期刊文献+
共找到40篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
Immunogenicity and protective efficacy of recombinant M2e.Hsp70c(Hsp70_(359–610)) fusion protein against influenza virus infection in mice 被引量:2
1
作者 Hamidreza Attaran Hassan Nili Majid Tebianian 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期218-227,共10页
New strategies in vaccine development are urgently needed to combat emerging influenza viruses and to reduce the risk of pandemic disease surfacing. Being conserved, the M2 e protein, is a potential candidate for univ... New strategies in vaccine development are urgently needed to combat emerging influenza viruses and to reduce the risk of pandemic disease surfacing. Being conserved, the M2 e protein, is a potential candidate for universal vaccine development against influenza A viruses. Mycobacterium tuberculosis Hsp70(mHsp70) is known to cultivate the function of immunogenic antigen-presenting cells, stimulate a strong cytotoxic T lymphocyte(CTL) response, and stop the induction of tolerance. Thus, in this study, a recombinant protein from the extracellular domain of influenza A virus matrix protein 2(M2e), was fused to the C-terminus of Mycobacterium tuberculosis Hsp70(Hsp70c), to generate a vaccine candidate. Humoral immune responses, IFN-γ-producing lymphocyte, and strong CTL activity were all induced to confirm the immunogenicity of M2 e.Hsp70c(Hsp70359–610). And challenge tests showed protection against H1N1 and H9N2 strains in vaccinated groups. Finally these results demonstrates M2 e.Hsp70c fusion protein can be a candidate for a universal influenza A vaccine. 展开更多
关键词 influenza A virus M2e.Hsp70 recombinant fusion protein universal influenza vaccine
下载PDF
Use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 in spine surgery 被引量:5
2
作者 Marios Lykissas Ioannis Gkiatas 《World Journal of Orthopedics》 2017年第7期531-535,共5页
Bone morphogenetic proteins are osteoinductive factors which have gained popularity in orthopaedicsurgery and especially in spine surgery. The use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 has been officially ... Bone morphogenetic proteins are osteoinductive factors which have gained popularity in orthopaedicsurgery and especially in spine surgery. The use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 has been officially approved by the United States Food and Drug Administration only for single level anterior lumbar interbody fusion, nevertheless it is widely used by many surgeons with off-label indications. Despite advantages in bone formation, its use still remains a controversial issue and several complications have been described by authors who oppose their wide use. 展开更多
