基于代谢组学方法研究乌头碱和苯甲酰乌头原碱对BeWo细胞的毒性机制

以BeWo细胞建立体外胎盘模型,采用基于气相色谱与质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,研究乌头碱及其代谢产物苯甲酰乌头原碱的生殖毒性机制。收集不同时间点(0,6,12,24和36 h)药物干预后的BeWo细胞裂解液,通过GC-MS/MS分析获得细胞代谢轮廓;正交偏最小二乘法-判别分析(OPLSDA)显示,BeWo细胞内代谢物在药物干预后呈动态变化。进一步通过变量重要性投影(VIP)值和单因素方差分析筛选差异性代谢物,最终鉴定出脯氨酸、甘氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、乙酰谷氨酰胺、赖氨酸、组氨酸、葡萄糖、半乳糖、琥珀酸共11个差异性代谢物。经Metaboanalyst分析,主要涉及谷氨酰胺和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,赖氨酸降解,精氨酸和脯氨酸代谢,组氨酸代谢等6条代谢通路。实验结果表明,乌头碱和苯甲酰乌头原碱主要通过影响氨基酸代谢对BeWo细胞产生生殖毒性作用。

基于代谢组学方法研究生半夏和姜半夏对BeWo细胞的毒性机制

目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析生半夏和姜半夏干预后细胞内代谢物改变,来评价生半夏和姜半夏潜在的发育毒性。方法采用胎盘组织来源的BeWo细胞系构建体外胎盘模型,运用GC-MS检测细胞经生半夏及姜半夏干预后细胞内所含代谢物及其相对含量的变化。结果细胞代谢物中共鉴定出甘氨酸、氨基丙二酸、脯氨酸、葡萄糖、半乳糖、硬脂酸在、肌醇等九种差异性代谢物。结论运用GC-MS代谢组学技术评价半夏及姜半夏的发育毒性具有可行性。

乙型肝炎病毒感染人胎盘绒毛膜癌BeWo细胞体外培养模型的建立

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)感染人绒毛膜癌滋养层细胞(BeWo)体外培养模型,探讨HBV宫内感染机制。方法应用高病毒载量的HBV阳性血清感染BeWo细胞并传代,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测感染初代细胞和传代细胞内以及上清液中HBV DNA量;应用化学发光微粒子免疫法检测感染后初代细胞和传代细胞的上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)量;应用SABC免疫组化检测感染细胞内HBsAg、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)的表达。结果感染初代各时间点细胞内和上清液中HBVDNA量随时间延长而增加,120 h HBV DNA量最高;传代细胞内和上清液中HBV DNA量随传代次数增加逐渐降低,5代后检测均为阴性。感染初代各时间点细胞的上清液中HBsAg量随时间延长而增加;传代细胞的上清液中HBsAg量在1～3代为阳性,但量逐渐降低,4代后均为阴性。感染初代各时间点细胞和传代细胞的上清液中HBeAg量均为阴性;1～3代细胞HBsAg、HBcAg染色可见阳性细胞。结论 HBV可以感染BeWo细胞,且能在传代细胞中表达;BeWo细胞可用于HBV宫内感染机制的研究。

HBeAg真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达

目的构建乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法用PCR方法从质粒pMD18T-HBV中扩增HBeAg基因,克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,通过酶切、PCR及测序鉴定,并将该载体转染Bewo细胞,72h后,用Western免疫印迹和微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测HBeAg蛋白在胞内和上清中的表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建HBeAg表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达HBeAg,并可分泌HBeAg。结论构建了HBeAg真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,为研究胞内HBeAg对Bewo细胞Toll样受体表达的作用奠定了基础。

14-3-3tau蛋白通过ERK信号通路调控BeWo细胞的侵袭功能

目的:探讨14-3-3tau蛋白对滋养细胞侵袭功能的影响及可能机制。方法:免疫组化法检测人早孕期绒毛、蜕膜以及人绒癌滋养细胞株BeWo中14-3-3tau的表达。RNA干扰方法下调BeWo细胞14-3-3tau的表达,RT-PCR和Western blotting方法检测E钙黏附素及转录因子snail的表达变化,Transwell小室方法检测侵袭细胞数目的变化。用U0126特异性阻断胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路,观察下调14-3-3tau对BeWo细胞侵袭能力的变化。结果:(1)14-3-3tau在早孕期绒毛外细胞滋养细胞和侵袭入蜕膜组织的游离型滋养细胞以及BeWo细胞中均有表达。(2)下调BeWo细胞14-3-3tau表达后,E钙黏附素表达下降,Snail表达增加,穿过Transwell小室的细胞数增加(P<0.05)。(3)U0126阻断14-3-3tau下调引起的BeWo细胞侵袭增加(P<0.05)。结论:14-3-3tau通过ERK1/2信号通路抑制滋养细胞的侵袭能力。

