油梨根际土壤微生物群落及其共生网络对根腐病的响应

【目的】为研发根腐病绿色综合防控技术提供理论依据,有效推进油梨树种产业发展。【方法】本研究以百色市林业科学研究所的健康和根腐病发病油梨植株根际土壤为研究对象,并利用基于16S核糖体RNA(rRNA)和内部转录间隔区(ITS)扩增子高通量测序技术,分析健康和染病植株根际细菌和真菌群落结构、组成及多样性差异,比较细菌和真菌群落结构及其相互作用,确定土壤病原菌和有益菌的变化。【结果】染病植株相对于健康植株,根际细菌和真菌群落结构和多样性均没有显著性变化。变形菌门Proteobacteria、酸杆菌门acidobacteria、放线菌门actinobacteria、拟杆菌门bacteroidetes和绿弯菌门chloroflexi是油梨根际土壤优势细菌类群,子囊菌门ascomycota和担子菌门basidiomycota是油梨根际土壤优势真菌类群。在门分类水平、纲分类水平以及属分类水平上,细菌和真菌群落组成有明显的变化,但随着分类水平降低,群落组成变化越明显。此外,健康和染病油梨根际细菌群落α多样性显著高于真菌群落,而健康与染病之间细菌群落结构差异小于真菌。细菌物种之间的相互作用比真菌网络物种间的相互作用更紧密,并且负连接百分比和关节类群数量更多,细菌网络的稳定性更高。同样,油梨根际土壤细菌群落相对于真菌群落表现出更高的生态位宽度和生态位重叠。对根腐病有反应的细菌和真菌,如芽孢杆菌Bacillus、假单胞杆菌pseudomonas和溶杆菌lysobacter和球囊菌纲glomeromycetes,由于其在染病油梨根际土壤中的相对丰度均高于健康土壤,可以被视为相关的生物防治菌。【结论】根腐病并不会使油梨根际细菌和真菌群落结构和多样性发生显著性变化,但会使得一些有益菌的相对丰度增加,并且细菌比真菌对根腐病具有更高的抵抗力。

4种杀菌剂对甘薯茎腐病的防治效果研究

为筛选出防治甘薯茎腐病的有效药剂,研究了4种杀菌剂对甘薯茎腐病的防治效果,结果表明,薯苗生长前期用90%(质量分数,下同)氯溴异氰尿酸稀释液滴灌根部,防治效果可达94.64%;用70%甲基硫菌灵稀释液在栽插前浸苗20 min配合栽后每10 d滴灌1次,防治效果为68.53%;用可杀得3000(46%氢氧化铜)稀释液或6%春雷霉素水剂稀释液浸苗配合叶面喷施,防治效果均低于40%.因此,90%氯溴异氰尿酸稀释液可作为甘薯茎腐病防控的有效药剂.

甘薯茎腐病田间症状识别与快速镜检诊断研究

为寻找一种适应基层植物检疫站应用的甘薯茎腐病产地检疫方法,以有效控制其传播与蔓延。通过多年田间发病全程观察及对甘薯茎腐病306份茎部和270份其他部位样本的显微镜检查并与传统和分子生物学方法比较和验证。研究表明甘薯茎腐病症状识别加显微镜喷菌现象观察能准确区分甘薯细菌性茎腐病与其他病原引起的甘薯茎基部腐烂病。明确了甘薯茎腐病初发病期的茎基水渍状斑始现时是镜检最佳和最有效时期,茎部是显微镜镜检的最佳部位。初期甘薯茎腐病症状识别加显微镜镜检喷菌现象的方法与传统和分子生物学方法匹配的准确率在98%~100%。这一方法不但准确、快速、简便、直观,而且适于国内基层植检站应用。