关键词 recombinant human BONE morphogenetic protein-2 SPINE fusion BONE GRAFT Yale UNIVERSITY Open Data project
下载PDF
抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2融合蛋白的构建与序列测定 被引量:3
3
作者 陈文吟 粟宽源 +3 位作者 任向荣 唐永红 郑业华 余宙耀 《天津医药》 CAS 北大核心 2002年第8期475-477,F003,共4页
目的:构建以人抗乙肝表面抗原(HBsAg)单链抗体(ScFv)为导向作用,白细胞介素-2(IL-2)为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv-IL-2。方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体... 目的:构建以人抗乙肝表面抗原(HBsAg)单链抗体(ScFv)为导向作用,白细胞介素-2(IL-2)为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv-IL-2。方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体pGEM7Zf(+)/ScFv-IL-2,经酶切鉴定及序列测定正确后,将目的基因片段克隆到pQE 40表达载体中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量约4.3×104Da处,可见蛋白表达带。以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验证,该表达蛋白为所设计的融合蛋白。结论:融合蛋白ScFv-IL-2的成功构建及表达,为融合蛋白的纯化和研究开发新型的乙肝导向治疗的基因工程药物打下良好的基础。 展开更多
关键词 抗HBsAg单链抗体 白细胞介素-2 序列测定 基因重组 融合蛋白 免疫印迹法
下载PDF
同时表达麻疹病毒L4株HA和F蛋白及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株的构建 被引量:7
4
作者 杨克俭 阮力 +4 位作者 朱诚 孙朝辉 陆柔剑 徐水婵 朱既明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期299-306,共8页
构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。H... 构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。HA分子有糖化的79kD和非糖化的田kD两种形式;F分子以60kD的前体F0、43kD的F1和18kD的F2三种形式存在。表达产物的血凝效价为1:8,血溶活性OD540的测定结果是O37。该重组病毒免疫新西兰白兔及C57小鼠,可以产生抗麻诊病毒HA和F蛋白的特异性ELISA(1:644~1600)、血凝抑制(1:256~512)、血溶抑制(1:80~160)和NT(1:640)抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应,明显低于只表达IL2的重组痘苗病毒疫苗株RVJ123,表现为兔皮肤红肿范围小,持续时间短,皮肤无坏死;裸鼠毒力的结果,表现出RVJMLHAFKIL2病毒只存留于接种局部,而且滴度大大降低,未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。 展开更多
关键词 麻疹病毒 融合蛋白 白细胞介素 重组痘苗病毒
下载PDF
重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究 被引量:4
5
作者 杨晓璐 闫若潜 +4 位作者 李勤楠 赵雪丽 谢彩华 刘梅芬 张书阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3153-3159,共7页
为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应... 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。 展开更多
关键词 鸡α干扰素 鸡白细胞介素-2 重组融合蛋白 体外活性
下载PDF
人MD-2/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达 被引量:3
6
作者 徐发良 顾长国 +1 位作者 胡承香 李磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期206-208,共3页
