RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解

目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。

口服硝黄温胆汤联合益生菌灌肠治疗膀胱癌根治性切除术+回肠原位新膀胱术术后胃肠功能紊乱的临床效果

目的探讨口服硝黄温胆汤联合益生菌灌肠治疗膀胱癌根治性切除术+回肠原位新膀胱术术后胃肠功能紊乱(POGD)的临床效果。方法选取2020年1月至2022年12月佛山市中医院泌尿外科的84例膀胱癌根治性切除术+回肠原位新膀胱术POGD患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组及试验组,各42例。两组均给予基础治疗,对照组给予甲硫酸新斯的明注射液肌肉注射联合开塞露塞肛灌肠,试验组口服硝黄温胆汤联合益生菌灌肠。比较两组的治疗效果。结果治疗后,试验组的腹胀、肠鸣音及伴随症状评分低于对照组(P<0.05)。治疗后,试验组的胃泌素(GAS)、胃动素(MOT)水平高于对照组,C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及白细胞计数(WBC)低于对照组(P<0.05)。试验组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。结论口服硝黄温胆汤联合益生菌灌肠治疗根治性膀胱全切+回肠原位新膀胱术POGD的临床效果确切。

膀胱癌术后尿路感染的临床特点及影响因素

目的探讨膀胱癌术后尿路感染临床特点及有关影响因素。方法选取2018年1月至2023年5月于医院接受膀胱癌切除术治疗的256例膀胱癌患者为研究对象,根据术后是否发生尿路感染分组。比较两组临床资料,通过logistic回归方程分析膀胱癌术后尿路感染相关危险因素。结果256例膀胱癌术后有49例(19.14%)发生尿路感染。两组糖尿病、膀胱冲洗时间及血清C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、干扰素-γ(IFN-γ)水平差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病、膀胱冲洗时间(≥2 d)及血清CRP、PCT、iNOS、IFN-γ水平为胱癌患者术后发生尿路感染的危险因素(P<0.05)。结论糖尿病、膀胱冲洗时间及血清CRP、PCT、iNOS、IFN-γ水平均为膀胱癌术后尿路感染影响因素,临床需加以针对性防范和干预,促进预后改善。

敲降lncRNA UCA1降低人膀胱癌细胞系T24对吉西他滨耐药

目的探讨lncRNA UCA1对人膀胱癌细胞系T24体外对吉西他滨(GEM)耐药的影响及相关分子机制。方法用RT-qPCR检测T24细胞和T24/GEM细胞中UCA1 mRNA表达。用不同浓度GEM(0.1、1和10μmol/L)刺激T24/GEM细胞48 h,用LC3染色法观察自噬斑,Western blot检测自噬相关蛋白质表达。将UCA1-shRNA或UCA1-shRNA+pcDNA-Bcl-2转入T24/GEM细胞,用MTT法和流式细胞测量术评估细胞对GEM的敏感性;用Western blot检测p53、Bcl-2和自噬相关蛋白质的表达。结果T24/GEM细胞中UCA1的表达显著高于亲本T24细胞(P<0.05)。在0~10μmol/L浓度范围的GEM呈依赖性促进T24/GEM细胞自噬(P<0.05)。敲降UCA1后,T24/GEM细胞对GEM的敏感性增加(P<0.05),自噬能力减弱(P<0.05),p53和Bcl-2表达降低(P<0.05)。Bcl-2过表达能部分逆转UCA1-shRNA对T24/GEM细胞的GEM增敏和抑制自噬的作用(P<0.05)。结论敲降lncRNA UCA1通过抑制Bcl-2介导的自噬降低T24/GEM细胞对GEM的耐药性。

腹膜外途径腹腔镜膀胱全切340例经验(“大家泌尿网”观看手术视频)

根治性膀胱全切联合盆腔淋巴结清扫是治疗肌层浸润性膀胱癌和高危非肌层浸润性膀胱癌的标准术式。青岛大学附属医院泌尿外科已为340例膀胱癌患者施行腹膜外途径腹腔镜下膀胱根治性切除术(ELRC),本文就术中腹膜外腔的建立、腹膜外手术空间的扩大及腹膜外途径切除膀胱、清扫淋巴结等手术步骤及如何缩短手术时间、降低手术风险等经验进行总结。腹膜外途径切除膀胱时,术中不破坏腹膜的完整性,保留腹膜的支持、分泌、保护、润滑等作用,不仅能降低并发症的发生率,而且对腹腔脏器影响较小,可为后续治疗提供有利条件。

