Decontamination of Bacillus subtilis var. niger spores on selected surfaces by chlorine dioxide gas

Objective： Chlorine dioxide （CD） gas has been used as a fumigant in the disinfection of biosafety labo- ratories. In this study, some experiments were conducted to assess the inactivation of spores inoculated on six ma- terials [stainless steel （SS）, painted steel （PS）, polyvinyl chlorid （PVC）, polyurethane （PU）, glass （GS）, and cotton cloth （CC）] by CD gas. The main aims of the study were to determine the sporicidal efficacy of CD gas and the effect of prehumidification before decontamination on sporicidal efficacy. Methods： Material coupons （1.2 cm diameter of SS, PS, and PU; 1.0 cmx1.0 cm for PVC, GS, and CC） were contaminated with 10 IJI of Bacillus subtilis var. niger（ATCC 9372） spore suspension in mixed organic burden and then dried in a biosafety cabinet for 12 h. The spores were recovered by soaking the coupons in 5 ml of extraction liquid for 1 h and then vortexing the liquid for 1 min. Results： The log reductions in spore numbers on inoculated test materials exposed to CD gas [0.080% （volume ratio, v/v） for 3 h] were in the range of from 1.80 to 6.64. Statistically significant differences were found in decontamination efficacies on test material coupons of SS, PS, PU, and CC between with and without a 1-h prehumidification treatment. With the extraction method, there were no statistically significant differences in the recovery ratios between the porous and non-porous materials. Conclusions： The results reported from this study could provide information for developing decontamination technology based on CD gas for targeting surface microbial contamination.

Fast Neutron Radiation Efiects on Bacillus Subtili

To examine the sterilizing effect and mechanism of neutron radiation, Bacillus subtills var. niger, strain （ATCC 9372） spores were irradiated with the fast neutron from the Chinese fast burst reactor II（CFBR-II）. The plate-count results indicated that the D10 value was 384.6 Gy with a neutron radiation dose rate of 7.4 Gy/min. The rudimental catalase activity of the spores declined obviously with the increase in the radiation dose. Meanwhile, under the scanning electron microscope, no visible influence of the neutron radiation on the spore configuration was detected even if the dose was increased to 4 kGy. The content and distribution of DNA double-strand breaks induced by neutron radiation at different doses were measured and quantified by pulsed- field gel electrophoresis （PFGE）. Further analysis of the DNA release percentage （PR）, the DNA breakage level （L）, and the average molecular weight, indicated that DNA fragments were obvi- ously distributed around the 5 kb regions at different radiation doses, which suggests that some points in the DNA molecule were sensitive to neutron radiation. Both PR and L varied regularly to some extent with the increase in radiation dose. Thus neutron radiation has a high sterilization power, and can induce falling enzyme activity and DNA breakage in Bacillus subtilis spores

Influence of nano-MgO particle size on bactericidal action against Bacillus subtilis var. niger

Nano-MgO with various particle sizes, synthe- sized by different methods using Mg(NO3)2·6H2O, Na2CO3, Na2SO4, urea and ammonia solution as reactants, was used to carry out bactericidal experiments on Bacillus subtilis var. niger. The results were compared with the effect of TiO2, a common kind of photocatalytic material. The materials were characterized by X-ray Diffraction (XRD), Transmission Electron Microscopy (TEM), low temperature N2 adsorp- tion-desorption measurements and FT-IR, and the results showed that the bactericidal ability of MgO increases with decreasing particle size. Nano-MgO and an interior wall-paint containing the material have better bactericidal effects than nono-TiO2 in both presence and absence of light. The bactericidal mechanism is discussed. The surface of MgO can generate high concentrations of O?2 which is highly active and can react with the peptide linkages in the coating walls of the spores. The spores are destroyed by the resulting damage to their structure.

