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鳙BMP基因家族成员的鉴定、进化及表达分析
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作者 武艳红 周小雨 +2 位作者 陈庚 俞小牧 童金苟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1085-1094,共10页
为了深入研究鳙(Hypophthalmichthys nobilis)骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)基因(Hyn-bmps)的结构、功能和表达特征,实验首先通过生物信息学方法对Hyn-bmps家族进行了全基因组水平的鉴定,利用qRT-PCR法检测其在不同... 为了深入研究鳙(Hypophthalmichthys nobilis)骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)基因(Hyn-bmps)的结构、功能和表达特征,实验首先通过生物信息学方法对Hyn-bmps家族进行了全基因组水平的鉴定,利用qRT-PCR法检测其在不同组织和快/慢速生长差异个体中的表达模式。在鳙全基因组水平上共鉴定出不均匀地分布于13条染色体上的18个BMP家族成员。分子系统发育分析将BMP划分为5个亚家族;内含子-外显子结构和保守基序的分析结果不仅表明Hyn-bmps在进化上高度保守,也为鳙亚家族的分类提供了证据。18个bmps在鳙不同组织中具有不同的表达模式。群体中极端快/慢速生长差异个体的组织表达分析结果表明,绝大部分Hyn-bmps的高表达与快速生长呈高度正相关,提示它们在鳙机体生长和头部发育中具有正调控作用。研究结果不仅表明BMP基因家族在鳙生长与发育中扮演重要角色,而且也为鳙选择育种和分子育种研究提供了重要的基因资源。 展开更多
关键词 bmp 基因家族 基因特征 基因表达
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BMP亚家族成员中影响绵羊繁殖性能的基因研究进展
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作者 刘梦兰 邵旭文 +1 位作者 单雪松 姜怀志 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第7期1-8,共8页
排卵数和产羔数是反映绵羊繁殖性状的关键性指标,也是绵羊重要的经济性状,二者属于中低遗传力性状,受基因型、环境和营养状况等多重因素共同影响。由BMP、GDF和AMH等组成的BMP亚家族是TGF-β超家族的重要组成部分,BMPR1B、BMP15和GDF9... 排卵数和产羔数是反映绵羊繁殖性状的关键性指标,也是绵羊重要的经济性状,二者属于中低遗传力性状,受基因型、环境和营养状况等多重因素共同影响。由BMP、GDF和AMH等组成的BMP亚家族是TGF-β超家族的重要组成部分,BMPR1B、BMP15和GDF9是目前与绵羊繁殖性能相关性研究最为深入的基因。该文对BMP亚家族成员中提升绵羊排卵数及产羔数的基因的SNP位点进行归纳,总结了这些基因影响繁殖性能的SNP位点的发现,品种、定位、表型,以及对排卵数和产羔率的影响机制,旨在为绵羊多胎品种的选育和高效繁殖提供理论参考。 展开更多
关键词 突变位点 繁殖性状 bmpS 主效基因 绵羊
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黄河鲤肌间骨转录组分析及斑马鱼bmp1基因敲除模型构建
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作者 董传举 贾颖颖 +1 位作者 申亚伟 李学军 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第4期71-79,I0012,共10页
肌间骨(IBs)由肌膈间的肌腱骨化而来,仅存在于低等硬骨鱼类中,研究选取黄河鲤(Cyprinus carpio haematopterus)肌间骨发育前后两个关键阶段进行转录组测序,并对差异表达基因进行功能富集分析.结果表明:测序共获得高质量有效序列12035678... 肌间骨(IBs)由肌膈间的肌腱骨化而来,仅存在于低等硬骨鱼类中,研究选取黄河鲤(Cyprinus carpio haematopterus)肌间骨发育前后两个关键阶段进行转录组测序,并对差异表达基因进行功能富集分析.结果表明:测序共获得高质量有效序列120356780条,共筛选出差异表达基因3454个(上调1283个,下调2171个).GO和KEGG分析显示差异基因主要富集于胞外区域、跨膜运输、氧化还原过程、催化活性、蛋白结合等功能,参与次生代谢物的生物合成、PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路、糖酵解等.经qRT-PCR验证差异基因表达谱与RNA-seq结果基本一致后,为进一步了解其生物功能,选取两阶段中显著上调基因bmp 1,利用CRISPR/Cas9建立bmp 1突变的嵌合体斑马鱼(Danio rerio).测序验证bmp 1突变品系已成功构建,表型观察结果发现突变型明显发育迟缓且尾部出现脊椎畸形. 展开更多
关键词 肌间骨 黄河鲤 转录组 bmp 1 基因敲除
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新西兰白兔BMP 15基因的真核表达载体构建、表达模式及其在卵巢组织的表达
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作者 陈孟娟 刘雨晴 +4 位作者 王智通 温佳乐 许会芬 于光晴 李明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期562-575,共14页
旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化... 旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化的Pmcherry-N1和pCMV-Myc空载体,构建真核表达载体,利用生物信息学分析其编码蛋白的性质及结构。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术与Western blotting技术检测pCMV-Myc-BMP 15过表达情况。接下来,使用qRT-PCR检测BMP 15基因在不同组织中的表达水平。激光共聚焦方法检测BMP 15基因的亚细胞定位。利用免疫荧光技术检测内源BMP15在新西兰白兔卵巢组织定位情况。结果表明:克隆得到新西兰白兔BMP 15基因CDS区序列长1182 bp,PCR及测序结果表明pCMV-Myc-BMP 15和Pmcherry-N1-BMP 15真核表达载体构建成功。生物信息学分析显示,BMP 15基因编码393个氨基酸;BMP15蛋白不稳定系数为55.32,等电点大小为9.69,是一种稳定的碱性蛋白质。BMP15蛋白共有26个磷酸化位点,15个糖基化位点,存在信号肽,不存在跨膜结构域。系统进化树表明,新西兰白兔与猪亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。二级结构和三级结构分析结果表明,BMP15蛋白主要由α-螺旋(38.68%)、无规则卷曲(37.4%)、延伸链(15.52%)、β-转角(8.40%)组成,为混合型蛋白。蛋白互作关系预测发现,BMP15蛋白与FSHR、FIGLA、BMPR1B、AMHR2、NOBOX等卵巢生长发育的相关蛋白之间存在相互作用。不同组织表达分析显示,BMP 15基因在卵巢组织中特异性表达;激光共聚焦结果显示,BMP15主要存在于在细胞质中。将pCMV-Myc-BMP 15转染至HEK293T细胞内,BMP15的mRNA水平和蛋白水平均显著上调。卵巢组织免疫荧光检测结果显示,BMP15主要定位在卵巢颗粒细胞的细胞质中。本研究成功构建了BMP15的真核表达载体,对BMP 15基因及其编码的蛋白的理化性质和生物学特性进行了预测分析,在HEK293T细胞内成功过表达,并得到了该基因的亚细胞定位情况、组织表达情况及在卵巢组织的分布情况。为后续开展BMP 15基因在卵巢生长发育中的功能及机制研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 新西兰白兔 bmp 15基因 克隆 组织表达 细胞定位
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中国明对虾BMP-7基因的克隆及表达模式分析 被引量:2
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作者 高娜 卢霞 +8 位作者 闫允君 孔杰 孟宪红 李旭鹏 隋娟 陈宝龙 曹宝祥 高焕 栾生 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期347-356,共10页
为探明转化生长因子-β (TGF-β)超蛋白家族的成员之一骨形态发生蛋白7 (BMP-7)基因在中国明对虾肌肉发生和生长过程中的表达模式,通过cDNA末端快速扩增技术得到了中国明对虾BMP-7基因(FcBMP-7基因)2003 bp的全长cDNA,包含466 bp的5′... 为探明转化生长因子-β (TGF-β)超蛋白家族的成员之一骨形态发生蛋白7 (BMP-7)基因在中国明对虾肌肉发生和生长过程中的表达模式,通过cDNA末端快速扩增技术得到了中国明对虾BMP-7基因(FcBMP-7基因)2003 bp的全长cDNA,包含466 bp的5′非翻译区和295 bp的3′非翻译区,1242 bp的开放阅读框共编码413个氨基酸。利用实时荧光定量PCR技术分析FcBMP-7基因在中国明对虾幼体原肠期、无节幼体期、溞状幼体期、糠虾幼体期、仔虾期5个不同发育时期肌肉组织中的表达规律,结果显示,该基因在幼体发育的各时期均有表达,原肠期表达量最低,从无节幼体期开始表达量显著增加(P<0.05),糠虾期表达水平最高,表明FcBMP-7基因参与了幼体肌肉的发生过程。此外,进一步分析FcBMP-7基因在中国明对虾2种规格幼虾[(3.95±0.08) g和(1.55±0.12) g]的8种组织中的表达模式,结果显示,FcBMP-7基因具有组织表达广泛性,且两组间的大部分组织的表达量均存在显著差异(P<0.05)。试验结果表明,FcBMP-7基因可能作为调节因子参与了中国明对虾幼体肌肉发生和幼虾肌肉生长过程,研究结果可为进一步解析中国明对虾肌肉发生发育的分子机制提供重要的理论资料。 展开更多
关键词 中国明对虾 bmp-7基因 克隆 表达模式
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Detection of the FecX^R Mutation of BMP15 Gene in Sheep and Goats
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作者 DI Ran FENG Tao +2 位作者 CHU Ming-xing ZHANG Ying-jie FANG Li 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期17-20,共4页
PCR-SSCP was used to detect mutations of bone morphogenetic protein 15(BMP15) gene in both high prolificacy(Small Tail Han sheep,Hu sheep,Jining Grey goat and Boer goat) and low prolificacy breeds(Dorset sheep,Texel s... PCR-SSCP was used to detect mutations of bone morphogenetic protein 15(BMP15) gene in both high prolificacy(Small Tail Han sheep,Hu sheep,Jining Grey goat and Boer goat) and low prolificacy