miR-143-3p通过靶向integrinβ1抑制肝癌进展

目的探讨肝癌中miR-143-3p的表达及其对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并分析潜在的机制。方法收集肝癌组织,用RT-qPCR和Western blot法分别检测miR-143-3p和integrinβ1的表达。体外培养肝癌细胞,并用miR-143-3p mimics转染后,用XTT和EDU法检测过表达miR-143-3p对细胞增殖活力的影响,用Transwell法检测过表达miR-143-3p对细胞迁移与侵袭的影响,Western blot法检测过表达miR-143-3p对integrinβ1表达的影响。用荧光素酶活性法检测miR-143-3p与integrinβ1的靶向关系。用XTT、EdU和Transwell法检测过表达integrinβ1对已转染miR-143-3p mimics的肝癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。结果与癌旁正常组织比较,肝癌组织中miR-143-3p表达降低,integrinβ1表达升高,且二者均随疾病分期进展进一步降低或增高。过表达miR-143-3p能抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,并能下调integrinβ1表达。过表达integrinβ1能逆转miR-143-3p对肝癌细胞的抑制作用。integrinβ1为miR-143-3p的靶点。结论miR-143-3p在肝癌中表达下调,而上调miR-143-3p能通过靶向integrinβ1抑制肝癌细胞增殖、迁移与侵袭。

DCLK1和ITGA5在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系研究

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)和整合素α5(integrin alpha5,ITGA5)水平并讨论二者与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月1日至2020年7月1日在我院收治的116例NSCLC患者(NSCLC组)作为研究对象,收集同期100例健康受试者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测NSCLC组和对照组受试者血清中DCLK1和ITGA5的水平;根据预后情况将患者分为生存组和死亡组,ROC曲线分析血清DCLK1、ITGA5的水平对NSCLC患者3年发生死亡的预测价值,多因素Cox回归分析影响NSCLC患者发生死亡的因素。结果 NSCLC组患者血清DCLK1、ITGA5的水平高于对照组(P<0.05);不同吸烟史、TNM分期、分化程度、肿瘤直径以及淋巴结转移的NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者血清DCLK1、ITGA5的水平均高于生存组(P<0.05);血清DCLK1、ITGA5单独及联合预测患者发生死亡的AUC分别为0.895(95%CI=0.824~0.944)、0.828(95%CI=0.747~0.892)、0.926(95%CI=0.862~0.966);DCLK1、ITGA5及淋巴结转移是影响NSCLC患者发生死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平异常升高,二者的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和不良预后有关。

Beta-Catenin,APC蛋白,C-myc及CyclinD_1在卵巢上皮肿瘤中的表达及意义

目的:探讨卵巢上皮性肿瘤的beta-catenin,APC蛋白及c-m yc,cyclin D1的表达及意义。方法:采用ABC免疫组织化学染色方法检测48例卵巢上皮性肿瘤(其中包括18例良性肿瘤,13例交界性肿瘤及17例恶性肿瘤)的beta-catenin,APC蛋白,c-myc及cyclinD1的表达。结果:beta-catenin在卵巢恶性上皮肿瘤及交界性上皮肿瘤中异常表达率均明显高于其在卵巢良性上皮性肿瘤中的表达(P<0.001)。抑癌基因APC蛋白在卵巢恶性上皮性肿瘤及交界性上皮肿瘤的表达明显低于卵巢良性上皮性肿瘤(P<0.05)。癌基因c-myc,cyclinD1在卵巢恶性上皮肿瘤及交界性上皮肿瘤中的表达均强于卵巢良性上皮肿瘤(P<0.05)。卵巢上皮性肿瘤中beta-catenin与APC蛋白呈负相关(P<0.05);beta-catenin与c-myc,cyclinD呈正相关(P<0.05)。结论:APC-beta-catenin-Tcf-4通路异常对卵巢上皮肿瘤的发生,发展起重要作用,beta-catenin异常表达可能激活原癌基因C-m yc,cyclin D1的表达。

