黄芪多糖在体内对小鼠CFU-E和BFU-E生成的影响

以甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖在体内对小鼠红系集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ）和红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）生成的影响。结果显示，剂量２０ｍｇ／ｋｇ和１００ｍｇ／ｋｇ的黄芪多糖均能提高ＣＦＵ－Ｅ的生成（均为Ｐ＜００１），也促进ＢＦＵ－Ｅ的生长（分别为Ｐ＜００１和Ｐ＜００５）；与环磷酰胺（ＣＴＸ）同步注射，黄芪多糖能缓解ＣＴＸ对ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的抑制作用（均为Ｐ＜００１）；对ＣＴＸ已形成的ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ抑制，高剂量的黄芪多糖对ＣＦＵ－Ｅ的恢复有作用（Ｐ＜００１），低剂量的作用不明显；对ＢＦＵ－Ｅ的恢复，则高低剂量均无作用。提示：黄芪多糖对小鼠ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的生成有促进作用，对ＣＴＸ引起的ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ抑制也有一定的保护或缓解作用，这些作用与黄芪多糖的剂量。

有血清和无血清培养基中BFU-E的比较研究

目的 :比较有血清和无血清培养基中BFU -E生长情况。方法 :分离脐血中单个核细胞 (MNC) ,接种于有血清和无血清甲基纤维素半固体培养基中生长 14～ 18d ,观察BFU -E ,并染色鉴定。结果 :有血清中约在培养 14～ 16d集落数达高峰 ,BFU-E为 ( 70 .3± 5 0 .5 ) /10 5MNC ,大部分BFU -E的细胞为 3 0 0～ 5 0 0个 ,小部分集落细胞超过 10 0 0个 ;无血清培养 16～ 18d集落数达高峰 ,BFU -E为 ( 3 6.5± 18.2 ) /10 5MNC ,集落形态与有血清基本相似 ,但集落体积普遍较小 ,细胞数约为 2 0 0～ 3 0 0左右。结论 :无血清培养基中生长时BFU -E数目及BFU -E平均细胞数均较有血清培养中少 ,血清中含有促进BFU

炙甘草汤及相应细胞培养上清对脐血BFU-E形成的影响

目的:探讨炙甘草汤及相应细胞培养上清对脐血单个核细胞BFU-E形成的影响。方法:新鲜脐血经淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,实验采用炙甘草汤与右归饮两个中药方剂,单个核细胞设空白对照组、炙甘草汤组、右归饮组、混合组及相应细胞培养上清组,每组分别加入中药液或细胞培养上清,甲基纤维素半固体培养基培养10 d后观察集落形成情况。结果:细胞培养上清组均能刺激细胞集落形成,其中尤以炙甘草汤组最为明显,其次是混合组与右归饮组。炙甘草汤培养上清组与混合培养上清组两组与空白培养上清组相比,刺激效果明显。结论:炙甘草汤细胞培养上清能明显刺激脐血单个核细胞集落形成,对脐血细胞扩增有明显效果。

rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响

目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50～1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100～400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100～400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。

正常人骨髓前红系祖细胞(BFU-E)体外培养的实验观察(摘要)

近20年来,由于细胞生物学的迅速进展,对造血干细胞的许多方面进行了实验与临床研究。有关人骨髓红系祖细胞体外培养研究由Gregory于1977年首获成功。本文采用Gregory甲基纤维素培养体系并加以改良,对13例正常人骨髓细胞进行红系祖细胞(BFU-E)培养成功,并获较高产率,培养14天可获高达40个左右中心的BFU-F集落。(一)材料与方法骨髓标本均采自健康的医务工作者共13人。男性10人,女性3人,年龄20～46岁,平均29岁。根据Gregory甲基纤维素法加以改良,

RhIL-2对人骨髓CFU-GM,CFU-E和BFU-E的影响

采用甲基纤维素体外半固体培养法证明，50～1000U／mlrhIL－2单用对人骨髓造血祖细胞的CFU－CM，CFU－E及BFU－E无直接刺激增生作用；当与GM－CSF联用时．100～400U／mlrhIL－2其CFU－GM集落形成率明显高于单用GM－CSF的对照组（P＜0．05）；当与EPO联用时，其CFU－E及BFU－E集落形成率也明显高于单用EPO对照组（P＜0．05），而1000U／mlrhIL－2其3种集落形成数目呈下降趋势，可能有抑制作用。说明100～400U／mlrhIL－2可应用于协同GM－CSF及EPO体外扩增骨髓干／祖细胞以进行骨髓移植是有重要意义的。

