球孢白僵菌可湿性粉剂对马铃薯甲虫的防治效果

从受感染的马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata(Say)分离出菌株1513,经鉴定为球孢白僵菌Beauveriabassiana(菌种保藏号为ACCC32222)。为了评价其对马铃薯甲虫的防治潜力,本研究测定了不同浓度白僵菌对不同龄期马铃薯甲虫幼虫的毒力作用。结果表明,在室温条件下(22～28℃),处理9 d时1～2龄幼虫的僵虫率与孢子浓度成正比,其LC50为3.09×107孢子mL 1;处理8 d时,对3～4龄幼虫的LC50为9.92×107孢子mL 1;而孢子浓度为1×107孢子mL 1时,虫卵未受到明显的抑制。田间施菌2250 g hm 2时,在新疆新源县的防治效果较好,18 d时98.87%的虫体落地,地表僵虫率为53.91%;而在新疆尼勒克县,仅在土壤中发现僵虫,僵虫率为19.61%。

不同含水量和温度下贮存中球孢白僵菌分生孢子活力与内贮营养的衰变

将球孢白僵菌(Beauveriabassiana)BBSG8702的未干燥孢子粉(含水量58.9±1.6%)和真空冷冻干燥孢子粉(含水量7.4±0.9%)置于4℃和20℃下贮存1个月,每隔5d取样测定活孢率和孢子内贮总糖和蛋白含量,发现含水量和贮存温度交互影响孢子的活力以及内贮总糖和蛋白质的代谢水平,各组合中的活孢率一般与内贮总糖和蛋白质代谢水平均存在显著或极显著相关性.在1个月的贮存期间,4℃下冻干粉总糖含量下降13.4%,蛋白质含量下降39.2%,清水中的萌发率下降32.0%,营养液中的萌发率仅下降6.7%,而未干燥孢子粉的相同指标分别下降42.4%、66.3%、96.4%和99%;在20℃下,冻干粉的上述指标分别下降了14.1%、38.2%、55.8%和 10.4%,而未干燥孢子粉则分别下降了 43.2%、65.4%、99.4%和98.4%. 显然,含水量影响活孢率和内贮营养衰变的幅度,而温度影响衰变的速度,但内贮营养的耗尽并不立即引起孢子失活,在供给外源营养之后孢子仍能萌发.将含水量降至4.0±0.9%的冻干粉贮存1年,4℃下活孢率由初始的99.0%下降至90.2%,而20℃下贮存的前165d活孢率下降较为缓慢,但此后急剧下降,至第240d时几乎全部失活.模拟分析表明,低含水量冻干粉在4℃和20℃下贮存的半衰期(即活孢率减少一半所需的时间)分别为1006d和197d.这些结果说明。

白僵菌可湿性粉剂的研制

以白僵菌孢子粉为原药,硅藻土为主要载体,通过单因素和正交设计筛选合适的润湿剂、分散剂等助剂配方比例,研制出性能优良的白僵菌可湿性粉剂。确定配方为:白僵菌分生孢子粉20%;NNO 7%;农乳3208 2%;拉开粉5%;十二烷基硫酸钠2%;硅藻土加齐至100%。质量检测结果表明:该配方润湿时间<1min,悬浮率可达到75%以上,其他各项指标均符合可湿性粉剂的要求。