breeds(Dorset sheep,Texel sheep,Inner Mongolia Cashmere goat and Angora goat).Both the nucleotide sequences and the amino acid sequences were compared in amplification fragments of both Small Tail Han sheep and Jining Grey goat.The results indicated that none of the four sheep and the four goat breeds carried the same FecX<sup>R</sup> mutation of the BMP15 gene as do Rasa Aragonesa sheep.The nucleotide sequence of Small Tail Han sheep was completely identical with that of the sheep BMP15 sequence(GenBank AF236079,NM<sub>0</sub>01114767).Three base substitutions(T529G,C530G and T576C) and two amino acid changes(V155G and S171P) were found in Jining Grey goat compared with Small Tail Han sheep.The FecX<sup>R</sup> mutation of the BMP15 gene had no significant effect on high prolificacy of Small Tail Han sheep, Hu sheep,Jining Grey goat and Boer goat. 展开更多
关键词 SHEEP GOAT PROLIFICACY bmp15 gene FecX^R mutation PCR-SSCP
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多浪羊BMP7基因克隆、生物信息学分析及其在不同初情期阶段组织表达分析
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作者 王晨光 隋志远 +3 位作者 张永杰 张志帅 李孝君 邢凤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2629-2638,共10页
【目的】对多浪羊骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP7)基因序列进行克隆和生物信息学分析,并检测多浪羊在初情期3个阶段5个组织中的表达规律,为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的生物学功能提供参考。【方法】采用PCR... 【目的】对多浪羊骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP7)基因序列进行克隆和生物信息学分析,并检测多浪羊在初情期3个阶段5个组织中的表达规律,为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的生物学功能提供参考。【方法】采用PCR扩增多浪羊BMP 7基因序列并克隆测序,利用Mega 7.0软件构建系统发育树,利用生物信息学软件分析BMP7蛋白的理化性质和结构功能;采用实时荧光定量PCR检测BMP 7基因在初情期前、初情期、初情期后多浪羊下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫5个组织中的表达量。【结果】试验成功获得多浪羊BMP 7基因序列长1334 bp,其中编码区长1296 bp,编码431个氨基酸,与绵羊和牛的亲缘关系最近,其次是人、猴、马,与小鼠和犬的亲缘关系最远。生物信息学分析显示,BMP7蛋白分子式为C_(2200)H_(3374)N_(632)O_(628)S_(17),理论等电点(pI)为8.17,原子总数为6851个,不稳定指数为53.18,脂溶性系数76.96,总平均亲水性为―0.419,为不稳定亲水碱性蛋白;二级结构主要以α-螺旋及无规则卷曲为主,三级结构预测结果与二级结构一致。实时荧光定量PCR检测显示,BMP 7基因在多浪羊初情期前、初情期、初情期后均有表达,其中在下丘脑中表达量显著高于其他组织(P<0.05);在初情期前到初情期的下丘脑和子宫中BMP 7基因表达量显著上升(P<0.05),初情期到初情期后BMP 7基因表达量显著下降(P<0.05)。【结论】试验成功克隆了多浪羊BMP 7基因序列,该基因在多浪羊初情期前后3个不同阶段的5个组织中均有表达,结果为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的作用提供了参考。 展开更多
关键词 多浪羊 bmp 7基因 克隆 初情期
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抑制BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响
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作者 徐媛媛 郑海英 +8 位作者 杨春艳 邓廷贤 黄晨茜 冯超 陆杏蓉 段安琴 莫霞 马小娅 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2354-2362,共9页