河北省甘薯茎腐病研究初报

甘薯茎腐病是近几年在我国发现的一种新的细菌性病害,目前该病已在我国的福建、广东、江西、广西、海南、河南、重庆、江苏等地发生。2013年10月在对河北省甘薯病害的调查中在文安县发现了大量疑似甘薯茎腐病的病株,给当地的甘薯生产造成了严重的影响。经对疑似病株病原菌的分离纯化、柯赫氏法则验证、形态观察以及基于16SrDNA序列的分析,最终确定该病害为甘薯茎腐病,病原菌为达旦提狄克氏菌(Dickeya dadantii)。这是该病害首次在河北省被发现。

海南岛槟榔根部及茎部病害调查及病原鉴定

在2003￣2005年间对海南省儋州、澄迈、琼山、文昌、陵水、琼海、万宁、保亭、琼中、五指山、白沙、三亚、乐东等13个市(县)的部分槟榔园内发生的槟榔根部及茎部病害进行了调查与病原鉴定。共调查到海南岛槟榔茎腐及根腐病害及附生植物6类21种。其中真菌病害8种,非侵染性病害4种,地衣类3种,附生蕨类植物4种,寄生植物病害1种,病原未明病害1种(丛枝病)。其中能引起槟榔全株枯死的病因有2类12种,真菌8种,非侵染性病因4种。

皖南烟田三种土传病原物分子检测

为检测皖南烟田土传病害的分布,2011—2012年从皖南烟区烟田共采集土样51份,采用分子生物学方法对烟田土壤进行了烟草黑胫病、根黑腐病和青枯病检测。结果显示,烟田土壤中烟草黑胫病菌、根黑腐病菌和青枯病菌的阳性率分别为19.6%、41.2%和56.9%,3种烟草土传病原菌在皖南烟区多数烟田均有分布,其中青枯病菌检出率最高。本研究证明了应用分子生物学方法检测土传病原菌的可能性,生产上可为烟草种植提供理论依据。

三江平原不同年代大豆主栽品种粒茎比和主要病害抗性分析

为了研究三江平原不同年代大豆主栽品种粒茎比与主要病害（灰斑病、根腐病）的变化规律,选用不同年代18个同熟期的主栽品种为试验材料,采用田间小区试验方法,深入系统的开展研究工作。结果表明：随着年代的推进,粒茎比的变化趋势为逐年累加提高,变化幅度为0.44-0.88,极差为0.44,增长速度为0.73%,是品种产量提高的关键因素之一。品种对灰斑病抗性水平存在着较大的差异,抗病能力总体呈逐步增强的趋势,说明灰斑病危害得到了有效的控制。其中20世纪50、60年代品种均表现感灰斑病,70年代品种抗感交替过渡,到80年代以后的品种全部表现为中抗或抗灰斑病。品种对根腐病的抗性除个别品种（‘绥农4’、‘合丰45、55’、‘黑农48’）抗性水平突出外多数品种抗病性较差,抗病能力总体呈阶段性提高的趋势,其中抗病品种占22.22%,感病品种占77.78%。说明根腐病没有得到有效的控制,是当前育种与生产亟待解决的病害。

黄芪根腐病病株和健株根围微生物菌群变化分析

通过分析黄芪根腐病病株和健株根围微生物菌群的变化,探究根腐病的发病机理,寻找预警病害发生的生物指示因子,为土壤微生态的生物调控提供依据。试验通过菌落计数、PCR-DGGE和16S rRNA V3区基因测序的方法,分析不同年限下黄芪根围病/健土中微生物区系、多样性及群落结构的变化。结果表明:细菌作为黄芪根围土中的优势种群,是影响病土中微生物数量升高的关键因子,其多样性降低是影响病害加重的主要原因之一。假单胞菌属Pseudomonas和无色杆菌属Achromobacter为土壤中的优势菌群,健土中的1号和4号特异条带分别为未培养的假单胞菌Uncultured Pseudomonas sp.和荧光假单胞菌P.fluorescens;6号未培养假单胞菌Uncultured Pseudomonas sp.的丰度与根腐病发病率负相关,16号无色杆菌Achromobacter sp.的丰度则在3年生土壤中显著升高,随后急剧下降。上述4个菌可作为潜在的土壤健康或发病指示因子进一步研究。