integrin β_1在不同细胞周期肝癌细胞与内皮细胞粘附中的作用

探讨了integrinβ1在不同细胞周期人肝癌细胞(SMMC-7721)上的表达和在肝癌细胞与人脐静脉内皮细胞粘附过程中的作用。未同步处理的肝癌细胞(对照组)各细胞周期时相百分比为G0/G1期53.51%、G2/M期11.01%、S期35.48%,采用胸腺嘧啶脱氧核苷、秋水仙碱顺序阻断和胸腺嘧啶脱氧核苷双阻断后释放培养的方法获得G1期和S期的肝癌细胞,其同步率分别为74.09%和98.29%。G1期肝癌细胞integrinβ1表达的荧光强度较S期和对照组相应值明显降低。利用微管吸吮技术定量研究了肝癌细胞与内皮细胞之间的粘附力学特性,发现G1期肝癌细胞的粘附力值比S期相应值明显降低(P<0.01),而S期的粘附力值与对照组比较无明显差别,integrinβ1在肝癌细胞与内皮细胞粘附过程中的贡献约50%。结果提示:胸腺嘧啶脱氧核苷和秋水仙碱能较好地将肝癌细胞同步于G1期和S期,integrinβ1在SMMC-7721肝癌细胞上的表达水平呈现周期差异,在肝癌细胞与内皮细胞粘附过程中,S期细胞可能起的作用更大,integrinβ1在这一粘附过程中起着重要作用。

CD44v6、MMP_2和β_1integrins在CINⅡ-Ⅲ、宫颈鳞形细胞癌中的表达和意义

目的通过研究CD44v6、MMP2和β1integrins在CINⅡ-Ⅲ、宫颈鳞形细胞癌组织中的表达,探讨细胞外基质降解在宫颈鳞形细胞癌发生发展中的作用。方法收集宫颈鳞形细胞癌组织切片20例,CINⅡ-Ⅲ组织切片15例,正常宫颈组织切片10例,免疫组化法检测CD44v6、MMP2和β1integrins表达。结果CD44v6低表达与CINⅡ-Ⅲ病变有相关性(P<0.05),与宫颈鳞形上皮癌变有高度相关性(P<0.001);β1integrins低表达与CINⅡ-Ⅲ病变有高度相关性(P<0.001);MMP2高表达与宫颈鳞形上皮癌变有高度相关性(P<0.001),但与CINⅡ-Ⅲ病变无相关性(P>0.05)。结论CD44v6、β1integrins和MMP2的异常表达与宫颈鳞癌的发生发展有关,细胞外基质作用减弱有利于宫颈癌变的发生,其本身结构的破坏有利于宫颈癌的浸润。

癌相关成纤维细胞中Gal-1表达通过integrin β1促进胃癌细胞侵袭的机制研究

目的研究癌相关成纤维细胞中Gal-1表达通过integrinβ1促进胃癌细胞侵袭的机制。方法高表达Gal-1的胃癌CAFs采用原代培养法,通过CAFs与胃癌细胞共培养、siRNA转染、抑制Gal-1/封闭integrinβ1表达、细胞侵袭能力实验、侵袭能力影响实验和IHC实验等技术,研究胃癌细胞侵袭迁移能力受胃癌CAFs中Gal-1表达的影响程度及作用机制。分析高表达Gal-1的CAFs对癌细胞迁移能力和侵袭能力的影响,比较Gal-1和integrinβ1免疫组化实验结果。结果 CAFs共培养使得胃癌细胞侵袭和迁移能力得到明显提升,Gal-1的表达遭到siRNA抑制后,CAFs对迁移能力和侵袭能力的促进作用得到有效抑制。Gal-1主要在胃癌细胞的间质成纤维细胞中表达,integrinβ1主要在胃癌细胞的细胞膜中表达。Gal-1和integrinβ1在胃癌中的阳性率分别为56.67%(51/90)、43.33%(39/90),并且其表达与淋巴结转移、远处转移、TNM分期差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CAFs表达Gal-1并通过促进胃癌细胞integrinβ1表达的形式提高胃癌细胞的侵袭迁移能力,指明今后胃癌的治疗和相关预后的研究方向,表现出一定的理论研究价值。

乳腺癌组织中β_1 integrin与MMP-2表达的临床病理意义

目的 :探讨 β1integrin与MMP 2在乳腺癌组织中表达的临床病理意义及相互联系。方法 :采用S P法对乳腺癌组织进行β1integrin和MMP 2单克隆抗体的免疫组化染色。 结果 :本组乳腺癌 β1integrin和MMP 2表达率分别为 84 0 % (80 / 94例 )和 94 8% (92 / 97例 )。β1integrin的表达与浸润性导管癌的病理分级有关 ,Ⅰ、Ⅱ级组其中度以上表达高于Ⅲ级组 (χ2 =3 92 ,P <0 .0 5 )。本组乳腺癌 β1integrin表达与MMP 2的表达之间有明显的相关性 ,在 β1integrin 2 +强度以上表达者中 ,其MMP 2中强度以上表达率高于 1+以下者 (χ2 =4 70 ,P <0 .0 5 )。结论 :结果显示 β1integrin的表达强度与乳腺癌细胞的粘附性有很大的关系 ,并且 β1integrin与MMP之间的活动可能有内在的联系。

