miR-21-3p靶向STAT3促进银屑病角质形成细胞增殖的研究

目的探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白(STAT3)在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表达量的检测选择实时荧光定量PCR法,靶基因STAT3和miR-21-3p关系的检测选择双荧光素酶报告基因。化学合成miR-21-3p模拟物、抑制剂,瞬时转染HaCaT细胞,对不同分组细胞进行CCK8、流式细胞凋亡实验,探究分析miR-21-3p调控细胞表型主要作用。对于转染细胞中STAT3蛋白表达情况,选择Western Blot检测。结果寻常型银屑病患者皮肤组织中miR-21-3p呈高表达(P<0.05)。STAT3免疫组化阳性表达定位于细胞浆,在银屑病组患者皮损组织阳性表达率为82.22%(37/45)高于正常皮肤组织(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-21-3p与STAT3存在结合,呈靶向关系。miR-21-3p mimics促进HaCaT细胞增殖活性,抑制细胞凋亡;miR-21-3p inhibitor抑制HaCaT细胞的增殖能力,促使细胞趋向凋亡。miR-21-3p转染HaCaT过表达可对STAT3蛋白表达量产生促进,相反则降低(F=48.632,P<0.01)。结论miR-21-3p呈现正调控关系,能够靶向调控STAT3;两者共同作用参与并加重银屑病的病程,并抑制患者细胞凋亡,调节角质形成细胞增殖活性。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

GATA3介导miR-21/PTEN轴对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭的影响

目的分析GATA结合蛋白3(GATA3)介导微小RNA-21(miR-21)/人类第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)轴对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭的影响。方法取HEC-1-A细胞,进行转染分组,分为对照组、GATA3空载质粒组、GATA3过表达质粒组、GATA3 siRNA阴性对照组、GATA3 siRNA组。检测各组细胞中GATA3、miR-21、PTEN表达量、增殖情况、凋亡率、迁移、侵袭。结果与hEEC组相比,HEC-1-A组、HEC-1-B组、Ishikawa组细胞中GATA3、miR-21表达水平升高,PTEN表达水平降低(P<0.05)。与GATA3空载质粒组相比,GATA3过表达质粒组GATA3、miR-21 mRNA表达量、增殖率、迁移距离、侵袭细胞数、Vimentin水平升高,PTEN mRNA表达量、凋亡率、Caspase-9、Bax、E-cadherin水平降低(P<0.05);与GATA3 siRNA阴性对照组相比,GATA3、miR-21 mRNA表达量、增殖率、迁移距离、侵袭细胞数、Vimentin水平降低,PTEN mRNA表达量、凋亡率、Caspase-9、Bax、E-cadherin水平升高(P<0.05)。结论下调GATA3表达,可对miR-21/PTEN轴进行调节,使HEC-1-A细胞的增殖减慢,促进HEC-1-A细胞的凋亡。

基于miR21/PI3K-Akt/SREBP通路研究泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制

目的 探索经典名方泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制。方法 采用ELISA法检测血清中血脂四项、肝功能指标及胆固醇脂酰转移酶(LCAT)水平。采用HE和油红O染色法判断肝组织病理情况。采用网络药理学预测泽泻汤降脂相关靶点,实现对交集靶点GO功能和KEGG通路富集分析。采用PCR芯片技术检测网络药理学筛选的目的基因,应用qPCR和Western blot检测基因和蛋白表达量。结果 泽泻汤可显著调节高脂血症模型小鼠的血脂四项水平,改善因高脂引起的肝损伤指标升高,对肝脏组织中脂质代谢关键酶HMGR、CYP7A1及脂质转运体ABCA1、Apo-A1具有反向调节作用。HE和油红O染色显示,泽泻汤可改善肝组织病理形态,减轻肝组织的脂质沉积情况,阳性面积比率显著下降(P<0.01)。PCR芯片获取反向调节基因44个,GO功能富集分析获取了266个条目,KEGG通路富集分析筛选得到99条信号通路。qPCR及Western blot结果显示,泽泻汤组显著下调PIK3CG、AKT1、IL-6基因表达量(P<0.05,P<0.01),上调ABCG1基因表达量(P<0.05),下调PI3 Kinase p110β、p-AKT(Ser473)及SREBP-1c蛋白表达水平(P<0.01);泽泻汤能够反向调节miR21-5p(P<0.01)。结论 泽泻汤对高脂血症模型小鼠脂代谢具有显著的调节作用,能改善高脂血症引起的肝损伤,其调脂作用可能与调节胆固醇在体内代谢、转运有关,与miR21/PI3K-Akt/SREBP通路密切相关,且泽泻汤全方调脂效果优于单味药。