真空干燥球孢白僵菌纯孢粉的活孢率、毒力与贮存期

采用真空冷冻干燥法 (冻干 )和真空室温干燥法 (抽干 )对球孢白僵菌 (Beauveriabassiana)原菌粉进行了干燥工艺的比较。在固体产孢基质上生产的新鲜纯孢粉 (原菌粉 )含水量达 5 8 65 % ,经 36h冻干或抽干 ,孢子粉的含水量分别降至 3 97%和 4 2 6% ,含孢量分别为 1 2 9× 1 0 1 1 孢子 /g和 1 2 5× 1 0 1 1 孢子 /g ,活孢率分别为 99 0 %和 97 9%。冻干粉和抽干粉之间的活孢率无显著差异 ,但萌发速度不同。原菌粉、抽干粉及冻干粉对桃蚜(Myzuspersicae)在接种后第 7d的LC50 分别为 1 1 5 ,5 89和 2 95× 1 0 4 个孢子 /mL ;在 1 0 6 个孢子 /mL的剂量下对桃蚜的LT50 分别为 3 6d、 4 4d和 3 9d。从生产成本低得多 ,抽干法比冻干法在白僵菌纯孢粉的生产中更有应用前景 ,尽管冻干粉的质量略优于抽干粉。在4℃和 2 0℃下贮存冻干粉并进行为期一年的孢子萌发率和毒力检测。结果显示 ,冻干粉在2 0℃下贮存至 2 5 5d时完全失活而丧失染虫能力 ,而在 4℃下贮存一年后的活孢率仍达90 2 % ,LT50 仅从初始的 3 9d延长至 4 7d。这说明仅通过降低含水量以延长白僵菌孢子粉在常温下的贮存期仍是不可能的。

一株小菜蛾高致病性球孢白僵菌菌株的筛选及其可湿性粉剂的田间药效试验

通过比较产孢量等性状,选择29株分离自鳞翅目昆虫的球孢白僵菌进行室内生物测定,从中筛选出1株对小菜蛾毒力强的菌株Bb2390,其对小菜蛾2龄幼虫的致死中浓度为1.56×105孢子.mL 1,在1.0×107孢子.mL 1浓度下的致死中时为4.61 d。该菌株对小菜蛾各虫态均有致病力,对卵、2龄幼虫、蛹和成虫的侵染率分别为37.2%、90.3%、58.8%和24.5%。在田间试验中,进一步测定了该菌株的可湿性粉剂对小菜蛾幼虫防治效果达65.85%,显著高于分生孢子水悬液的防效51.66%。

150亿孢子/g球孢白僵菌可湿性粉剂的研发及对西花蓟马的防治应用

为了研发靶标害虫为西花蓟马的球孢白僵菌杀虫剂,我们首先通过筛选、纯化和复壮获得对西花蓟马高效的真菌菌株;其次,对液-固双相发酵条件和发酵工艺进行优化;然后,改良了产品剂型和配方;最后对产品进行环境和毒性评价。结果显示该产品各项指标均符合国家标准。150亿孢子/g球孢白僵菌可湿性粉剂于2018年在国内获审批登记。喷施1800~3000 g/hm^2对辣椒上西花蓟马的防效均为74%以上。推荐用量为2400 g/hm^2。该产品的研发和获批登记为西花蓟马的生物防治奠定了坚实的基础。

球孢白僵菌BD-B015可湿性粉剂配方的筛选

研究了甜菜夜蛾高毒力球孢白僵菌BD-B015菌株的可湿性粉剂配方,通过孢子粉萌发率、菌落生长速率、产孢量、润湿时间、相容性和分散时间等试验,筛选确定出载体、湿润剂和分散剂种类,并对制剂的各项指标进行了检测。配方结果如下:孢子粉30%,载体高岭土60%,润湿剂拉开粉BX 5%,分散剂HK-2302 5%。可湿性粉剂各项指标为:含孢量400亿孢子/g,润湿时间69s,有效成分悬浮率94.6%,干燥减重1.7%,98.4%通过200目标准筛,均达到国家标准GB/T25864-2010。

球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂配方的筛选

[目的]确定球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂的最佳配方。[方法]以高效杀蚜球孢白僵菌Bb2860菌株纯孢粉(含孢量为1.20×1011个/g)为研究对象,通过逐一筛选法确定载体、润湿剂、分散剂和紫外保护剂的种类和用量,并按国家标准进行制剂质量指标测定。[结果]可湿性粉剂配方为球孢白僵菌分生孢子粉10.0%,分散剂MorwetD-425 1.0%,润湿剂MF-5 3.0%,紫外保护剂抗坏血酸0.3%,填料硅藻土85.7%。指标测定结果为活孢率94.44%,润湿时间89.2 s,有效成分悬浮率95.11%,含水量1.50%,98.50%通过200目标准筛,pH 6.8。[结论]该配方制剂各项指标均符合国家标准,为蚜虫生物防治产品的开发奠定了基础。