再生障碍性贫血儿童血清作用下巨噬细胞及T淋巴细胞对BFU-E的影响

作者观察了再生障碍性贫血儿童血清作用下正常人骨髓巨噬细胞及T淋巴细胞对BFU—E产率的影响。发现正常人巨噬细胞在再障血清影响下对BFU—E生长有明显刺激作用。T淋巴细胞的作用系双向的,其条件培养液及小量加入混合细胞培养可刺激BFU—E生长,大量加入混合细胞培养则产生抑制效应。据此推断再障患者骨髓中网状细胞增多对造血机能衰竭具有代偿作用,而T淋巴细胞增高则对红系造血起抑制作用。

骨髓内皮细胞无血清条件培养液对CFU-E和BFU-E生成的影响

利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ,且在 2 %～ 6% (V/V ,下同 )范围内集落产率随浓度增加而增加 ;而分子量 <1 0 0 0 0组分对CFU E ,BFU E有明显抑制作用 ,且在 1 0 %～ 40

离子对反相HPLC测定小鼠骨髓BFU-E、CFU-E中PRPP合成酶活性

采用离子对反相高效液相色谱法 ( IPr HPLC)的单液等度洗脱 ,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位 ( BFU- Es)与红系集落形成单位 ( CFU- Es)的 PRPP合成酶活性 .方法学研究表明 ,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵 ( TBAHS)后 ,ADP谱峰分离完全 ,其反应增加量易于计算 .本法的批内变异系数平均值为 - 2 .30 %～ - 1 .0 6%与 1 .0 6%～ 2 .30 % ,平均相对偏差为 0 .81 %～ 1 .74% ,回收率为 93.9%～ 98.5% ,能达到操作简便、灵敏和准确的要求 .采用本法测得 2 0只正常昆明小鼠的 BFU- E和 CFU- E中该酶活性各为 ( 0 .563± 0 .0 2 7)μmol/( min·g· m L- 1)与 ( 0 .41 6± 0 .0 2 6) μmol/( min·g·m L- 1) .

鸡血藤单体化合物对造血祖细胞增殖的调控作用研究

目的研究从中药鸡血藤(spatholobus suberectus dunn,SSD)中提取的9个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响,明确鸡血藤补血活血作用的主要物质基础。方法采用血清药理学方法,通过造血祖细胞培养观察9个化合物对骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用。结果腹腔注射鸡血藤各单体后的含药血清对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的生长有较强的刺激作用:各单体化合物(除焦性粘液酸、芒柄花苷外)含药血清均可刺激CFU-GM的生长(P<0.01);儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸、表儿茶素的含药血清对CFU-E、BFU-E和CFU-Meg的刺激增殖作用与对照组比较亦差异有显著性(P<0.05)。结论从中药鸡血藤中提取的单体化合物可刺激骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖,缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷,其中儿茶素的刺激增殖活性相对最强,可能是鸡血藤补血活血的主要物质基础。

鸡血藤活性成分SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的作用

目的:研究鸡血藤单体成分SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞(CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg)增殖的影响。方法:采用甲基纤维素半固体培养法,通过对长期接受SS8治疗后的骨髓抑制小鼠造血祖细胞的培养,观察SS8对CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg生长的作用。结果:SS8可显著刺激骨髓抑制小鼠CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg生长,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。随时间延长、剂量增加,刺激作用逐渐加强。结论:SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有明显刺激作用,且有时间、剂量相关性。

鸡血藤单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响(英文)