【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过... 【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测Smad 4基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选的干扰效率最高的siRNA,转染水牛卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测对照组和干扰组细胞的增殖情况,实时荧光定量PCR检测上述两组细胞凋亡相关基因Bax和Bcl2,细胞周期相关调控基因CyclinD2和CDK4,以及类固醇激素合成相关基因Cyp19A1和Cyp11A1的表达水平,并通过ELISA检测雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)的含量。【结果】基因干扰试验结果表明,3对siRNAs对Smad4基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中Smad4-siRNA1的干扰效率最高,达到了64%。CCK-8检测结果显示,与对照组相比,干扰组细胞的增殖效率显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,干扰组Bcl2、CyclinD2、CDK4和Cyp19A1基因的表达量均显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01),而Cyp11A1基因的表达极显著上调(P<0.01),Bax基因的表达未受影响。ELISA检测结果表明,与对照组相比,干扰组雌二醇分泌量减少10.2%,孕酮的分泌量增加24.7%,差异均显著(P<0.05)。【结论】通过RNAi介导的Smad 4基因沉默对内源性BMP/Smad信号通路的中断不仅能够显著抑制水牛颗粒细胞的生长,而且能够诱导水牛颗粒细胞的凋亡,还会改变类固醇激素生成。BMP/Smad信号通路在调控水牛颗粒细胞生长和类固醇生成过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 水牛 bmp/Smad信号通路 Smad 4基因 颗粒细胞 RNA干扰 类固醇生成
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The toxic effects of Tris-(2,3-dibromopropyl)isocyanurate(TBC)on genes expression of bmp2b and bmp4 of zebrafish embryos
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作者 JIA Wan-jun 《科技视界》 2016年第9期241-241,279,共2页
We exposed zebrafish embryos to Tris-(2,3-dibromopropyl)isocyanurate(TBC) at the concentration of 20 ppb, 100 ppb, 400 ppb,1000ppb for 120 h and 0.1%DMSO was set as the control group. Bmp2 b and bmp4 were chosen perfo... We exposed zebrafish embryos to Tris-(2,3-dibromopropyl)isocyanurate(TBC) at the concentration of 20 ppb, 100 ppb, 400 ppb,1000ppb for 120 h and 0.1%DMSO was set as the control group. Bmp2 b and bmp4 were chosen perform RT-PCR to determine their genes expression level. The results showed that, TBC influenced their genes expression level in some extent and it significantly raised the genes expression level at the concentration of 20 ppb. 展开更多
关键词 bmp gene EXPRESSION RT-PCR Zebrafish
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杜寒绵羊多胎性能候选基因BMPR-1B和BMP15的研究 被引量:12
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作者 郭慧慧 李俊 +1 位作者 罗惠娣 牛晋国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第5期1312-1318,共7页
为了从分子水平探讨杜寒绵羊的多胎机制,本试验在山西省某养殖场采集了87只经产杜寒母绵羊的耳组织,选取骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)和骨形态发生蛋白受体1B(bone morphogenetic protein receptor 1B,BMPR-... 为了从分子水平探讨杜寒绵羊的多胎机制,本试验在山西省某养殖场采集了87只经产杜寒母绵羊的耳组织,选取骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)和骨形态发生蛋白受体1B(bone morphogenetic protein receptor 1B,BMPR-1B)为候选基因,采用PCR-SSCP、PCR-RFLP法,结合母羊产羔数与所产羊羔初生重,分析其与杜寒绵羊多胎性能的相关性。结果显示,杜寒绵羊的BMPR-1B基因在第746位碱基处发生了A→G突变,检测到3种基因型:AA、AG和GG,A等位基因频率(0.5230)略高于G等位基因(0.4770),A为优势等位基因;AG基因型频率(0.5172)高于GG(0.2184)和AA(0.2644)基因型,AG为优势基因型。χ2适合性检验显示该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态;BMPR-1B基因第864位碱基未发生突变。杜寒绵羊的BMP15基因不存在V31D和S300G位点突变。在该群体中,BMPR-1B基因A746G位点GG、AG基因型个体的产羔数极显著高于AA基因型个体(P<0.01),羔羊初生重在3种基因型间差异不显著(P>0.05)。综上所述,BMPR-1B基因是影响杜寒绵羊繁殖性能的一个主效基因,可以作为分子标记对杜寒绵羊进行辅助育种,初步排除BMP15基因突变对杜寒绵羊多胎性能影响的可能性。 展开更多