血清FGF-21、Gal-3联合对肥胖型多囊卵巢综合征患者体外受精-胚胎移植治疗后妊娠结局的预测价值

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合对肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗后妊娠结局的预测价值。方法选取2019年2月至2023年2月在南阳市中心医院确诊的98例肥胖型PCOS患者作为研究对象,根据IVF-ET治疗后的妊娠结局分为成功组(n=48)和失败组(n=50);采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中FGF-21、Gal-3表达水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清FGF-21、Gal-3联合对肥胖型PCOS患者IVF-ET治疗后妊娠结局的预测价值。采用Logistic回归分析探索肥胖型PCOS患者IVF-ET治疗后妊娠结局的影响因素。结果与成功组比较,失败组LH、FTI、Glu、INS的水平升高,FSH、SHBG水平、Gn天数降低(P<0.05)。与成功组比较,失败组患者FGF-21水平升高,Gal-3水平降低(t=8.412、8.298,P<0.001、<0.001)。FGF-21、Gal-3联合预测肥胖型PCOS患者IVF-ET治疗后妊娠结局的AUC高于FGF-21、Gal-3单独预测的AUC值(Z=14.317,P<0.001;Z=11.793,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,FGF-21、Gal-3为肥胖型PCOS患者IVF-ET治疗后妊娠结局的影响因素(P<0.05)。结论IVF-ET治疗后妊娠失败的肥胖型PCOS患者血清中FGF-21水平升高、Gal-3水平降低,二者对肥胖型PCOS患者IVF-ET治疗后妊娠结局有一定的预测价值。

miR-21-3p通过下调CCT4抑制食管鳞癌细胞的迁移及侵袭

目的:探讨miR-21-3p对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:通过数据库检索miR-21-3p的下游靶基因,GEPIA2数据库预测CCT4在食管鳞癌中的表达和对食管鳞癌患者预后的影响,培养食管鳞癌细胞TE-1、KYSE150,将miR-21-3p inhibitor、SiCCT4、Plenti-CMV-CCT4-GFP/Puro转染至TE-1和KYSE150细胞中,分为miR-21-3p inhibitor组和inhibitor NC组、SiCCT4组和SiNC组、Plenti-CMV-CCT4组和inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组,采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-21-3p和CCT4 mRNA的表达水平,Transwell迁移侵袭实验检测各组细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测转染后各组细胞CCT4蛋白的表达水平。结果:数据库预测结果显示CCT4在食管鳞癌中过表达,与食管鳞癌患者总体生存期相关,与miR-21-3p呈正相关。qRT-PCR显示miR-21-3p和CCT4在食管癌细胞相较于正常上皮细胞表达显著升高,且在抑制miR-21-3p后CCT4表达水平显著降低(P<0.05)。Transwell实验显示,inhibitor组迁移率及侵袭率显著低于inhibitor NC组(P<0.05);SiCCT4组迁移率及侵袭率显著低于SiNC组(P<0.05);inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组迁移率及侵袭率显著高于inhibitor组(P<0.05);Western blot检测CCT4蛋白发现,inhibitor组蛋白低于inhibitor NC组(P<0.05),inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组蛋白显著高于inhibitor组(P<0.05)。结论:miR-21-3p和CCT4在食管癌中呈现过表达,miR-21-3p通过下调CCT4表达抑制食管癌细胞迁移和侵袭能力。