构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF B... 构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF BOS/hMD 2为模板 ,用PCR法在MD 2编码序列上下游引入酶切位点和终止密码子 ;将hMD 2编码序列克隆入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ;用PCR和酶切筛选、鉴定重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2 ,并对插入基因片断测序 ;重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2转化大肠杆菌 ,经IPTG诱导后用SDS PAGE分析表达产物。结果PCR、酶切鉴定和序列测定证实MD 2编码序列正向插入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ,片断与PCR扩增产物大小相同、序列无误、阅读框架正确 ;SDS PAGE证实hMD 2 /GST在大肠杆菌中表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 3 0 %。说明成功构建了PGEX 4T 1/hMD 2载体 ,hMD 2 /GST融合蛋白在大肠杆菌中得到初步表达 ,为MD 展开更多
关键词 重组融合蛋白类 谷胱甘肽巯基转移酶 人髓样分化蛋白-2 遗传载体
下载PDF
重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究 被引量:4
7
作者 杨晓璐 闫若潜 +6 位作者 吴志明 刘梅芬 张代宝 张书阳 王淑娟 赵雪丽 刘毅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期175-178,共4页
为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试... 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分含量以及CD4^+/CD8^+比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3~14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^+CD4^+细胞百分含量,降低CD3^+CD8^+细胞的百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值;接种后3~7d期间,第2组鸡的CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞含量及CD4^+/CD8^+比值与PBS对照组(第1组)相比差异均极显著(P〈0.01),第3组与第1组相比差异均显著(P〈0.05)。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^+/CD8^+比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。 展开更多
关键词 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白 重组鸡α干扰素蛋白 T淋巴细胞亚群 CD4^+/CD8^+比值 免疫功能
下载PDF
人抗菌肽HBD-2的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
8
作者 王国兴 冯云 +4 位作者 吴琦 阎蓉华 李洵 王伯瑶 黄宁 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期575-579,共5页
制备人β-防御素2(HBD-2)多克隆抗体,以用于HBD-2蛋白水平表达的检测。提取人肠腺上皮细胞株Caco-2总RNA,设计引物,应用RT-PCR从其总RNA中扩增HBD-2成熟肽cDNA片段,以pGEX-1λT为载体,构建原核表达质粒pGEX-1λT-HBD-2。大肠杆菌裂解物... 制备人β-防御素2(HBD-2)多克隆抗体,以用于HBD-2蛋白水平表达的检测。提取人肠腺上皮细胞株Caco-2总RNA,设计引物,应用RT-PCR从其总RNA中扩增HBD-2成熟肽cDNA片段,以pGEX-1λT为载体,构建原核表达质粒pGEX-1λT-HBD-2。大肠杆菌裂解物经亲合层析纯化后获得分子量约30kDa的融合蛋白,将此融合蛋白免疫新西兰兔,并用正辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清,ELISA法显示抗血清对HBD-2的效价为1∶12800,Western印迹显示抗血清可识别HBD-2。本实验结果证明应用重组融合小肽代替白蛋白或甲状腺-肽偶联免疫可获得其高效价的识别HBD-2的多克隆抗体,为今后从蛋白质水平研究HBD-2基因的诱导表达,包括组织分布和基因表达调控等研究打下了基础。 展开更多
关键词 人抗菌肽 HBD-2 原核表达 多克隆抗体 制备工艺 Β-防御素2 天然免疫
下载PDF
基因重组人骨形态发生蛋白-2联合自体骨椎间打压植骨在腰椎融合术中的应用研究 被引量:6
9
作者 唐勇 叶记超 +1 位作者 胡旭民 沈慧勇 《中华骨与关节外科杂志》 2018年第9期664-667,共4页
