可溶性CD44分子对人眼小梁网细胞凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad表达的影响

背景研究表明可溶性CD44分子（sCD44）在原发性开角型青光眼（POAG）患者眼中的质量浓度高于正常人，POAG患者房水中sCD44水平与小梁网细胞凋亡相关蛋白的表达是否有关及其对POAG的共同作用机制至今尚不明确。目的探讨不同质量浓度的sCD44对POAG患者小梁网细胞凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad表达的影响。方法收集POAG患者行小梁切除术中切除的小梁网组织，采用组织块培养法原代培养小梁网细胞，并用免疫细胞化学法对培养细胞进行鉴定，将第3代的小梁网细胞按随机数字表法随机分为6个组，分别在无血清培养基中加入含终质量浓度为0（对照组）、1、5、10、25、50μg／L的sCD44，培养细胞48h。采用细胞计数试剂8（CCK-8）法和ELISA法检测小梁网细胞中凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad蛋白的表达。结果培养的细胞经层黏连蛋白（LM）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）单克隆抗体、纤维连接蛋白（FN）免疫组织化学染色呈阳性反应。CCK-8法检测0、1、5、10、25、50μg／LsCD44作用48h后小梁网细胞吸光度（A450）值分别为：0．2460±0．0019、0．1874±0．0015、0．1570±0．0016、0．1302±0．0019、0．1084±0．0018、0．0940±O．0020，差异有统计学意义（F=14．922，P=0．000），各实验组A450值均低于对照组，差异均有统计学意义（P=0．013、0．008、0．011、0．005、0．004）。ELISA法检测表明，0、1、5、10、25、50p^g／LsCD44作用48h后小梁网细胞中bad蛋白质量浓度分别为（114．8461±2．9560）、（137．8270±2．4259）、（161．4194±3．7381）、（170．9453±3．2006）、（221．2252±4．3738）、（324．6167±4．4220）ng／L，差异有统计学意义（F=16．610，P=0．000），各实验组小梁网细胞中bad蛋白质量浓度均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P=0．017、0．013、0．008、0．007、0．006）。结论sCD44在一定质量浓度范围内可促进POAG小梁网细胞的凋亡，并且能上调凋亡调节蛋白bel-2相关死亡因子bad蛋白的表达。