蝎毒多肽提取物对人膀胱癌T24细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用及其机制。方法采用体外培养法培养T24细胞,应用MTT法检测对照组和实验组(不同浓度PESV)处理膀胱癌T24细胞后的增殖变化;倒置显微镜观察其对T24细胞形态的影响;RT-PCR检测实验组(低剂量、中剂量及高剂量)BAX和Bcl-2的mRNA的表达变化。结果:PESV能显著抑制T24细胞的增殖,呈现时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.01),24h抑制率接近50%的T24细胞生长浓度为75mg/L;低、中及高浓度PESV均可致T24细胞生长明显抑制,出现典型细胞凋亡形态;和对照组比较,实验组BAXmRNA和BAX/Bcl-2mRNA表达升高,Bcl-2mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PESV对膀胱癌T24细胞具有明显抑制作用,其诱导T24细胞凋亡的作用可能与上调BAX和下调Bcl-2的表达有关。

局部进展期直肠癌术前新辅助治疗后凋亡相关蛋白检测及临床意义

目的通过局部进展期直肠癌患者术前同步放化疗前、后的凋亡相关蛋白的检测，探讨放化疗诱导直肠癌凋亡的机制并评价其疗效。方法应用免疫组化EnVision法检测术前同步放化疗前、后Bcl—XL、Bax表达，结合患者临床、病理各项指标，进行统计学分析和评价。结果术前同步放化疗后肿瘤细胞退缩明显（TRG2＋TRG3＋TRG4）患者13例，无退缩（TRGO＋TRGl）患者21例，术前同步放化疗前、后Bcl—XL阳性率分别为58．8％（20／34）和52．9％（18／34），放化疗前、后Bcl-XL表达变化与放化疗前肿瘤大小，放疔后肿瘤细胞退缩以及手术方式之间差异有统计学意义。术前同步放化疗前、后Bax阳性率分别为32．4％（11／34）和44．1％（15／34），Bax表达变化与放疗后肿瘤细胞退缩间差异无统计学意义。术前同步放化疗前、后Bcl—XL／Bax比值之间差异有统计学意义（χ^2=9．607，P=0．048）。术前同步放化疗前、后Bcl—XL/MBax比值与肿瘤细胞退缩之间差异无统计学意义。按照术前同步放化疗是否加热疗进行分层分析，发现单纯放化疗组Bcl—XL表达变化与手术方式之间差异有统计学意义（χ^2=13．964，P=0．007），单纯放化疗组Bax表达变化与肿瘤肌层浸润和放疗后肿瘤细胞退缩之间差异有显著性意义（χ^2=10．806、10．455，P〈0．05）。结论术前同步放化疗可以改变Bcl—XL、Bax表达，影响直肠癌细胞凋亡和患者治疗效果，Bcl—XL表达减低和Bax表达上调在术前同步放化疗诱导直肠癌细胞凋亡中具有重要的临床作用，可有效提高直肠癌放化疗的效果。

白细胞介素11在IEC-6细胞损伤时的抗凋亡机制研究

目的研究白细胞介素11(IL-11)在正常大鼠空肠上皮细胞(IEC-6)损伤时的抗凋亡机制。方法通过脂多糖(LPS)作用于IEC-6,建立了坏死性小肠结肠炎体外模型,加入外源性IL-11,建立IL-11治疗模型。采用免疫印迹方法研究IL-11对大鼠肠道上皮细胞磷酸化STAT3、Bax及Bcl-2蛋白含量的表达变化影响。数据以均数±标准差(x珋±s)表示,采取one-Way-ANOVA方差分析,用SPSS 11.0统计软件进行分析,P<0.01差异有统计学意义。结果定量分析结果表明,LPS致IEC-6细胞损伤时,Bax表达增强,IL-11处理可抑制Bax的表达。P-STAT3及Bcl--2蛋白含量在LPS致IEC-6细胞损伤时表达显著减少,IL-11处理可上调上述两种蛋白的表达。结论 LPS致IEC-6细胞损伤时,外源性IL-11可能激活Jak/STAT信号通路中关键分子STAT3,继而上调Bcl-2,下调Bax发挥抗凋亡作用。

异黏蛋白、Bcl-2和上皮型钙黏蛋白在鼻黏膜恶性黑色素瘤中的表达及意义

目的探讨鼻黏膜恶性黑色素瘤中异黏蛋白（metadhein，MTDH）、Bcl-2和上皮型钙黏蛋白（E—cadherin）的表达及其临床意义。方法免疫组化法检测74例鼻黏膜恶性黑色素瘤组织中MTDH、Bcl．2和E—cadherin的表达情况，并分析其与预后的关系。以SPSS19．0软件进行数据分析。结果鼻黏膜恶性黑色素瘤组织中MTDH、Bcl．2和E—cadherin的阳性率分别为75．7％（56／74）、24．3％（18／74）和28．4％（21／74）。MTDH阳性患者的肿瘤转移率（67．9％）高于MTDH阴性患者（33．3％），差异有统计学意义（P=0．009）。Bcl-2阴性患者的总生存期较Bcl-2阳性患者短（HR=2．023，P=0．025）。E—cadherin的表达与MTDH的表达呈负相关（r=-0．315，P=0．006）。结论鼻黏膜恶性黑色素瘤组织中MTDH阳性、Bcl-2阴性提示预后差，而E—cadherin对预后判断的价值有待进-步研究。

木犀草素对小鼠T淋巴细胞体外增殖及凋亡的作用

目的：研究木犀草素对小鼠T淋巴细胞体外增殖及凋亡作用的影响。方法：设置刀豆蛋白A（Con A）组和空白组,设置3个木犀草素药物组,终质量浓度分别为2.5,5,10 mg·L-1,细胞毒性活性检测-8（CCK-8）法检测各组细胞增殖情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法（TUNEL）和Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞凋亡通路蛋白B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）表达水平。结果：CCK-8实验结果显示3个木犀草素药物组细胞数明显低于Con A组和空白组（P〈0.01）,差异有统计学意义。TUNEL实验结果显示,Con A组的凋亡细胞数量显著低于3个木犀草素药物组（P〈0.01）,差异有统计学意义。流式细胞仪检测结果显示3个木犀草素药物组的细胞凋亡率显著高于Con A组和空白组（P〈0.01）,细胞凋亡率随着药物浓度增加而增高,呈明显的量-效关系。Western blot检测结果显示,2.5,5 mg·L-1木犀草素药物组中Bcl-2表达量高于对照组,Bax表达量低于对照组;10 mg·L-1药物组中Bcl-2表达量低于对照组,Bax表达量高于对照组。结论：2.5,5,10 mg·L-1木犀草素能够抑制T淋巴细胞增殖,能够诱导T淋巴细胞凋亡,10 mg·L-1木犀草素可能主要通过下调Bcl-2,上调Bax影响线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡,2.5,5 mg·L-1木犀草素可能通过其他通路诱导细胞凋亡。