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碱性纤维素酶高产菌株Bacillus sp.CY1-3的诱变选育 被引量:1
1
作者 蔡勇 阿依木古丽 《西北民族大学学报(自然科学版)》 2007年第2期13-16,37,共5页
以一株产单组分羧甲基纤维素酶芽孢杆菌Bacillus sp.CY1-3为出发菌,经紫外线和亚硝基胍复合诱变处理后,其纤维素酶产量达到了53.86 U/mL,是出发菌株的4倍.研究发现最优的紫外辐射时间和亚硝基胍浓度分别是4min和0.06%.
关键词 纤维素酶 酶活力 诱变 芽孢杆菌cy1-3
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Bacillus velenzensis S3-1基因组中表面活性素、伊枯草菌素和丰原素合成基因簇的定位与分析 被引量:6
2
作者 金清 张蕾 +2 位作者 蒋秋悦 苏翠珠 肖明 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2018年第4期451-457,共7页
通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性... 通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性素、伊枯草菌素和丰原素的结构及相关的合成酶结构域进行了预测与分析. 展开更多
关键词 生物信息学 bacillus velezensis S3-1 表面活性素 伊枯草菌素 丰原素
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响应面法优化热泉菌Bacillus sp.Lc50-1的发酵产卡拉胶酶条件 被引量:1
3
作者 胡秋实 苏忠亮 +1 位作者 何培青 李江 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期259-267,共9页
采用响应面法对1株高产卡拉胶酶的印度尼西亚热泉菌Bacillus sp.Lc50-1的发酵条件进行优化。分别以培养温度、pH值、C源、N源、金属离子及接种量作为唯一变量进行单因素实验,筛选出对酶活有显著影响的单因素取值范围;参考单因素实验结果... 采用响应面法对1株高产卡拉胶酶的印度尼西亚热泉菌Bacillus sp.Lc50-1的发酵条件进行优化。分别以培养温度、pH值、C源、N源、金属离子及接种量作为唯一变量进行单因素实验,筛选出对酶活有显著影响的单因素取值范围;参考单因素实验结果,再利用Box-Behnken设计及响应面分析法进行回归分析以确定最佳发酵条件。结果表明,培养温度、卡拉胶浓度(C源)、蛋白胨浓度(N源)、KCl浓度(金属离子)与酶活存在着显著的相关性,通过求解回归方程得到Bacillus sp.Lc50-1的最佳发酵条件为:培养温度47.5℃、蛋白胨0.25%、卡拉胶0.3%、KCl 21.55mmol·L-1,优化后发酵上清液的酶活达到8.9U·mL-1,比优化前提高了1.5倍。 展开更多
关键词 热泉菌bacillus sp Lc50-1 卡拉胶酶 响应面法 优化
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Candida sp.99-125脂肪酶催化猪油酸解合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯 被引量:6
4
作者 李昕倩 邓利 +3 位作者 叶贤春 聂开立 刘珞 李玲 《生物加工过程》 CAS CSCD 2013年第3期13-17,共5页
人乳脂是一种在甘油骨架Sn-2位上富含棕榈酸(C16∶0)的结构酯。经分析可知,猪油中棕榈酸主要分布在甘油酯的Sn-2位,可作为制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的原料。以Candida sp.99-125脂肪酶作催化剂,以猪油和油酸为原料,通过正... 人乳脂是一种在甘油骨架Sn-2位上富含棕榈酸(C16∶0)的结构酯。经分析可知,猪油中棕榈酸主要分布在甘油酯的Sn-2位,可作为制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的原料。以Candida sp.99-125脂肪酶作催化剂,以猪油和油酸为原料,通过正交试验对无溶剂体系中酸解合成OPO的工艺条件进行研究,得到最适反应条件:猪油与油酸的质量比为1∶2.0,酶用量为总底物质量的10%,反应温度40℃,反应时间4 h。在该反应条件下,经酸解合成的产物三甘酯中,Sn-2C16∶0的含量大于70%,占总脂肪酸中棕榈酸含量的93%以上,并含有43%以上的OPO。 展开更多
关键词 CANDIDA sp 99—125脂肪酶 1 3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯 猪油
