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索拉非尼通过调节Beclin-l的表达诱导肝癌细胞自噬的实验研究 被引量:1
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作者 黄玉双 孙艾军 +2 位作者 高鹏 蒲春文 金代强 《中国现代普通外科进展》 CAS 2021年第3期220-222,226,共4页
探讨索拉非尼诱导肝癌细胞自噬的作用及机制。选取人肝癌HepG2细胞,随机分为对照组、2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组,其中2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组分别给予2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L索拉非尼,采用MTT法检... 探讨索拉非尼诱导肝癌细胞自噬的作用及机制。选取人肝癌HepG2细胞,随机分为对照组、2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组,其中2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组分别给予2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L索拉非尼,采用MTT法检测细胞增殖,倒置荧光显微镜观察自噬小体,Western blot检测LC3-Ⅱ、Beclin-l表达。2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组培养24、48和72 h时吸光度(A)值明显低于对照组(P<0.05),其中10μmol/L组培养24、48和72 h时A值分别为0.289±0.097、0.310±0.100和0.411±0.103,明显低于2.5μmol/L和5μmol/L组(P<0.05);2.5μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组自噬小体形成数明显高于对照组(P<0.05),其中10μmol/L组自噬小体形成数为(37.40±4.45)个,明显高于2.5μmol/L组和5μmol/L组(P<0.05);2.5μmol/L、5μmol/L组和10μmol/L组LC3-Ⅱ、Beclin-1相对表达量明显高于对照组(P<0.05),其中10μmol/L组LC3-Ⅱ、Beclin-1相对表达量为1.022±0.105和0.562±0.102,明显高于2.5μmol/L组和5μmol/L组(P<0.05)。索拉非尼可抑制肝癌细胞增殖,促进自噬小体生成,可能与调控Beclin-1表达有关。 展开更多
关键词 索拉非尼 肝癌细胞 自噬小体 beclin-l
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紫草素诱导甲状腺髓样癌TT细胞自噬的实验研究 被引量:3
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作者 唐旭霞 叶再元 《浙江中西医结合杂志》 2016年第5期418-421,F0003,共5页
目的探讨紫草素能否诱导甲状腺髓样癌细胞发生自噬。方法采用透射电镜观察不同浓度紫草素对甲状腺髓样癌TT细胞发生自噬的形态。利用Western-blot分析紫草素作用甲状腺髓样癌TT细胞后自噬标志物Beclin-l和LC3蛋白的表达,利用荧光显微镜... 目的探讨紫草素能否诱导甲状腺髓样癌细胞发生自噬。方法采用透射电镜观察不同浓度紫草素对甲状腺髓样癌TT细胞发生自噬的形态。利用Western-blot分析紫草素作用甲状腺髓样癌TT细胞后自噬标志物Beclin-l和LC3蛋白的表达,利用荧光显微镜观察自噬标记蛋白LC3-Ⅱ的点状聚集情况。结果不同浓度紫草素作用24~72h对TT细胞均有自噬现象发生。2μg/m L、4μg/m L紫草素处理组作用24h后透射电镜观察TT细胞自噬的形态,发现TT细胞出现典型的自噬囊泡:双层膜包绕的圆形或椭圆形结构。紫草素处理自噬相关基因Beclin-l的表达明显低于空白对照组,参与自噬降解的p62表达水平下降,其下降水平与剂量呈相关性,自噬标记蛋白LC3-Ⅱ的表达明显提高。将TT细胞转染GFP-LC3质粒24h后,用紫草素处理24h,于荧光显微镜下观察,处理组与空白对照组相比,胞浆上出现大量的LC3-Ⅱ点状聚集。结论紫草素能诱导甲状腺髓样癌TT细胞发生自噬,透射电镜下可见自噬体,荧光显微镜下可观察到自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ。紫草素诱导TT细胞自噬,可能与降低自噬抑制基因Beclinl表达水平相关。 展开更多
关键词 甲状腺髓样癌 TT细胞 紫草素 自噬 beclin-l LC3
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Autophagy activation aggravates neuronal injury in the hippocampus of vascular dementia rats 被引量:25
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作者 Bin Liu Jing Tang +3 位作者 Jinxia Zhang Shiying Li Min Yuan Ruimin Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第13期1288-1296,共9页