膀胱黏膜红斑样病灶的特征和活检病理结果分析

目的分析经膀胱镜检查发现的膀胱黏膜红斑样病灶(RPL)的特征及病理良恶性概率,探讨RPL活检的意义。方法回顾性分析2019年1月—2023年6月南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科膀胱镜检查中发现RPL患者的性别、年龄、膀胱镜检查原因、是否有疤痕、并发症以及活检病理结果等资料,按照病理结果将患者分成良性组和恶性组,分析其临床和RPL特征。结果共收集521例患者资料,其中病理结果良性416(79.8%)例,恶性105例(20.2%),恶性组患者平均年龄更高,差异有统计学意义[(66.8±12.2)岁vs.(62.8±12.9)岁,P=0.005]。膀胱镜检查原因为膀胱癌/肾盂输尿管癌术后随访、血尿待查和下尿路症状患者RPL的恶性检出率分别为23.7%(92/389)、19.6%(9/46)、4.7%(4/86)。医师根据膀胱镜下直接观察的结果和经验判断对RPL高度怀疑恶性、轻度怀疑恶性、良性概率大的3组患者的病理恶性检出率分别为56.9%(37/65)、37.0%(30/81)、10.1%(38/375)。结论RPL活检在膀胱癌/肾盂输尿管癌患者的术后随访中具有重要意义,尤其是男性高龄患者且病灶位于疤痕或疤痕旁时。

Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭

目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。

经尿道钬激光整块切除术治疗高危非肌层浸润性膀胱癌47例疗效及术后并发症与复发风险的观察

目的 探讨经尿道钬激光整块切除术治疗高危非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)的效果。方法 选取2019年1月至2021年5月承德医学院附属医院94例高危NMIBC病人进行前瞻性研究,按随机数字表法分组,各47例。对照组行经尿道膀胱肿瘤等离子电切术,观察组行经尿道钬激光整块切除术。比较两组手术相关指标、临床疗效、手术前后外周血循环肿瘤细胞(CTCs)计数、肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、膀胱肿瘤抗原(BTA)、糖链抗原19-9(CA19-9)]、并发症及预后情况。结果 观察组术中出血量、膀胱冲洗、尿管留置及术后住院时间分别为(25.10±4.12)mL、(18.65±6.74)min、(19.57±3.48)h、(8.01±1.69)d,均优于对照组的(43.25±6.78)mL、(24.78±8.12)min、(35.24±5.12)h、(15.32±2.89)d(P<0.05);观察组总有效率87.23%高于对照组68.09%(P<0.05);术后72 h观察组外周血CTCs计数为5.47±2.00,低于对照组的8.96±3.12(P<0.05);术后3、6、12个月观察组血清BTA、CEA、CA19-9水平低于对照组(P<0.05);观察组并发症发生率6.38%(3例)低于对照组23.40%(11例)(P<0.05);术后随访1年,观察组病人1年无复发生存率97.83%(45/46)与对照组90.91%(40/44)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 经尿道钬激光整块切除术可提高高危NMIBC病人临床疗效,减少并发症,加速术后康复进程,并可减少外周血循环肿瘤细胞,降低肿瘤标志物水平。

斯钙素-1的表达在膀胱尿路上皮癌的复发和预后中的作用

目的探讨斯钙素-1(STC1)的表达在膀胱尿路上皮癌中的作用。方法选取2011年8月至2018年4月潍坊市益都中心医院泌尿外科及肾脏内科收治的126例膀胱癌肿瘤切除术患者作为研究对象,采用免疫组化检测126个膀胱尿路上皮癌样本中的STC1表达情况,免疫组化评分≥4分的样本归为STC1高表达组(31例),而得分<4分的样本归为STC1低表达组(95例)。分析STC1表达与临床病理因素的相关性。通过Kaplan-Meier方法绘制生存曲线分析膀胱尿路上皮癌组织中STC1表达在患者预后中的作用。通过Cox回归模型分析影响膀胱尿路上皮癌患者不良预后发生的危险因素。结果STC1在T2~T4期膀胱尿路上皮癌患者中的表达高于在Ta~T1期患者中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,STC1高表达、低表达在肿瘤复发中差异有统计学意义(P<0.05)。STC1高表达是不良预后因子(P<0.05),多因素分析结果显示,STC1高表达为复发影响因子(P<0.05),STC1高表达为膀胱尿路上皮癌独立预后危险因素(P<0.05)。结论STC1高表达是一个独立的生物标志物,与膀胱尿路上皮癌的复发和预后不良有关。