白僵菌可湿性粉剂的研制

选择合适的助剂与填料配制白僵菌可湿性粉剂,通过混合粉碎过程的研究,得到抑菌作用小、理化性能优良的可湿性粉剂小试产品3号和4号,其润湿性小于3分钟,悬浮率和孢子萌发率均为85％以上。成品细度:98％通过325筛目。经10～20℃室温贮存8个月后孢子萌发率为85％左右,与纯孢粉无显著差异。室内测定:含孢量500亿/克可湿性粉剂的杀虫效果为95％,LC50为7.30×105孢子/ml,LT50为113.6小时。田间防治玉米螟的效果达80％以上。

白僵菌可湿性粉剂的改良及其对稻水象甲的田间防治效果

为进一步完善白僵菌可湿性粉剂的配方及明确其对稻水象甲的田间防治效果,通过对消泡剂、结构稳定剂、乳化剂、润湿剂、分散剂等白僵菌可湿性粉剂各种制剂组分比例调整、改良,并应用完善后的250亿/g白僵菌可湿性粉剂65 g/667 m^2、55 g/667 m^2、45 g/667 m^2、苦参碱22 ml/667 m^2四个处理进行防治稻水象甲田间试验。结果表明:改良后的白僵菌可湿性粉剂的各项指标均达到或超过化学农药可湿性粉剂的相应国家标准,最佳使用时期为生产后的3个月内;在田间使用55 g/667 m2以上剂量时,对稻水象甲的防治效果达到65%以上;改良后的白僵菌可湿性粉剂,不但有效降低稻水象甲的田间危害,还可促进水稻的生长发育,尤其是促进水稻根系的发育。应用白僵菌可湿性粉剂防治稻水象甲,可作为稻水象甲的一种有效生物防治手段。

苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂研制及杀虫毒力测定

以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3∶1,润湿分散剂为1%Morwet EFW、3%SDS、9%Morwet D425、9%TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3%黄原胶,以凹凸棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%,润湿时间<1min,平均粒度为13.76μm。苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂中各指标符合商品制剂的标准,对黄褐天幕毛虫毒力分别高于苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂单剂,是一种具有高杀虫活性、持效期长、环境友好型绿色农药。

球孢白僵菌林间防治油茶黑褐盗毒蛾试验

应用球孢白僵菌不同剂型进行林间防治油茶黑褐盗毒蛾试验,通过林间施菌,套笼法检查防治效果,调查防治后油茶植株的虫口数和油茶叶片新增受害率,综合评价白僵菌林间防治该虫的效果。结果表明,以108孢子·mL-1白僵菌孢子悬浮液喷雾(B处理)防治效果最佳,施菌10 d后黑褐盗毒蛾幼虫死亡率达92.8%,防治效果达91.0%。白僵菌粉炮处理中,60个粉炮·hm-2(A2处理)、90个粉炮·hm-2(A3处理)2个处理间防治效果差异不显著,10 d后防治效果分别达到82.4%、85.3%,但显著高于30个粉炮·hm-2(A1处理)。白僵菌不同剂型防治后各处理组的虫口数、防治期间新增受害率均较防治前出现了显著的下降。其中虫口数下降最多的分别是A3、B、A2处理,虫口减退率分别为88.6%、88.4%、81.5%;B、A3、A2处理在防治期间新增受害率仅为5.3%、6.0%、8.3%,而对照的新增量为21.0%,防治效果十分显著。

球孢白僵菌对马尾松毛虫的毒力与有关生化指标的关系——Ⅲ.不同世代白僵菌胞外蛋白酶的毒力

用液体培养的方法研究了白僵菌(Beauveria bassiana)不同世代的胞外蛋白酶产酶水平与其毒力关系。结果发现,B.bassiana各世代在明胶和虫尸粉两种液体培养基中均表现出随着继代移殖次数的增加胞外蛋白酶产酶水平依次降低的趋势,但同一世代在虫尸粉培养基中的产酶量显著高于明胶培养基中的产酶量。各世代在两种培养基中的产酶方式也不完全相同。各世代对马尾松毛虫的毒力也表现出了随继代数增加而减弱的趋势。

