二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x_1表达的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架对犬冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x1表达的影响。方法犬进行冠状动脉左回旋支支架植入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架和对照支架分别植入左回旋支的远端和近端,术后28d处死,进行细胞凋亡检测、Bcl-x1免疫组化和蛋白质印迹杂交。结果术后28d,二烯丙基三硫化物涂层支架组细胞凋亡率为(9.18±3.41)%高于对照支架组的(3.28±1.74)%,P<0.01。对照支架组血管壁内Bcl-x1蛋白表达为,12.17±5.02,显著高于二烯丙基三硫化物涂层支架组的5.46±2.50,P<0.05。蛋白质印迹杂交也显示对照支架组有高水平Bcl-x1蛋白表达(37.52±6.15),明显高于二烯丙基三硫化物涂层支架组(10.48±2.75),P<0.01。结论二烯丙基三硫化物可逆转血管损伤后内膜中Bcl-x1的高表达,促进细胞凋亡,可能是二烯丙基三硫化物涂层支架抑制内膜增生的机制之一。

BCL-x_1和BCL-2在喉鳞状细胞癌细胞中的表达

目的探讨B细胞淋巴瘤 /白血病 2 (B celllymphoma/leukemia 2 ,BCL 2 )基因及B细胞淋巴瘤/白血病 x基因长片段 (B celllymphoma/keukemia x ,long ,BCL x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素 α对其表达的影响。方法采用SABC免疫组织化学染色 ,观察比较干扰素治疗 1 0周后喉癌组织( 2 5例 )和未治疗组 ( 2 7例 )喉癌组织中喉鳞状细胞中BCL x1、BCL 2蛋白的表达。结果①治疗组喉癌组织中BCL x1表达OD值为 0 .1 2 ,未治疗组OD值为 0 .2 1 ,两组表达率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;② 5 2例喉癌组织中均无BCL 2蛋白表达。结论BCL x1可能在喉癌细胞凋亡中发挥抗凋亡作用 ,干扰素 α可能通过抑制BCL

重组腺病毒介导的BCL-X1基因过表达治疗急性肝衰竭大鼠的研究

目的明确肝细胞凋亡与急性大鼠肝衰竭模型肝组织损伤程度的关系；明确BCL—X1过表达对急性肝衰竭大鼠肝脏的治疗保护作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、处理组三组。正常对照组及模型组给予门静脉注射生理盐水，处理组予门静脉注射重组BCL-Xl腺病毒。预处理7d后模型组及处理组予D-氨基半乳糖＋脂多糖建立肝衰竭模型，观察各组大鼠的BCL-X1蛋白的表达、ALT、AST水平、肝细胞凋亡率及死亡率。结果BCL．XI基因在处理组的表达高于在模型组中的表达；建立大鼠肝衰竭后6h，处理组的血清ALT、AST水平低于模型组（P〈0．05）。处理组的肝细胞凋亡率低于模型组（P〈0．05）。处理组的大鼠死亡率低于模型组（P〈0．05）。结论在急性肝衰竭大鼠中，肝细胞的凋亡率与大鼠的死亡率呈正相关；BCL-XI在肝组织中的过表达能减少急性肝衰竭模型大鼠的肝细胞凋亡率，降低急性肝衰竭大鼠的死亡率。

用显微注射法建立转bcl-x_l基因小鼠

建立转bcl xl基因小鼠 ,继而传代建系 ,用于缺血性脑血管疾病的研究。采用显微注射法 ,将人bcl xl基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠 ,然后作PCR ,Southern blot ,mRNA ,Western blot检测以获得阳性鼠。实验中注射受精卵 16 5 4枚 ,移植卵数 14 4 8枚 ,受体鼠 4 9只 ,怀孕鼠 7只 ,子代鼠 13只 ,整合数 4只并均有表达 ,植入受精卵的存活率 83% ,受精卵的总存活率 0 .78% ,移植鼠的怀孕率 14 .3% ,整合效率 30 .7% ,总有效率为 0 .2 4 %。初步获得了转bcl

