不同光照和水分下三叶鬼针草与本地种金盏银盘生长特征的比较研究

为探讨三叶鬼针草(Bidens pilosa)成功入侵机制,利用盆栽试验对不同光照和水分条件下三叶鬼针草与本地种金盏银盘(B.biternata)的生长特征进行了比较研究。结果表明,两物种对光和水的变化均具有较大可塑性,但与金盏银盘相比,在有利环境下三叶鬼针草具有较大的株高、叶面积、生物量;在不利环境下,三叶鬼针草具有较大的比叶面积和叶面积比;除叶面积比和叶生物量比外,三叶鬼针草各生理参数的可塑性指数均高于本地种。这说明三叶鬼针草具有较强的表型可塑性和入侵适应性,这些特性促进了其成功入侵。

铅胁迫对金盏银盘的生长及其根系耐性的影响

通过水培模拟试验，在不同质量浓度（5、10、20、50、100mg·L^-1）铅（Pb）处理下，研究沼生药用植物金盏银盘（Bidensbiternata）地上部与根系生物量、根系长度和根活力、根系的耐性指数、体内Pb的质量分数与分布。结果表明：Pb处理质量浓度≤20mg·L^-1时，对金盏银盘生长有促进作用。随着Pb处理质量浓度的升高，生物量和根长开始下降，当Pb处理质量浓度达100mg·L^-1时，其生物量和根长均极显著降低（P〈0．01）。各质量浓度处理下的金盏银盘根系活力均低于对照，且都随着处理时间的延长而降低.随着Pb处理质量浓度的升高，金盏银盘体内各部位Pb质量分数基本表现为先升高后降低，其中叶和茎的Pb质量分数在Pb处理质量浓度为20mg·L^-1时达到最大；而根系在Ph处理质量浓度为10n培·L^-1时Pb质量分数最大，对铅的积累显著，质量分数高达2080．89mg·kg^-1。在Ph处理同质量浓度下，Pb在各部位的质量分数由大到小的顺序是根系、茎、叶。各处理质量浓度下的转移系数均小于0．1。在Pb处理质量浓度为10～20mg·L^-1时，金盏银盘的根系耐性指数大于1．0；随着Ph处理质量浓度的增加，根系耐性指数降低。

铅胁迫对金盏银盘生长及生理生化的影响

通过水培模拟试验，研究不同处理时间和不同浓度铅胁迫下金盏银盘生物量及生理生化指标。结果表明，低浓度铅对金盏银盘生长有促进、高浓度有抑制作用；低浓度铅处理（Pb^2＋≤20mg／L）对叶绿素合成有促进、高浓度抑制作用，而随处理时间的延长，各处理浓度最终均引起叶绿素含量的下降；在铅胁迫处理2～8d内，各浓度处理脯氨酸含量都高于对照，在处理10～12d内，低浓度铅处理（Pb^2＋≤10mg／L）脯氨酸含量高于对照，随处理时间的延长变化不规律；在铅胁迫12d内，丙二醛含量基本均随着铅浓度的升高而增加，且均高于对照，随时间增加表现为先升高后降低再升高的趋势；在铅处理8d内，POD活性随着铅浓度的增加基本表现为先升高后降低再升高的趋势，而在处理8d后，基本表现为先降低后升高的趋势；铅胁迫对SOD活性有一定抑制作用，各铅浓度处理在相同处理时间对SOD活性的抑制无明显的规律。POD活性波动较大，而SQD活性最终都会增加。

不同光照和温度下白花鬼针草和金盏银盘种子萌发研究

通过在人工培养箱内模拟环境条件,探讨了不同光照和温度对白花鬼针草和金盏银盘种子萌发的影响,结果表明:光照和温度不是白花鬼针草种子萌发的必要条件,白花鬼针草种子萌发的温度适应范围比金盏银盘宽,在15℃/10℃、20℃/15℃、25℃/20℃、30℃/25℃、35℃/30℃、40℃/35℃下均能萌发,在15℃/10℃、20℃/15℃、25℃/20℃、30℃/25℃时萌发率均达94%左右,金盏银盘种子在40℃/35℃时不能萌发;温度影响白花鬼针草和金盏银盘种子萌发高峰的出现时间及峰值大小,而光照不影响。