光照和漂白粉对白僵菌孢子萌发及致病力的影响

研究人工紫外光和自然光照射以及消毒剂漂白粉对白僵菌(Beauveria bassiana)孢子萌发和致病力的影响。结果表明,人工紫外光照射对裸露的白僵菌孢子有明显的杀伤作用,使孢子萌发率和对家蚕(Bombyx mori L.)的致病力明显下降,但对白僵菌原粉中的孢子杀伤力相对较弱,照射24 h后白僵菌原粉对家蚕的致死率仍达93.33%。在自然光下,喷洒到桑叶上的白僵菌孢子悬浮液随光照时间的增加对家蚕的致病力下降,自然光照射3、6、12、24、36 h后,对家蚕的致死率分别为100.00%、70.00%、79.66%、10.00%和25.00%;用白僵菌原粉喷桑树,经自然光照射0～36 h后,对家蚕的致死率为88.33%～96.67%,48 h后对家蚕的致死率大幅度下降,照射48、54、78 h对家蚕的致死率分别为53.33%、31.67%和23.33%;直接置于自然光下照射的白僵菌原粉,随光照时间增加,对家蚕的致病力下降,30 h后致病力明显下降,致死率只有38.33%。有效氯浓度为1.00%和2.00%的漂白粉溶液对白僵菌孢子萌发有很强的抑制作用,72 h孢子萌发率分别为1.000%和0;用有效氯浓度为2.00%的漂白粉液进行叶片和蚕体消毒处理对白僵菌孢子均有杀灭效果,使白僵菌孢子液和原粉对家蚕的致病力明显下降,但对叶片消毒比对蚕体消毒效果好。

新型旋风分离器高效分离多株生防真菌分生孢子

真菌生防制剂在害虫生防和植病生防中具有极大的应用潜力,有效侵染体(气生分生孢子)的质量和数量对它的应用有极大的影响。本文通过固体发酵获得三株生防真菌代表菌株(球孢白僵菌Beauveriabassiana、金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae、绿色木霉Trichoderma viride)的气生分生孢子,进行孢子分离装置的分离效果比较和评价。结果表明,自主研制的CC旋风分离器在分离性能上优于进口的MH5型旋风孢子分离器和200目不锈钢筛网,金龟子绿僵菌的孢子粉得率为3.7%,含孢量为0.68×1011孢子.g 1;而且分离三株生防菌株的分生孢子的技术指标和分离效率也较高。因此,自主研制的分离装置适合各类生防真菌高纯度孢子粉的分离,具有较好的通用性和应用价值。

无人机喷撒白僵菌防治越冬代马尾松毛虫效果研究

利用自主研发的森翼-D20水剂/粉剂双载荷六旋翼植保无人机开展喷撒白僵菌粉剂和阿维菌素粉剂防治越冬代马尾松毛虫试验。结果表明:2种药剂单剂及其复配剂对越冬代马尾松毛虫的防治均有较好的效果。白僵菌粉剂复配阿维菌素粉剂具有药效快、低毒和环保的特点。此外,应用无人机喷撒生物粉剂大面积防治越冬代马尾松毛虫解决了树高林密、劳动力缺乏等限制因素,适合在林区大面积推广。

不同药剂对阜新地区松毛虫的防效比较

为筛选阜新地区松毛虫的最佳防治药剂,以2016年阜新地区3~4龄松毛虫为防治对象,对白僵菌粉、苏云金杆菌、25%灭幼脲3号悬浮剂3种无公害药剂的防治效果进行了比较研究。结果表明,几种药剂对松毛虫均显示了较为理想的防治效果,达到了86.7%以上,其中25%灭幼脲3号悬浮剂防效最佳,持效性强;苏云金杆菌的速效性较好,白僵菌粉具有一定的迟效性。2017年在阜新地区林间开展的松毛虫大面积防治试验显示,3种药剂总体防效以25%灭幼脲3号悬浮剂最优。大面积防治可有针对性地对药剂进行单一或合并使用。