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基于广义坐标形式牛顿-欧拉方法的3SPS+1PS并联髋关节试验机动力学研究 被引量:3
5
作者 袁欣 程刚 +1 位作者 山显雷 王松涛 《制造业自动化》 北大核心 2014年第5期50-52,共3页
针对并联髋关节试验机的核心模块-3SPS+1PS并联机构,基于广义坐标形式的牛顿-欧拉方法,建立系统动力学方程,并利用MATLAB软件进行仿真分析。结果表明:在Z轴方向上,动平台上球副所受约束力最大,并且远大于Z轴方向上的约束力。另外,在0.3s... 针对并联髋关节试验机的核心模块-3SPS+1PS并联机构,基于广义坐标形式的牛顿-欧拉方法,建立系统动力学方程,并利用MATLAB软件进行仿真分析。结果表明:在Z轴方向上,动平台上球副所受约束力最大,并且远大于Z轴方向上的约束力。另外,在0.3s和0.7s左右两个时刻,球副处的约束力及主动支链的驱动力发生突变,这是因为机构在两个位置时发生正、逆转。 展开更多
关键词 3spS+1PS并联机构 广义坐标 牛顿-欧拉方程 动力学
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血清CEA、CY21-1、CA15-3联合检测对肺癌诊断与预后的临床意义 被引量:4
6
作者 伍伟明 于梅花 王红波 《中国当代医药》 2012年第19期116-117,共2页
目的分析血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CY21-1)、糖类抗原15-3(CA15-3)联合检测在肺癌诊断和预后中的应用价值。方法对43例肺癌患者、31例良性肺病疾病患者和28例健康志愿者取血清,分别采用放射免疫法和酶联免疫法检测CEA、CA1... 目的分析血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CY21-1)、糖类抗原15-3(CA15-3)联合检测在肺癌诊断和预后中的应用价值。方法对43例肺癌患者、31例良性肺病疾病患者和28例健康志愿者取血清,分别采用放射免疫法和酶联免疫法检测CEA、CA15-3和CY21-1的水平。结果肺癌组3项指标的水平均高于良性组和健康组,差异有统计学意义(P<0.05),且3项指标的水平在不同的病理分型和临床分期中也有差异;3项联合检测较单项检测有更高的灵敏度和准确度(P<0.05)。结论联合检测能够提高肺癌诊断的灵敏性和特异性,并且可以用于预后手术疗效的判定及复发或转移的监测。 展开更多
关键词 血清癌胚抗原(CEA) 细胞角蛋白19片段 (cy21-1) 糖类抗原15-3(CA15-3) 联合检测 肺癌
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JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞Caspase-3活化的影响 被引量:1
7
作者 强占荣 吴静 +5 位作者 杨国栋 周永宁 姬瑞 李娟 王爱勤 薛群基 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期367-370,共4页
目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125... 目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125与细胞作用,细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3活性的变化。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,凋亡率明显减低,Caspase-3活性显著下调,与COPADG单作用组之间有显著性差异。结论:SP600125能够显著抑制COPADG诱导Eca-109细胞Caspase-3激活以及COPADG诱导Eca-109细胞凋亡,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖 食菅癌 C-JUN氨基末端激酶 Caspase-3 特异性JNK抑制剂(sp600125)
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高耐镉细菌Burkholderia sp.DF3-1对镉的吸附特性及机理 被引量:5
8
作者 李卓阳 曹苗苗 +3 位作者 周登博 王尉 戚春林 谢江辉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期589-596,共8页