苍术消毒剂杀菌性能的实验观察

目的 通过试验对苍术消毒剂的杀菌性能进行科学评价。方法 采用悬液定量杀菌试验 ,观察其杀菌效果。结果 在 2 0～ 2 1℃条件下 ,用其 1.4 % (原液 70倍稀释 )苍术消毒剂对金黄色葡萄球菌作用 7min的杀灭率达 99.9% ;以 10 .0 %该液对枯草杆菌黑色变种芽胞作用 7m in的杀灭率 10 0 % ;该原液放置于 5 4～ 5 6℃条件下 2周 ,杀菌效果无明显变化。结论 苍术消毒剂具有良好杀菌效果和稳定性。

酸性氧化电位水杀菌效果及毒性的试验观察

为了解专门电解生成机生成的酸性氧化电位水消毒性能,采用流动载体浸泡杀菌试验和动物试验方法对其杀菌效果及毒性进行了试验观察。结果,联邦牌酸化水生成机产生的酸性氧化电位水原液对白色念珠菌作用4m in,对枯草杆菌黑色变种芽孢作用10 m in,平均杀灭对数值≥3.00;体积分数50%该酸化水对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌作用2 m in,平均杀灭对数值均≥3.00。该酸性氧化电位水对小鼠急性口服毒性试验属实际无毒;对家兔皮肤、黏膜无刺激性;对小鼠嗜多染红细胞无致微核作用。酸性氧化电位水原液浸泡72 h,对碳钢有中度腐蚀,对铝有轻度腐蚀,对不锈钢和铜基本无腐蚀。结论,该酸性氧化电位水具有很好的杀菌能力,属无毒类物质,对皮肤黏膜无刺激性,对金属具有一定腐蚀性。

内镜细胞刷不同清洗方法的效果比较

目的探讨内镜细胞刷有效的清洗方法。方法将内镜细胞刷人工污染枯草杆菌黑色变种芽胞和全血后,分别以4种方法进行清洗,A组:手工刷洗;B组:多酶洗液浸泡+手工刷洗;C组:超声机清洗;D组:多酶洗液+超声机清洗。再用潜血试验法和细菌计数培养进行清洗效果检测比较。结果A组潜血试验阴性率43.33%,芽胞去除率90.87%;B组潜血试验阴性率100.00%,芽胞去除率96.79%;C组潜血试验阴性率73.33%,芽胞去除率99.03%;D组潜血试验阴性率100.00%,芽胞去除率99.90%。是否用多酶洗液清洗对血液去除效果有差异(P<0.05);4组毛刷芽胞去除效果差异有显著性(P<0.05)。结论多酶洗液浸泡可有效去除细胞刷污染的血液,超声机清洗对污染菌的清除效果比手工刷洗好。内镜细胞刷应采用流动水冲洗→多酶洗液+超声机清洗→流动水冲洗的清洗流程。

四种全自动内镜消毒机对内镜消毒效果的比对观察

目的比较四种全自动内镜清洗消毒机对内镜消毒效果。方法采用实验室和模拟现场试验方法进行了比较检测。结果用超声雾化型自动清洗内镜消毒机,配合20.7g/L戊二醛雾化熏蒸3min,对染于聚四氟乙烯管道内壁载体上枯草杆菌黑色变种芽孢的平均清除率为93.21%,对内镜活检通道和镜身表面污染的枯草杆菌黑色变种芽孢的清除率分别为16.7%和73.3%。用SY-600型全自动内镜清洗消毒机,配合20.1g/L戊二醛消毒液冲洗10min,对染于聚四氟乙烯管道内壁载体上枯草杆菌黑色变种芽孢的平均清除率为99.94%,对内镜活检通道和镜身表面污染枯草杆菌黑色变种芽孢的清除率分别为86.7%和100%。用HY-0610全自动内窥镜清洗机,配合507mg/L过氧乙酸消毒液冲洗5min;用WAYWIN-2000型医用内镜灭菌器,配合1179mg/L过氧乙酸消毒液冲洗10min;对染于聚四氟乙烯管道内壁载体上和污染于内镜活检通道及镜身表面的枯草杆菌黑色变种芽孢的清除率均达到100%。结论以戊二醛为消毒剂的全自动内镜清洗消毒机,冲洗的消毒方式明显优于超声雾化,但均达不到消毒合格要求;以过氧乙酸为消毒剂的全自动内镜清洗消毒机对内镜管道和外壁均可达到消毒要求。

邻苯二甲醛和强化戊二醛杀灭细菌芽孢效果比较

目的比较邻苯二甲醛消毒剂与强化戊二醛消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭效果。方法采用载体定量杀菌试验对两者的杀灭效果和连续使用稳定性进行比较。结果0.53%邻苯二甲醛消毒液作用3 h对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值为3.21,作用10 h杀灭对数值>6.10;而2.18%强化戊二醛消毒液作用3 h杀灭对数值>6.10;0.53%邻苯二甲醛消毒液连续使用7、14 d后,仍保持对芽孢有良好的杀灭能力。结论邻苯二甲醛消毒剂杀灭细菌芽孢的效果不如强化戊二醛,但可具备用于内镜高水平消毒效果和使用稳定性。