Bcl-x_l和Bcl-2在鼻息肉组织嗜酸粒细胞中的表达

目的 探讨B细胞淋巴瘤 白血病 2 (B celllymphoma leukemia 2 ,Bcl 2 )基因及B细胞淋巴瘤 白血病 x基因长片段 (B celllymphoma leukemia xlong ,Bcl xl)在鼻息肉组织嗜酸性粒细胞中的蛋白表达及鼻腔应用二丙酸倍氯米松 (biclomethasonedipropionate,Bdp)对其表达的影响。方法 采用May Gr櫣ｎｗａｌｄ Giemsa(MGG)染色和免疫组织化学染色 ,观察比较经Bdp治疗 10～ 12周鼻息肉组织 (2 5例 )和未治疗鼻息肉组织 (2 7例 )中嗜酸粒细胞的浸润状态和对Bcl xl,Bcl 2蛋白的表达。结果 ①治疗组鼻息肉组织中嗜酸粒细胞的浸润程度弱于未治组 ,两者间差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ;② 5 2例鼻息肉组织均无Bcl 2蛋白的表达 ;③治疗组Bcl xl 表达率为 2 0 .0 % ,未治组表达率为 48.1% ,2组的表达率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 Bcl xl 可能在鼻息肉组织嗜酸粒细胞凋亡中发挥抗凋亡作用 ,糖皮质激素可能通过抑制Bcl

超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究

目的评价超声微泡介导bclxl基因抗视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用。方法体外混合培养LongEvans大鼠RGCs,并建立N甲基D天冬氨酸(NMDA)损伤的RGCs凋亡模型。将体外培养的RGCs分为A组(正常对照组),B组(NMDA组),C组(bclxl转染+NMDA组);其中C组在加入NMDA前48h用超声微泡介导bclxl转染RGCs。转染48h后采用免疫组化分析转染细胞和未转染细胞的bclxl蛋白水平;加入NMDA36h后采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色检测细胞凋亡的形态特征,琼脂糖电泳检测细胞凋亡DNA片断。结果免疫组化检测表明转染细胞与未转染细胞的bclxl蛋白表达水平有差异,AO/EB检测发现B组可见大量凋亡小体,C组可见少许凋亡细胞。琼脂糖电泳检测亦发现B组呈典型的DNA“梯度”条带,而A组和C组无明显的DNA“梯度”条带。结论超声微泡介导bc1xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡有一定作用,有可能为视网膜视神经疾病的基因治疗提供一种新的方法。

大鼠液压脑损伤后bax和bcl-X_L的表达改变在mRNA和蛋白水平的相关性

目的 探讨脑创伤后bax和bcl xL 在mRNA和蛋白水平的变化规律及其与神经细胞凋亡发生、发展的关系。方法 在液压脑损伤模型中 ,应用逆转录聚合酶链反应、免疫组化分别检测大鼠脑创伤后不同时程bax和bcl xL 的表达 ;采用凋亡原位末端标记、电镜超微结构、DNA凝胶电泳观察脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征。结果 伤后 6h ,bcl xL mRNA下调 [伤侧半球为对侧的 (6 7.42± 7.5 4) % ],bcl xL 蛋白水平下降 [伤侧为对侧的 (85 .85± 5 .72 ) % ]。伤后 3d ,bcl xL mRNA和bcl xL 蛋白表达分别为对侧的 (39.97± 3.6 1) %和 (5 7.5 0± 6 .2 1) % ;baxmRNA和bax蛋白分别为对侧半球的 (2 0 3.95± 17.5 3) %和 (189.0 2± 7.2 3) %。伤后bax/bcl xL 比率升高比细胞凋亡提前出现 ,早期由于bcl xL 的表达下降 ,后期主要是由于bax的升高所致。结论 细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 ;脑创伤对bax和bcl xL 的调节发生在转录水平以前的某一环节。bax/bcl xL 平衡体系的维持或紊乱影响脑创伤后神经细胞生存或死亡。

Bcl-xl在结肠癌中的表达及意义

为了探讨 bcl-xl在结肠癌组织中的表达及与结肠癌发生、发展、转移的关系 ,采用免疫组织化学法检测 3 1例结肠癌及配对正常结肠粘膜中 bcl-xl表达。结果显示 ,bcl-xl在结肠癌组织中表达增强 ,可能参与结肠癌的发展。

白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响

目的从基因水平研究白花蛇舌草对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及其可能的作用机制。方法采用人肝癌Bel7402细胞常规体外培养,随机设定空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组、白花蛇舌草组。倒置显微镜直接观察细胞形态变化。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数。采用MTT法检测白花蛇舌草对癌细胞的生长抑制作用。RT-PCR半定量法检测Bcl-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变;凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P<0.01);细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P<0.01);上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。

