应用BIAcore技术对KA-01及主要组分体外抗病毒研究

为了从中草药中找到抗HBV的有效药物,利用BIA技术分析比较中药复方KA-01及其组成部分A、B、C、D对HBsAg和HBeAg蛋白结合的作用,应用HepG2.2.15细胞模型,激光扫描共聚焦显微技术研究了KA-01及其主要组分体外抑制HBV蛋白分泌的活性.结果显示,KA-01、A、B、C和D与HBsAg蛋白结合的响应值分别为200、183.7、162.1、39.1、66.6 RU,与HBeAg蛋白结合很少.KA-01对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制率分别为62.01%和30.59%,A对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制率分别为54.26%和14.15%,B对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制率分别为50.97%和27.92%,C对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制率分别为17.54%和8.06%.KA-01,A,B体外具有抗HBV活性.

基于表面等离子体共振(SPR)技术实时分析RGD基序与整联蛋白的相互作用

旨在研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)结构蛋白VP1上的RGD(Arg-Gly-Asp)基序与宿主细胞表面受体整联蛋白的结合特异性,作者应用基于表面等离子共振技术(SPR)的Biacore 3000系统实时研究RGD基序分别与猪源整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域、α_v亚基胞外区结构域和β_6亚基胞外区结构域的亲和力。首先通过结合试验筛选与RGD基序有结合的整联蛋白结构域,再对有结合的整联蛋白与RGD基序开展动力学分析。结果显示,合成的RGD基序与猪源整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域有结合,结合动力学常数K_a、K_d、K_D分别为42.3 M~(-1)s~(-1)、3.1×10~(-4)s~(-1)和7.33×10~(-6)M;与整联蛋白α_v亚基胞外区结构域之间亦有结合,结合动力学常数K_a、K_d、K_D分别为21.8 M~(-1)s~(-1)、2.13×10~(-4)s~(-1)和9.79×10~(-5)M;与β_6亚基胞外区结构域几乎没有结合。综上表明,RGD与整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域的结合比与整联蛋白α_v亚基胞外区结构域之间的结合快且亲和力强。本研究将为进一步探讨FMDV与宿主细胞表面受体的相互作用提供参考。