溴氯海因消毒片杀菌性能与腐蚀性的试验研究

为了解溴氯海因消毒片的杀菌效果,进行了载体定量杀菌试验与腐蚀性试验。结果,有效氯溴含量为 1200mg/L(有效溴含量为 632mg/L),作用 90min,对布片上枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭率达 99. 90%;以有效氯溴含量为 90mg/L(有效溴含量为 47mg/L),分别作用 8min和 6min,对布片上金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率均达 99. 90%;以有效氯溴含量为 1200mg/L(有效溴含量为 632mg/L)作用 90min,可有效破坏HBsAg的抗原性。有机物对其杀菌作用有影响。该消毒片存放于 54℃ 14d,有效氯溴含量下降率为 0. 96%。用含有效氯溴 1200mg/L水溶液浸泡 72h,对不锈钢无腐蚀性,对铜和铝有中度腐蚀,对碳钢重度腐蚀。

二氧化氯消毒液性能的试验观察

二氧化氯消毒液为一元制剂,为了解其性能,采用悬液定量杀菌试验、能量试验、现场试验以及毒理学评价进行了试验观察。结果,以含二氧化氯 100mg/L该消毒液作用 5min,对悬液内金黄色葡萄球菌、大肠杆菌杀灭对数值均>5. 0;以 500mg/L二氧化氯消毒液作用 30min,对枯草杆菌黑色变种芽孢的平均杀灭对数值 >5. 0。对大肠杆菌能量试验的最低有效浓度为 200mg/L二氧化氯。用 500mg/L二氧化氯水溶液作用 5min,对染于瓷碗、竹筷和桌面上的大肠杆菌杀灭对数值>3. 0,对黄瓜表面自然菌的杀灭对数均值为 1. 40。含二氧化氯 1mg/L的消毒液使水样中大肠菌群数下降至 0cfu/100ml,水温、有机物和pH值均对饮用水中二氧化氯杀菌效果有一定影响。该消毒液对小鼠急性经口LD50 >5000mg/kg,属于无毒级;对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性。结论该消毒液杀菌效果可靠,作用快速,毒性低,对饮用水和果蔬消毒具有应用价值。

一元制剂二氧化氯消毒粉剂杀菌性能及毒性试验研究

一元制剂二氧化氯消毒粉剂是由3种主要成分组成,为了解其杀菌效果和毒性,采用悬液定量杀菌试验和动物毒性试验进行了实验室研究。结果,以含30 mg/L二氧化氯该消毒剂水溶液对悬液内大肠杆菌作用5 m in,平均杀灭率为99.95%;15 mg/L二氧化氯消毒液对金黄色葡萄球菌作用5 m in,平均杀灭率为99.91%;60 mg/L二氧化氯消毒液对枯草杆菌黑色变种芽孢作用10 m in,平均杀灭率为99.94%。以200 mg/L二氧化氯消毒液作用5m in,可完全破坏悬液内HBsAg的抗原性。菌悬液内含体积分数25%以上小牛血清对其杀灭大肠杆菌效果有轻度影响。该二氧化氯消毒粉剂对小鼠急性经口LD50值大于5000 mg/kg,属无毒类物质;以100 mg/L二氧化氯消毒液对家兔皮肤刺激试验指数为0.63,属于轻度刺激性。结论,一元制剂二氧化氯消毒粉剂对细菌繁殖体和细菌芽孢具有良好的杀菌效果,动物毒性试验属无毒类物质、对家兔皮肤有轻度刺激性。