单月桂酸甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响

试验旨在研究单月桂酸甘油酯(ML)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响。通过ML对3D4/21细胞活力试验和PEDV在3D4/21细胞中的生长曲线确定最适浓度和最佳时间后,将3D4/21细胞随机分为3组(control组、PEDV组、PEDV+ML组),各组分别以全时添加10µmol/L ML和PEDV感染细胞后添加10µmol/L ML两种方式进行处理,并检测相关基因相对表达量。结果表明:添加10µmol/L的ML对3D4/21细胞生长具有显著的促进作用(P<0.05),病毒感染3D4/21细胞的48 h内PEDV-S、M、N基因相对表达量呈现先增加再降低的趋势,12 h时处于最高;与PEDV组相比,PEDV+ML组全时添加ML处理12 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05),处理24 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1和IFITM1基因相对表达量显著下调(P<0.05),KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。与PEDV组相比,PEDV+ML组在感染后添加ML处理12 h使MMP13基因相对表达量显著下调(P<0.05),PEDV-M基因相对表达量显著上调(P<0.05),处理24 h使IL-6、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1、IFITM1、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05),PEDV-S、M、N、KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。综上所述,PEDV感染前ML预处理具有一定的抗病毒效果;PEDV感染使细胞处于免疫应激状态,ML有一定的缓解作用。

利用小泛素蛋白修饰分子融合技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组抗菌肽LLv

为了研究在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中利用小分子泛素蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)融合技术表达重组抗菌肽LLv(antimicrobial peptide LLv)的方法。试验以天然抗菌肽LL-37氨基酸组成及分子结构为依据,人工设计了LLv的氨基酸序列和基因序列。利用SUMO融合技术,构建重组大肠杆菌表达载体pSUMO-LLv在E.coli BL21(DE3)中表达SUMO-LLv,并研究异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl beta-D-thiogalacyranoside,IPTG)浓度和诱导时间对融合蛋白SUMO-LLv表达的影响,同时分析融合蛋白SUMO-LLv表达的可溶性并分离纯化目的蛋白LLv。结果表明:建立的E.coli BL21(DE3)的pSUMO-LLv重组表达载体,经DNA测序验证构建正确;SUMO-LLv的诱导表达最佳条件是IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导表达时间为2 h;融合蛋白SUMO-LLv主要存在于菌液上清液中,表达含量为11.34μg/mL;免疫印迹试验(Western blot)鉴定证明融合蛋白具有良好的反应原性;采用Ni柱亲和层析法在诱导菌液中成功纯化到了目的蛋白LLv,大小为5 kDa。说明在E.coli BL21(DE3)中利用SUMO融合技术表达重组抗菌肽LLv的方法可行。

外周血miR-21-5p、Foxp3及凝血功能预测人工周期-冻融胚胎移植结局的价值

目的:探讨外周血miR-21-5p、Foxp3及凝血功能预测人工周期-冻融胚胎移植结局的价值。方法:选取2021年1月—2023年12月于赣州市人民医院行人工周期-冻融胚胎移植的患者108例,其中妊娠成功48例,妊娠失败60例。观察比较妊娠成功和失败患者外周血miR-21-5p、Foxp3、D-二聚体(D-D)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT)的差异,并分析外周血miR-21-5p、Foxp3及凝血功能指标预测人工周期-冻融胚胎移植结局的价值。结果:妊娠成功患者外周血miR-21-5p、Foxp3 mRNA、D-D均高于妊娠失败患者,APTT和PT均明显长于妊娠失败患者(P<0.05)。miR-21-5p、Foxp3 mRNA、D-D和PT是妊娠失败的影响因素(P<0.05)。miR-21-5p、Foxp3 mRNA、D-D和PT预测妊娠失败的受试者操作特征(ROC)曲线下面积分别为0.857、0.790、0.922和0.861。结论:人工周期-冻融胚胎移植成功和失败患者外周血miR-21-5p、Foxp3及D-D和PT有所差异,且在预测妊娠结局方面有一定应用价值。