KAI1调控Integrinβ1通路抑制卵巢癌侵袭、转移

目的探讨KAI1通过调控Integrinβ1通路抑制卵巢癌侵袭的可能机制。方法采用免疫组化En Vision法检测60例上皮性卵巢癌组织、25例正常卵巢组织、21例良性上皮性卵巢肿瘤组织中KAI1蛋白与Integrinβ1蛋白表达的关系; Western blot法检测KAI1在人上皮性卵巢癌细胞株A2780、HO-8910、SKOV3细胞和人正常卵巢上皮细胞株HOSEpi C中的表达;构建高表达质粒EGFP-KAI1转染HO-8910细胞株后,使用Western blot法检测KAI1、Integrinβ1、MMP-7、MMP-9的表达。结果随着上皮性卵巢癌病理学分级及临床分期的增高,KAI1蛋白阳性率降低,Integrinβ1蛋白阳性率升高,KAI1与Integrinβ1表达呈负相关(P <0. 05),在卵巢癌细胞株上亦观察到相似结果;相对于对照组,KAI1高表达组中Integrinβ1、MMP-7、MMP-9表达下调,细胞侵袭、转移能力下降。结论 KAI1可能通过调控Integrinβ1通路抑制卵巢癌侵袭、转移,为探究KAI1抑制肿瘤发生、发展提供新思路。

17β-雌二醇对机械牵拉诱导心肌细胞integrin β1/FAK/p38 MAPK信号转导的影响

目的:研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对体外机械牵拉诱导心肌细胞integrinβ1/FAK/p38 MAPK信号转导的影响。方法:以机械牵拉刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,采用免疫共沉淀方法检测integrinβ1和FAK的结合情况,Western blot方法检测FAK和p38 MAPK磷酸化水平的变化。结果:机械牵拉心肌细胞24 h后,integrinβ1和FAK的结合显著增加,FAK和p38 MAPK磷酸化水平亦明显增强。100 nmol/L E2预处理30 min可明显减轻机械牵拉诱导的心肌细胞integrinβ1和FAK的结合增加,抑制FAK和p38 MAPK磷酸化的水平增强,该效应可被雌激素受体非特异性拮抗剂ICI182780逆转。结论:100 nmol/L的E2能够抑制机械牵拉诱导心肌细胞肥大发生发展过程中integrinβ1对其下游FAK招募结合增加,降低FAK及p38MAPK的磷酸化活性,提示E2与雌激素受体结合后通过抑制integrinβ1/FAK/p38 MAPK信号转导途径的激活,从而发挥心血管保护作用。

Integrin α_5β_1及CD_(44V6)在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的:通过研究integrinα5β1及CD44V6在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨各指标与卵巢癌淋巴结转移的关系。方法:用免疫组化ElivisionTM法检测80例卵巢上皮性肿瘤中integrinα5β1及CD44V6的表达。结果:integrinα5β1的表达按良性、交界性及恶性的顺序呈递减趋势,组间均有显著性差异(P<0.01);CD44V6的表达则呈递增趋势,组间有显著性差异(P<0.05);integrinα5β1淋巴结转移组与未转移组间表达有显著性差异(P<0.05);integrinα5β1与CD44V6的表达呈负相关。结论:integrinα5β1表达下降或缺失,CD44V6表达升高,提示肿瘤进展,恶性度高,预后不良;计算机图像分析系统对卵巢上皮性肿瘤的自动化诊断、淋巴结转移及预后评估有重要意义。

AP-1、Integrin α_1的表达和肺癌转移的相关性

【目的】研究AP-1、integrin α1、Ⅷ因子在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系。【方法】通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、integrin α1、Ⅷ因子的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图象分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、integrin α1蛋白阳性细胞的平均光密度(AOD)和积分光密度(IOD)。并以Ⅷ因子抗体阳性血管数计算微血管密度(MVD)。【结果】C-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关。Integrin α1与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期显著正相关;integrin α1与AP-1之间均存在显著正相关关系;Integrin α1与MVD间存在显著正相关性。【结论】AP-1信号传导通路通过上调integrin α1的表达,改变细胞粘附特性、促进新生血管建立,从而加速了肺癌的浸润转移。

