Biological control of rice disease and insect by chitinase-producing bacterium X2-23

Enriched by the-medium containingchitin and cell wall of Phizoctoniasolani AG-1,a bacterium X2-23 withhigher chitinase activity was isolatedfrom 166 chitinase-producing bacteria.It could distinctly inhibit the fungi

生防菌bio-2菌株对家禽病原菌的抑制作用

采用纸片药敏试验法，分别测定了不同稀释度生防菌bio-2菌株无菌滤液对分离自家禽的大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌等3种病原菌的抑菌作用。结果表明，生防菌bio-2菌株无菌滤液原液、1：2、1：4、1：8、1：16和1：32倍稀释液对沙门氏菌、大肠杆菌和葡萄球菌均具有很好的抑菌作用，其中对沙门氏菌的抑菌效果最好（抑菌圈直径17．67～23．78mm），对葡萄球菌的抑制效果次之（抑菌圈直径14．90～19．73mm），对大肠杆菌的抑菌效果稍差（抑菌圈直径11．64～16．72mm）。

细菌XS-JS3对松材线虫杀线活性的测定

细菌XS-JS3是一种新发现的对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)具有较高杀线活性的细菌,试验比较了细菌XS-JS3培养液、细菌培养液滤液及含菌体水溶液对松材线虫的杀线活性,结果发现细菌菌体本身对松材线虫无杀线活性,杀线活性物质存在于细菌的培养液滤液中。通过对该细菌培养液滤液对松材线虫致死过程的观察发现:松材线虫接触该细菌培养液滤液30min后就表现为行动迟缓;在5h后所有虫体均不活动,针刺无反应;24h后部分僵直虫体出现局部膨大,且膨大部位出现体液外渗而虫体最终被消解。对不同培养时间的细菌XS-JS3滤液杀线活性的比较试验表明:该细菌分泌的杀线物质在10d内随培养时间的延长而含量增加,杀线活性逐渐提高,不同培养时间下滤液的杀线活性差异明显;但培养15d后,稀释10倍的滤液对松材线虫杀线活性比培养10d时同样滤液的杀线活性则略有下降,但差异不明显,因此获得该细菌分泌的杀线物质较理想的培养时间为10d。将细菌XS-JS3培养液滤液进行不同温度的热处理后测定对松材线虫的杀线活性,结果表明引起松材线虫死亡和消解的物质是两个不同物质,存在于培养液滤液中的对松材线虫有杀线活性的物质是热稳定的,而引起松材线虫虫体消解的物质是热不稳定的。

生防细菌ML-3抗菌蛋白发酵条件的优化及其防治应用

明确菌株ML-3抗菌蛋白对马铃薯早疫病的防效效果,为马铃薯早疫病生物防治提供参考依据。本研究采用硫酸铵分级沉淀、琼脂扩散法、正交试验、田间试验以及16S rDNA系统进化分析相结合的方法对菌株ML-3产抗菌蛋白的较优碳源、氮源、发酵条件、最佳硫酸铵沉淀浓度、抑菌稳定性、马铃薯早疫病田间防效和分类地位进行了研究。结果表明:该菌株产生的抗菌蛋白最佳发酵液配方为2%马铃薯、1%蛋白胨和0.5%NaCl,最佳发酵条件为:初始pH值7.0、温度30℃、装液量400 mL/500 mL、接种量5 mL、发酵48 h;抗菌蛋白在温度≤60℃、pH值5-8和紫外照射36 h内具有良好稳定性,而且对K+、Fe^2+、Zn^2+、Na^+稳定性较好;马铃薯早疫病防治的田间用药浓度为≥10 mg/L;使用16S rDNA序列可将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌沙漠亚种(Bacillus subtilis subsp.inaquosorum)。说明菌株ML-3抗菌蛋白在防治马铃薯早疫病和生物农药开发中应用潜力明显。

生防菌株CAB-1抑菌物质产生的条件及其稳定性研究

[目的]探索生防菌株CAB-1的最优培养条件及其产生的抑菌物质稳定性。[方法]以黄瓜灰霉菌为靶标,分别采用改进牛津杯法和含药平板法测定抑菌物质活性,并对菌株CAB-1产生抑菌物质的发酵条件及抑菌物质特性进行了研究。[结果]菌株CAB-1产生抑菌物质的最适培养基为4号培养基,最佳发酵温度为31℃,最佳发酵时间为48h。菌株CAB-1所产的抑菌物质在60℃及其以下具有热稳定性;超声波(100W)处理20min对抑菌物质的活性没有影响,处理30min以上抑菌物质的活性显著下降;紫外线照射20、30、40min对抑菌物质的活性没有显著影响,照射50min后其活性显著降低;pH值为6、10、11时,抑菌物质的活性最高。[结论]该研究为利用生防菌株CAB-1开发新型微生物杀菌剂提供了依据。

