平均质量显著低于对照组、sODN组(F=25.376,q=3.168、20.737,P<0.01),其质量抑瘤率为56.24%,sODN组为8.47%。AsODN组瘤体中可见大量的凋亡细胞。免疫组化证实AsODN组Survivin表达明显降低,同sODN组相比差异有显著意义(F=15.103,q=5.883、7.191,P<0.01);Bcl-2表达亦明显降低,同sODN组相比差异有显著性(F=6.632,q=4.793、4.030,P<0.05)。结论联合转染Survivin和Bcl-2AsODN可下调Survivin和Bcl-2表达,诱发细胞凋亡,从而抑制裸鼠胆囊癌种植瘤的生长。

淫羊藿总黄酮对痴呆模型大鼠学习记忆功能及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨淫羊藿总黄酮对老年痴呆大鼠行为学及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法大鼠海马CAI区微量注射冈田酸,建立AD大鼠模型,淫羊藿总黄酮灌胃,采用Morris水迷宫实验检测行为学,免疫组织化学检测海马Bcl-2、Bax蛋白表达。结果AD模型组与对照组相比大鼠认知能力明显下降(P<0.01),Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P<0.01),淫羊藿总黄酮组与AD模型组相比大鼠认知能力改善(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.01),Bax蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮可以通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,改善AD大鼠模型的学习记忆能力。

针刺对MGH模型大鼠乳腺组织PCNA和BCL-2蛋白表达的影响

目的:探讨针刺治疗乳腺增生病(MGH)和预防MGH癌变的机理。方法:对空白组外各组均造模,模型组、自愈组不治疗,对抗组于造模的同时行针刺治疗,治疗组于造模成功后行针刺治疗,治疗1个月后处死动物,采集各组乳腺组织,免疫组化SABC法检测PCNA、BCL-2。结果:PCNA含量治疗组低于自愈组、模型组(P<0.01),与空白组无差别(P>0.05),对抗组低于模型组(P<0.01)。BCL-2阳性表达积分治疗组、对抗组显著低于模型组(P<0.01),治疗组与空白组无差别(P>0.05)。结论:针刺对大鼠MGH的乳腺病理改变有一定抑制作用,并可加速其复常,通过阻断乳腺增生向乳腺癌发展的进程,发挥对MGH的治疗作用和对乳腺癌的预防作用。

地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞Bax/Bcl-2表达的影响

目的探讨地黄低聚糖(RGOs)对过氧化氢-血清饥饿诱导的小型猪脂肪组织来源干细胞(ASCs)Bax、Bcl-2表达的影响。方法过氧化氢(200μM)联合血清饥饿(H2O2/SD,6 h)建立小型猪ASCs凋亡模型。RGOs(0.01 g/L、0.1 g/L、1 g/L、10 g/L)预处理12 h并继续干预6 h。Western-blot法测定细胞Bax、Bcl-2的表达。结果 RGOs在一定浓度范围(0.1 g/L^10 g/L)可以减轻H2O2/SD引起的ASCs损伤,表现在Bax表达下调,Bcl-2表达上调。结论地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞的凋亡具有保护作用。

鱼藤酮致帕金森病大鼠黑质中Smac和Bcl-2的表达及意义

目的:研究鱼藤酮致帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠脑黑质中凋亡相关蛋白Smac和Bcl-2表达的改变。方法:将Witstar大鼠随机分为对照组和实验组。对照组10只背部皮下注射葵花油1ml/kg,实验组25只分为A、B、C三组,按照3.0(5只)、2.0(10只)和1.0(10只)mg/(kg·d)背部皮下注射鱼藤酮(鱼藤酮溶解在葵花籽油中,充分震荡混匀后4℃避光保存)。结果:透射电镜观察下,鱼藤酮处置的实验组神经元细胞皱缩,胞质致密,核染色质边集,有部分细胞胞核裂解,胞质芽突脱落,形成凋亡小体。并且随着鱼藤酮染毒剂量的增大,凋亡小体形成更加明显。免疫组化染色显示,Smac的阳性表达实验组高于对照组,Bcl-2的阳性表达实验组低于对照组。结论:鱼藤酮具有明显的神经毒性,能导致大鼠脑内DA能神经元的损伤,细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤。

鱼藤酮致帕金森大鼠的脑黑质中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达改变

目的研究鱼藤酮致帕金森病(PD)大鼠中脑黑质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的改变。方法Wistar大鼠每日颈背部皮下注射鱼藤酮2mg(kg·d)(3～6周)造模,依据所建立的评分体系记录动物行为变化,在行为学有记分并停止给鱼藤酮4、10d时,中脑黑质病理切片免疫组化染色比较黑质区域Bcl-2、Bax的表达。结果在有行为学记分4d时,记4分和8分的大鼠中脑黑质Bcl-2表达均显著减少;所有PD大鼠中脑黑质Bax表达均显著增加;Bcl-2/Bax比率均显著减少;有记分4d时,行为学记分与Bcl-2/Bax比值成负相关性。结论细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤。

氯沙坦对心力衰竭大鼠心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯沙坦对心力衰竭大鼠心肌细胞促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的影响。方法:选24只雄性8周龄SD大鼠,分为对照组、心衰组和氯沙坦干预组各8只。采用阿霉素腹腔注射造模,氯沙坦干预组同时灌胃给氯沙坦连续给药6周。用原位脱氧核糖核酸酶未端标记法(TUNEL法)检测大鼠心肌细胞凋亡,用免疫组化法检测大鼠心肌Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与对照组比较,心衰组心肌细胞凋亡指数升高,提示心衰组存在明显心肌细胞膜损伤。与心衰组比较,氯沙坦干预组心肌细胞凋亡指数降低。心衰组和氯沙坦干预组心肌细胞Bax和Bc1-2基因蛋白表达显著高于对照组,与心衰组相比,氯沙坦干预组明显下调Bax基因表达,上调Bc1-2基因表达。结论:氯沙坦可明显提高抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达,降低促凋亡蛋白Bax蛋白表达,提示氯沙坦具有有效抑制心肌细胞凋亡,改善心衰作用。