Integrinβ1和CD_(44)V_6在子宫内膜癌组织中的表达及与癌生物学行为的关系

目的探讨Integrinβ1和CD44V6在子宫内膜癌中的表达及与癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测84例子宫内膜癌、20例非典型子宫内膜增生和14例增殖期子宫内膜Integrinβ1和CD44V6的表达情况。结果子宫内膜癌组织中Integrinβ1和CD44V6的表达阳性率明显高于非典型子宫内膜增生(P均<0.05)和增殖期子宫内膜(P<0.01或0.05);Integrinβ1的表达与子宫浆膜侵犯(u=3.07,P<0.01),病理分级(u=3.77,P<0.01)及肿瘤转移(u=3.66,P<0.01)关系密切;CD44V6在有肿瘤转移组织中的阳性表达率显著高于无肿瘤转移的组织(χ2=5.12,P<0.05)。结论Integrinβ1和CD44V6在子宫内膜癌中的明显表达可能与其浸润转移的生物学行为有关。

整合素Integrinβ_1在原发性肝癌组织内的表达及意义

选择同济医院 2 0 0 2年 1月至 12月间住院手术肝癌患者 3 8例肝癌标本作为实验组 ,以 8例门脉高压症肝硬变患者和 4例肝外伤患者肝脏标本作为对照组 ,采用免疫组织化学染色方法检测正常肝脏组织、肝硬化组织和肝癌组织内整合素β1 的表达情况 ,并分析其表达水平与肝癌的部分生物学行为如肿瘤直径、有无包膜侵犯、肝癌病理分级、是否有肝内外转移、是否合并肝硬化以及 AFP水平等因素的关系。结果显示 ,正常肝脏组织及肝硬化组织中均有不同程度的 Integrinβ1 的表达 ,但是表达强度与肝癌组织内的表达相比明显为弱 ( P<0 .0 5 ) ,有显著性差异。提示在肝癌组织内整合素 Integrinβ1 的表达明显高于非肝癌组织 。

integrin β_1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:观察integrinβ1在胰腺癌及癌旁组织中表达,与临床病理特征参数进行相关性分析,初步探讨其临床意义。方法:应用免疫组化技术(SABC法)检测integrinβ1在25例胰腺癌及其癌旁组织中的表达,图像分析软件分析其表达强度,分析与胰腺癌临床病理特征参数之间的关系。结果:integrinβ1在胰腺癌及其癌旁组织中的高表达率分别为76.00%、40.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。在胰腺癌组织中,integrinβ1的表达强度和临床分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05,P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、大小及分化程度无关。结论:integrinβ1可以作为胰腺癌新的分子病理标志物,可能为胰腺癌的基因治疗提供新的靶点。

不同细胞周期肝癌细胞Integrinβ_1的表达

探讨人肝癌细胞(SMMC-7721)的同步化方法及粘附分子integrin β_1 在不同周期肝癌细胞上的表达。采用胸腺嘧啶脱氧核苷、秋水仙碱顺序阻断和胸腺嘧啶脱氧核苷双阻断后释放培养的方法分别获得G_1期和S期的肝癌细胞,用流式细胞仪进行周期分析;采用抗体阻断技术和流式细胞仪检测肝癌细胞上integrin β_1的表达。结果发现未同步化肝癌细胞integrin β_1表达的荧光强度为95.70;G_1期和S期细胞的同步率分别为74.09％和98.29％,integrin β_1表达的荧光强度相应为76.90和94.09。得知药物胸腺嘧啶脱氧核苷和秋水仙碱能较好地将肝癌细胞同步于G_1期和S期;粘附分子integrin β_1在SMMC-7721肝癌细胞上高表达,但表达水平呈现周期差异。

Integrinα_5β_1在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的通过研究integrinα5β1(整合素α5β1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨其与卵巢癌淋巴结转移的关系。方法用免疫组化ElivisionTM法检测80例卵巢上皮性肿瘤中integrinα5β1的表达;运用图像分析系统进行定量检测。结果①定性及半定量结果integrinα5β1的表达按良性、交界性及恶性的顺序呈递减趋势,组间均有显著差异(P<0.01);integrinα5β1淋巴结转移组与未转移组间表达有显著差异(P<0.01)。②定量检测结果integrinα5β1表达的阳性细胞面积按良性、交界性、恶性的顺序呈递减趋势,灰度呈递增趋势。结论integrinα5β1的表达与肿瘤的侵袭、转移有关;integrinα5β1表达下降或缺失,提示肿瘤进展,恶性度高,预后不良;计算机图像分析系统为卵巢上皮性肿瘤的自动化诊断、淋巴结转移及预后评估有重要意义。