不同缺氧方法诱导BeWo细胞缺氧诱导因子 1α表达的实验研究

【目的】探讨用于滋养细胞缺氧研究的缺氧方法及滋养细胞模型。【方法】滋养细胞来源的BeWo细胞系,分4组培养:正常对照组、低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组。培养4 8h后收集细胞,应用实时定量PCR方法,检测BeWo细胞HIF- 1αmRNA表达水平;应用Westernblot方法,检测BeWo细胞HIF -1α蛋白的表达水平。【结果】与正常对照组相比,低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组的HIF- 1α蛋白和mRNA表达均明显升高;与低氧浓度组比较,二氯化钴组和去铁敏组HIF 1α蛋白和mRNA表达水平无明显差异。【结论】环境缺氧和细胞缺氧均可诱导BeWo细胞HIF 1α的表达,二氯化钴或去铁敏可以作为缺氧方法用于滋养细胞缺氧方面的研究,BeWo细胞也可作为一种细胞模型用于HIF -1α表达的研究。

缺氧对BeWo细胞系中缺氧诱导因子2及其靶基因VEGF表达的影响

目的:探讨缺氧对体外培养的BeWo细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,以及应用反义寡核甘酸封闭缺氧诱导因子2α(HIF- 2α)后,VEGF表达的变化。方法:将BeWo细胞分4组进行体外培养:常氧组、缺氧组、HIF -2α正义组和HIF- 2α反义组。检测HIF- 2α蛋白、HIF -2αmRNA和VEGFmRNA表达。结果:与常氧组相比,缺氧组的HIF- 2α蛋白、mRNA、VEGF的mRNA水平均升高;与缺氧组相比,反义组的HIF -2α蛋白、HIF-2αmRNA、VEGFmRNA表达均降低。结论:缺氧可诱导BeWo细胞中VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF-

CXCL12在母胎界面的表达及其促进BeWo滋养细胞系的体外迁移作用

目的研究CXCL12在早孕期母胎界面的表达情况及其对BeWo细胞的体外迁移作用。方法免疫组织化学法检测早孕期绒毛及蜕膜组织中CXCL12的表达情况;用Transwell细胞侵入系统检测CXCL12对BeWo细胞迁移的影响。结果早孕期绒毛及蜕膜组织均有CXCL12的表达,分布于绒毛柱、滋养细胞及间质血管内;CXCL12对BeWo细胞具有趋化作用,浓度达10ng/ml时趋化效应最强。结论CXCL12可促进BeWo细胞的迁移,因此早孕期母胎界面产生的CXCL12可能参与滋养细胞的迁移,对于维系正常妊娠发挥了一定作用。

土贝母皂苷甲作用线粒体途径促进人绒毛膜癌Bewo细胞凋亡

为了研究土贝母苷甲(TBMS1)诱导人绒毛膜癌Bewo细胞凋亡的作用及机制,分别采用MTT法检测细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定药物对细胞周期、凋亡及线粒体跨膜电位(△Ψm)的影响,DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA含量变化和DNA断裂的情况,蛋白质免疫印迹法及RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因表达的变化。研究结果显示,TBMS1呈浓度依赖性显著抑制Bewo细胞的生长;流式细胞术分析显示TBMS1能促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G1期,并导致线粒体跨膜电位降低,细胞色素c(Cyt c)释放,caspase-3表达增强;DNA梯状区带验证了药物诱导细胞凋亡的发生;Bax表达上调,Bcl-2及磷酸化的p38表达下调等结果表明,TBMS1可能是通过p38/MAPK信号通路调控作用,导致线粒体功能紊乱,从而影响凋亡相关基因表达,有效诱导Bewo细胞凋亡。

