RNAi沉默β-arrestin2基因对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响

目的:通过体外实验观察β-arrestin2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响。方法:针对β-arrestin2基因设计siRNA序列,克隆到空载体PGPU6/GFP/Neo,转化DH5α菌株,提取质粒,进行测序分析。在脂质体lipofectamineTM2000的介导下转染Bcap37细胞,同时转染空白对照组及阴性对照组。转染后用定量Western blot检测Bcap37细胞β-arrestin2蛋白的表达情况,流式细胞仪检测Bcap37细胞的凋亡情况。结果:我们的研究表明,β-arrestin2的siRNA能有效下调β-arrestin2的表达,与对照组相比,β-arrestin2干扰组β-arrestin2的表达明显下降(P<0.05);β-arrestin2干扰组Bcap37细胞凋亡率显著高于对照组。结论:β-arrestin2干扰组能有效降低β-arrestin2的表达,有效促进Bcap37细胞凋亡;β-arrestin2可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。

体外评估多烯紫杉醇与顺铂给药顺序依赖性的相互作用(英文)

目的 :将多烯紫杉醇与顺铂以不同给药顺序处理人乳腺癌细胞研究两者细胞毒性的相互作用。方法 :应用一系列体外实验如DNA片段分析、MTT测定、流式细胞仪分析和蛋白印迹法分析两者以不同给药顺序的实验结果。结果 :显示当同时给药或顺铂在多烯紫杉醇前给药则发生拮抗作用 ;多烯紫杉醇在顺铂前给药则不发生拮抗作用。结论 :顺铂干扰多烯紫杉醇对癌细胞的捕获和细胞凋亡 ,并影响多烯紫杉醇诱导的bcl 2磷酸化 ;

天麻素在Caco-2细胞及Bcap37、Bcap37/MDR1细胞模型中的转运和摄取(英文)

天麻素是传统中药天麻的有效活性成分。本研究以Caco-2细胞、Bcap37和Bcap37/MDR1为模型,体外评价天麻素在Caco-2细胞模型上的转运过程以及天麻素与P-糖蛋白之间的相互作用。在50～500μmol.L?1浓度内,天麻素的表观渗透系数(Papp)比值<2.0,与转运方向无关,且不受P-糖蛋白的经典抑制剂(维拉帕米和GF120918)的影响。天麻素在Bcap37、Bcap37/MDR1细胞中的积聚呈浓度依赖性,且不干扰罗丹明123在Bcap37/MDR1细胞中的积聚。结果表明,天麻素在Caco-2细胞模型上的转运方式以被动转运为主,天麻素不是P-糖蛋白的底物和抑制剂。

微囊化Maspin基因修饰细胞对乳腺癌细胞Bcap37运动及黏附功能的影响

目的探讨Maspin在抗肿瘤转移过程中的作用及微囊化基因修饰细胞治疗恶性肿瘤的可能性和可行性。方法将微囊化Maspin基因修饰的中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO细胞)与乳腺癌细胞Bcap37进行共同培养,观察Bcap37细胞运动功能的变化;观察Bcap37细胞对同质细胞(Bcap37)和异质细胞(人血管内皮细胞ECV204)黏附功能的变化;同时观察被干预后的Bcap37细胞黏附分子CD44v6和E2Cadherin表达的改变。结果经微囊化Maspin基因修饰的CHO细胞处理后的Bcap37细胞,其迁徙功能明显减弱,对Bcap37细胞同质黏附功能明显增强,对ECV204细胞异质黏附功能明显减弱;经微囊化CHO/Maspin细胞处理后,Bcap37细胞的黏附分子E2Cad表达增强,而CD44v6表达有所降低。结论微囊化Maspin基因修饰的CHO细胞对乳腺癌细胞Bcap37的运动和黏附功能有一定影响;Maspin通过抑制肿瘤细胞的运动功能、异质黏附功能和增强同质黏附功能抑制肿瘤细胞的转移;微囊化基因修饰细胞可以用于治疗恶性肿瘤。