背景:使用基因重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2)联合自体骨植入治疗骨缺损有较好疗效和安全性,而椎间植骨中rhBMP-2使用量与临床效果间的关系尚不明确。目的目的:评价rhBMP-2联合自体... 背景:使用基因重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2)联合自体骨植入治疗骨缺损有较好疗效和安全性,而椎间植骨中rhBMP-2使用量与临床效果间的关系尚不明确。目的目的:评价rhBMP-2联合自体骨椎间打压植骨在腰椎融合术中的安全性和有效性。方法方法:2015年1月至2015年9月,因腰腿痛接受腰椎融合术的60例≤65岁患者,随机分为3组:单纯自体骨组、rhBMP-2(1 mg/椎间)联合自体骨组、rhBMP-2(2 mg/椎间)联合自体骨组;常规行椎板切除、神经根管扩大、后路椎间自体颗粒骨打压植骨加椎弓根钉内固定术,融合节段为1~2个椎间隙;其中单纯自体骨组共26个椎间隙;rhBMP-2(1 mg/椎间)联合自体骨组共27个椎间隙;rhBMP-2(2mg/椎间)联合自体骨组共26个椎间隙。临床疗效评价包含VAS评分、Oswestry功能障碍指数;影像学评价腰椎正侧位和动力位片;CT矢状位重建,观察上下终板间连续性骨小梁,横断面观察有无椎管游离骨粒、异位骨化。术后随访2年。结果结果:60例患者均完成随访,3组疾病组成、融合节段、年龄分布差异无统计学意义,手术时间、手术失血量、术后总引流量、平均住院时间等方面差异亦无统计学意义;未出现深部感染;2例出现伤口浅表感染(单纯自体骨组和2 mgrh BMP-2联合自体骨组各1例)。无内固定失败。未见椎管内游离骨粒脱出及异位骨化。术后VAS评分和Oswestry功能障碍指数均无统计学差异。3组末次随访融合率比较,仅2 mg rhBMP-2组与单纯自体骨组及1 mg rhBMP-2组之间差异有统计学意义,其余组间无统计学差异。结论结论:椎间融合使用自体骨联合2 mg rhBMP-2,可获得良好的融合效果,但远期效果仍需进一步研究。 展开更多
关键词 基因重组人骨形态发生蛋白一2 腰椎融合术 椎弓根钉内固定
下载PDF
新型重组免疫抑制融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL的分离纯化 被引量:1
10
作者 关海容 孙玉英 +6 位作者 袁志宏 张惠丽 梁飞 刘楠 郭斯启 习彩霞 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期123-127,共5页
为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结... 为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结果表明,在反相层析分离中疏水相分别采用了常规的甲醇和乙腈,结果为所分离的该重组融合蛋白均发生了变性,从色谱柱中分离出来就生成了絮状沉淀。在蓝染料亲和层析一步分离中,由于全菌体蛋白中与亲和树脂发生非特异结合的成分较多,极难区分目的蛋白和杂蛋白。但是,PRSETA-B7-2-PE40KDEL表达载体上带有翻译增强序列T7-g10,可在表达目的蛋白N端融合6个组氨酸,这十分有利于通过Ni-NTA金属鏊和层析法快速高纯度地纯化表达产物。根据这一特性,经反复筛选实验设计最终确定了金属螯合层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步法的纯化路线,用于纯化分离B7-2-PE40KDEL融合蛋白。所得的目的蛋白的纯度可达95%以上,总回收率为8%。Western-blot实验显示,所得蛋白可与B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT生物活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28受体的人T细胞系Jurkat产生特异性杀伤作用,而对不表达CD28的淋巴细胞系Raji无任何杀伤作用。结论:建立了高效快速纯化大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的技术路线,所纯化的重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白能特异性靶向杀伤表达CD28受体的人T细胞。 展开更多
关键词 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 蛋白纯化 靶向杀伤 生物活性
下载PDF
人类髓样分化蛋白-2的原核表达 被引量:1
11
作者 徐发良 顾长国 +1 位作者 胡承香 李磊 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第14期1256-1259,共4页
目的 :在大肠杆菌DH 5α中表达人类髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 (glutathione s transferase ,GST)的融合蛋白 (GST/hMD 2 ) ,并对融合蛋白进行免疫学鉴定及初步的变性复性处理 ... 目的 :在大肠杆菌DH 5α中表达人类髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 (glutathione s transferase ,GST)的融合蛋白 (GST/hMD 2 ) ,并对融合蛋白进行免疫学鉴定及初步的变性复性处理 .方法 :建立GST/hMD 2表达菌 ,在不同温度下以不同浓度IPTG诱导不同时间后采样 ,用SDS PAGE分析各种组合条件下融合蛋白的表达量和溶解性 ;用Western Blot鉴定融合蛋白免疫性 ;用尿素变性和透析法对融合蛋白进行初步纯化 .结果 :在 37℃经 0 .4mmol/LIPTG诱导 4h后 ,GST/hMD 2可获最高表达量 (约占菌体总蛋白的 2 0 % ) ,未见可溶性表达 ;Western Blot证实GST/hMD 2能与抗MD 2单克隆抗体特异性结合 ;GST/hMD 2溶于 8mol/L尿素 ,梯度透析后纯度提高至4 0 % .结论 :hMD 2可在大肠杆菌DH 展开更多
关键词 髓样分化蛋白-2 基因表达 重组融合蛋白质类 谷胱甘肽转移酶
下载PDF
人重组骨形态发生蛋白-2在脊柱融合中的作用 被引量:5
12