邻苯二甲醛与戊二醛杀菌效果的比较

邻苯二甲醛和戊二醛均为高效消毒剂,为了解二者杀菌效果的差别,采用载体定量杀菌试验对其进行了比较试验。结果,以含1000 mg/L的邻苯二甲醛或戊二醛,作用5 m in,对不锈钢片上大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭对数值均可达到5以上。以含10 g/L邻苯二甲醛或戊二醛作用3h,前者对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值为5.14,后者则只有4.43。但在推荐的使用浓度下作用4 h,5 g/L邻苯二甲醛对该细菌芽孢杀灭对数值为3.69;20 g/L戊二醛对该细菌芽孢杀灭对数值为6.17。结论,在相同浓度下,邻苯二甲醛杀灭细菌芽孢的效果比戊二醛强;在推荐的使用浓度下,戊二醛杀灭细菌芽孢的效果则好于邻苯二甲醛。

邻苯二甲醛杀菌效果影响因素的研究

为观察邻苯二甲醛对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭作用及其影响因素 ,采用悬液定量杀菌试验法对其进行了研究。结果 ,在 2 0℃条件下 ,以含 10g/L邻苯二甲醛水溶液作用 6 0min ,平均杀灭率为 99.896 % ;含量提高到 2 0g/L ,作用 6 0min ,平均杀灭率可达到 99.992 %。试验温度 4 0℃时 ,10g/L邻苯二甲醛作用 6 0min ,平均杀灭率为10 0 % ;药液pH值由 5 .5降低到 0 .5 ,杀灭率由原来的 99.896 %降到 98.795 % ,pH值 7.5 ,杀灭率可达到 99.994 %。10g/L邻苯二甲醛水溶液作用时间由 6 0min延长至 90min ,平均杀灭率则提高到 99.992 % ;醇类及某些表面活性剂可以明显提高邻苯二甲醛杀菌效果 ,用含 5g/L邻苯二甲醛的复方作用 6 0min ,对芽孢杀灭率达 10 0 % ;体积分数2 5 %以上小牛血清对邻苯二甲醛杀芽孢效果影响较轻。结果提示 ,邻苯二甲醛随其浓度增加、试验温度升高、作用时间延长、pH值增加 ,杀芽孢效果增强 ;pH值降低 ,可使杀芽孢效果下降。

用粘质沙雷菌试验评价Ⅱ级生物安全柜的研究

目的改进完善Ⅱ级生物安全柜生物测试的方法,观察两种指示微生物的空气生物学特性。方法采用改良美国NF-49标准方法,以粘质沙雷菌为指标菌检测生物安全柜防护性能。结果枯草杆菌黑色变种芽孢经过porton采样器冲击30 m in,其相对存活率只有37%;而粘质沙雷菌经30 m in冲击,其相对存活率为88%。枯草杆菌黑色变种芽孢经30 m in雾化,其相对存活率为53%;粘质沙雷菌雾化30 m in,其相对存活率为89%。实验环境中粘质沙雷菌本底检测结果菌落数均为0,粘质沙雷菌在自然界空气中不是优势菌株,不会对检测产生干扰。两台生物安全柜在不同风速下防护性能检测结果全部合格且与该安全柜出厂检测结果一致。结论粘质沙雷菌具有良好的雾化和冲击耐受性,受检的安全柜的人员、样品和环境防护作用合格,本研究建立的检测验证方法灵敏性和重复性与美国标准(NF-49)一致。

戊二醛熏蒸柜消毒灭菌效果与影响因素的实验研究

目的探讨戊二醛熏蒸柜的机器性能和消毒灭菌效果与影响因素。方法按卫生部《消毒技术规范》、羟胺缩合紫外分光光度法测定戊二醛含量,测定开机不同时间熏蒸柜内、工作环境空气中及关机后熏蒸柜中戊二醛气体-气溶胶浓度,熏蒸柜对不同微生物的杀灭效果。结果熏蒸柜开机2 h柜内戊二醛气体-气溶胶浓度达到91.93 mg/m3,熏蒸柜开机90 min对不锈钢片载体上金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞的平均杀灭对数值>5;开机60 min对染于手术剪、镊子上金黄色葡萄球菌的平均杀灭对数值>5;开机5 h能完全杀灭止血钳上的枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞。结论肯格王牌XZG型戊二醛熏蒸柜是一种高效、快速、安全、可靠、适用的医疗消毒器械。