基于前期从重金属矿区污染土壤中分离和鉴定的一株伯克霍尔德氏菌Burkholderia sp.DF3-1,分析其对环境中镉离子(Cd^(2+))的吸附特性。通过测定不同初始浓度、pH及培养时间下菌株对镉离子的去除效率,并利用扫描电镜和透射电镜观察含镉环... 基于前期从重金属矿区污染土壤中分离和鉴定的一株伯克霍尔德氏菌Burkholderia sp.DF3-1,分析其对环境中镉离子(Cd^(2+))的吸附特性。通过测定不同初始浓度、pH及培养时间下菌株对镉离子的去除效率,并利用扫描电镜和透射电镜观察含镉环境对菌体细胞内外形态的影响,以及红外光谱和质粒消除实验测定菌体表面基团和初步测试耐镉基因位置,探讨菌株Burkholderia sp.DF3-1对环境中镉离子的吸附机制。结果表明,该菌株在10 mg/L以下的Cd^(2+)中生长几乎不受影响,在50 mg/L和100 mg/L时生长受限;在培养24 h达到最大生物量,此后有所减少;在pH为5时,去除效率最高。该菌株最高去除效率为83.64%。扫描电镜结果显示Cd^(2+)致使菌体细胞外表粗糙、变形皱缩;透射电镜结果显示Cd^(2+)使菌体细胞膜增厚,遗传物质分散,细胞膜与细胞质界线模糊;红外光谱结果表明,菌体表面主要是-CH_(2)-、酰胺I、-NO_(2)、-COOH、-C-OH和-CO-基团参与了吸附过程;质粒提取与消除实验可知,耐镉基因可能位于遗传物质而不是质粒上。综上所述,耐镉伯克霍尔德氏菌Burkholderia sp.DF3-1对镉离子的吸附作用同时发生在胞内积累和胞外吸附两方面,初始浓度和pH对其吸附能力具有较大影响。 展开更多
关键词 Burkholderia sp.DF3-1 吸附 形态结构 机制
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黄芪注射液对老年肺结核患者血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP及肝肾损伤的影响观察 被引量:9
9
作者 赖晓宇 廖伟群 黄培生 《海南医学院学报》 CAS 2013年第7期904-907,共4页
目的:探讨分析黄芪注射液对老年肺结核患者血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP及肝肾损伤的影响。方法:选取2010年6月~2012年12月于本站采用常规治疗干预的28例老年肺结核患者为对照组,并将同期采用常规方法加黄芪注射液进行治疗的28例患者为... 目的:探讨分析黄芪注射液对老年肺结核患者血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP及肝肾损伤的影响。方法:选取2010年6月~2012年12月于本站采用常规治疗干预的28例老年肺结核患者为对照组,并将同期采用常规方法加黄芪注射液进行治疗的28例患者为观察组,然后将两组患者治疗前与治疗后的第1个月、第2个月的血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP及肝肾功能指标进行比较。结果:观察组治疗后的第1个月、第2个月的血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP水平均低于对照组,肝肾功能指标也显著地优于对照组,P均<0.05,均有显著性差异。结论:黄芪注射液可显著降低老年肺结核患者的血浆HNP1-3、ET-1、PCT、SP水平,对于肝肾功能的保护作用也较佳。 展开更多
关键词 黄芪注射液 老年肺结核 HNP1-3 ET-1 PCT sp 肝肾损伤
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考虑关节摩擦的3SPS+1PS并联机构显式动力学建模研究 被引量:22
10
作者 山显雷 程刚 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期28-35,共8页
显式动力学模型是并联机构控制器设计的基础,由于并联机构的闭环结构特点,导致其显式动力学建模过程通常比较复杂。为了避免动力学建模过程中繁琐的求导过程,考虑关节摩擦并基于牛顿-欧拉法对3SPS+1PS并联机构的显示动力学模型进行了研... 显式动力学模型是并联机构控制器设计的基础,由于并联机构的闭环结构特点,导致其显式动力学建模过程通常比较复杂。为了避免动力学建模过程中繁琐的求导过程,考虑关节摩擦并基于牛顿-欧拉法对3SPS+1PS并联机构的显示动力学模型进行了研究。在并联机构运动学及受力分析的基础上,建立其具有一般形式的动力学模型,选取动平台上球铰链所在位置点的运动学参数作为中间变量,并将其表示为各运动参数的函数,通过参数替换,最终得到包含人工髋关节、推力球轴承、球铰链及电动缸等处摩擦且具有显式形式的动力学模型。将所建立并联机构动力学模型的数值仿真结果与实测结果进行对比分析,验证了所建立模型的有效性。得到的动力学模型可用于并联机构的动力学控制器设计及摩擦补偿控制研究,所使用的方法同样适用于其他构型并联机构的显式动力学建模。 展开更多
关键词 3spS+1PS并联机构 牛顿-欧拉法 显式动力学建模 摩擦建模
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益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达的影响 被引量:4
11
作者 林燕 段春燕 +2 位作者 付艳丽 王巧琳 王宁 《肿瘤药学》 CAS 2017年第2期159-163,共5页