双特异性磷酸酶5对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响

目的探讨双特异性磷酸酶5(dual specificity phosphatase 5,DUSP5)基因过表达对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法以携带人DUSP5基因的重组慢病毒感染BeWo细胞,用流式细胞仪分选建立过表达DUSP5的BeWo细胞模型,以携带空载体的慢病毒感染的细胞以及未经任何处理的细胞作对照。经荧光实时定量PCR和Western blot检测DUSP5基因mRNA和蛋白的表达,经CCK-8实验和流式细胞术检测BeWo细胞增殖和凋亡的变化,经Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、p-p38及p-JNK的变化。结果①经荧光实时定量PCR和Western blot证实,成功构建了DUSP5过表达的人胎盘滋养层细胞BeWo细胞模型;②CCK-8实验结果显示DUSP5过表达组在第3、4、5天的光密度值D(490)与其他两对照组相比明显增高(P<0.01);流式细胞仪结果显示顺铂作用48 h后,DUSP5过表达组与空病毒载体组相比,正常细胞的百分比显著增加而早期凋亡细胞百分比则显著减少(P<0.01);Western blot结果显示DUSP5过表达组中p-ERK1/2水平显著下降,而p-p38和p-JNK未见明显变化。结论 DUSP5可促进人胎盘滋养细胞系BeWo增殖、抑制细胞凋亡,以上作用可能与DUSP5抑制ERK信号通路有关。

基于基因芯片整合分析筛选及验证BeWo细胞合体化相关调控因子

目的:合体滋养层细胞(syncytiotrophoblast,STB)是一类多核化上皮细胞位于人类胎盘最外层,由单核滋养细胞(cytotrophoblast,CTB)分化、融合而来,肩负妊娠维持关键激素的分泌和母胎间营养交换的重要职责,也是母胎屏障重要组成部分之一。然而,目前关于胎盘滋养细胞的合体化过程的调控机制仍不明确。本研究即利用生物信息学的方法筛选并初步验证潜在调控绒毛膜癌BeWo细胞合体化调控的关键基因。方法:从GEO数据库检索并下载BeWo细胞合体化前后的基因芯片数据集,并利用生物信息学分析方法对所有相关数据集进行综合分析,筛选出差异表达基因并进行GO及KEGG聚类分析,进一步通过PPI蛋白互作网络寻找节点基因,最后利用qRT-PCR验证候选基因在合体化前后的差异表达。结果:从2组数据中共筛选出137个差异表达基因,其中25个差异基因为2组数据集共有,参与细胞迁移、细胞黏附、激素代谢、MAPK信号通路等。进一步借助蛋白质互作网络分析,得到3个候选基因并通过qRT-PCR验证,结果与信息分析结果一致。结论:本研究为滋养细胞合体化研究提供了潜在靶基因,也为解析其分子调控机制提供了线索。

低氧对BeWo细胞骨桥蛋白表达的影响

目的体外模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境培养滋养细胞,研究低氧对滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响,以进一步深入研究OPN在子痫前期发病机制中的作用。方法利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3)模拟子痫前期的发生发展过程,配置不同氧浓度,采用细胞免疫组化和实时荧光定量PCR检测人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞在不同氧浓度下OPN蛋白及其mRNA的表达。结果①在不同氧浓度的环境下,显微镜观察BeWo细胞的生长情况,发现其对低氧反应敏感,细胞形态发生明显的改变。②细胞免疫组化检测结果显示:OPN在各组BeWo细胞中均有表达,其免疫反应产物主要表达定位于胞质和胞膜中;缺氧24h各组的OPN蛋白表达无明显变化;但低氧48h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著。③实时荧光定量PCR检测结果表明低氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,即随着氧浓度的降低和低氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势。结论低氧使BeWo细胞OPN的表达降低,且呈浓度时间依赖性,类似于OPN在子痫前期胎盘组织的表达随病情加重而进一步降低,这可能是子痫前期胎盘中缺氧对滋养细胞功能影响的重要机制之一。

单核细胞增生李斯特菌感染对Bewo细胞炎症因子及迁移能力的影响

目的研究单核细胞增生李斯特菌(Lm)感染致Bewo细胞炎症因子表达及迁移能力的变化,并探讨其可能的机制。方法Lm以MOI=10感染Bewo细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Bewo细胞炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平;划痕试验及Transwell试验检测Bewo细胞的迁移能力;Western Blot检测Bewo细胞迁移相关蛋白(MMP2,MMP9,TIMP-1)以及MAPK家族蛋白(p-p38MAPK,p38MAPK,p-ERK1/2,ERK1/2)的表达水平。结果Lm感染Bewo细胞后炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平与感染1 h相比均升高。Western Blot结果表明,随着感染时间的延长,迁移相关蛋白MMP2逐渐升高;MMP9和TIMP-1变化趋势一致,先上升后下降;Lm感染致MAPK家族p38MAPK及ERK1/2蛋白磷酸化水平升高。结论Lm感染Bewo细胞后导致细胞迁移能力增强,MMP2在调控细胞迁移能力的变化中起主要作用,Lm感染可以激活Bewo细胞MAPK家族p38MAPK及ERK1/2信号通路。