关键词 杜寒绵羊 多胎性能 bmpR-1B基因 bmp15基因
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人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量:7
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作者 方针强 叶钢 +3 位作者 欧阳一辛 刘永亮 贾维胜 冯嘉瑜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期153-156,共4页
目的构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,... 目的构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7,并在其中包装扩增病毒。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测。结果酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达1.25×1010PFU/ml,对HKC有较强感染能力。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形成蛋白-7 同源重组
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BMP-2基因转染兔骨骼肌干细胞修复骨缺损实验研究 被引量:6
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作者 尚咏 卢世璧 +2 位作者 王继芳 袁玫 王爱媛 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第4期241-244,共4页
目的探讨AdrhBMP 2修饰的兔骨骼肌干细胞(RRSMSCs)为种子细胞、脱钙骨基质(DBM)为支架材料构建组织工程化人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的可行性。方法建立兔桡骨干骨缺损(20 mm)模型,50 只新西兰兔分为5 组:AdrhBMP- 2 转染RSMSCs/DBM组(... 目的探讨AdrhBMP 2修饰的兔骨骼肌干细胞(RRSMSCs)为种子细胞、脱钙骨基质(DBM)为支架材料构建组织工程化人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的可行性。方法建立兔桡骨干骨缺损(20 mm)模型,50 只新西兰兔分为5 组:AdrhBMP- 2 转染RSMSCs/DBM组(A组)、AdGFP转染RSMSCs/DBM组(B组)、未转染RSMSCs/DBM组(C组)、单纯DBM组(D组)和对照组(E组)。术后4周和6周分别行骨密度、X线、生物力学及组织学检查。结果术后4周,A组骨修复达到X线愈合标准,但髓腔不通;术后6周,各组的愈合率分别为A组100%、B组50%、C组33%,D组和E组为0。结论AdrhBMP -2 修饰的RSMSCs为种子细胞、DBM为支架材料构建的基因强化组织工程骨能修复兔桡骨长20 mm的大段骨缺损,为临床上大范围骨缺损的修复提供了一种更为有效的方法和材料。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白 基因治疗 骨骼肌干细胞 骨缺损
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BMPMP3、BMPBMP10、BMPBMP15基因在雏鸡和成年鸡主要器官中的表达特性研究 被引量:4
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作者 王赛赛 王亚丽 +7 位作者 沈丹 薛松磊 钱跃 史云强 陈才 钟继汉 刘帅军 高波 《中国家禽》 北大核心 2016年第4期5-9,共5页
骨形态发生蛋白(BMP)是转化生长因子超家族中的重要成员,其信号通路控制着诸如中胚层形成、神经系统分化、牙齿和骨骼发育以及癌症发生等许多重要的生物学过程。研究旨在分析BMP家族中的BMP3、BMP10、BMP15在雏鸡和成年鸡主要器官中表... 骨形态发生蛋白(BMP)是转化生长因子超家族中的重要成员,其信号通路控制着诸如中胚层形成、神经系统分化、牙齿和骨骼发育以及癌症发生等许多重要的生物学过程。研究旨在分析BMP家族中的BMP3、BMP10、BMP15在雏鸡和成年鸡主要器官中表达水平。采用RT-PCR方法分析BMP3、BMP10、BMP15在雏鸡、成年鸡主要器官中的表达情况,并分析这3个基因在雏鸡和成年鸡心脏中的表达差异性。结果表明:BMP3、BMP10在雏鸡和成年鸡两阶段主要器官中均可表达,BMP15在成年鸡母鸡各器官均有表达,公鸡仅肝中有表达;BMP3在雏鸡心脏中表达水平显著高于成年鸡(P<0.05),BMP10表达水平两者差异不显著(P>0.05),BMP15在成年鸡表达水平显著高于雏鸡(P<0.05)。研究结果为BMP信号通路研究提供参考。 展开更多
关键词 bmp基因 表达特性
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hBMP2和hVEGF165双基因修饰组织工程骨的构建及检测 被引量:2
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作者 范伟 张弓 +2 位作者 安洪 蒋电明 倪卫东 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期3317-3319,F0002,F0003,共5页