目的观察益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达的影响。方法取2015年1月~2016年7月医院进行实验的BALB/c小鼠60只,建立BALB/c小鼠胃癌抑制瘤模型,根据处理方法不同分为对照1组、对照2组和观察组,每组20只。对照1组不进行任何处理,对... 目的观察益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达的影响。方法取2015年1月~2016年7月医院进行实验的BALB/c小鼠60只,建立BALB/c小鼠胃癌抑制瘤模型,根据处理方法不同分为对照1组、对照2组和观察组,每组20只。对照1组不进行任何处理,对照2组给予5-氟尿嘧啶注射液,观察组给予益气复生方。14 d后处死小鼠,采用免疫组织化学Envision法检测3组小鼠胃癌组织中STAT3的表达水平,免疫组织化学SP法检测3组小鼠胃癌组织中HIF-1的表达水平;对肿瘤组织进行HE染色,分析益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达水平的影响。结果观察组小鼠胃癌组织中STAT3及HIF-1的表达水平显著低于对照2组和对照1组(P<0.05);对照2组小鼠胃癌组织中STAT3及HIF-1的表达水平显著低于对照1组(P<0.05)。观察组小鼠STAT3及HIF-1的表达阳性率显著高于对照2组和对照1组(P<0.05);对照2组小鼠STAT3及HIF-1的表达阳性率显著高于对照1组(P<0.05)。免疫组化结果显示,3组小鼠均存在STAT3的阳性表达,表达量从低到高依次为观察组、对照2组、对照1组;观察组与对照2组HIF-1表达的差异无统计学意义(P>0.05),对照1组HIF-1表达相对较高。观察组肠黏膜绒毛轻度破坏,排列相对整齐,治疗后有所恢复;对照1组和对照2组肠黏膜绒毛完整性被破坏,部分绒毛坏死脱落、稀疏,排列紊乱。结论益气复生方可降低胃癌组织中STAT3的表达水平,抑制HIF-1的表达。 展开更多
关键词 益气复生方 胃癌组织 STAT3 HIF-1 免疫组织化学Envision法 免疫组织化学sp 5-氟尿嘧啶
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miR-381-3p靶向特异性蛋白1抑制mTOR/p70s6k信号通路调控食管癌细胞的增殖和凋亡 被引量:3
12
作者 木亚林 岳恺 李明 《成都医学院学报》 CAS 2020年第1期33-39,132,共8页
目的探讨miR-381-3p靶向特异性蛋白1(SP1)抑制mTOR/p70s6k信号通路对食管癌细胞的增殖和凋亡调控作用。方法RT-qPCR检测正常食管细胞和食管癌细胞中miR-381-3p与SP1mRNA的表达;利用Lipofectamine 2000将miR-381-3p mimic、miR-control、... 目的探讨miR-381-3p靶向特异性蛋白1(SP1)抑制mTOR/p70s6k信号通路对食管癌细胞的增殖和凋亡调控作用。方法RT-qPCR检测正常食管细胞和食管癌细胞中miR-381-3p与SP1mRNA的表达;利用Lipofectamine 2000将miR-381-3p mimic、miR-control、SP1质粒分别或联合转染进入EC9706细胞,基因预测软件预测miR-381-3p的靶基因,双荧光素酶报告检测靶向关系;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹技术检测Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、p70s6激酶(p70s6k)、p-p70s6k和SP1蛋白表达水平。结果miR-381-3p在食管癌细胞EC9706中低表达(P<0.01),而SP1高表达(P<0.01);miR-381-3p与SP13′UTR区存在结合位点,且miR-381-3p直接靶向抑制SP1表达;过表达miR-381-3p后,食管癌细胞增殖明显降低(P<0.01),Ki67和PCNA蛋白表达明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显降升高(P<0.01),Bax/Bcl-2和cleaved caspase-3蛋白表达明显上调(P<0.01),mTOR和p70s6k磷酸化明显减少(P<0.01);而高表达SP1可以逆转miR-381-3p对食管癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。抑制mTOR/p70s6k信号通路后,食管癌细胞增殖明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),增殖标记蛋白Ki67表达明显下调(P<0.01),凋亡标记蛋白cleaved caspase-3表达明显上调(P<0.01),而SP1蛋白表达无明显变化。结论miR-381-3p可能通过靶向SP1抑制mTOR/p70s6k信号通路来抑制食管癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-381-3p sp1 MTOR P70S6K 增殖 凋亡