作者 王健 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2016年第5期62-66,共5页
脊柱融合是治疗脊柱结核、感染、畸形、椎间盘退行性病变脊柱疾患的有效手段,促进脊柱融合成骨率的方法之一就是使用自体骨移植,但其存在来源有限、取骨处疼痛等弊端,目前人重组骨形态发生蛋白-2(The role of recombinant human bone mo... 脊柱融合是治疗脊柱结核、感染、畸形、椎间盘退行性病变脊柱疾患的有效手段,促进脊柱融合成骨率的方法之一就是使用自体骨移植,但其存在来源有限、取骨处疼痛等弊端,目前人重组骨形态发生蛋白-2(The role of recombinant human bone morphogenetic 2,rh BMP-2)负载于载体是一种理想的自体骨移植材料的替代物,广泛应用于脊柱融合术中,但近来发现了与其相关的一些副反应。本文就其在脊柱融合中的应用的安全性、有效性及相关的副反应进行综述。 展开更多
关键词 人重组骨形态发生蛋白-2 脊柱融合 副作用
下载PDF
新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定
13
作者 关海容 孙玉英 +6 位作者 袁志宏 张惠丽 梁飞 刘楠 郭斯启 习彩霞 奚永志 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,166,共5页
目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀... 目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果:B7-2-PE40KDEL经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为72628,与理论预测值69561相比误差在5%之内;全波长扫描分析显示该目的蛋白分别在225nm和276nm处各有一吸收峰;MALTI-TOF-MS质谱测定共获得15个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为60000~80000的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与我们预测的目的蛋白相符;Westernblot实验显示B7-2-PE40KDEL能与人B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT杀伤活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28+的人T淋巴瘤细胞系Jurkat产生特异性杀伤,而对不表达的CD28-淋巴细胞系Raji无任何杀伤。结论:重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白为一全新的具有靶向B7:CD28细胞杀伤活性的蛋白质。 展开更多
关键词 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 肽谱 抗原特异性 生物学活性
下载PDF
自身抗原OGDC-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定
14
作者 周晔 姚定康 +6 位作者 陈燕 蒋天舒 蒋延旺 吴传勇 钱 邓安梅 仲人前 《中国实验诊断学》 2006年第7期722-724,共3页
目的基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)融合蛋白。方法用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。结果获得OGDC-E2融合蛋... 目的基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)融合蛋白。方法用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。结果获得OGDC-E2融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的免疫原性。结论基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验诊断。 展开更多
关键词 PBC 自身抗原 OCDC-E2 重组融合蛋白
下载PDF
重组人类骨形成蛋白-2在腰椎椎间融合中应用的临床研究
15
作者 张宗余 周志竞 +3 位作者 张鹏 姜为民 汪恒 李雪峰 《当代医学》 2021年第24期95-98,共4页
目的探究重组人类骨形成蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)在腰椎椎间融合中应用的临床疗效。方法选取本院2018年1月至2019年6月收治的60例行腰椎退变性疾病后路减压融合术患者,按照治疗方法的不同分为A... 目的探究重组人类骨形成蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)在腰椎椎间融合中应用的临床疗效。方法选取本院2018年1月至2019年6月收治的60例行腰椎退变性疾病后路减压融合术患者,按照治疗方法的不同分为A组和B组,每组30例。A组采用rhBMP-2和自体骨复合植骨治疗,B组采用传统自体骨植骨与椎间融合器治疗,比较两组不同时间点椎间隙高度、腰腿部疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、植骨融合及并发症发生率。结果术后,两组各时间点VAS、ODI评分均低于术前,椎间隙高度均高于术前(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义;术后3个月,A组植骨融合率高于B组(P<0.05),术后6、12个月,两组植骨融合率比较差异无统计学意义。两组无一例术后出现相关并发症。结论rhBMP-2应用于退变性腰椎疾病椎间融合中可提高近期随访融合率,减少手术融合失败率,远期疗效与自体骨相当,应用rhBMP-2骨诱导效果好、融合快、成功率高,且可避免有创取材,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 重组人类骨形成蛋白-2 腰椎椎间融合术 腰椎退行性病变
