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荧光素酶标记的BEL-7405细胞体内外成像及肿瘤动物模型建立
被引量:
9
1
作者
孙宝昌
靳宝锋
+3 位作者
侗冬青
梁冰
李卫华
周涛
《中国比较医学杂志》
2008年第1期1-4,I0001,共5页
目的筛选表达荧光素酶(luciferase)基因的人单克隆肝癌细胞系,用活体成像技术(bioluminescentimaging)在细胞及整体动物水平检测其发光能力,为监测肿瘤生长和转移建立一种新的肿瘤动物模型。方法构建表达荧光素酶基因的真核表达载体并...
目的筛选表达荧光素酶(luciferase)基因的人单克隆肝癌细胞系,用活体成像技术(bioluminescentimaging)在细胞及整体动物水平检测其发光能力,为监测肿瘤生长和转移建立一种新的肿瘤动物模型。方法构建表达荧光素酶基因的真核表达载体并将其转入肝癌细胞(BEL-7405),用G418筛选稳定表达荧光素酶的单细胞克隆,在体外用活体成像技术评价其稳定发光能力。BALB/c nu/nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体内观察肿瘤的生长及转移情况。结果在肝癌细胞中获得稳定表达荧光素酶的克隆,利用活体成像技术可检测到细胞克隆发光。将稳定表达荧光素酶的克隆皮下接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤发光随着观察时间的延长而增强,但是没有观察到肿瘤转移的现象。结论本研究筛选得到了稳定表达荧光素酶的肿瘤单克隆细胞系,结合活体成像技术,建立了一套新的能够用于活体内监测肿瘤生长的研究方法。
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关键词
荧光素酶
肝癌细胞
bel-7405
生物发光成像
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职称材料
肉苁蓉苯乙醇总苷对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
2
作者
齐鑫鑫
赵军
+2 位作者
何转霞
苏德奇
刘涛
《毒理学杂志》
CAS
CSCD
2021年第3期225-230,240,共7页
目的探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度CPhGs干预Bel-7405肝癌细胞后,计算其IC_(50),根据IC_(50)设置后续实验干预浓度分别为0、35、70和140μg/ml,采用MTT与划痕实验检测CP...
目的探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度CPhGs干预Bel-7405肝癌细胞后,计算其IC_(50),根据IC_(50)设置后续实验干预浓度分别为0、35、70和140μg/ml,采用MTT与划痕实验检测CPhGs对Bel-7405肝癌细胞活性及增殖情况、Annexin V-FITC/PI、Hochest33258及线粒体染色检测细胞凋亡变化,Western blot检测Pro-PARP、cleaved-PARP、Pro-Caspase-9、cleaved-Caspase-9及Cleaved-Caspase-3等凋亡蛋白表达情况。结果CPhGs对Bel-7405肝癌细胞的IC_(50)为298μg/ml,随着CPhGs浓度增加,Bel-7405细胞增殖抑制作用逐渐增强(P<0.01);细胞在24 h及48 h迁移率随CPhGs剂量的增加而减少(P<0.01);CPhGs各剂量组均可诱导Bel-7405肝癌细胞凋亡,且有一定的剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。Hoechst33258及线粒体染色发现,CPhGs各剂量组均可诱导细胞凋亡;凋亡相关蛋白Pro-PARP、Cleaved-PARP、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、Pro-Caspase-9及Cleaved-Caspase-9表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CPhGs对Bel-7405肝癌细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关,但其具体细胞凋亡机制还需进一步探讨。
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关键词
肉苁蓉苯乙醇总苷
bel-7405
肝癌细胞
细胞增殖
细胞凋亡
原文传递
题名
荧光素酶标记的BEL-7405细胞体内外成像及肿瘤动物模型建立
被引量:
9
1
作者
孙宝昌
靳宝锋
侗冬青
梁冰
李卫华
周涛
机构
军事医学科学院仪器测试分析中心
温州市疾病预防控制中心
出处
《中国比较医学杂志》
2008年第1期1-4,I0001,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30500583)
文摘
目的筛选表达荧光素酶(luciferase)基因的人单克隆肝癌细胞系,用活体成像技术(bioluminescentimaging)在细胞及整体动物水平检测其发光能力,为监测肿瘤生长和转移建立一种新的肿瘤动物模型。方法构建表达荧光素酶基因的真核表达载体并将其转入肝癌细胞(BEL-7405),用G418筛选稳定表达荧光素酶的单细胞克隆,在体外用活体成像技术评价其稳定发光能力。BALB/c nu/nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体内观察肿瘤的生长及转移情况。结果在肝癌细胞中获得稳定表达荧光素酶的克隆,利用活体成像技术可检测到细胞克隆发光。将稳定表达荧光素酶的克隆皮下接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤发光随着观察时间的延长而增强,但是没有观察到肿瘤转移的现象。结论本研究筛选得到了稳定表达荧光素酶的肿瘤单克隆细胞系,结合活体成像技术,建立了一套新的能够用于活体内监测肿瘤生长的研究方法。
关键词
荧光素酶
肝癌细胞
bel-7405
生物发光成像
Keywords
Luciferase
bel-7405
Bioluminescent imaging (BLI)
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
肉苁蓉苯乙醇总苷对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
2
作者
齐鑫鑫
赵军
何转霞
苏德奇
刘涛
机构
新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室
新疆维吾尔自治区药物研究所
出处
《毒理学杂志》
CAS
CSCD
2021年第3期225-230,240,共7页
基金
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2019D01C199)
新疆维吾尔自治区研究生创新项目(XJ2020G183)。
文摘
目的探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度CPhGs干预Bel-7405肝癌细胞后,计算其IC_(50),根据IC_(50)设置后续实验干预浓度分别为0、35、70和140μg/ml,采用MTT与划痕实验检测CPhGs对Bel-7405肝癌细胞活性及增殖情况、Annexin V-FITC/PI、Hochest33258及线粒体染色检测细胞凋亡变化,Western blot检测Pro-PARP、cleaved-PARP、Pro-Caspase-9、cleaved-Caspase-9及Cleaved-Caspase-3等凋亡蛋白表达情况。结果CPhGs对Bel-7405肝癌细胞的IC_(50)为298μg/ml,随着CPhGs浓度增加,Bel-7405细胞增殖抑制作用逐渐增强(P<0.01);细胞在24 h及48 h迁移率随CPhGs剂量的增加而减少(P<0.01);CPhGs各剂量组均可诱导Bel-7405肝癌细胞凋亡,且有一定的剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。Hoechst33258及线粒体染色发现,CPhGs各剂量组均可诱导细胞凋亡;凋亡相关蛋白Pro-PARP、Cleaved-PARP、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、Pro-Caspase-9及Cleaved-Caspase-9表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CPhGs对Bel-7405肝癌细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关,但其具体细胞凋亡机制还需进一步探讨。
关键词
肉苁蓉苯乙醇总苷
bel-7405
肝癌细胞
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
Phenylethanol glycoside from Cistanche deserticola
bel-7405
Proliferaion
Apoptosis
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
R114 [医药卫生—卫生毒理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光素酶标记的BEL-7405细胞体内外成像及肿瘤动物模型建立
孙宝昌
靳宝锋
侗冬青
梁冰
李卫华
周涛
《中国比较医学杂志》
2008
9
下载PDF
职称材料
2
肉苁蓉苯乙醇总苷对Bel-7405肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
齐鑫鑫
赵军
何转霞
苏德奇
刘涛
《毒理学杂志》
CAS
CSCD
2021
0
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