CalliSpheres可载药微球动脉栓塞化疗治疗膀胱癌并出血的疗效及安全性分析

目的 探讨CalliSpheres可载药微球动脉化疗栓塞治疗膀胱癌并出血的可行性及安全性。方法 选取接受CalliSpheres可载药微球经导管动脉化疗栓塞(DEB-TACE)治疗的11例膀胱癌并出血患者,采用改良实体瘤疗效评价标准(mRECIST)评价3个月、6个月的治疗效果,并记录患者治疗前后血尿复发情况、血液指标变化、不良反应及并发症发生情况。结果 11例患者均完成介入栓塞治疗,技术成功率100%。肉眼血尿均在术后48~72 h消失。患者首次治疗后3个月和6个月的客观溶解率(ORR)分别为72.73%和63.64%,疾病控制率DCR分别为90.91%和81.82%。随访9个月时11例患者均生存。术后并发症包括膀胱区疼痛8例,恶心、呕吐6例,发热2例,均经对症处理后缓解。未出现异位栓塞等严重并发症。结论 应用CalliSpheres载药微球动脉栓塞化疗治疗膀胱癌并出血疗效显著,安全性好,值得推广。

Gabra3通过AKT/mTOR途径促进膀胱癌T24细胞侵袭和迁移

目的:探究γ-氨基丁酸受体亚基α-3(Gamma-aminobutyric acid receptor subunit alpha-3,Gabra3)基因对膀胱癌T24细胞凋亡、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:TCGA数据库分析Gabra3基因在膀胱癌中的表达以及转移和生存的相关性。建立Gabra3过表达和Gabra3突变的T24细胞株,根据转染质粒不同,分为空白T24细胞(Control)、空pDONR223载体转染T24细胞(NC)、野生型Gabra3过表达T24细胞株(wt-Gabra3)、突变型Gabra3 T24细胞株(mut-Gabra3)。在回补实验中,分为转染突变型Gabra3 T24组(mut-Gabra3)、转染空pDONR223载体mut-Gabra3组(mut-Gabra3-NC)、转染野生型Gabra3过表达组(mut-Gabra3+wt-Gabra3)。用TUNEL染色检测T24细胞凋亡,细胞划痕和Transwell分别检测T24细胞迁移和侵袭,Western blot检测AKT/mTOR通路相关分子生物表达水平。结果:Gabra3基因在膀胱癌中显著高表达(P<0.05),生存曲线证实远处转移存在的患者生存期明显较短(P<0.05)。成功构建Gabra3过表达和突变的T24细胞株。与Control组相比,wt-Gabra3组细胞凋亡能力显著降低,迁移、侵袭能力显著增强(P<0.05),而mut-Gabra3组细胞凋亡显著增加,侵袭能力显著减弱(P<0.05);wt-Gabra3组细胞p-AKT、p-mTOR、p-4E-BP1、p-S6K蛋白表达均显示上凋(P<0.05),而mut-Gabra3组细胞上述蛋白无差异。在回补实验中,过表达wt-Gabra3的mut-Gabra3突变T24细胞凋亡能力受到抑制(P<0.05),迁移和侵袭能力显著增强(P<0.05),并且该组细胞AKT/mTOR通路相关分子显著激活(P<0.05)。结论:外源性的未编辑的Gabra3可以促进膀胱癌T24细胞的迁移、侵袭能力,并且可能与激活AKT/mTOR途径通路密切相关。

单次灌注化疗后膀胱持续生理盐水冲洗或增加中低风险非肌层浸润性膀胱癌进展风险

目的探究行经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)的中低风险非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)患者单次即刻膀胱灌注化疗(SIIC)后膀胱持续生理盐水冲洗(CSBI)的治疗效果。方法回顾性分析2004年1月—2019年12月于北京大学人民医院泌尿外科行TURBT的211例中低风险NMIBC患者的临床资料,根据患者SIIC后是否进行CSBI分为CSBI组和无CSBI组,比较两组患者的复发率、进展率、无复发生存率和无进展生存率。通过Cox单因素及多因素回归分析探究CSBI是否为患者肿瘤复发和进展的危险因素。结果两组患者的基线资料、复发率和进展率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者无复发生存率比较无明显差异,而CSBI组无进展生存率更低(χ^(2)=8.270,P=0.004)。在多因素Cox回归分析中,糖尿病(HR:2.240,95%CI:1.066~4.704,P=0.033)和多发肿瘤(HR:3.060,95%CI:1.639~5.711,P<0.001)是中低风险NMIBC患者肿瘤复发的独立危险因素,CSBI(HR:7.914,95%CI:1.710~36.632,P=0.008)是肿瘤进展的独立危险因素。结论SIIC后CSBI可能会增加中低风险NMIBC患者的进展风险,但该结论仍需要更大样本量进行验证。