不同土壤消毒药剂对甘薯2种土传病害的防治效果

为寻找能同时防治甘薯根腐病和茎线虫病的高效药剂,选择98%棉隆微粒剂等5种土壤消毒药剂,研究其对2种病害的防治效果及对甘薯产量的影响。结果表明,98%棉隆微粒剂对根腐病的防治效果最好,可达46.23%;其他药剂的防效为-5.92%~29.08%。土病消可湿性粉剂对茎线虫病的防治效果最好,可达87.79%;其他药剂处理的病薯率和病情指数与土病消可湿性粉剂处理差异不显著,防效为56.67%~80.35%。收获期测产表明,98%棉隆微粒剂对甘薯的增产效果最好,产量为23 491.80 kg/hm2,较空白对照增产35.33%;其他药剂处理较对照增产-31.59%~20.77%。建议生产上选择98%棉隆微粒剂,于甘薯定植前施用,以降低根腐病和茎线虫病对甘薯产量的影响。

棉隆及与生物菌肥配施对大棚秋番茄生长、产量及病虫草害的影响

为解决土传病害为害大棚秋番茄的问题,以棉隆、生物菌肥和大棚秋番茄为试验材料,采用大田对比的方法,对棉隆及与生物菌肥配施处理大棚土壤的效果进行研究。结果表明,棉隆单一处理大棚土壤抑制了秋番茄生长,使番茄第1穗果实膨大受到抑制,果实单果重也明显降低,对秋番茄茎基腐病和根结线虫发病率无降低作用,但明显抑制了杂草的生长。而棉隆+生物菌肥配施处理土壤可使秋番茄第1果穗产量明显高于对照和棉隆处理,且降低茎基腐病发病率达79.62%,降低根结线虫发病率15%,防治根结线虫病效果达30.3%。综上,棉隆+生物菌肥配施处理土壤是防治大棚秋番茄茎基腐病、根结线虫病和提高产量的有效方法。

山西省甘薯主要病害及防治技术研究进展

甘薯是山西省主要的杂粮作物,在农业产业发展中具有重要作用。近年来,甘薯病害种类不断增加,危害程度加重,造成新品种快速退化、产量降低,严重制约着山西省甘薯产业的发展。综述了影响山西省甘薯产量及品质的4种主要病害,即甘薯病毒病、茎线虫病、根腐病、黑斑病等及其对病原、危害症状、传播方式、防治措施等方面的研究进展,以期为控制甘薯病害发展、促进山西省甘薯产业标准化生产提供理论依据。

牡丹根腐病病株和健株根内微生物菌群的差异

为有效防控牡丹根腐病,采用Illumina MiSeq测序技术对牡丹健康及患病植株根部样本中细菌16S rRNA基因V5—V7可变区、真菌ITS基因进行高通量测序分析,以明确牡丹根腐病发病植株和健株根部组织中细菌、真菌菌群结构差异,解析牡丹根腐病的发生机制。结果表明,与健株相比,患病植株中细菌和真菌群落丰富度均降低;真菌种群多样性显著降低,但细菌种群多样性差异不大。细菌优势菌的相对丰度在门、属水平上发生了变化,与健株相比,患病植株中变形菌门(Proteobacteria)相对丰度明显增加,增加了34.03个百分点,厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度明显降低,降低了65.00个百分点;在属水平上,链霉菌属(Streptomyces)和固醇杆菌属(Steroidobacter)细菌相对丰度增加,分别增加了3.56、0.38个百分点,而假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)细菌相对丰度明显降低,其降低幅度为13.42个百分点。真菌优势菌的相对丰度在在门、属水平上也发生了显著变化,与健株相比,患病植株中担子菌门(Basidiomycota)相对丰度明显增加,增加了9.21个百分点,子囊菌门(Ascomycota)相对丰度明显降低,降低了1.61个百分点;Hymenula和Dactylonectria属相对丰度显著增加,增加了30.71、11.69个百分点,Unclassified-p-Ascomycota和外瓶霉属(Exophiala)真菌相对丰度明显降低,其降低幅度分别为18.28、4.41个百分点;同时推测病株样本中独有的真菌属如Kurtzmanomyces、Unclassified_f__Nectriaceae和Unclassified_o__Hypocreales可能与牡丹根腐病的发生关系密切。真菌功能类群预测结果表明,患病植株中与植物病原菌相关的类群及腐生菌类群显著高于健株。综上,牡丹根腐病改变了牡丹病株根部组织中细菌和真菌的菌群结构,尤其是发病根部组织中与植物病原菌相关的真菌种群相对丰度显著高于健康组织。