下载PDF
重组人骨形态发生蛋白2联合自体骨行椎间植骨融合治疗胸腰椎结核 被引量:8
16
作者 翁汭 叶林强 +5 位作者 黄学成 姚珍松 梁德 江晓兵 唐晶晶 蔡卓延 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第23期3609-3614,共6页
背景:重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)联合自体骨行椎间植骨融合术治疗腰椎滑脱、椎管狭窄、椎间盘突出等脊柱退行性变疾病的疗效和安全性已经得到认可,但对于治疗脊柱结核等脊柱感染... 背景:重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)联合自体骨行椎间植骨融合术治疗腰椎滑脱、椎管狭窄、椎间盘突出等脊柱退行性变疾病的疗效和安全性已经得到认可,但对于治疗脊柱结核等脊柱感染性疾病的疗效和安全性少有临床研究。目的:评价rhBMP-2联合自体骨行椎间植骨融合术对脊柱结核的临床疗效及其安全性。方法:回顾性分析2010年11月至2018年5月广州中医药大学第一附属医院收治的胸腰椎结核患者的临床资料,所有患者均采用后路经椎弓根螺钉内固定+植骨融合术,根据植骨时是否使用rhBMP-2将其分为2组,试验组33例采用1 mg rhBMP-2联合自体骨植入大小适宜的支撑体中,对照组35例单纯用自体骨植入支撑体。术后随访1年以上,并对术前、术后疼痛目测类比评分、脊髓损伤ASIA分级、围术期并发症以及融合率进行统计学分析。研究通过广州中医药大学第一附属医院伦理委员会的批准,患者对治疗方案均知情同意。结果与结论:①所有患者均完成1年以上的随访,随访中未发现内固定断裂移动和椎体的明显塌陷;②两组手术时间、术中出血量、住院时间、围术期并发症比例差异无显著性意义(P>0.05);③两组术后1周和术后1年的目测类比评分、ASIA分级与术前相比,有显著改善(P<0.05),但两组之间对比差异无显著性意义(P>0.05);④在融合率方面,试验组术后6个月的融合率明显高于对照组(P<0.05),然而,两组术后1年的融合率比较却无统计学差异(P>0.05)。提示:rhBMP-2联合自体骨行植骨融合术治疗胸腰椎结核能在短期内加快骨性融合,具有良好的疗效和安全性。 展开更多
关键词 重组人骨形态发生蛋白2 植骨融合 胸腰椎 结核 脊柱 融合率
下载PDF
RhBMP-2复合体促进单节段腰椎椎间融合临床疗效的Meta分析
17
作者 王峰 石美荣 +6 位作者 孙强 苏云 于晓光 于海波 禹铭杨 吴迪 杨小玉 《影像研究与医学应用》 2017年第2期28-32,共5页
目的:通过Meta分析方法比较rhBMP-2复合体与自体髂骨块(ICBG)在融合率及临床疗效方面的差异。方法:通过检索2000年1月—2016年12月PUBMED、MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库等数据库以及人工检索中、英文已发表文... 目的:通过Meta分析方法比较rhBMP-2复合体与自体髂骨块(ICBG)在融合率及临床疗效方面的差异。方法:通过检索2000年1月—2016年12月PUBMED、MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库等数据库以及人工检索中、英文已发表文献中的关于rhBMP-2复合体与ICBG施行腰椎椎间融合术治疗成人单节段腰椎退行性病变的随机对照试验研究文献。筛选符合纳入标准的相关文献,评价纳入研究的方法学质量。比较内容包括:手术时间、术中出血量、住院时间、融合失败率、ODI较术前恢复情况、二次手术数,应用RevMan5.0进行统计学分析。结果:根据纳入标准,共筛选出6篇文献共计577例患者。6篇文献方法学质量较高(≥6分)。Meta分析表明,rhBMP-2复合体能够显著缩短手术及住院时间、降低出血量、减少二次手术风险。术后24个月rhBMP-2复合体组融合失败率显著低于ICBG组。术后24个月ODI评分提高不明显病例的比例rhBMP-2复合体组少于ICBG组,但无统计学意义。根据手术入路不同进行亚组分析,除住院时间异质性较大,其余指标均得到相同结果。结论:rhBMP-2用于治疗单节段腰椎退行性病变,其中远期椎间融合率明显优于自体髂骨移植,并且前者可明显缩短手术及住院时间、降低出血量、减少二次手术风险。初步证明rhBMP-2复合体在进行腰椎椎间融合时的有效性以及对自体髂骨的替代作用。 展开更多
关键词 META分析 重组人骨形态发生蛋白-2 自体髂骨块 腰椎椎间融合术 随机对照试验
下载PDF
零切迹自锁椎间融合器联合rhBMP-2融合术应用于ACDF的疗效分析
18
作者 许春财 徐杨 《现代医药卫生》 2018年第24期3757-3759,3762,共4页
