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牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性
被引量:
9
1
作者
赵昆
刘思国
+9 位作者
王春来
宫强
迟磊
刘建东
王勇
云孟克
常月红
刘慧芳
周媛媛
孙延鸣
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期65-70,共6页
牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组...
牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。
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关键词
牛抗菌肽Bac7和
bac5
融合基因
重组表达
抑菌活性
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职称材料
奶牛Cathelicidins Bac5基因的克隆、表达及抑菌活性分析
被引量:
1
2
作者
杨利恒
张勇
+3 位作者
徐鹏
胡俊杰
高昭辉
薛慧文
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期8-12,共5页
根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出4...
根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出414bp去信号肽的Bac5基因片段,重组蛋白经ZPTG诱导和SDS-PAGE检测发现,在19ku附近有1条清晰蛋白条带,与理论预测值大小一致;对表达的Bac5重组蛋白(rBac5)处理后进行抑菌活性的初步鉴定结果表明,rBac5对大肠杆菌(CVCC1450)和金黄色葡萄球菌(CVCC545)2种标准菌株和乳房炎乳的3种常见分离菌株均有一定的抑菌活性.
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关键词
奶牛
bac5
基因
克隆
原核表达
抑菌活性
下载PDF
职称材料
题名
牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性
被引量:
9
1
作者
赵昆
刘思国
王春来
宫强
迟磊
刘建东
王勇
云孟克
常月红
刘慧芳
周媛媛
孙延鸣
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室
石河子大学
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期65-70,共6页
文摘
牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。
关键词
牛抗菌肽Bac7和
bac5
融合基因
重组表达
抑菌活性
Keywords
Bovine antimicrobial peptides Bac7 and
bac5
Fusion
gene
Recombinant expression
Antimicrobial activity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
奶牛Cathelicidins Bac5基因的克隆、表达及抑菌活性分析
被引量:
1
2
作者
杨利恒
张勇
徐鹏
胡俊杰
高昭辉
薛慧文
机构
甘肃农业大学动物医学院
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期8-12,共5页
基金
甘肃省农牧厅生物技术专项(GNSW-2007-04)
甘肃省科技厅科技支撑项目(0708NKCA081)
科技部"十二五计划"项目(2011AA10A210)
文摘
根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出414bp去信号肽的Bac5基因片段,重组蛋白经ZPTG诱导和SDS-PAGE检测发现,在19ku附近有1条清晰蛋白条带,与理论预测值大小一致;对表达的Bac5重组蛋白(rBac5)处理后进行抑菌活性的初步鉴定结果表明,rBac5对大肠杆菌(CVCC1450)和金黄色葡萄球菌(CVCC545)2种标准菌株和乳房炎乳的3种常见分离菌株均有一定的抑菌活性.
关键词
奶牛
bac5
基因
克隆
原核表达
抑菌活性
Keywords
dairy cattle
bac5 gene
clone
prokaryotic expression
antimicrobial activity
分类号
S823.91 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性
赵昆
刘思国
王春来
宫强
迟磊
刘建东
王勇
云孟克
常月红
刘慧芳
周媛媛
孙延鸣
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
9
下载PDF
职称材料
2
奶牛Cathelicidins Bac5基因的克隆、表达及抑菌活性分析
杨利恒
张勇
徐鹏
胡俊杰
高昭辉
薛慧文
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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