烤烟红花大金元“两黑一青”病的预防及补救措施

为进一步明确烟草"两黑一青"病的预防及补救措施,以烤烟红花大金元为研究对象,提出了调控土壤酸碱度、农家肥腐熟灭菌、培育健壮幼苗、带药移栽、带药追肥、适时揭膜培土和优化排水7项以截断病害感染源为前提的预防措施和几种药物综合治疗的补救措施,旨在为减轻"两黑一青"病对红花大金元的危害提供理论依据。

永济市芦笋三大病害的发生规律及防治方法

文章就永济市芦笋茎枯病、枯萎病和根腐病的三大病害发生规律进行了综述,提出了选用抗病品种、农业防治和合理使用农药等综合防治方法,建议在此基础上应加强生物防治技术的应用。

葡萄房枯病、褐斑病、栓皮病、扇叶病、蔓枯病和白纹羽病的识别与防治

介绍了葡萄房枯病、褐斑病、栓皮病、扇叶病、蔓枯病和白纹羽病的危害症状、发病特点,提出防治这些病害应采取农业防治和化学防治的综合防治方法。为减轻病害危害,提高葡萄的产量和品质提供了一定的依据。

西番莲茎基腐病果园土壤细菌群落多样性分析

西番莲(Passiflora edulis)茎基腐病是危害西番莲生产最为严重的土传病害之一,其致病机理尚未完全明确,目前没有较为可靠的治疗方法,严重影响西番莲产业的发展.本研究探究西番莲茎基腐病发病与土壤理化性质和土壤细菌群落多样性的相关性,以期为西番莲茎基腐病的综合防治提供理论依据.通过对水田、旱地和山地3种地形西番莲果园的茎基腐病发病率进行调查以及对其土壤理化性质进行测定,并采用高通量测序对不同地形土壤进行细菌16S rDNA的V4高变区序列测序,分析了土壤细菌群落相关性和多样性指数.水田的西番莲茎基腐病发病率最高(80.67%),旱地次之(52.67%),山地最低(15.33%).水田土壤的pH值和电导率最高(7.25和49.43 us/cm),旱地次之(5.18和48.27 us/cm),山地最低(4.57和39.73 us/cm).土壤细菌群落丰度是水田最高,旱地次之,山地最低,且染病植株土壤的细菌群落丰度高于正常植株土壤;细菌群落多样性是旱地最高,山地次之,水田最低.聚类分析表明,不同样地土壤中细菌群落结构的组间差异较大,而水田组内相似度低,旱地和山地组内相似度高.西番莲果园茎基腐病发病率与土壤理化性质、地形因子和细菌的丰度和多样性有明显的相关性.