BAD、p-BAD及p-AKT蛋白在乳腺癌癌变过程中的表达及意义

用免疫组织化学S-P法检测131例乳腺石蜡包埋组织、Western Blotting法检测27例乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中Bcl-xl/Bcl-2相关死亡启动子(BAD)、磷酸化Bcl-xl/Bcl-2相关死亡启动子(p-BAD)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(p-AKT)的表达情况,分析三种蛋白在乳腺癌组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系。结果免疫组化结果显示在乳腺癌癌变过程中三种蛋白表达阳性率呈递增趋势,三种蛋白在乳腺普通导管增生和重度不典型增生及原位癌间阳性表达率差异有统计学意义(P值分别为0.022、0.023、0.001);p-BAD蛋白在重度不典型增生及原位癌组与浸润性导管癌组间差异有明显统计学意义(P=0.004)。三种蛋白与乳腺浸润性导管癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小无明显关系,但均与组织学分级相关(P值分别为0.026、0.038、0.026)。p-AKT蛋白表达与腋窝淋巴结转移有关(P值为0.016)。Western Blotting结果显示乳腺癌组织中三种蛋白含量明显高于癌旁组织(P值分别为0.002、0.002、0.003)。在乳腺癌组织中BAD与p-BAD及p-BAD与p-AKT蛋白表达量呈正相关性(P值分别为0.011、0.032)。认为这三种蛋白表达水平可提示乳腺导管非典型增生向乳腺癌的转化潜能;PI3-K/Akt传导路径在乳腺癌癌变过程中具有重要作用。

线粒体与细胞凋亡

凋亡是机体细胞的一种程序性死亡。线粒体作为细胞能量代谢的场所,不仅能诱导细胞凋亡,还是细胞凋亡的执行者。线粒体内的细胞色素C和细胞凋亡诱导因子参与凋亡的诱导,同时Caspase3、7、9还参与线粒体/细胞色素C诱导的细胞凋亡机制,线粒体内的Bc l-2和Bc l-X1也参与细胞凋亡的调节。对线粒体生命代谢活动的了解及运用对我们认识机体发生、发育及衰老有重要意义。

去除雄激素对前列腺癌中凋亡抑制蛋白 Bcl- 2和 Bcl- X_L 表达的影响

的 :探讨去除雄激素对人前列腺癌 ( PCa)细胞中凋亡抑制蛋白 Bcl-2和 Bcl-XL 蛋白表达的影响。方法 :采用雄激素依赖 PCa细胞株 L NCa P为研究对象 ,雄激素非依赖 PCa细胞株 PC-3为对照 ;以 Western印迹法检测去除雄激素后 Bcl-2和 Bcl-XL 蛋白的表达。 结果 :在 L NCa P中去除雄激素 12 h后 Bcl-2蛋白的表达开始升高 ,到 2 4h最明显 ,而去除雄激素 10h后 Bcl-XL 蛋白表达开始降低 ,在 2 4h达最低。而在 PC-3中去除雄激素前后未见 Bcl-2和 Bcl-XL 蛋白表达改变。 结论 :去除雄激素可促 PCa细胞中 Bcl-XL 蛋白表达降低 ,可能是手术或药物去势治疗前列腺癌的机制之一 ,Bcl-2蛋白的表达升高可能和后期 PCa雄激素非依赖性生长有关。

PCNA及凋亡相关基因蛋白在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的:分析PCNA、Bcl-xl、bak蛋白在翼状胬肉中的表达,探讨其与翼状胬肉增殖的关系。方法:应用免疫组化法对40例翼状胬肉组织中PCNA、Bcl-xl、bak蛋白的表达进行观察和分析。结果:PCNA在翼状胬肉中的阳性表达率显著高于正常结膜(P<0.01)。Bcl-xl主要表达于翼状胬肉的上皮基底层,正常结膜无表达。bak在翼状胬肉与正常结膜中的表达差异无显著性。PCNA与Bcl-xl表达呈正相关。结论:翼状胬肉的发生、发展与PCNA和Bcl-xl、bak的异常表达有关,可能是细胞异常增殖和凋亡失衡的结果。

四逆汤在过氧化氢引起的心肌细胞氧化应激性损伤中的保护效应

目的:观察四逆汤对乳鼠心肌细胞在过氧化氢损伤中的保护效应,探讨Bcl- xL/xSmRNA在四逆汤抗过氧化氢损伤保护心肌细胞中的作用。方法:采用过氧化氢诱导损伤制备乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含不同浓度的四逆汤含药血清DMME培养基培养细胞,应用流式细胞仪检测培养细胞的存活率,筛选合适的四逆汤含药血清培养细胞的浓度;用1mmol/L过氧化氢处理心肌细胞,分别在处理0. 5h, 1h, 2h, 3h, 4h, 8h后检测细胞内丙二醛(MDA)和过氧化物歧化酶(SOD)的活性,并用流式细胞仪检测不同作用时间的细胞凋亡率和坏死率;在过氧化氢处理心肌细胞1h和8h后,收获细胞,检测细胞胞浆Bcl- xL和Bcl- xSmRNA的表达情况。结果:采用含15%四逆汤含药血清的DMEM培养基是心肌细胞生长的合适浓度;过氧化氢对心肌细胞的损伤程度与处理时间成正相关;与单纯过氧化氢处理组相比,四逆汤含药血清组细胞内MDA的含量降低,SOD的活性增加,细胞的凋亡率和坏死率降低,Bcl- xLmRNA表达增加,Bcl- xSmRNA表达减少。结论:四逆汤含药血清有较好的抗氧化应激性损伤保护心肌细胞的作用,这种保护作用可能通过增加Bcl- xLmRNA的表达,降低Bcl- xSmRNA的表达来实现。