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脂肪酸Bacillus pumilus羟基化调控基因fadD-like的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 王岩 沈锡权 +1 位作者 吴祖芳 张锐 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期66-70,共5页
利用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的ω-1-羟基脂肪酸高产突变菌株M-F641、M-F81、M-F8272及B.pumilus20075的总DNA为模板,通过Primer Premier5.0软件设计引物,对决定长链脂肪酸无效降解途径中的关键酶基因fadD-like基因进行克隆,得到... 利用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的ω-1-羟基脂肪酸高产突变菌株M-F641、M-F81、M-F8272及B.pumilus20075的总DNA为模板,通过Primer Premier5.0软件设计引物,对决定长链脂肪酸无效降解途径中的关键酶基因fadD-like基因进行克隆,得到4条长约1 720 bp的fadD-like基因全序列;利用MEGA3.1、DNAStar等软件进行序列分析结合脂酰辅酶A合成酶系统进化分析,结果表明其与fadD基因具有较高的相似性,克隆得到的核苷酸为编码脂酰辅酶A合成酶的fadD基因序列;研究结果为长链脂肪酸高效转化生产ω-1-羟基脂肪酸提供基础。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌(bacillus pumilus) ω-1、ω-2、ω-3-羟基脂肪酸 fadD基因 序列分析
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SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的影响 被引量:1
14
作者 吴静 强占荣 +3 位作者 杨国栋 周永宁 王爱勤 薛群基 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第14期1056-1059,共4页
目的:观察特异性JNK抑制剂[specificc-junNH2terminalproteinkinase(JNK)inhibitor]SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{[2-(3-carboxy-1-oxopropyl)a-mino-2-deoxy-D-Glucose],COPADG}诱导Eca-109细... 目的:观察特异性JNK抑制剂[specificc-junNH2terminalproteinkinase(JNK)inhibitor]SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{[2-(3-carboxy-1-oxopropyl)a-mino-2-deoxy-D-Glucose],COPADG}诱导Eca-109细胞凋亡的影响并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,用COPADG及SP600125对细胞进行处理。细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT检测不同时间点的细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,同时,COPADG诱导的Eca-109细胞凋亡率明显减低,细胞增殖抑制率下降明显,与COPADG单独作用组之间比较差异有统计学意义。结论:SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物CO-PADG诱导Eca-109细胞凋亡具有抑制作用,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖/药理学 食管肿瘤/病理学 蛋白激酶类/c—Jun氨基末端激酶 JNK 抑制剂(sp600125)
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CY3菌株代谢中间产物的氧化产物的分析与鉴定 被引量:2
15
作者 李静 苏占雄 +1 位作者 沈小娟 刘超 《黑龙江科技信息》 2011年第12期67-68,共2页
实验通过研究发现CY3菌株不但能代谢原始的多环芳烃,还可以在很短的时间内将中间产物代谢掉,从而使这些中间产物不易积累。通过GC-MS来鉴定CY3菌株将1-羟基-2-萘甲酸降解为1-羟基萘,1,2-二羟基萘等。