It remains unclear whether autophagy affects hippocampal neuronal injury in vascular dementia. In the present study, we investigated the effects of autophagy blockade on hippocampal neuro- nal injury in a rat model of... It remains unclear whether autophagy affects hippocampal neuronal injury in vascular dementia. In the present study, we investigated the effects of autophagy blockade on hippocampal neuro- nal injury in a rat model of vascular dementia. In model rats, hippocampal CA1 neurons were severely damaged, and expression of the autophagy-related proteins beclin-1, cathepsin B and microtubule-associated protein 1 light chain 3 was elevated compared with that in sham-operated animals. These responses were suppressed in animals that received a single intraperitoneal injection of wortmannin, an autophagy inhibitor, prior to model establishment. The present results confirm that autophagy and autophagy-related proteins are involved in the pathological changes of vascular dementia, and that inhibition of autophagy has neuroprotective effects. 展开更多
关键词 nerve regeneration vascular dementia AUTOPHAGY beclin-l cathepsin B microtbule-associated protein 1 light chain 3 AUTOPHAGOSOMES LYSOSOMES WORTMANNIN neural regeneration
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大鼠脊髓损伤后不同时间自噬相关蛋白beclin-1和神经元超微结构的变化 被引量:1
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作者 李海艳 王永为 +1 位作者 孙淑红 程振宇 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期188-191,共4页
目的:观察大鼠脊髓腰段全横断损伤后beclin-1及脊髓神经元超微结构的变化。方法:雄性Wistar大鼠随机分成损伤后6h,1、3、7、14d和21d及假手术组共7组。脊髓损伤组用手术刀片横切腰段。电镜观察脊髓损伤以下神经元内超微结构形态学变... 目的:观察大鼠脊髓腰段全横断损伤后beclin-1及脊髓神经元超微结构的变化。方法:雄性Wistar大鼠随机分成损伤后6h,1、3、7、14d和21d及假手术组共7组。脊髓损伤组用手术刀片横切腰段。电镜观察脊髓损伤以下神经元内超微结构形态学变化,免疫印迹检测beclin-1蛋白的表达。结果:脊髓损伤早期出现自噬体和自噬溶酶体,神经元内细胞器以退行性变化为主,随着时间延长,神经元超微结构出现明显改变;脊髓损伤后6h,1、3、7、14d和21d,与假手术组相比,大鼠脊髓组织中beclin-1蛋白明显增加,差异有统计学意义;脊髓损伤后3dbeclin-1蛋白表达最高,7d开始降低,21d降到最低。结论:脊髓腰段全横断损伤后神经元自噬活动增强,beclin-1可反映神经元自噬状态的变化。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经元 自噬 BECLIN-1 超微结构
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左卡尼汀对环磷酰胺诱导的生精细胞凋亡的疗效机制研究(英文) 被引量:1
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作者 Bin ZHU Yan-fei ZHENG +7 位作者 Yue-ying ZHANG Yun-song CAO Lei ZHANG Xin-gang LI Teng LIU Zhao-zhu JIAO Qi WANG Zhi-gang ZHAO 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期781-787,共7页
目的:环境因素及抗癌药物的使用会导致生精细胞出现凋亡,从而引起男性不育。目前尚缺乏疗效明确的治疗药物。左卡尼汀被用来治疗男性不育取得了一定的疗效。本研究拟通过环磷酰胺诱导的大鼠不育模型,研究左卡尼汀对生精细胞的保护作用... 目的:环境因素及抗癌药物的使用会导致生精细胞出现凋亡,从而引起男性不育。目前尚缺乏疗效明确的治疗药物。左卡尼汀被用来治疗男性不育取得了一定的疗效。本研究拟通过环磷酰胺诱导的大鼠不育模型,研究左卡尼汀对生精细胞的保护作用。创新点:首次观察了左卡尼汀改善化疗药物环磷酰胺所导致的生殖功能障碍的疗效。方法:采用环磷酰胺诱导大鼠不育模型成功后,给予左卡尼汀治疗15天,然后处死全部大鼠。检测血清中的睾酮和雌激素含量;采用全自动精子分析仪检测附睾组织中精子的数量和质量;采用苏木精-伊红(H&E)染色观察睾丸组织的病理损伤;通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口标记技术(TUNEL)的染色观察睾丸组织中生精细胞的凋亡;采用免疫组织化学法观察睾丸组织中LC3和Beclin-1的表达;采用蛋白质免疫印迹分析(Western blot)和多聚酶链式反应(PCR)分别检测组织中LC3和Beclin-1的表达。结论:左卡尼汀可以通过增加细胞自噬,抑制生精细胞凋亡,提高生精细胞的质量和数量,进而降低环磷酰胺引起的睾丸组织的损伤。 展开更多
关键词 左卡尼汀 男性不育 环磷酰胺 LC3 BECLIN-1
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