卡介苗膀胱灌注相关肝炎临床病理特征分析

目的 阐明卡介苗膀胱灌注相关肝炎的临床病理特征。方法 2023年北京友谊医院诊治的卡介苗膀胱灌注相关肝损伤患者2例,通过文献检索卡介苗膀胱灌注相关肝损伤21例。总结患者性别、年龄、卡介苗膀胱灌注次数、肝脏生化结果、肝脏病理活检、结核杆菌检测结果、治疗方案、预后等信息。结果 本中心共诊治2例、文献共报道21例资料较为齐全的卡介苗膀胱灌注相关肝损伤。23例患者均为男性,年龄66(34~88)岁,接受卡介苗膀胱灌注次数为6(1~17)次。主要表现为ALP和(或)GGT明显升高,伴或不伴ALT和AST升高,52.2%(12/23)患者血清TBil升高。结核菌检测阳性6例,阴性14例,检测结果不详3例。共20例接受肝穿刺活检,其中19例呈肉芽肿性肝炎,1例呈汇管区扩大及炎症细胞浸润,未见肉芽肿形成。7例接受抗结核治疗,14例接受抗结核+激素治疗,2例只接受激素治疗。87.0%(20/23)患者痊愈,2例患者好转后没有继续随访,死亡2例。结论 卡介苗膀胱灌注相关肝炎表现为ALP和(或)GGT明显升高,约半数患者可出现黄疸,绝大部分呈肉芽肿性肝炎,少数患者可找到结核分枝杆菌。部分患者经过抗结核治疗痊愈,大部分患者抗结核联合激素治疗、部分患者只接受激素治疗后痊愈,提示免疫反应参与了疾病的发生发展。

“推挑式”铥激光膀胱肿瘤整体剜除术临床疗效研究

目的比较“推挑式”铥激光膀胱肿瘤整体剜除术(TmLRBT)与等离子膀胱肿瘤电切术(TURBT)处理非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)的疗效与安全性。方法分析2018年1月至2020年6月我院99例NMIBC患者的临床资料,其中行“推挑式”TmLRBT 50例,行TURBT 49例,比较两组手术时间、术中出血量、膀胱冲洗时间、保留导尿时间、术后住院时间、术中并发症、尿道狭窄发生及肿瘤复发情况。结果TmLRBT组手术时间(38.56±8.51)min,TURBT组(36.79±9.05)min,差异无统计学意义(P>0.05)。TmLRBT组术中出血量(7.59±3.34)ml,膀胱冲洗时间(1.05±0.82)d,术后留置尿管时间(3.87±2.77)d,术后住院时间(4.96±2.38)d,显著低于TURBT组的(11.84±4.17)ml、(3.23±1.35)d、(5.69±3.01)d、(6.56±2.42)d,差异有统计学意义(P<0.05)。术后TmLRBT组无闭孔神经反射及膀胱穿孔,显著低于TURBT组的14.29%及10.20%(P<0.05);术后发生尿道狭窄两组差异无统计学意义(P>0.05);在12个月肿瘤复发率中,TmLRBT组发生2例(4.00%),TURBT组发生8例(16.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论TmLRBT与TURBT都是处理NMIBC安全可靠的手术方式,“推挑式”TmLRBT在安全性及疗效上更有优势,值得推广。