背景：机体造血主要依靠造血祖细胞来扩增，当受到放射线、化学药物等损伤时，即会发生造血功能障碍。目的：观察从传统中药鸡血藤中提取的九个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响。设计：随机对照实验。单位：中国人民解放军总医院临床药理研究室。材料：实验于2002-11／2003-02在中国人民解放军总医院药理研究室完成，选用348只健康昆明种小鼠，体质量22～25g，清洁级，雌雄各半，由解放军军事医学科学院实验动物中心提供，许可证号码为SCXK-2001-001。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。鸡血藤由中国人民解放军总医院中药房提供，单体化合物没食子儿茶素、芒柄花素、儿茶素、焦性粘液酸、丁香酸、Demethylvestitol、间苯三酚、芒柄花甙、表儿茶素由中国医学科学院药物研究所从鸡血藤乙酸乙酯部位中分离。TGL-16型离心机为上海医疗器械六厂生产，CO2培养箱为日本SANYO公司产品，MK型倒置显微镜为日本OLYMPUS公司产品。方法：①实验分组：随机抽签法将小鼠分为29组：鸡血藤九种单体化合物没食子儿茶素、芒柄花素、儿茶素、焦性粘液酸、丁香酸、Demethylvestitol、间苯三酚、芒柄花甙、表儿茶素高剂量组、中剂量组及低剂量组共27组，同时设立正常组及对照组，每组12只。②实验干预：除正常组外，小鼠均给予全身^60Co γ射线照射，剂量为4Gy。照射后第3天，9种单体化合物高、中、低剂量组小鼠分别腹腔注射2，0．4，0．08g/L相应单体化合物药液0．5mL，正常组和对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。③实验评估：给药30min后分别取正常组及对照组各8只及其他组全部小鼠静脉血制备正常、对照及各单体含药血清，取对照组剩余4只小鼠的骨髓细胞进行造血祖细胞培养，培养分为对照组和九个单体化合物高、中、低剂量组，分别在各组培养体系中加入对照及各单体含药血清，另取正常组小鼠4只进行骨髓造血祖细胞培养作为细胞培养的正常组，通过计数各组CFU—E、BFU-E、CFU-GM、CFU—Meg集落数来观察九个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响。主要观察指标：各组CFU—E、BFU-E、CFU-GM、CFU—Meg集落数。结果：纳入小鼠348只，均进入结果分析，无脱失值。①CFU-E集落数：儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸、表儿茶素高剂量组CFU—E显著高于对照组（P〈0．05～0．01），儿茶素中、低剂量组及没食子儿茶素中剂量组CFU-E也显著高于对照组（P〈0．05）。②CFU—GM集落数：除焦性粘液酸、芒柄花甙各剂量组外，鸡血藤其余单体化合物各剂量组CFU-GM均较对照组明显增加（P〈0．01）。③BFU-E集落数：儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸各剂量组及表儿茶素高、中剂量组的BFU-E较对照组明显增加（P〈0．05）。④CFU-Meg集落数：儿茶素和表儿茶素各剂量组、丁香酸高、低剂量组及没食子儿茶素低剂量组的CFU-Meg显著高于对照组（P〈0．05）。对照组所有集落数均明显少于正常组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论从中药鸡血藤中提取的单体化合物可刺激骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖，其中儿茶素的刺激增殖活性相对最强。

鸡血藤活性成份对造血祖细胞增殖的调控作用

目的:探讨从中药鸡血藤Spatholobus suberectus Dunn中提取的几种单体(SS8、SS9、SS12、SS17)对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响.方法:采用血清药理学方法,通过造血祖细胞培养观察几种单体对骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用.结果:中药鸡血藤中各单体的含药血清可刺激骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的生长,与空白血清对照组相比有显著差异(p＜0.05).结论:从中药鸡血藤中提取的几种单体对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有刺激活性,可缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷,其中以SS8的活性最强.

黄芪多糖对体外人骨髓造血祖细胞生成的影响

应用甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖 (AstragalusPolysaccharides ,APSs)在体外对人骨髓粒单集落 (CFU GM )、红细胞集落 (CFU E)和爆式红细胞集落 (BFU E)生成的影响。结果显示 :APSs 5mg/L对人骨髓CFU GM和CFU E的生成具有促进作用 (均为P <0 .0 5 ) ,在APSs 12 5mg/L时 ,能促进BFU E的生成 (P <0 .0 5 ) ;在CFU GM的培养体系中 ,如果没有GM CSF ,APSs在 5mg/L的终浓度时 ,仍能促进CFU GM的生成 (P <0 .0 5 ) ,过高或过低的浓度无效。在培养CFU E时 ,不含EPO ,则APSs对CFU E无刺激作用。骨髓细胞与APSs孵育 2小时后 ,再进行造血祖细胞培养 ,则CFU GM、CFU E和BFU E的生成均略有下降 ,但与孵育时APSs的浓度高低无关。提示浓度合适的APSs在体外能促进人骨髓细胞中红细胞系和粒细胞系祖细胞的生成 ,这种促进作用在造血因子存在时 ,才能发挥 ,或发挥的作用最大 ,并且这种促进作用的发挥需APSs的持续刺激 ,短时间的刺激无效。