生防菌株11-7对松材线虫的拮抗研究

为筛选出对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)有拮抗效果的细菌菌株,采用胰化蛋白胨肉汤培养基和牛肉膏蛋白胨培养基进行菌株发酵后,加入松材线虫进行平板测定和稀释测定.结果表明:生防菌株11-7的发酵原液和上清液均对松材线虫有很强的拮抗作用,处理24 h即可全部杀死线虫.经胰化蛋白胨肉汤培养基发酵后稀释100倍的菌液对松材线虫仍具有较强的拮抗效果,校正死亡率可达78.4%,效果远远好于经牛肉膏蛋白胨培养基发酵的菌液.

生防细菌与黄腐酸绿源宝促进棉花生长及防治黄萎病的效果

分析、测定内生细菌73 a、拮抗细菌JB52和化学药剂黄腐酸绿源宝单独使用、混合使用对棉苗生长、棉花产量的影响以及对棉花黄萎病的防治效果。结果表明:73 a和JB52都具有促进棉苗生长和提高棉花产量的作用,特别是73 a的作用最强,苗期株高可增长29.9%,鲜重增加45.2%,田间试验结果籽棉增产11.5%;73 a菌液灌根对棉花黄萎病的防治效果最好,达到50%;黄腐酸绿源宝对棉苗生长和棉花产量没有促进作用,但对防治棉花黄萎病有一定的效能;内生细菌73 a与拮抗细菌JB52或黄腐酸绿源宝混用都不如单独使用效果好。

利用响应面分析方法优化生防细菌B579增殖培养基

采用响应面法（Response Surface Methodology,RSM）对影响生防细菌B579生长的黄豆饼粉、玉米粉、牛肉膏3个主要因子的最佳水平及其交互作用进行了研究与探讨。结果表明黄豆饼粉、玉米粉、牛肉膏分别在30.2、31和23.5g/L的条件下,可使B579获得最大菌体量。验证试验证实了该方程的预测值与实际值之间吻合较好。优化后的培养基使菌体量从起始LB培养基的8×10^9cfu/mL提高到8×10^11cfu/mL。

生防菌B9601的防治效果研究

该研究测定了生防菌株B 96 0 1对 2 9个丝状真菌抑制效果及对部分植物病害的防治作用 ,为了明确该菌株的作用机理 ,开展了抑菌活性物质的初步试验。结果表明 ,该菌株对大部分供试的病原真菌及木霉菌有极显著抑制作用 ,对食用菌污染菌的曲霉菌、棉花黄萎病菌及对食用菌平菇、裂褶菌无抑制作用 ,对食用菌香菇和金针菇有部分抑制作用。对辣椒疫病预防作用优于治病作用 ,能推迟发病 2～ 3d。对马铃薯薯块晚疫病具有拮抗作用 ,而对马铃薯叶片的预防作用也优于治病作用 ,同时早期治疗的效果优于晚期治疗效果。抑菌活性物质测定试验证明 :B 96 0 1分泌的活性物质对油菜菌核病原菌和烟草赤星病病原真菌具有 96 %以上的抑制作用 ,但当温度达 10 0℃以上 0 .5h 。

有机磷农药对韭菜虫害的防治效果及农药的微生物降解

采用 3 0 0kg(a.i)·hm-2 辛硫磷和 2 6 3kg(a.i)·hm-2 甲基对硫磷来防治韭菜蓟马 ,3d后与不施农药的对照相比 ,虫口减退率分别达到 98 2 8%和 98 39% ;2 0d后虫口减退率分别达到 89 94 %和94 0 4 % .用浓度分别为 15 0 0、18 0 0和 2 1 0 0kg(a .i)·hm-2 的辛硫磷来防治韭蛆 ,3d后与不施农药的对照相比 ,虫口减退率分别达到了 80 77%、93 10 %和 96 98% ;35d后虫口减退率分别达到了 92 4 4 %、95 0 5 %和 96 81% .施用降解菌剂对防治蓟马和韭蛆没有不良影响 ,但可显著降低韭菜中的农药含量 .蓟马施药防治后 3d喷施 4 5 0 0L·hm-2 的降解菌剂 ,3d后与不施菌对照相比 ,辛硫磷和甲基对硫磷的降解率分别为 99 5 2 %和 98 83% ;2 0d后韭菜 (苔 )中农药含量均检测不出 .韭蛆施药防治后 3d灌施 75 0 0L·hm-2 降解菌剂 ,35d后不同辛硫磷施用量的降解率分别为 10 0 %、10 0 %和 99 6 9% .