血清FGF21和SIRT3水平对慢性心力衰竭患者病情及预后评估的价值

目的:对慢性心力衰竭(congestive heartfailure,CHF)患者的病情及预后进行早期评估有助于降低其病死率,改善其预后。本研究旨在探索CHF患者血清成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)和沉默信息调节因子2相关酶3(silent information regulator factor 2 related enzyme 3,SIRT3)水平及其在患者病情及预后评估中的应用价值。方法:选取2021年1月至2022年6月确诊的164例CHF患者作为疾病组,选择同期160例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清FGF21和SIRT3水平,采用多普勒超声仪检测患者左室重量指数(left ventricular weight index,LVMI)、左心室舒张期末内径(left ventricular end-diastolic internal diameter,LVEDD)、左房内径(left atrium diameter,LAD)、左室射血分数(left ventricular ejection fractions,LVEF);Pearson相关性分析血清FGF21、SIRT3分别与LVMI、LVEDD、LAD的相关性;采用受试者操作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析血清FGF21和SIRT3对CHF患者预后的诊断价值,采用Kaplan-Meier法分析FGF21和SIRT3与CHF患者预后的关系。结果:与对照组比较,疾病组LVMI、LVEDD、LAD及FGF21水平均升高,SIRT3水平降低(均P<0.05);不同心功能分级患者血清FGF21和SIRT3水平差异均有统计学意义(均P<0.05);FGF21水平与LVMI、LVEDD、LAD呈正相关,SIRT3水平与LVMI、LVEDD、LAD和FGF21水平呈负相关(均P<0.05);FGF21和SIRT3联合诊断CHF患者预后的曲线下面积(area under the curve,AUC)显著大于FGF21单独诊断的AUC(Z=2.645,P=0.008)及SIRT3单独诊断的AUC(Z=2.738,P=0.006),FGF21高表达组生存率低于低表达组(χ^(2)=8.257,P=0.004),SIRT3高表达组生存率高于低表达组(χ^(2)=15.305,P<0.001)。结论:CHF患者血清FGF21水平升高,SIRT3水平降低,FGF21与SIRT3联合在CHF病情及预后评估中具有较高的应用价值。

血清Nesfatin-1、IGFBP-3、FGF-21联合检测对特发性矮小症的诊断价值

目的探究血清摄食抑制因子(Nesfatin-1)、类胰岛素生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)、成纤维细胞生长因子21(FGF-21)联合检测对特发性矮小症(ISS)的诊断价值。方法本研究选取2022年6月至2023年6月期间在本院诊治的85例ISS患儿记为ISS组,另选74例在本院体检的儿童记为对照组,记录两组儿童一般资料并进行比较分析。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测受试者血清Nesfatin-1、IGFBP-3、FGF-21;使用原子吸收光谱仪测定受试者血清营养元素钙(Ca)、镁(Mg)、铜(Cu)、铁(Fe)、锌(Zn)的水平。X线骨密度仪检查受试者骨龄(BA)。Pearson相关性分析ISS患儿血清Nesfatin-1、IGFBP-3、FGF-21水平的相关性;多因素Logistic回归分析影响儿童发生ISS的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析Nesfatin-1、IGFBP-3、FGF-21水平对ISS的诊断价值;通过Z检验比较曲线下面积(AUC)的差异。结果与对照组相比,ISS组BA、身高、体重、BMI以及IGFBP-3、FGF-21水平较低,Nesfatin-1水平、性发育状态I级人数较高(P<0.05);ISS组患儿Nesfatin-1与IGFBP-3、FGF-21水平呈负相关(r_(Nesfatin-1 vs IGFBP-3)=-0.469,r_(Nesfatin-1 vs FGF-21)=-0.483),IGFBP-3与FGF-21水平呈正相关(r_(IGFBP-3 vs FGF-21)=0.456)(P<0.05);BA、性发育状态、IGFBP-3、FGF-21是儿童发生ISS的独立保护因素,而Nesfatin-1是儿童发生ISS的独立危险因素(P<0.05);Nesfatin-1、IGFBP-3、FGF-21单独诊断ISS的AUC分别为0.831、0.836、0.823,3者联合诊断ISS的AUC为0.928,优于单独及两两联合诊断(P<0.05)。结论ISS患儿血清中Nesfatin-1水平较高,IGFBP-3、FGF-21水平较低,3者是儿童发生ISS的影响因素,联合诊断ISS具有较高价值。