我国甘薯新病害-茎腐病的研究初报

2006年以来广东省主要甘薯产区发现1种甘薯新病害,主要症状表现为叶片变黄,茎基部呈黑色水浸状腐烂,并逐渐沿茎枝向顶端腐烂,后整株倒伏、死亡。从甘薯病茎部分离得到了病菌,经柯赫法则验证为致病病原菌。根据病原菌的形态特征、培养性状、生理生化及16S rDNA序列分析,鉴定其为菊欧文氏菌(Erwinia chrysanthemi)。采用茎枝、菌液共培养法接种8个甘薯品种,结果表明8个品种均无抗病性,病原菌致病性较强。这是我国首次发现该病害。

甘薯茎腐病的研究进展

甘薯茎腐病是由达旦提狄克氏菌Dickeya dadantii Samson et al.引起的细菌性甘薯病害,属于我国新发生病害,其蔓延迅速、防治困难,严重影响甘薯的品质和产量,已成为我国南方甘薯产区主要病害之一。文章对该病症状、病原菌分类、致病机制、全基因组测序概况和防治措施等方面的研究进展进行了综述,并指出了今后的研究方向。

根腐病胁迫下设施韭菜根际土壤细菌群落多样性及结构演替

为分析设施栽培多年生韭菜根际土壤微生物群落结构和多样性,探寻韭菜根腐病感病程度与根际土壤微生物群落之间的关系,以辽宁省设施连作韭菜根际土壤为研究对象,应用Illumina MiSeq高通量测序技术,对病情指数不同地块的土壤进行16S r RNA基因V3-V4变异区序列扩增子进行分析,研究多年生韭菜感染根腐病后根际土壤细菌群落组成、结构及多样性变化。结果发现:从3组病情指数不同(H组:健康;Rl组:DI≤20的轻度发病组;Rh组:DI>20重度发病组)的18个根际土壤共获得1029093条有效序列,6104个OTU,经分类注释为39门,134个纲,336个目,573个科,1119个属,2353个种。α多样性指数表明,随着病情的加重韭菜根际土壤细菌群落的Shannon、Chao1、ACE指数呈现先增加后稍减少的趋势,即HRh>Rl。β多样性分组差异分析表明,感病根际土壤(Rl&Rh)与健康根际土壤(H)细菌群落结构、丰度均存在一定差异,韭菜感染根腐病后,变形菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、拟杆菌门相对丰度有所提高,而放线菌门和芽单孢菌门丰度减少。采用菌群差异LEfSe分析发现在属级以下水平Bacillus asahii和Bellilinea在感病韭菜根际中相对丰度显著降低(P<0.05,Wilcoxon秩和检验),而Bryobacter则在重度发病组(Rh)明显富集。db-RDA相关性分析表明,韭菜根际土壤细菌群落与根腐病病情指数DI明显相关,即随着感病程度加重细菌群落结构和多样性逐渐演替。综上分析发现,韭菜多年生宿根感染根腐病后,根际土壤中富集部分微生物类群,根际土壤细菌群落多样性发生改变,打破原有的群落平衡,细菌核心微生物类群由健康向亚健康发生演替,且与病害发生程度密切相关。

甘薯茎腐病菌的遗传多样性及致病力差异分析

为了解不同地区甘薯茎腐病菌Dickeya dadantii种群遗传多样性水平及致病力差异,采用重复序列PCR基因指纹(repetitive element palindromic PCR,REP-PCR)技术和薯片接种方法,对采自广东省、广西壮族自治区和重庆市的6个市区县的59株菌株进行分析。结果表明,5对引物对59株菌株扩增出41个清晰的条带,其中36个为多态性条带,每对引物的扩增条带数在4～10之间,平均为7.2。在物种水平上,有效等位基因数、Nei’s基因多样性指数和Shannon信息指数分别为1.4768、0.2801和0.4186,其中湛江种群多样性最高,南宁种群多样性最低;当遗传相似系数为0.79时,59株菌株可被划分为5个类群,类群划分与菌株来源地间有一定的相关性。此外,不同地区病菌种群间存在明显的致病力差异,其中合浦种群与湛江种群致病力最强,万州种群致病力较弱。表明甘薯茎腐病菌种群具有丰富的遗传多样性,不同地区的病菌种群存在明显的遗传多样性与致病力差异。