金盏银盘指纹图谱的建立及其活性成分的研究

目的:建立不同产地金盏银盘药材的高效液相色谱指纹图谱,并同时测定金丝桃苷、异槲皮苷、鬼针聚炔苷和紫云英苷4种主要成分的含量。方法:采用反相高效液相色谱法,选用Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-3%冰醋酸为流动相梯度洗脱,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)评价图谱的相似性,同时测定药材中4种主要成分的含量。结果:建立了不同产地金盏银盘药材的HPLC指纹图谱,方法学符合指纹图谱要求,不同产地药材相似度差异不大,但4种主要成分含量差异较大。结论:该方法稳定、准确、可靠,指纹图谱结合含量测定为金盏银盘药材质控标准的制定提供了科学依据。

金盏银盘总黄酮的含量测定

目的测定金盏银盘茎和叶中总黄酮的含量。方法采用80%乙醇提取,三氯化铝显色,波长415nm处测定吸光度。结果金盏银盘总黄酮含量茎中为0.47%,叶中为2.54%。结论三氯化铝法测定金盏银盘中总黄酮含量,操作简便,结果可靠,可用于鬼针草类生药及制剂总黄酮的含量测定及质量控制。

金盏银盘化学成分的分离与鉴定

目的研究金盏银盘的化学成分。方法采用乙醇提取,不同溶剂提取,硅胶柱、聚酰胺柱色谱分离纯化,波谱分析鉴定化合物的结构。结果从金盏银盘中得到单体9个,用化学和现代波谱技术鉴定了6个,分别为:(Z)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6,7,3′,4′-四羟基橙酮,即海生菊苷(maritimetin)Ⅰ,槲皮素(quercetin)Ⅱ,6-O-(6″-丙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6,7,3′,4′-四羟基橙酮(Z-6-O-(6″-propionyl-β-D-glucopyranosyl)-6,7,3′,4′-tetrahydroxy-auron)Ⅲ,4-O-(2″-O-乙酰基-6″-O-对香豆酰基-β-D-吡喃葡萄糖)-对香豆酸(4-O-(2″-O-acetyl-6″-O-p-coumaroyl-β-D-glucopyranosyl)-p-coumaricacid)Ⅳ,三十烷酸(triacontanoic acid)Ⅴ,豆甾醇(stigmasterol)Ⅵ。结论化合物Ⅲ,Ⅴ为首次从本属植物中得到,Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ,Ⅵ为首次从本植物中得到。

金盏银盘提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

对金盏银盘醇提取物用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,测定各部分的酶抑制活性,并初步对金盏银盘酶抑制的动力学进行研究。结果表明:乙酸乙酯部位具有较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其抑制成分在35～55℃具有较高的稳定性,最佳作用浓度为45μg/mL,且抑制作用迅速。

金盏银盘黄酮类成分抗氧化研究

目的测定金盏银盘黄酮类成分抗氧化活性。方法采用Fenton反应法,分别检测金盏银盘不同部位及黄酮单体的抗氧化活性。结果乙酸乙酯部位的羟自由基清除率最高;乙酸乙酯部位分离得到的黄酮单体,Z-6-O-(6″-丙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6,7,3',4'-四羟基橙酮的抗氧化效果优于槲皮素。结论金盏银盘黄酮对羟自由基有较好的清除作用。