目的探讨零切迹自锁椎间融合器联合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)融合术在前路颈椎间盘切除椎间融合术(ACDF)中的临床疗效。方法 2014年6月至2017年6月因单节段颈椎病在该院行ACDF治疗的患者74例,25例行颈前路椎间盘切除常规椎间融... 目的探讨零切迹自锁椎间融合器联合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)融合术在前路颈椎间盘切除椎间融合术(ACDF)中的临床疗效。方法 2014年6月至2017年6月因单节段颈椎病在该院行ACDF治疗的患者74例,25例行颈前路椎间盘切除常规椎间融合器钛板固定术(A组),27例行颈前路椎间盘切除零切迹自锁椎间融合器融合术(B组),22例行零切迹自锁椎间融合器联合rhBMP-2融合术(C组)。记录手术时间、术中出血量、术后引流量、术后吞咽困难发生情况,采用日本矫形外科协会治疗评分(JOA评分)、视觉模拟疼痛评分(VAS评分)及术后各时间点融合率评价临床疗效。结果 B、C组手术时间、术中出血量、术后引流量均少于A组(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组术后1、3、12个月JOA评分、VAS评分均较术前明显改善(P<0.05),各时间点各组间JOA、VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。B、C组术后吞咽困难发生率低于A组(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。C组术后3、6个月融合率高于A、B组(P<0.05),A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ACDF中采用零切迹自锁椎间融合系统疗效与传统融合固定相当,且具有手术时间短、术中出血少、术后引流少、术后吞咽困难发生率低等优点,联合使用rhBMP-2还能促进早期融合,提高融合手术成功率。 展开更多
关键词 颈椎病 椎间融合器 重组人骨形态发生蛋白-2 脊柱融合
下载PDF
人CLEC-2胞外段CRD重组蛋白纯化与多克隆抗体的制备和活性鉴定 被引量:1
19
作者 李因涛 吴维宾 +4 位作者 洪谊 王文忠 杨俊武 谢建辉 吴兴中 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1012-1018,共7页
人C型凝集素样受体(human C-type lectin-like receptor-2,hCLEC-2)是新克隆的Ⅱ型跨膜受体分子,研究表明,它在病毒感染,血小板活化、聚集,肿瘤转移和信号转导等方面发挥重要作用.通过制备针对其胞外段糖类识别结构域(CRD)的抗体来进一... 人C型凝集素样受体(human C-type lectin-like receptor-2,hCLEC-2)是新克隆的Ⅱ型跨膜受体分子,研究表明,它在病毒感染,血小板活化、聚集,肿瘤转移和信号转导等方面发挥重要作用.通过制备针对其胞外段糖类识别结构域(CRD)的抗体来进一步研究该蛋白质的生物学功能及相关信号通路.构建了pET23b-CRD重组表达质粒,将其转化到大肠杆菌BL21中,用于hCLEC-2-CRD-His融合蛋白的表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表明,融合重组蛋白成功获得了高效表达,分子质量在18ku左右.经鉴定,发现hCLEC-2-CRD-His表达于包涵体中.为获得高纯度的可溶性蛋白,将包涵体溶于6mol/L盐酸胍,并用镍柱进行纯化.纯化后的蛋白质经过透析、再折叠后作为抗原,免疫家兔制备抗血清,抗血清经蛋白G亲合层析纯化后用Western blot等方法进行鉴定,结果显示该抗体能特异性地检测到GFP-hCLEC-2和GFP-CRD.通过使用该抗体,进一步发现,在用PMA和IL-4诱导单核细胞THP-1分化的过程中,内源性hCLEC-2蛋白水平下调,初步揭示了hCLEC-2的表达和单核细胞的分化存在一定的联系.因此,该抗体的成功制备将为进一步研究CLEC-2的生物学功能提供有利的条件. 展开更多
关键词 C型凝集素样蛋白 糖类识别结构域 重组质粒 融合蛋白 多克隆抗体
下载PDF
SLP-2荧光表达载体的构建及其在乳腺癌细胞MCF-7中的表达与定位 被引量:1
20
作者 王义军 吴文韬 +3 位作者 徐甜 向双林 张健 韩梅 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第1期10-13,24,共5页
人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因,它在多个癌组织里高表达,如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织。其中在乳腺癌组织的高表达和病人的存活率负相关,这说明该基因很可能在乳腺癌的发生中发挥重要作用。为了研究SLP-2基因在肿瘤里的功能,... 人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因,它在多个癌组织里高表达,如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织。其中在乳腺癌组织的高表达和病人的存活率负相关,这说明该基因很可能在乳腺癌的发生中发挥重要作用。为了研究SLP-2基因在肿瘤里的功能,将人类SLP-2基因全长编码区定向连入pEGFP-C3质粒,使SLP-2蛋白可以与绿色荧光蛋白在乳腺癌细胞MCF-7内融合表达。而且细胞荧光实验发现SLP-2蛋白主要定位在MCF-7细胞的胞质内,这为进一步研究SLP-2基因在乳腺癌中的功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 SLP-2 重组质粒 融合蛋白表达 细胞定位
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部