人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达

背景:近年来间充质干细胞已是新药开发领域的研究热点,其旁分泌效应也已应用于多种组织损伤性细胞模型修复评估实验,但目前尚无研究探索其条件培养液是否对缺氧状态下人胎盘滋养层系细胞的紧密连接功能具有修复作用。目的:探讨人胎盘源间充质干细胞条件培养液对缺氧条件下人胎盘绒毛膜癌滋养层系BeWo细胞活力和紧密连接因子表达的影响。方法:采用1000μmol/L氯化钴处理12 h诱导BeWo细胞以构建胎盘屏障缺氧模型,检测细胞活力以及缺氧诱导因子1α和紧密连接因子闭合小环蛋白1、封闭蛋白4、封闭蛋白8的表达量变化;在缺氧模型中添加人胎盘源间充质干细胞条件培养液建立缺氧干预组、复氧修复组,检测细胞活力和上述4个基因的表达量改变;为探讨人胎盘源间充质干细胞条件培养液改变闭合小环蛋白1表达量的潜在机制,建立胰岛素样生长因子1缺氧干预组、胰岛素样生长因子1处理组,检测BeWo细胞活力以及闭合小环蛋白1表达量。结果与结论:①氯化钴诱导缺氧显著下调BeWo细胞活力,上调缺氧诱导因子1αmRNA和蛋白表达,下调闭合小环蛋白1和封闭蛋白4 mRNA和蛋白表达,上调封闭蛋白8 mRNA表达,但其蛋白表达下降;②人胎盘源间充质干细胞条件培养液明显提升缺氧条件下BeWo细胞活力和闭合小环蛋白1的表达,下调缺氧诱导因子1α的表达,但对封闭蛋白4无作用;③胰岛素样生长因子1干预缓解了缺氧对BeWo细胞活力的抑制作用,并上调闭合小环蛋白1的表达。

IL-1β对BeWo细胞ABCG2 mRNA表达的影响

目的:探讨人滋养细胞ABC膜转运蛋白家族G2蛋白(ABCG2)mRNA的表达与白细胞介素-1β(IL-1β)的关系。方法:体外培养人胎盘滋养细胞BeWo,分为IL-1β干预组和空白对照组,每组重复3次,干预组分别于12、24、48、72小时收集BeWo细胞,抽提总RNA。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组细胞ABCG2 mRNA表达。结果:实时荧火定量PCR检测干预12、24、48、72小时ABCG2 mRNA表达量:IL-1β干预组1.19±0.02、1.90±0.04、2.59±0.03、2.98±0.07(×106copies/μg RNA),空白对照组1.00±0.03、1.01±0.03、0.99±0.03、1.04±0.02(×106copies/μg RNA),IL-1β干预组ABCG2 mRNA表达量显著高于相应时间点空白对照组的表达(F=6657.235,P=0.000)。IL-1β干预组后一时间点的表达量显著高于前一时间点的表达量(F=783.772,P=0.000),且IL-1β干预各组的表达量显著高于任一时间点空白对照组的表达量(F=744.127,P=0.000)。结论:IL-1β能增强BeWo细胞ABCG2的表达,提示IL-1β可能在转录水平上调ABCG2 mRNA表达。

滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞表达整合素α_vβ_3蛋白的影响

目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞与人子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESC)的共培养体系,Western blot法检测共培养体系培养液中14-3-3τ蛋白的表达,以及ESC容受性分子整合素αvβ3的表达变化。结果与si RNA阴性对照组相比,特异性si RNA显著下调Be Wo细胞和培养液中14-3-3τ蛋白的表达(P<0.05)。共培养体系中,与si RNA阴性对照组相比,与14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞共培养的ESC整合素αvβ3的表达显著上调(P<0.05),提示ESC容受性增加。与单独培养的ESC相比,培养液中添加14-3-3τ重组蛋白的ESC培养24 h后整合素αvβ3的表达显著下调(P<0.05),提示ESC容受性降低。结论14-3-3τ蛋白可以被滋养细胞分泌至细胞外,并可能发挥调控ESC容受性的作用,但其作用机制仍需进一步研究。