目的构建hBMP2和hVEGF165双基因修饰的组织工程骨并检测其表达情况。方法构建hVEGF165和hBMP2真核表达质粒,并转染至兔成骨细胞,以DPB为支架,构建双基因修饰的组织工程骨,同时采用RT-PCR和Western blot对两种基因表达情况进行检测。结... 目的构建hBMP2和hVEGF165双基因修饰的组织工程骨并检测其表达情况。方法构建hVEGF165和hBMP2真核表达质粒,并转染至兔成骨细胞,以DPB为支架,构建双基因修饰的组织工程骨,同时采用RT-PCR和Western blot对两种基因表达情况进行检测。结果转染hBMP2和hVEGF165的成骨细胞可以在DPB上贴附生长,并且体外表达时间可持续7 d。结论成功构建双基因修饰组织工程骨,且能有效表达,为其用于大段骨缺损修复奠定了实验基础。 展开更多
关键词 组织工程骨 血管内皮细胞生长因子 骨形态发生蛋白 基因表达
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BMP-2转染BMSCs修复兔股骨头坏死模型的实验研究 被引量:8
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作者 张雁儒 马辉 +1 位作者 张辉 王义生 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第4期447-452,共6页
目的探索骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)联合骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)基因转染在治疗兔早期激素性ANFH中的作用,以期为临床上ANFH的基因治疗的应用提供理论依据。方法把36只... 目的探索骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)联合骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)基因转染在治疗兔早期激素性ANFH中的作用,以期为临床上ANFH的基因治疗的应用提供理论依据。方法把36只新西兰大白兔ANFH模型被随机分为3组,每组12只。A组为模型对照组,B组为模型对照组处理的基础上减压后植入空质粒BMSCs;C组为模型对照组处理的基础上减压后植入重组BMP-2真核表达载体转染的BMSCs。所有动物均将单侧股骨头制作ANFH模型,观察股骨头坏死(Avascular necrosis of the femoral head,ANFH)模型兔的一般情况,并分别于术后4、8周每组处死6只,收集到的模型股骨头标本分别做X线检查、HE染色。通过X线检查、组织学检查的方法检测ANFH修复重建的效果。结果 ANFH模型股骨头X线检查结果和股骨头组织切片观察,A、B、C三组的效果依次提高,C>B>A。结论 BMP-2与BMSCs在新骨生成过程中具有协同作用。 展开更多
关键词 股骨头坏死 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白 基因治疗
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BMP-2基因转染对人成纤维细胞生长和增殖的影响 被引量:3
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作者 石健 林月秋 +2 位作者 王力 徐永清 汤逊 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第13期904-906,共3页
目的 :研究人骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因转染对人成纤维细胞株KMB 17生长及增殖的影响。方法 :将hBMP 2基因导入KMB 17细胞 ,检测其表达情况及对KMB 17细胞生长和增殖的影响。结果 :KMB 17细胞至少可以表达BMP 2基因 3周左右 ;并... 目的 :研究人骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因转染对人成纤维细胞株KMB 17生长及增殖的影响。方法 :将hBMP 2基因导入KMB 17细胞 ,检测其表达情况及对KMB 17细胞生长和增殖的影响。结果 :KMB 17细胞至少可以表达BMP 2基因 3周左右 ;并且增殖指数上升 ,细胞增殖加剧。结论 :人成纤维细胞株KMB 17可以作为靶细胞用于BMP 2基因疗法研究。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白 成纤维细胞 基因表达 增殖
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BMP_2-EGFP融合蛋白的构建及其生物活性 被引量:3
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作者 张银刚 郭雄 +2 位作者 师常宏 邹爱民 许鹏 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期16-20,共5页
目的:构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并检测其表达的融合蛋白的生物活性。方法: 用基因重组技术构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并通过酶切和PCR鉴定。脂质体法转染COS 7细 胞,用荧光显微镜检测和Westernblotting... 目的:构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并检测其表达的融合蛋白的生物活性。方法: 用基因重组技术构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并通过酶切和PCR鉴定。脂质体法转染COS 7细 胞,用荧光显微镜检测和Westernblotting分析其在COS 7细胞表达,细胞活性实验和动物体内异位成骨实验进一 步检测融合蛋白的生物活性。结果:经酶切和PCR鉴定重组质粒BMP2/pLEGFP构建成功。转染COS 7细胞后, 荧光显微镜和Westernblotting检测均显示融合蛋白在细胞中表达;分泌的产物经细胞活性实验和动物体内异位成 骨实验证实具有BMP2和EGFP的双重蛋白活性。结论:基因重组技术成功构建BMP2/pLEGFP重组体,重组体表 达的融合蛋白具有GFP和BMP2的双重活性。 展开更多