DNA倍体分析和E-CD、Integrinα5β1、MMP-2的表达在肺癌中的意义

目的:研究E-CD(E-cadherin,E钙黏着蛋白)、integrinα5β1(整联蛋白α5β1)、基质金属蛋白酶-2(m atrix m etalloprote inase-2,MMP-2)的表达联合DNA倍体和增殖指数(proliferation index,PI)的检测在肺癌侵袭和转移中的意义。方法:免疫组化法观察57例肺癌组织三指标的表达情况,同时用流式细胞术分析这57例组织的DNA倍体和PI。结果:E-CD在肺癌不同组织分化之间存在显著性差异(P<0.05)。E-CD、integrinα5β1、MMP-2在淋巴结转移情况都存在显著性差异(P<0.05)。流式细胞术结果显示PI在TNM分期、组织分化、组织类型中均存在显著性差异(P<0.05),但和淋巴结转移无关。DNA异倍体与淋巴结有无转移之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:随着肿瘤异质性的发生和发展,E-CD、integrinα5β1、MMP-2的异常表达以及DNA异倍体率的增加,表明他们在肺癌侵袭和转移的发生中扮演着重要的角色。但本文研究显示PI的增加和淋巴结转移无关。

合并前列腺炎症的良性前列腺增生组织中Integrinα_2β_1/CD133表达及其意义

目的:探讨合并前列腺炎症的良性前列腺增生(BPH)组织中Integrinα2β1/CD133表达及其意义。方法:收集56例行经膀胱前列腺摘除手术的BPH患者的前列腺标本,常规HE染色后观察其合并炎症情况,其中单纯BPH(24例)为A组,合并前列腺炎症的BPH(32例)为B组。采用免疫组化SP法及Western印迹法检测Integrinα2β1/CD133在两组前列腺组织中表达差异。Image-ProPlus 6.0图像分析软件对结果进行分析。结果:免疫组化Mattern积分结果显示:两组中Integrinα2β1/CD133表达有显著差异(P<0.05)。Western免疫印迹显示:B组Integrinα2β1平均相对光密度值高于A组[(0.29±0.18)vs(0.04±0.03)],P<0.05;B组CD133平均相对光密度值高于A组[(0.08±0.07)vs(0.002 0±0.001 8)],P<0.05。提示B组中Integrinα2β1/CD133表达较A组显著升高。结论:炎症可以促进BPH组织中Integrinα2β1/CD133蛋白表达表达。

乳腺浸润性微乳头状癌组织β1 integrin及Rac1和RhoA表达的研究

目的:探讨极性蛋白β1 integrin及Rac1和RhoA在乳腺浸润性微乳头状癌(invasive micropapillary carcinoma,IMPC)组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学法检测天津医科大学肿瘤医院自2007年1月至2008年12月89例乳腺IMPC患者组织中β1 integrin、Rac1及RhoA的表达,并选取该院同期诊断的90例乳腺浸润性导管癌非特殊型(invasive ductal carcinoma-not otherwise specified,IDC-NOS)病例作为对照,分析3种蛋白间及其与临床病理学特征之间的关系。结果:IMPC组织中β1 integrin及Rac1蛋白高表达率分别为78.7%(70/89)和76.4%(68/89),显著高于IDC-NOS组织的63.3%(57/90)和54.4%(49/90),差异均具有统计学意义(P<0.05);IMPC组织中RhoA阳性表达率为68.5%(61/89),显著高于IDC-NOS组织的44.4%(40/90),差异亦具有统计学意义(P=0.001)。IMPC组织中β1 integrin与Rac1表达均与淋巴结转移呈正相关(P<0.05),且二者之间呈正相关(P=0.006);RhoA表达与淋巴结转移、ER及PR呈正相关(P<0.05),但与β1 integrin及Rac1的表达无显著相关性(P>0.05)。结论:极性蛋白β1integrin、Rac1及RhoA在乳腺IMPC组织中过表达,提示其可能均在IMPC的高转移中发挥重要作用,且可能成为靶向治疗研究的新靶点。