QPQ处理对3J21弹性合金性能的影响

以3J21弹性合金作为研究对象,采用570℃的QPQ工艺对3J21合金进行不同时长的处理,研究QPQ处理对其性能的影响。通过维氏显微硬度计、光学显微镜、XRD衍射分析仪分别检测了3J21处理后的表面维氏显微硬度、断面维氏显微硬度、渗氮层厚度和相结构组成。结果表明:3J21合金经QPQ处理后,表面硬度得到了显著提升;断面硬度随着QPQ处理的时间延长,下降趋势变缓;渗氮层深度随着处理时间的延长而增加;通过XRD衍射图谱观察到,由于渗层浅,各相衍射峰强度较低,主要由α″相、Ni_(3)N、CrN和Co_(2)N等固溶相构成渗层。

血清CEA、NSE、CYFRA21-1、CA15-3在肺癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨血清CEA、NSE、CYFRA21-1、CA15-3在肺癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 将80例肺癌患者作为A组,同期选择80例肺部良性病变患者和健康体检人群作为B组、C组。采集静脉血进行检测,对比血清标志物水平。结果 各组肿瘤标志物水平比较结果为:A组>B组>C组。肺癌患者的血清肿瘤标志物水平在病理特征为低、中分化;有淋巴结转移及Ⅲ-Ⅳ期明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson结果显示,血清CEA、NSE、CYFRA21-1、CA15-3水平与淋巴结转移、TNM分期呈正相关,与肿瘤分化程度呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 肺癌患者的血清CEA,CYFRA21-1,CA15-3水平明显不同于健康人群,可作为肺癌跟踪、良恶性鉴别及病情评估等指标,具有重要作用。

呕吐毒素体外刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞对炎性因子和m^(6)A甲基化相关基因表达的影响

本实验构建了呕吐毒素(DON)体外刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞模型,研究DON刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞对炎性因子IL-6、IL-8和m^(6)A甲基化修饰相关基因METTL3、METTL14、FTO、WTAP和YTHDF2表达的影响。利用2μmol/L的DON刺激细胞24h和48h,收集不同时间点细胞样品的总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR检测炎性因子和m^(6)A修饰相关基因表达水平的变化,并利用蛋白免疫印迹法(WB)检测METTL3和FTO蛋白的表达水平变化。结果表明:2μmol/L的DON刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞24 h和48 h后,炎性细胞因子IL-6、IL-8的相对表达量均上调(P<0.01);与对照组相比,METTL3基因的mRNA转录水平均上调(P<0.05),FTO基因的mRNA转录水平均下调(P<0.05),METTL14基因仅在24 h后上调(P<0.05),而WTAP和YTHDF2基因在DON刺激细胞24 h和48 h后均无显著变化。蛋白免疫印迹分析结果显示,METTL3蛋白在48 h后上调(P<0.05),而FTO蛋白在24 h和48 h均下调(P<0.05)。以上结果表明,DON刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞可引起细胞内炎性因子的表达增加,且m^(6)A甲基化修饰相关基因METTL3的上调和FTO的下调可能与细胞炎症相关。此外,对DON组小鼠腹腔注射5 mg/kg BW DON,对照组注射等体积的磷酸盐缓冲液。3 h后检测小鼠肺脏组织中m^(6)A甲基化修饰相关基因的表达情况,与对照组相比,肺脏组织中m^(6)A甲基化相关基因METTTL3、METTL14、WTAP、YTHDF2均无显著差异;FTO下调(P<0.001)。蛋白免疫印迹分析结果显示:在DON刺激小鼠3h后FTO蛋白下调(P<0.01),表明DON在动物体内也表现出相似的效应。