关键词 bmp2 基因转染 真核表达 生物活性
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人BMP-7及VEGF基因共表达腺病毒的构建及在兔骨髓基质干细胞中的共表达 被引量:4
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作者 鱼兵 闫露 +2 位作者 范清宇 龙华 文艳华 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第21期1704-1707,共4页
目的构建人BMP7及VEGF165基因共表达腺病毒并观察其在兔骨髓基质干细胞(rBMSC)中的表达。方法利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP7及VEGF165基因共表达腺病毒AdB7V,体外感染rBMSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RTPCR、免疫组化方法鉴定... 目的构建人BMP7及VEGF165基因共表达腺病毒并观察其在兔骨髓基质干细胞(rBMSC)中的表达。方法利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP7及VEGF165基因共表达腺病毒AdB7V,体外感染rBMSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RTPCR、免疫组化方法鉴定外源基因的表达。结果rBMSC经AdB7V感染后72h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RTPCR、免疫细胞化学方法证实外源性BMP7及VEGF165基因均可在rBMSC中表达。结论成功构建人BMP7及VEGF165基因共表达重组腺病毒,证实了其在rBMSC的表达,为骨再生的局部联合基因治疗打下基础。 展开更多
关键词 bmp-7基因 VEGF基因 骨髓基质干细胞 腺病毒
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骨髓基质干细胞BMP-2和bFGF基因的联合修饰 被引量:7
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作者 李毅 陈槐卿 +1 位作者 成敏 唐艳娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期133-136,共4页
目的:建立能够稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞,优化骨组织工程种子细胞。方法:通过RT-PCR方法获取全长BMP-2及bFGF基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.0,鉴定正确后,经脂质体介导导入分离培养的大鼠骨髓基质干细胞,G418筛选稳定表达... 目的:建立能够稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞,优化骨组织工程种子细胞。方法:通过RT-PCR方法获取全长BMP-2及bFGF基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.0,鉴定正确后,经脂质体介导导入分离培养的大鼠骨髓基质干细胞,G418筛选稳定表达株。利用RT-PCR、Westernblot、ELISA、免疫组织化学染色方法分析转染细胞外源基因表达情况。结果:成功构建了全长BMP-2及bFGF的真核表达载体,转染大鼠骨髓基质干细胞后经G418筛选获得稳定表达株。RT-PCR结果显示稳定转染细胞中具有大量目的基因mRNA转录,ELISA检测培养上清中目的蛋白表达阳性,Westernblot、免疫组化结果显示胞质中有目的蛋白的表达。结论:获得了可以稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞,有利于组织工程骨缺损修复中的应用。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 bmp-2 BFGF 基因转染
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骨形成蛋白7(BMP7)基因的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 孙大铭 侯树勋 +2 位作者 童贻刚 杜桂鑫 付小兵 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第21期1487-1489,共3页
目的 :克隆BMP7全长cDNA ,构建BMP7克隆质粒。方法 :通过反转录PCR技术和巢式PCR技术从人类胚胎肾 2 93细胞中克隆BMP7基因 ,应用互补拼接的方法对其进行修复获得全长cDNA ,将其与T载体进行连接得到BMP7克隆质粒。结果 :琼脂糖电泳及测... 目的 :克隆BMP7全长cDNA ,构建BMP7克隆质粒。方法 :通过反转录PCR技术和巢式PCR技术从人类胚胎肾 2 93细胞中克隆BMP7基因 ,应用互补拼接的方法对其进行修复获得全长cDNA ,将其与T载体进行连接得到BMP7克隆质粒。结果 :琼脂糖电泳及测序结果显示经过修复后的BMP7基因与预期结果相一致 ,酶切鉴定及测序结果证明pT BMP7克隆质粒结构正确。结论 :BMP7基因的克隆为进一步研究BMP7基因和蛋白的成骨功能奠定了基础。 展开更多
关键词 骨形成蛋白 基因克隆 反转录PCR 基因序列分析 bmp7基因
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