有氧运动对衰老大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的:研究有氧运动对衰老模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:建立衰老大鼠模型,随机分为对照组和2组运动组,运动组分别给予6次/周和3次(隔日)/周的游泳训练,每次运动持续90 min,共训练12周,于末次训练48 h后处死动物。TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡,免疫印迹法检测骨骼肌细胞内Bcl-2、Bax的表达,并计算Bcl-2/Bax的比值。结果:与对照组相比,2组运动组骨骼肌细胞凋亡指数和Bax蛋白表达均显著降低(P均<0.01),而Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax明显升高(P均<0.01);与6次/周运动组比较,3次/周运动组骨骼肌凋亡指数和Bax表达明显降低(P均<0.05),而Bcl-2表达和Bcl-2/Bax明显升高(P均<0.05)。结论:有氧运动能优化Bcl-2/Bax的比值,降低骨骼肌细胞凋亡指数,有效减少衰老导致的骨骼肌过度凋亡;且隔日有氧运动效果更佳。

Bcl-2反义核酸治疗Burkitt’s淋巴瘤裸鼠模型的研究

为了探讨Bcl 2反义核酸治疗Burkitt’s淋巴瘤 (BL)的疗效 ,将不含EB病毒的人类BL的细胞株—CA4 6移植到BAB C裸鼠体内 ,建立BL裸鼠模型 ,并将荷瘤裸鼠随机分为反义治疗 (A组 )、无义对照 (B组 )和空白对照 (C组 ) 3个组 ,每组 5只。A组注射Bcl 2反义核酸 ,B组注射无义寡核苷酸 ,C组不注射任何制剂 ;治疗剂量为 5mg·kg-1 ·d-1 ,给药方式为瘤内局部注射 ,每天注射 1次 ,连续给药 1 5d。结果显示 :A组肿瘤的生长明显受到抑制 ,其中 1只裸鼠的肿瘤消失 ,其余 4只的瘤块明显小于B组和C组。A组对C组的肿瘤抑制率为 89.5 % ;A组对B组的肿瘤抑制率为83.3% ,2者的抑制率无显著差异 (p >0 .0 5 ) ;而B组对C组的抑制率为 36 .9%与前 2者的抑制率差异非常显著 (p <0 .0 1 )。说明Bcl

哮喘小鼠T细胞周期和Bcl-2基因表达的变化

采用腹腔注射和雾化吸入卵蛋白建立小鼠过敏性哮喘动物模型 ,应用流式细胞术和免疫荧光法观察脾及肺泡灌洗液 (BALF)中T细胞数、T细胞周期和Bcl 2基因表达的变化 ,结果发现哮喘组脾和BALF中淋巴细胞CD3表达率显著高于正常对照组 (尤其是BALF明显 ) ;脾T细胞S期及G2 +M期细胞数明显增多 ,同时凋亡率增加 ;Bcl 2基因表达率显著增高。提示哮喘发病时 ,T细胞增多 ,脾T细胞活化增殖增加 ,凋亡增加。同时淋巴细胞Bcl

Bcl-2在EMT模型大鼠中药治疗前后异位组织中的表达

目的观察细胞凋亡调控蛋白Bcl2在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)模型大鼠异位组织中的表达,探讨“消症汤”促进异位组织消退的作用机理,为临床用药提供实验依据。方法制作大鼠EMT动物模型,模型鼠每日分别以05ml和10ml中药灌胃,采用免疫组化方法观察用药前后在位和异位子宫内膜组织中Bcl2的表达。结果Bcl2在各组在位和异位组织中的上皮细胞、腺细胞、基质细胞、白细胞以及巨噬细胞中均有表达,且模型对照组中阳性细胞数大于正常对照组和10ml用药组(P<001)。“消症汤”治疗前后,巨噬细胞数无显著差异(P>005),而Bcl2阳性表达的巨噬细胞渐减(P<001)。结论子宫内膜中Bcl2的高表达可能抑制了异位组织细胞凋亡,而“消症汤”降低了Bcl2蛋白水平,后者可能与促进细胞凋亡有关。

克癌临对大鼠肝癌发生期间p53和bcl-2表达的影响

为探讨克癌临 (主药 :半枝莲、仙鹤草等 )抑制癌症发生的作用机制 ,以DEN诱生大鼠肝癌 ,观察诱癌 8周和 16周时大鼠肝脏组织形态及p5 3、bcl- 2基因表达等的改变。结果 :克癌临组大鼠的肝脏增长性病变在 8周和 16周时均明显轻于模型组 ;p5 3和bcl- 2表达少于模型组 ,比较其积分光密度值均有显著差异 (P <0 0 5或P <0 0 1)。提示下调p5 3和bcl - 2基因表达 。

含碘中药对甲亢大鼠细胞凋亡基因bcl-2及bax表达的影响

目的:观察不同浓度含碘中药对甲亢大鼠模型甲状腺组织bcl-2、baxmRNA表达的影响。方法:制作大鼠甲状腺机能亢进模型,灌服不同浓度含碘中药复方及其他对照药物进行治疗,然后RT-PCR法检测各组大鼠甲状腺组织bcl-2、baxmRNA水平。结果:含碘较低的中药复方较之含碘高的中药复方在增加bcl-2mRNA表达及减少baxmRNA表达上具有显著性的差异。结论:小剂量含碘中药复方对实验性甲亢大鼠甲状腺细胞具有保护作用。