乙肝病毒通过调控miR-21-5p/STAT3通路促进骨髓来源抑制细胞的增殖与活性

目的:探究乙肝病毒(HBV)对骨髓来源抑制细胞(MDSCs)的作用及其机制。方法:C57BL/6小鼠分为正常组和乙肝组,乙肝组建立慢性HBV感染模型,检测小鼠miR-21-5p水平;另将C57BL/6小鼠分为对照组、miR-21-5p阴性对照组、miR-21-5p过表达组和miR-21-5p沉默组,除对照组外其余小鼠注射miR-21-5p干预,除miR-21-5p阴性对照组外,所有小鼠建立慢性HBV感染小鼠模型,检测小鼠miR-21-5p水平及MDSCs数量;将miR-21-5p分别转染小鼠MDSCs,暴露于HBV病毒中,检测p-STAT3(Ser727)、Arginase-1、IL-10及p-STAT3蛋白水平;在培养基中加入Stattic(STAT3抑制剂),检测p-STAT3、Arginase-1以及IL-10蛋白水平。结果:乙肝组miR-21-5p表达水平高于正常组;miR-21-5p阴性对照组相较于对照组miR-21-5p表达水平及MDSCs数量升高,miR-21-5p过表达组相较于miR-21-5p沉默组miR-21-5p表达水平及MDSCs数量升高;小鼠MDSCs感染HBV后p-STAT3(Ser727)、Arginase-1、IL-10及p-STAT3蛋白表达升高,miR-21-5p过表达后p-STAT3(Ser727)、Arginase-1、IL-10及p-STAT3蛋白表达升高;加入Stattic后,p-STAT3、Arginase-1以及IL-10蛋白表达无差异。结论:HBV可能通过调控miR-21-5p/STAT3通路,从而促进MDSCs的增殖与活性。

射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠巨噬细胞活化及IL-21/STAT3通路调节作用研究

目的探讨射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠巨噬细胞活化及白细胞介素(IL)-21/信号转导和转录活化因子3(STAT3)通路调节作用。方法取雄性SD大鼠36只,随机选择6只作为正常组,其余大鼠采用卵清白蛋白致敏法建立支气管哮喘模型。将造模成功大鼠随机分为哮喘组、射干麻黄汤低剂量组、射干麻黄汤中剂量组、射干麻黄汤高剂量组及地塞米松组,每组6只。射干麻黄汤低、中、高剂量组大鼠分别给予1 g/kg、2 g/kg、4 g/kg(以生药含量计)射干麻黄汤灌胃,地塞米松组大鼠给予1 mg/kg地塞米松灌胃,正常组及哮喘组大鼠灌胃等量蒸馏水,均1次/d,连续灌胃20 d。末次灌胃结束后,使用肺功能检测系统测定大鼠肺活量、肺动态顺应性及呼气峰值流速,ELISA法测定肺泡灌洗液中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2、IL-4、IL-13水平,计算肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞及中性粒细胞占比,HE染色法观察肺组织病理学形态,免疫组化法观察肺组织中F4/80蛋白阳性表达情况,Western blot法测定肺组织中IL-21、p-STAT3、STAT3蛋白表达情况。结果与正常组比较,哮喘组大鼠肺活量、肺动态顺应性、呼气峰值流速及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-2水平均明显降低(P均<0.05),肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞占比、中性粒细胞占比、IL-4水平、IL-13水平及肺组织中F4/80蛋白阳性表达相对积分光密度和IL-21蛋白相对表达量、p-STAT3/STAT3比值均明显升高(P均<0.05),肺组织炎症损伤。与哮喘组比较,射干麻黄汤各组及地塞米松组大鼠肺活量、肺动态顺应性、呼气峰值流速及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-2水平均明显升高(P均<0.05),肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞占比、中性粒细胞占比、IL-4水平、IL-13水平及肺组织中F4/80蛋白阳性表达相对积分光密度和IL-21蛋白相对表达量、p-STAT3/STAT3比值均明显降低(P均<0.05),肺组织病理改变明显恢复,且各指标随射干麻黄汤剂量的增加改善更明显。结论射干麻黄汤能够显著改善支气管哮喘大鼠肺功能,缓解气道炎症反应,减轻肺组织病变,其机制可能与抑制肺组织巨噬细胞活化、调节IL-21/STAT3通路有关。