红树内生细菌AiL3抗菌蛋白的纯化及其防治芒果炭疽病机理研究

本文对红树内生细菌AiL3菌株的抑菌蛋白及其防治芒果炭疽病的效果与防病机理进行了研究。结果表明,AiL3菌株产生的抑菌物质主要为分子量28 kD的抑菌蛋白;60 g.mL 1抑菌蛋白处理芒果9 d后对炭疽病的防治效果达45.1%,与施保克的防治效果(43.6%)相当;抑菌蛋白抑制病原菌菌丝生长,导致菌丝现肿胀、膨大、畸形、细胞膜透性增加、细胞内含物外渗;抑菌蛋白处理后诱导芒果体内过氧化物酶(POD)活性下降,而苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性上升。

油菜内生细菌yc8诱导植物抗病性机理研究

从山西太谷、运城采集的油菜中分离得到40株植物内生细菌,经过初步筛选得到具有生防潜力的菌株yc8,经鉴定其为环状芽孢杆菌(B circulans),对其生物学特性、生防作用、发酵条件、促生作用及诱导植物抗病性进行了研究,结果表明,经油菜内生细菌yc8发酵液处理后,植物体内丙二醛(MDA)的含量减少,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)有不同程度的升高,从而提高了植物对病害的抵御能力。

1株解淀粉芽孢杆菌HN011抑菌次级代谢产物的分析

【目的】分离和鉴定生防菌HN011在YPD条件下发酵的次级代谢产物。【方法】HN011少量（1 L）发酵,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行液-液萃取,通过金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的活性试验跟踪确定活性部位;通过放大发酵,对活性部位进行分离得到单体化合物。利用核磁共振和质谱等手段,鉴定单体化合物。【结果】生防菌HN011少量发酵后,发酵液经不同极性的有机溶剂液-液萃取,萃取物的活性试验表明,乙酸乙酯部位活性最强,其次氯仿部位,正丁醇部位活性较弱,石油醚部位、水部位活性不明显。通过放大发酵,在活性部位分离出15个单体,结构鉴定表明,主要为小分子的环二肽。【结论】生防菌HN011在YPD的发酵条件下,次级代谢产物主要为一些小分子的环二肽。

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6摇瓶发酵条件优化

[目的]对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6的摇瓶发酵工艺进行优化。[方法]通过对发酵培养基成分和发酵条件的单因素试验和正交试验,测定生防菌株FS6对人参立枯丝核菌的抑菌效果和菌体生长量,来确定其最适发酵培养基和发酵条件。[结果]最适摇瓶发酵培养基配方为葡萄糖30 g,酵母浸粉40 g,Mg SO_4·7H_2O_2 g,甘油10 m L,K_2HPO_42 g,H_2O 1000 m L;最优培养条件为接种量6%,摇瓶装液量50 m L/250m L,摇床转速160 r/min,初始p H值6.0,培养温度28℃,培养时间12 h。[结论]解淀粉芽孢杆菌FS6在最适摇瓶发酵培养基及发酵条件下,对人参立枯病菌的抑菌活性最好,为该菌株的工业化生产奠定了基础。

生防菌Act12铁载体合成酶Ser基因的功能

【目的】通过敲除生防菌Act12铁载体合成酶Ser基因,研究该铁载体在植物防病促生中的作用。【方法】以自杀型质粒p KC1132作为基本载体,两侧为Ser基因上下游片段作为同源交换臂,两个同源臂之间为卡那霉素抗性基因,构建重组质粒p CT12;借助接合转移技术,将该质粒导入Act12,筛选突变株并进行PCR验证;研究Ser基因缺失突变体和野生型菌株Act12在生长速率、铁载体产量、甜瓜种子促生、抗苹果轮纹病菌(Macrophoma kawatsukai)等方面的差异。【结果】经PCR验证及测序均证实Ser基因缺失突变体构建成功。Ser基因突变后,铁载体合成量明显减少,抑制甜瓜种子的萌发及生长,对苹果轮纹病菌拮抗作用降低。【结论】生防菌Act12 Ser合成酶基因参与控制合成的铁载体在对甜瓜种子促生作用和拮抗苹果轮纹病菌中发挥一定作用,为进一步研究Act12防病促生机制奠定基础。