绒毛膜癌细胞的融合与侵袭和转移能力变化关系的研究

目的:观察人绒毛膜癌(绒癌)细胞系中BeWo细胞株在福斯考林(forskolin)诱导融合前后细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达变化,以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。方法:用BeWo细胞株进行培养传代,以100mmol/L浓度的forskolin作用于BeWo细胞,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)方法检测细胞中人类内源性逆转录病毒基因编码的膜糖蛋白(Syncytin mRNA)表达量的变化;免疫印迹技术(Western blot)方法检测细胞中表达MMP-2及E-cad蛋白表达量的变化。结果:以BeWo细胞作为靶细胞,根据RT-PCR和Western blot方法中条带的形状和亮暗程度可知Syncytin基因和E-cad及MMP-2蛋白的表达呈时间依赖性,随着forskolin作用时间的增加,Syncytin基因及E-cad蛋白的表达逐渐增加,而MMP-2蛋白表达量逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Syncytin高表达与融合后绒癌细胞的浸润转移能力的改变可能有一定关系,Syncytin的检测有望成为滋养细胞肿瘤患者判定预后的有价值的指标,并为滋养细胞肿瘤的治疗开辟了新的思路。

Kiss-1基因与胚胎种植和发育的关系

目的:通过体外实验研究雌激素、孕激素对人绒毛膜癌细胞株BeWo中Kiss-1 mRNA表达的调节,探讨其在胚胎种植和发育中的作用。方法:体外培养BeWo细胞,采用不同浓度的雌激素和孕激素作用48h后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各种条件下Kiss-1 mRNA的表达水平。结果:低浓度雌激素(10-9M,10-8M)可促进Kiss-1 mRNA的表达,而高浓度雌激素(10-7M)作用恰好相反(P<0.05);不同浓度的孕激素均促进Kiss-1 mRNA的表达,但随着浓度的升高,Kiss-1 mRNA的表达逐渐下降(除10-7M和10-6M组间无差异外,余各组间均为P<0.05)。结论:(1)雌、孕激素均对BeWo细胞中Kiss-1基因的表达有调控作用;(2)较低浓度的雌、孕激素均上调Kiss-1基因的表达;(3)较高浓度的雌激素下调Kiss-1基因的表达,而较高浓度的孕激素则上调Kiss-1基因的表达;(4)Kiss-1基因可能在妊娠胎盘形成和种植过程中起着重要的作用。

骨桥蛋白在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用

目的研究不同氧浓度下滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达与相应氧浓度下滋养细胞侵袭力的相关性,探讨OPN在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用。方法利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3),模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境,培养人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞。采用Western印迹和实时荧光定量PCR方法,检测不同氧浓度对BeWo细胞OPN表达的影响。采用Transwell侵袭模型,探讨缺氧对BeWo细胞侵袭力的影响。结果 Western blot检测结果显示,缺氧48h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著。实时荧光定量PCR检测结果表明,缺氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,随着氧浓度的降低和缺氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势。Transwell侵袭实验结果显示,与常氧对照组相比,低氧组细胞侵袭力明显降低,8%O2组和2%O2组的细胞浸润指数分别为0.298 8和0.091 7(P<0.01)。采用Spearman相关分析法,比较OPN表达水平与BeWo细胞侵袭力的相关性,结果显示,随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力进一步下降,OPN表达水平与侵袭指数成正相关(rs=0.944,P<0.01)。结论缺氧降低滋养细胞OPN的表达,表现为浓度和时间依赖性;随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力下降。OPN低表达可能是子痫前期滋养细胞侵袭力下降的分子机制之一。

孕激素对绒癌细胞系Galectin-3表达的影响

目的通过体外试验研究孕激素对BeWo绒癌细胞系中Galectin-3蛋白的表达,探讨其对滋养细胞侵袭性相关基因表达的影响作用。方法体外培养BeWo绒癌细胞,分别加入不同浓度的孕激素24h后,采用免疫印迹技术、免疫荧光技术测定各种条件下的Galectin-3蛋白的表达。结果Bewo绒癌细胞系表达Galectin-3。分别用0、10-7、10-6、10-5mol/L孕激素处理24h后,10-7、10-6mol/L的孕激素可以显著提高BeWo绒癌细胞系中Galectin-3蛋白的表达(P<0.05,相反10-5mol/LP使Galectin-3表达降低(P<0.05)。结论(1)BeWo绒癌细胞系有Galectin-3的表达。(2)低浓度的孕激素可以诱导Galectin-3蛋白的表达。(3)高浓度的孕激素对Galectin-3蛋白的表达有下调作用。