RNA干扰人端粒酶逆转录酶基因对膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株端粒酶活性抑制的研究

目的:探讨RNA干扰技术使人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因沉默,对膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株端粒酶活性的抑制作用。方法:针对hTERT基因设计构建多种siRNA表达载体,并转染至膀胱肿瘤BIU-87细胞,通过实时荧光定量、单四唑(MTT)检测端粒酶活性,观察siRNA表达载体对hTERT基因表达的影响。结果:实时荧光定量和MTT检测证明,所构建的载体能导致不同程度的hTERT基因沉默,并成功地抑制BIU-87细胞的生长。结论:RNA干扰膀胱尿路上皮癌细胞(BIU-87)端粒酶hTERT基因,能影响端粒酶基因的表达,为进一步研究端粒酶活性在膀胱尿路上皮癌中的作用奠定了基础。

荧光原位杂交在膀胱尿路上皮癌中的应用

目的探讨3,7,17号染色体及9p21(p16基因)组合探针在监测膀胱尿路上皮癌术后复发及诊断膀胱尿路上皮癌的应用价值。方法利用荧光原位杂交(FISH)检测膀胱尿路上皮癌患者的尿脱落细胞及组织切片中3,7,17号染色体及9p21组合的畸变情况。结果 FISH监测膀胱尿路上皮癌术后复发的敏感度为87.50%;术前FISH阳性的患者术后更易复发;FISH诊断膀胱尿路上皮癌的阳性率为78.85%。结论利用FISH检测尿脱落细胞中3,7,17号染色体及9p21组合的畸变能有效辅助监测膀胱尿路上皮癌术后复发;并可能在一定程度上预测术后复发;同时利用FISH检测组织切片中3,7,17号染色体及9p21组合的畸变也能有效辅助膀胱尿路上皮癌的诊断。

荧光原位杂交技术检测膀胱肿瘤组织中染色体的表达及意义

目的:利用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH),分析膀胱肿瘤中染色体畸变情况,探讨膀胱尿路上皮癌和非尿路上皮癌中染色体的表达及意义。方法:采用FISH技术检测25例膀胱尿路上皮癌、13例非尿路上皮癌(7例鳞癌,6例腺癌)标本中3、7、17号染色体及9p21的表达,以1 5例正常膀胱组织作为阴性对照。结果:38例膀胱肿瘤标本中3、7、17号染色体扩增明显,其中染色体在肿瘤和正常组织中平均拷贝数分别为:3号染色体为2.43 vs.1.46,7号染色体为2.29 vs.1.44,17号染色体为2.29 vs.1.30(P<0.01)。9号染色体P16基因为1.36 vs.1.14(P=0.05)。3、7、17号染色体在膀胱尿路上皮癌和非尿路上皮癌中扩增率差异无统计学意义,而9p21缺失率在两者中明显相关,在移行细胞癌、鳞癌、腺癌缺失率为52.0%(13/25)、100%(7/7)、83.7%(5/6)(P=0.037)。结论:采用FISH技术检测有助于探索3、7、17号染色体及9p21畸变与肿瘤类型的关系,并可作为膀胱非尿路上皮癌早期诊断的有用指标。