不同干燥方法对金盏银盘中苯丙素类成分含量的影响

目的建立高效液相色谱法同时测定鲜品金盏银盘中绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸3种苯丙素类成分含量,并考察阴干、烘干、晒干及冻干等4种不同干燥方法对这3种成分含量的影响。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Welch Materials Ultimate XB C18(250 mm×4.6 mm,5μm),体积分数为0.1%的甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280 nm,柱温为30℃。鲜品金盏银盘采用不同方法干燥后,水加热回流提取,经处理后测定。结果所建立的HPLC方法可用于金盏银盘中3种苯丙素类成分的含量测定;在不同方法制备的样品中,鲜品含量最高,其次为冷冻干燥、晒干、阴干,烘干样品含量最低。结论该方法可用于考察不同干燥方法对金盏银盘主要成分含量的影响,并为其质量控制提供参考依据。

基于网络药理学的金盏银盘作用机制研究

本研究应用网络药理学方法分析和预测金盏银盘(Bidens biternata(Lour.) Merr. et Sherff.)中活性成分对应的靶点和作用机制。结合作者前期的研究结果,在收集和筛选金盏银盘中活性成分的基础上,通过TCMSP和PubChem BioActivity Analysis Service分析平台获取对应靶标;与基因本体(Gene Ontology)和信号通路(Pathway)功能富集分析相结合,构建金盏银盘的活性成分-靶点-通路作用网络,分析和探讨金盏银盘的作用机制。结果表明,数据库中筛选出绿原酸、色氨酸、芦丁、奥卡宁等金盏银盘的12个活性成分,发现其主要作用于PTDS2,TNF,TOP2A,PTPN1等58个关键靶点,638个生物学过程(涉及分子功能、细胞组成和生物过程3个部分),113条信号通路(主要包括人类疾病、信号转导、细胞过程、物质代谢等);金盏银盘有抗氧化、抗炎、护肝作用,在炎症相关疾病方面有良好的药理药效活性。通过网络药理学方法对金盏银盘活性成分进行了靶点预测,构建了网络分析图,为进一步深入实验研究金盏银盘的作用提供了参考和借鉴。

基于顶空静态进样技术的中药鬼针草挥发性成分GC-MS分析

目的:建立顶空静态进样快速分析鬼针草低温易挥发性成分的方法。方法:采用顶空静态加热萃取技术,提取鬼针草低温易挥发性成分,进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析。结果:经GC-MS分析,鉴定出鬼针草中24个挥发性化学成分,其中α-蒎烯、α-人参烯含量最高,分别为25.19%,12.29%。结论:GC-MS结合顶空进样技术,分析鬼针草中的低温易挥发性化学成分信息,寻求中药气味主观认识的化学成分客观表征,为中药采集术语和采集经验的客观化研究提供科学依据,从而有效推进中药现代化的进程。

基于Nrf2/Keap1信号通路探讨金盏银盘水提液对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠抗氧化应激作用

目的探究金盏银盘Bidens biternata(Lour.)Merr.&Sherff.水提液对四氯化碳诱导的急性肝损伤改善作用及其机制。方法将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素(0.15 g/kg)组和金盏银盘低、高剂量(3.9、7.8 g/kg)组,每组12只。各组小鼠连续ig给予相应药物7 d,末次给药后除对照组外均ip 0.4%四氯化碳构建急性肝损伤小鼠模型。24 h后收集小鼠血清及肝脏组织。用生化试剂盒检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,并取肝组织匀浆检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。采用苏木精–伊红染色(HE)切片观察小鼠肝脏病理变化。Western blotting测定肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、抗体Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白的表达情况。结果与模型组比较,金盏银盘水提液组小鼠组织病理学观察发现肝脏炎症细胞浸润明显减少,血清AST、ALT、MDA水平降低,血清SOD和肝组织GSH-Px活性升高(P<0.05、0.01);金盏银盘水提液组可以增加小鼠肝脏Nrf2和HO-1蛋白表达,抑制Keap1蛋白表达。结论金盏银盘能够有效改善四氯化碳诱导的急性肝损伤,作用机制与激活Nrf2/Keap1信号通路抑制氧化应激损伤有关。