关键词 cy3 中间产物 GC-MS 1-羟基-2-萘甲酸
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miR-199-3p通过靶向调控SP1促进成纤维细胞增殖对心房颤动心房重构的影响 被引量:6
16
作者 魏飞宇 范洁 +1 位作者 高田 王礼琳 《临床心血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期523-530,共8页
目的:探讨miR-199-3p与心房纤维化的关系及其对心房成纤维细胞增殖的影响。方法:连续入选2018年11月-2019年11月在云南省第一人民医院心内科住院的心房颤动(AF)患者100例,以基线资料相匹配的非AF患者50例作为对照,利用qRT-PCR检测2组患... 目的:探讨miR-199-3p与心房纤维化的关系及其对心房成纤维细胞增殖的影响。方法:连续入选2018年11月-2019年11月在云南省第一人民医院心内科住院的心房颤动(AF)患者100例,以基线资料相匹配的非AF患者50例作为对照,利用qRT-PCR检测2组患者外周血中miR-199-3p的表达差异;利用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-199-3p对AF的诊断价值;采用Pearson相关分析miR-199-3p和左房纤维化的相关性;利用CCK-8测定miR-199-3p对成纤维细胞增殖的影响,qRT-PCR检测细胞周期调控因子Ki67和Cyclin D1及CollagenⅠ和CollagenⅢ表达变化;最后利用双荧光素酶报告基因实验确定miR-199-3p的靶基因。结果:miR-199-3p在AF患者外周血[(0.38±0.31)∶(1.25±0.89),P<0.01]和心房组织中[(0.48±0.03)∶(1.00±0.12),P<0.01]表达都下调,且在持续性AF患者中表达低于阵发性AF[(0.42±0.20)∶(1.08±0.48),P<0.01];ROC曲线分析miR-199-3p表达下降鉴别AF的曲线下面积(AUC)为0.90,其敏感性为81%,特异性为86%,鉴别持续性AF的AUC为0.91,其敏感性为98%,特异性为73%;Pearson相关分析显示miR-199-3p表达水平和左房纤维化程度呈负相关(r=-0.863,P<0.01);与对照组相比,沉默miR-199-3p表达可促进成纤维细胞增殖和纤维化,但过表达miR-199-3p可抑制细胞增殖和纤维化(P<0.05);荧光素酶报告基因实验和Western blot证实SP1是miR-199-3p的直接靶基因。结论:AF患者中miR-199-3p和左房纤维化呈负相关,且miR-199-3p通过靶向SP1的表达负性调控成纤维细胞增殖和纤维化,进而参与AF心房重构。因此,miR-199-3p有望成为临床AF潜在的非侵入性诊断标志物和纤维化的预测标志物。 展开更多
关键词 心房颤动 miR-199-3p 成纤维细胞增殖 结构重构 sp1
原文传递
重楼皂苷Ⅰ调控Sp1/miR-542-3p/ILK信号通路对肺癌细胞的抑制作用 被引量:4
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作者 唐青 王苏美 +1 位作者 吴万垠 韩凌 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期2805-2812,共8页
目的:探讨中药重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对肺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制。方法:采用MTT实验、划痕实验和细胞周期实验等检测PPⅠ对肺癌细胞生长、迁移和细胞周期的影响。采用Western Blot检测转录调控因子Sp1和整合素连接激酶ILK的蛋白... 目的:探讨中药重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对肺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制。方法:采用MTT实验、划痕实验和细胞周期实验等检测PPⅠ对肺癌细胞生长、迁移和细胞周期的影响。采用Western Blot检测转录调控因子Sp1和整合素连接激酶ILK的蛋白表达水平。qPCR实验测定miR-542-3p和ILK mRNA的表达水平。细胞瞬时转染技术用于转染ILK和Sp1过表达质粒或siRNA。双荧光素酶基因报告实验用于测定ILK基因启动子活性。结果:PPⅠ显著抑制A549和PC9细胞活力,且呈时间和剂量依赖方式。Western Blot结果显示,PPⅠ明显下调ILK蛋白表达水平。沉默ILK抑制细胞活力和细胞迁移,阻滞细胞周期S期。过表达ILK促进细胞活力,并显著逆转PPI对A549和PC9细胞的生长抑制作用。miR-542-3p通过直接与ILK mRNA的3’-UTR结合,从而抑制ILK蛋白的表达。PPⅠ有效提高miR-542-3p的表达水平,显著下调转录调控因子Sp1的蛋白表达水平。Sp1可与ILK基因启动子区域结合,沉默Sp1显著下调ILK启动子活性并减少ILK蛋白的表达水平。过表达Sp1显著逆转PPⅠ对ILK蛋白表达的下调作用。结论:PPⅠ通过增加miR-542-3p的表达和减少Sp1的表达,进而下调ILK蛋白的表达水平,最终显著抑制肺癌细胞的生长。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ) 肺癌 MiR-542-3p sp1 ILK 抗癌分子机制
