利用一种新型反应器——BelloCell培养动物细胞

利用BelloCell这种新型的生物反应器,来培养COS7细胞和昆虫Sf 9细胞。COS7细胞和昆虫Sf 9细胞分别用T75培养瓶及spinner flask培养之后,经细胞计数接入BelloCell之中,同时检测并分析培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和氨浓度变化情况。COS7细胞初始接种量为4.208×107cells,最终在培养156h后细胞数量达到了4.68×108cells,是初始细胞量的11倍。sf 9细胞初始接种细胞量为1×108cells,在培养192h时,细胞总量达到了最高为4.01×109cells,是最初细胞量的40倍。培养基的代谢物进行有规律的变化。BelloCell适合COS7细胞和昆虫Sf 9细胞高密度大规模培养,为动物细胞高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础。

昆虫细胞Sf9在四种生物反应器中的培养

昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×105/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度以及主要代谢产物乳酸、氨的浓度进行检测.昆虫细胞经转瓶和摇瓶培养,细胞密度达到最高分别为:5.5×106、7.3×106/mL,是起始密度的11倍和14.6倍.昆虫细胞经Bellocell和发酵罐培养,细胞密度达到最高分别为:8.01×106、1.52×107/mL,是起始密度的16.02倍和30.4倍.昆虫细胞经四种生物反应器中的悬浮培养之后,都达到了很高的密度,尤其是经发酵罐培养达到如此高密度,为高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础.

采用潮汐式生物反应器进行ST细胞培养的研究

ST细胞为一种广泛使用的兽用疫苗生产传代细胞,该研究利用一种新型的潮汐式生物反应器Bellocell进行了ST细胞的培养试验。通过3L转瓶培养扩增ST细胞,消化分散后以1.07×108个细胞接种对潮葡汐萄式糖反的应消器耗逐Be日llo增ce快ll?,为-5维00持,培细养胞7的天正,每常天生监长测,4细8h胞之数后量需、p要H每和天葡更萄换糖新值的的培变养化基。。试在验1期～间6天细的胞培养期间,观察到细胞每日增长倍数在1.2～2.4倍之间,接种后第6天细胞数量达到峰值3.17×109个,是接种之初的30倍。细胞数量达到109时,显微镜观察载体上的ST细胞,呈梭形、大小均一,台盼蓝染色结果证实细胞存活。试验成功实现了ST细胞的高密度培养,为以ST细胞为生产基质的兽用疫苗生产提供了一条简便快捷的途径。