当归多糖（APS）对造血生长因子受体表达调控的实验研究

当归多糖(APS)是当归的主要成分之一。我们既往研究证明：APS是当归“补血”或促进血细胞发生的有效成分：APS对小鼠造血干细胞(CFU-S)、小鼠与人髓系造血祖细胞(BFU-E、CFU-E、CFU-GM、CFU-MK)的增殖分化有显著促进作用。为进一步阐明当归“补血”的生物学机理，本研究采用造血祖细胞体外培养，免疫细胞化学技术，

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。

脐血造血细胞培养的特性

目的 培养脐血中具有造血潜能的造血细胞 ,分析脐血中造血细胞的特性。方法 用密封的采血袋采集脐血 ,采用羟乙基淀粉一次沉淀法分离有核细胞 ,用半固体培养体系培养 ,7天计数红系集落形成单位 (CFU E) ,14天后计数红系爆式集落形成单位 (BFU E)、粒单系集落形成单位 (CFU GM) ,同时染色分析集落的组成成分。结果 采集 34份脐血 ,平均体积为 (99± 2 2 )ml;有核细胞数为 (0 6 4～ 2 5 9)×10 9,有核细胞回收率为 79 2 %± 13 7% ,回收的有核细胞绝对值为 (1 2 2± 0 43)× 10 9;平均每份脐血中含有BFU E(1 39± 0 75 )× 10 6,CFU GM (2 15± 1 2 2 )× 10 6。结论 脐血富含各期具有造血潜能细胞 ,每份脐血在有核细胞数和各种集落总数都可以满足成人移植的需求。

真性红细胞增多症及慢性粒细胞白血病骨髓BFU─E培养及临床意义

真性红细胞增多症及慢性粒细胞白血病骨髓ＢＦＵ─Ｅ培养及临床意义魏彩霞，杨绵本，肖敏，杨弘真性红细胞增多症（ＰＶ）是一种克隆性的、以红系细胞异常增生为主的慢性骨髓增殖性疾病。慢粒白血病（ＣＧＬ）病变发生在多能干细胞水平。在无红细胞生成素（ＥＰＯ）存在的...

红细胞生成素和重组细胞因子对动员后外周血造血祖细胞、红系爆式祖细胞和粒巨噬系祖细胞的集落形成和自我更新的作用(英文)

本研究探讨红细胞生成素 (EPO)和重组细胞因子 (G CSF ,SCF ,IL 3和GM CSF)对患者和健康供者动员后的外周造血祖细胞的红系爆式祖细胞 (BFU E)和粒巨噬系祖细胞 (CFU GM )的集落形成和自我更新的作用。为了更好的了解上述那一种细胞因子和如何联合对干细胞的扩增更为有效 ,采用甲基纤维素半固体培养法 ,观察在单独用EPO、G CSF的基础上 ,比较联合SCF ,IL 3和GM CSF对BFU E和CFU GM的作用。结果显示 :①在EPO +IL 3和EPO +SCF +IL 3组 ,外周血BFU E自我更新显著增加 ,而EPO +SCF组则明显增加。②患者与正常供者之间BFU E的自我更新无显著差别。③G CSF联合SCF ,IL 3和GM CSF后CFU GM集落形成显著增加。患者组仅G CSF本身可使CFU GM集落形成显著增加 ,而G CSF +SCF和GMix组CFU GM集落形成明显增加。④当G CSF联合SCF ,IL 3和GM CSF可以显著增加CFU GM的自我更新 (AUC)。GMix是CFU GM的集落形成和祖细胞扩增的较佳组合。⑤正常供者比患者有较高的AUC即自我更新 ,特别是在G CSF组比患者具有显著差异 (P=0 .0 0 6 7)。