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miRNA-24-3P靶向调节SP1对RAW264.7细胞功能的影响 被引量:2
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作者 程东良 梁媛 +1 位作者 陈衍晨 卿娣 《重庆医学》 CAS 2018年第17期2257-2260,2265,共5页
目的探讨miRNA-24-3P(miR-24-3P)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)过程中的作用机制。方法在RAW264.7细胞中分别转染miR-24-3Pmimics、miR-24-3Pinhibitor及各自阴性对照,检测各组细胞中miR-24-3P的相对表达水平,检测各组细胞中肿瘤坏死因子-... 目的探讨miRNA-24-3P(miR-24-3P)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)过程中的作用机制。方法在RAW264.7细胞中分别转染miR-24-3Pmimics、miR-24-3Pinhibitor及各自阴性对照,检测各组细胞中miR-24-3P的相对表达水平,检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、SP1、核因子-κB(NF-κB)的相对表达水平,并通过双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-24-3P对SP1的靶向作用。结果TNF-αmRNA、IL-6mRNA在各组细胞中的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。SP1 mRNA、NF-κB mRNA在各组细胞中的相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。SP1在各组细胞中的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。NF-κB在各组细胞中的相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因分析表明,共同转入miR-24-3P与SP1野生型会显著抑制HEK293细胞中的荧光酶表达(P<0.05)。结论miR-24-3P可通过影响SPI基因的翻译进而影响炎性介质的释放,在ARDS过程中发挥作用。 展开更多
关键词 miR-24-3P 急性呼吸窘迫综合征 成人 sp1
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Heterologous expression of LamA gene encoded endo-β-1,3- glucanase and CO2 fixation by bioengineered Synechococcus sp. PCC 7002 被引量:1
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作者 Di Li Swati Yewalkar +7 位作者 Xiaotao Bi Sheldon Duff Dusko Posarac Heli Wang Layne A. Woodfin Jan-Hendrik Hehemann Sheila C. Potter Francis E. Nano 《Frontiers of Environmental Science & Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第2期115-122,共8页