耳、鼻、咽、喉

041273 BC1-X1反义寡核苷酸对裸鼠鼻咽癌移植瘤抑制作用的研究/闵玲…∥中华肿瘤杂志.-2004,26(1),-14～16 实验建立裸鼠人NPC模型,接种肿瘤细胞后24h内将bc1-x1 ASODN、序列对照寡核苷酸(ODN)皮下注射进行治疗。观察肿瘤变化及组织学改变、bc1-x1 mRNA及其蛋白的表达。结果:bc1-x1 ASODN治疗组裸鼠NPC的生长明显受抑,抑瘤率为41.7%,其对应的bc1-x1

Mcl-1介导去因子饥饿诱导的人骨髓病细胞系XG-7凋亡(英文)

目的 研究去lL 6饥饿引发的人骨髓瘤细胞系XG 7凋亡以及三种Bcl 2家族抗凋亡蛋白 (Bcl 2 ,Bcl xL,Mcl 1)在凋亡发生过程中的作用。方法 采用碘化丙腚 (PI)染色和流式细胞分析术确定去IL 6饥饿引发的XG 7细胞凋亡效应 ;采用免疫印迹方法检测Bcl 2家族分子在XG 7细胞中的表达情况。结果 经去IL 6饥饿处理一定时间后 ,可观察到一定比例的凋亡XG 7细胞 ,同时三种抗凋亡蛋白之一的Mcl 1在XG 7细胞中的表达明显下调。在经过去因子饥饿处理的XG 7细胞中重新补加IL 6 ,则细胞凋亡被明显抑制 ,同时Mcl 1表达上调结论 Mcl 1在去IL 6饥饿所引发的XG 7细胞凋亡过程中具有重要作用 ,而Bcl 2 ,Bcl xL

基底细胞癌Bcl-2、Bax、Bcl-xl蛋白免疫组化表达的定量研究

目的 通过对基底细胞癌 Bcl-2、 Bax、 Bcl-xl蛋白表达的研究，探讨 3种蛋白在基底细胞癌发生、发展中的作用。 方法 按病理亚型将 46例基底细胞癌分为非侵袭组（ 21例）和侵袭组（ 25例），采用免疫组化 SP法检测 Bcl-2、 Bax、 Bcl-xl蛋白在石蜡切片上的表达，并对组化结果进行图像分析以获得平均光密度和 Bcl-2/Bax的比值。结果 非侵袭性基底细胞癌组 Bcl-2蛋白表达水平和 Bcl-2/Bax的比值高于侵袭性基底细胞癌组， P值分别为 0.005和 0.044;两组间 Bcl-xl、 Bax蛋白表达水平的差异无显著性， P值分别为 0.097和 0.979。结论 Bcl-2、 Bcl-xl、 Bax蛋白可能参与了基底细胞癌的发生、发展。

正己烷对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控基因影响

目的观察正己烷对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控基因bcl-2、bax、bcl-xl、xiap mRNA表达的影响。方法 48只成年雌性Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别给予浓度为0,3.01,9.03,27.1 g/m3正己烷静式吸入染毒;每天4 h,每周6 d,持续6周;染毒结束待大鼠进入动情期,处死并提取卵巢颗粒细胞,并采用实时荧光定量PCR法测定颗粒细胞bcl-2、bax、bcl-xl、xiap mRNA表达水平。结果随着染毒剂量增加,各组bcl-2 mRNA表达呈下降趋势(2-△△CT值分别为1.069,0.762,0.698,0.690),bax mRNA表达呈上升趋势(2-△△CT值分别为1.039,1.242,1.317,1.895),各染毒组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各染毒组bcl-xl mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05);27.1g/m3染毒组xiap mRNA表达(0.694)低于对照组(0.999),差异有统计学意义(P<0.05)。结论正己烷上调大鼠卵巢颗粒细胞bax,下调bcl-2、xiap mRNA表达,可能是正己烷致使卵巢颗粒细胞凋亡的机制之一。