邻苯二甲醛杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果及其影响因素的研究

为研究邻苯二甲醛最佳杀菌效果,采用载体定量杀菌试验方法对其在不同条件下杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果及其影响因素进行了观察。结果,邻苯二甲醛在pH值为8.3(碱性)条件下杀菌效果最好。在碱性条件下,邻苯二甲醛随浓度增加杀菌效果增强,19836mg/L邻苯二甲醛对载体上枯草杆菌黑色变种芽孢作用4h,杀灭对数值为6.35。添加表面活性剂的邻苯二甲醛以4959mg/L作用30min,对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值即可达5.77。而4959mg/L邻苯二甲醛纯品作用4h平均杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢对数值为3.69;50%小牛血清对含有表面活性剂的碱性邻苯二甲醛杀菌效果有轻微影响;在室温下连续反复浸泡器械35d,其杀芽孢效果基本不下降。结论,邻苯二甲醛对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀菌效果受其浓度、pH值和表面活性剂影响较大,以含表面活性剂的碱性邻苯二甲醛杀芽孢效果最好且性能稳定。

三氯异氰尿酸消毒片杀菌效果与毒性试验观察

为了解三氯异氰尿酸消毒片杀菌效果及毒性,以悬液定量杀菌试验和毒性试验进行了试验观察。结果,以含有效氯250 mg/L该消毒片溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌作用15 m in,杀灭对数值均>5.0,对白色念球菌的杀灭对数值>4.0。含2500 mg/L有效氯该消毒液对枯草杆菌黑色变种芽孢作用30 m in,杀灭对数值>5.0。对铜绿假单胞菌能量试验最低合格浓度为500 mg/L。用含250 mg/L该消毒液浸泡作用30 m in,对瓷盘上大肠杆菌的杀灭对数值>3.0。以含1000 mg/L消毒液作用15 m in,对物体表面自然菌的杀菌对数值为1.72。该消毒片对小鼠经口毒性LD50为>5000 mg/kg,属实际无毒级;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验阴性。结论,三氯异氰尿酸消毒片对细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭作用较强,动物试验属无毒级物质。

两种试验方法对3种含氯消毒剂部分消毒性能的评价

目的:了解试验方法对不同含氯消毒剂消毒性能评价的影响。方法:按照1999年版规定的载体浸泡定量杀菌试验和2002年版规定的悬液定量杀菌试验方法,对三种含氯消毒剂杀菌效果进行了比较。用1999年版载体法测定3种含氯消毒剂达到消毒合格所需的剂量均较低,有效氯50mg/L^200mg/L作用2·5min^10min,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率≥99·90%;有效氯1000mg/L^2000mg/L作用15min^20min,对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率≥99·90%。结果:按照2002年版规范,悬液法达到消毒合格的剂量均有不同程度的提高,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯200mg/L作用10min,健来牌含氯消毒剂有效氯600mg/L^700mg/L作用5min^10min,众智牌84消毒液有效氯500mg/L作用10min^15min。对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯2000mg/L作用40min,健来牌含氯消毒液有效氯6000mg/L作用60min,众智牌84消毒液有效氯5000mg/L作用30min。结论:用不同方法得到的3种消毒剂有效浓度有差异,杀菌效果有差异,用2002年版悬液定量杀菌试验方法得到的消毒效果较差。

微波杀菌规律的研究

试验结果表明，在６５０Ｗ微波照射下，杀灭敷料包中枯草杆菌黑色变种芽胞的Ｄ_（１０）值为１．９４分钟。随着微波的功率增大、物品含湿率增高、物品包装密封及与洗必泰协同，均有助于微波的杀菌。枯草杆菌黑色变种芽胞对微波的抗力强于嗜热脂肪杆菌芽胞。

酸氧化电位水对微生物杀灭效果的观察

目的 测定酸氧化电位水消毒液对细菌芽胞的杀灭效果和对HBsAg抗原性的破坏作用,了解该消毒液用于医疗器械消毒时的使用剂量。方法 采用载体流动浸泡定量杀菌试验、载体浸泡定性HBsAg抗原性的破坏试验和医疗器械模拟现场消毒试验,分别测定酸氧化电位水消毒液对细菌芽胞的杀灭效果、HBsAg抗原性的破坏作用和使用消毒效果。结果 酸氧化电位水消毒液在氧化还原电位值(1150±50)mV、pH值2.2±0.2和有效氧含量(55±10)mg/L时,流动浸泡作用15 min可杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞达消毒要求,载体浸泡作用10 min可破坏HBsAg的抗原性,连续流动浸泡消毒45 min,对干燥于医疗器械表面的枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率可达99.90％以上。