The gene for the catalytic domain of thermostable endo-β-1,3-glucanase (laminarinase) LamA was cloned from Thermotoga maritima MSB8 and heterologously expressed in a bioengineered Synechococcus sp. PCC 7002. The mu... The gene for the catalytic domain of thermostable endo-β-1,3-glucanase (laminarinase) LamA was cloned from Thermotoga maritima MSB8 and heterologously expressed in a bioengineered Synechococcus sp. PCC 7002. The mutant strain was cultured in a photobioreactor to assess biomass yield, recombinant laminarinase activity, and CO2 uptake. The maximum enzyme activity was observed at a oH of 8.0 and a temoerature of 70℃. At a CO2 concentration of 5%, we obtained a maximum specific growth rate of 0.083 h^-1 a biomass productivity of 0.42 g· L^-1·d^-1 a blomass concentration of 3.697 g.L^-1 , and a specific enzyme activity of the mutant strain of 4.325 U.mg^- 1 dry mass. All parameters decreased as CO2 concentration increased from 5% to 10% and further to 15% CO2, except enzyme activity, which increased from 5% to 10% CO2. However, the mutant culture still 1 1 grew at 15% CO2 concentration, as reflected by the blomass productwlty (0.26 g.L .d ), biomass concentration (2.416 g.L^- 1), and specific enzyme activity (3.247 U.mg^-1 dry mass). 展开更多
关键词 Synechococcus sp. PCC 7002Thermotoga maritimaLamA geneEndo-β-1 3-glucanaseCO2 fixation
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转录因子 Sp1在人肾小球系膜细胞 IP3 R1表达中的作用 被引量:1
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作者 王育蓉 李艳艳 +1 位作者 卢仁隆 孙辉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期534-540,共7页
目的探讨转录因子Sp1在肿瘤坏死因子( TNF-α)上调人肾小球系膜细胞( HMCs ) IP3R1表达中的作用,进一步阐明肝肾综合征( HRS)肾小球滤过率( GFR)下降的分子机制。方法用实时定量PCR和免疫印迹检测TNF-α刺激HMCs后,IP3R1 mRNA... 目的探讨转录因子Sp1在肿瘤坏死因子( TNF-α)上调人肾小球系膜细胞( HMCs ) IP3R1表达中的作用,进一步阐明肝肾综合征( HRS)肾小球滤过率( GFR)下降的分子机制。方法用实时定量PCR和免疫印迹检测TNF-α刺激HMCs后,IP3R1 mRNA、IP3R1蛋白及Sp1蛋白表达的情况,重组质粒PGL3-IP3R1 promoter瞬时转染HMCs,应用荧光素酶报告基因检测TNF-α对IP3R1启动子活性的影响;应用Sp1和DNA结合抑制剂光辉霉素( Mithramycin A )及Sp1-siRNA质粒瞬时转染预处理HMCs后,检测IP3R1蛋白表达的变化。此外,免疫印迹法检测肿瘤坏死因子受体( TNFR)对Sp1的活化及IP3R1蛋白表达的影响。结果 TNF-α作用HMCs后,IP3R1 mRNA、IP3R1蛋白和Sp1蛋白表达均明显增加,TNF-α显著增强IP3R1基因启动子的活性,Mithramycin A呈剂量依赖性阻断TNF-α诱导IP3R1蛋白表达上调,Sp1-siRNA预处理HMCs后,IP3R1蛋白表达明显下降。 TNFR1抗体+TNF-α组和TNFR2抗体+TNF-α组,IP3R1蛋白表达均有不同程度的下降。 TNFR1抗体+TNF-α组Sp1蛋白表达明显下降,而TNFR2抗体+TNF-α组,Sp1蛋白表达无明显变化。结论 TNF-α能上调人系膜细胞IP3R1的表达,TNF-α可能通过TNFR1/Sp1上调IP3R1的表达。 展开更多
关键词 肝肾综合征(HRS) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 人肾小球系膜细胞(HMCs) Ⅰ型1 4 5-三磷酸肌醇受体(IP3R1) 转录因子sp1
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