血清miR-21-3p、IL-18水平检测对重症急性胰腺炎患者急性肾损伤预测评估的临床价值

目的探讨血清中微RNA(miR)-21-3p和白细胞介素(IL)-18水平对重症急性胰腺炎患者急性肾损伤(AKI)预测评估的临床价值。方法前瞻性选取2020年9月至2023年青岛市中医医院收治的146例急性重症胰腺炎患者,根据有无AKI分为AKI组(n=51)和非AKI组(n=95)。比较两组的临床资料[性别、年龄(≤50岁、>50岁)、病因类型(酒精性、胆源性、高血脂性、其他)、体重指数(≤28 kg/m 2、>28 kg/m 2)],比较两组血清中miR-21-3p(相对表达量、高表达比例、低表达比例)、IL-18水平(平均表达量、≤140 pg/mL比例、>140 pg/mL比例);采用Logistic回归模型分析影响重症急性胰腺炎患者住院期间AKI发生的因素;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析miR-21-3p、IL-18对重症急性胰腺炎患者并发AKI的预测价值。结果AKI组患者的性别、年龄、病因类型、体重指数与非AKI组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。AKI组的miR-21-3p相对表达量、IL-18水平、Ranson评分分别为2.24±0.52、(178.21±49.32)pg/mL、(6.14±1.24)分,均明显高于非AKI组[1.58±0.35、(82.35±38.43)pg/mL、(4.53±1.12)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,miR-21-3p和IL-18增高均是SAP患者发生AKI的危险因素(OR=1.490,95%CI:1.035~1.832;OR=1.421,95%CI:1.042~1.734;P<0.05)。miR-21-3p和IL-18联合检测对重症急性胰腺炎伴AKI的诊断具有更高的敏感性和特异性,AUC为0.873,敏感度为90.42%,特异度为91.24%。结论在重症急性胰腺炎合并AKI患者中,血清中miR-21-3p和IL-18水平显著升高。检测血清miR-21-3p和IL-18水平有助于预测重症急性胰腺炎合并AKI,尤其在联合检测时,有更高的准确性。

基于Civil 3D和MIKE 21耦合的全二维溃堤洪水动态模拟应用

为探究基于Civil 3D和MIKE 21耦合的全二维水动力模型在溃堤洪水动态模拟中的实际应用效果,文章采用实测地形资料,利用Civil 3D创建河道内、外全二维高精度地形曲面,结合MIKE 21构建全二维水动力模型,计算得到不同溃口工况下提防沿线的淹没深度及流场分布。结果表明,采用Civil 3D创建河道内地形曲面较横断面数据概化更为精准,更能直观展示河道内洪水演进变化。该研究为工程设计提供了科学可靠的数据支持,对于指导防洪工程建设具有重要意义。

FGF21通过SOCS3/JAK/STAT通路调控肝细胞脂质代谢研究

目的通过敲减细胞内成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factors 21,FGF21)的表达,观察其对肝细胞脂质代谢的影响,并探讨FGF21调控肝细胞脂质代谢的分子机制。方法通过FGF21干扰慢病毒转染HepG2细胞,降低FGF21的表达,以空载体转染HepG2细胞作为对照,分为干扰组和对照组。两组均以棕榈酸油酸刺激构建非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型。采用油红O染色法观察肝细胞内脂质沉积情况,测定分光光度值,计算脂质含量;利用蛋白质印迹(Western blot)法检测肝细胞中SOCS3、JAK2、STAT3蛋白的变化。结果油红O染色及吸光度值显示,与对照组相比,干扰组肝细胞内脂滴含量显著减少;Western blot结果表明,干扰组肝细胞内细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)、Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription,STAT3)蛋白表达水平均显著升高。结论在肝细胞模型中,敲减FGF21表达,可通过激活SOCS3/JAK/STAT信号通路从而抑制肝细胞脂质沉积。但其具体作用机制仍需进一步深入研究。

BL21（DE_3）／PET－11做为人IL－2表达系统的研究

ＢＬ２１（ＤＥ_３）／ＰＥＴ－１１做为人ＩＬ－２表达系统的研究公茂凯，章静波，刘德培，张世馥刘丕旭，董敏（中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究所，北京１００００５）关键词白细胞介素２，ＢＬ２１（ＤＥ_３），聚合酶链反应中图号Ｒ３９２。１２白细...