lncRNA FTX通过靶向miR-590调控膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探究lncRNA FTX在膀胱癌中的表达及其对肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响和相关机制。方法RT-qPCR检测34例膀胱癌患者癌组织和癌旁组织、人膀胱癌细胞系(5637、RT4、T24和UMUC3)及人输尿管上皮细胞系(SV-HUC-1)中lncRNA FTX和miR-590表达。将沉默lncRNA FTX表达的慢病毒载体(sh-FTX)和阴性对照(sh-NC)分别转染RT4和T24细胞,并记为sh-FTX组和sh-NC组,共转染sh-NC与miR-NC的细胞为sh-NC+miR-NC组,共转染sh-NC与miR-590 inhibitor的细胞为sh-NC+miR-590 inhibitor组,共转染sh-FTX与miR-NC的细胞为sh-FTX+miR-NC组,共转染sh-FTX与miR-590 inhibitor的细胞为sh-FTX+miR-590 inhibitor组。CCK-8检测RT4和T24细胞的增殖率,细胞划痕实验检测RT4和T24细胞的迁移能力,Transwell检测细胞的侵袭能力。Pearson相关系数分析膀胱癌组织中lncRNA FTX表达与miR-590表达的相关性。生物信息学技术和双荧光素酶基因报告实验验证lncRNA FTX和miR-590的调控关系。结果与癌旁组织相比,癌组织中lncRNA FTX的表达明显升高(P<0.01),而miR-590的表达水平显著降低(P<0.01);在膀胱癌组织中miR-590表达与lncRNA FTX表达呈负相关。与SV-HUC-1细胞相比,5637、RT4、T24及UMUC3细胞中lncRNA FTX的表达均明显升高(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-FTX组RT4和T24细胞的增殖率、迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05)。lncRNA FTX可靶向抑制miR-590表达。与sh-NC+miR-NC组相比,sh-NC+miR-590 inhibitor组RT4和T24细胞增殖率、迁移和侵袭能力均显著升高(P<0.01),sh-FTX+miR-NC组RT4和T24细胞增殖率、迁移和侵袭能力明显降低(P<0.01),sh-FTX+miR-590 inhibitor组RT4和T24细胞增殖率、迁移和侵袭能力无明显变化(P>0.05);与sh-FTX+miR-NC组相比,sh-FTX+miR-590 inhibitor组RT4和T24细胞的增殖率、迁移和侵袭能力均明显升高(P<0.05)。结论lncRNA FTX在膀胱癌组织及细胞中表达升高,下调其表达可能通过调控miR-590表达抑制膀胱癌的进展。

焦亡相关基因在膀胱癌中的作用鉴定与预后分析研究

目的:通过生物信息学的方法分析并确定膀胱癌患者的关键焦亡相关基因(PRGs)表达谱,并阐明其潜在功能。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载了对应膀胱样本的mRNA表达谱和临床数据,进行功能富集分析,包括基因本体论分析(GO)和京都基因与基因组百科全书的分析(KEGG)。构建评估预后的基因模型,计算风险评分,分高、低风险组评估膀胱癌的预后。评估PRGs与肿瘤免疫浸润的相关性,并构建基于它们的共表达和预测目标的竞争性内源性RNA(ceRNA)调控轴。结果:我们选择了33个PRGs,功能富集分析显示,它们主要参与细胞因子产生、炎症小体复合物、凋亡过程和NOD样受体信号通路的正调控。我们用LASSO Cox回归分析筛选6个基因(CASP9、PRKACA、CASP6、TNF、AIM2、GSDMB)构建PRGs模型,KM曲线提示高风险评分的膀胱癌患者的总生存时间概率低于低风险评分患者,差异有统计学意义(P<0.001),列线图表明该模型对预后预测较准确。AIM2、CASP6与免疫细胞浸润显著相关(P<0.05)。通过构建ceRNA网络,确定了膀胱癌中的CASP6/hsa-let-7c-5p/MIR29B2CHG调控轴。结论:预后相关的PRGs与膀胱癌患者免疫细胞浸润显著相关。膀胱癌的CeRNA调控轴尚需进一步验证。

自然杀伤细胞2组成员A、程序性死亡因子配体1表达检测对PD-L1阻断免疫治疗肌层浸润性膀胱癌反应性的预测价值

目的:探究自然杀伤细胞2组成员A(NKG2A)及程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达检测对PD-L1阻断免疫治疗肌层浸润性膀胱癌反应性的预测价值。方法:选取100例肌层浸润性膀胱癌患者作为研究对象,对其行PD-L1阻断免疫治疗后,根据治疗反应性将其分为缓解组和未缓解组;对缓解组患者随访3个月,将其分为复发组和未复发组。比较两组患者NKG2A和PD-L1在CD4^(+)和CD8^(+)上的表达水平,采用ROC曲线分析NKG2A和PD-L1预测膀胱癌患者治疗反应性的价值。结果:100例研究对象中,缓解组患者72例(72.00%),未缓解组患者28例(28.00%),两组性别、年龄比较无统计学差异(均P>0.05),但缓解组患者肿瘤直径小于未缓解组,NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达水平均低于未缓解组(均P<0.05)。膀胱癌患者NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达预测免疫治疗后缓解的AUC值分别为0.771、0.724、0.710;联合诊断的AUC为0.836。72例缓解患者中,出现复发29例(40.28%),未出现复发43例(59.72%),两组性别、年龄以及肿瘤直径比较无统计学差异(均P>0.05),但复发组NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达水平均高于未复发组(均P<0.05)。NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)表达预测膀胱癌患者缓解后复发的AUC值分别为0.775、0.740、0.728;联合诊断的AUC为0.874。结论:NKG2A、PD-L1/CD4^(+)和PD-L1/CD8^(+)在不同治疗反应性肌层浸润性膀胱癌患者外周血中表达水平不同,三者对于膀胱癌患者PD-L1阻断免疫治疗反应性均有一定的预测价值,且三者联合预测效能最佳。

黄连素对膀胱癌5637细胞增殖的影响及机制研究

目的探讨传统中药黄连素对人膀胱癌5637细胞的抑制效应及可能机制。方法使用不同浓度的黄连素(20、40、80、160μmol/L)分别处理人膀胱癌5637细胞24、48、72 h,采用CCK-8实验检测黄连素对膀胱癌5637细胞的抑制效应并使用流式细胞术检测黄连素对癌细胞增殖周期的改变;通过qPCR、Western blotting实验检测黄连素对膀胱癌细胞中EZH2、CDK1 mRNA及蛋白表达水平的影响。结果经过黄连素处理后,膀胱癌5637细胞的增殖受到了明显抑制,抑制强度与黄连素处理的时间以及其药物浓度呈正相关;且黄连素可使肿瘤细胞G 0/G 1期受到明显阻滞,还能显著降低EZH2、CDK1 mRNA及蛋白的表达。结论黄连素可抑制膀胱癌细胞的生长并阻滞细胞周期,机制可能与药物黄连素下调膀胱肿瘤细胞中EZH2、CDK1的表达有关。

不同尿流改道方式在膀胱癌患者行机器人辅助腹腔镜下全膀胱切除术后的效果观察

目的探析不同尿流改道方式应用于膀胱癌患者机器人辅助腹腔镜(以下简称腹腔镜)下全膀胱切除术后的效果。方法采用前瞻性研究法,选取2018年5月~2022年5月南京大学医学院附属鼓楼医院收治的行腹腔镜下全膀胱切除术的膀胱癌患者102例,采用随机数表法分为对照组和试验组两组,各51例。对照组行输尿管皮肤造口术,试验组行原位回肠新膀胱重建术。比较两组患者围术期指标、生活质量变化,并统计并发症发生率情况。结果试验组手术时间及住院时间分别为(372.07±45.48)min、(24.83±4.16)d较对照组(339.47±52.07)min、(21.05±4.72)d长,术中出血量为(857.06±125.39)ml较对照组的(749.14±140.06)ml多,差异有统计学意义(t=3.367、4.291、4.100,P<0.001)。试验组治疗后生理功能、心理健康及总体健康评分分别为(64.08±7.25)分、(63.93±7.02)分和(61.17±6.93)分,较对照组的(60.13±6.59)分、(59.97±6.84)分和(57.08±7.11)分高,差异有统计学意义(t=2.879、2.885、2.942,P<0.05);试验组术后尿路感染发生率为1.96%(151),低于对照组的15.69%(851),差异有统计学意义(χ^(2)=4.387,P=0.036)。结论原位回肠新膀胱重建术应用于膀胱癌患者腹腔镜下全膀胱切除术后虽手术时间长,术中出血量多,但可提高生活质量,且术后尿路感染发生率低,安全性更高。

布比卡因通过PI3K/AKT/mTOR通路对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响

目的 探讨布比卡因对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响及其机制。方法 常规培养人膀胱癌细胞(T24和5637)和人尿路上皮细胞(SV-HUC-1),MTT实验检测布比卡因细胞毒性,筛选合适处理浓度,将T24和5637细胞分为对照组、0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因组、布比卡因+铁死亡激动剂(Erastin)组、布比卡因+铁死亡抑制剂(Fer-1)组细胞和布比卡因+PI3K激动剂(740Y-P)组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,相应试剂盒检测Fe^(2+)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平,Western blot检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、xCT、GPX4和磷脂酰肌醇3/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)相关蛋白表达。结果 0.25、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L布比卡因均可明显抑制T24和5637细胞的活性(P<0.001),选择仅对癌细胞有毒性的0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因进行后续研究。与对照组比较,随着布比卡因浓度增加,T24和5637细胞凋亡率、Fe^(2+)、ROS和MDA水平逐渐升高,GSH水平逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.001);与1 mmol/L布比卡因组比较,布比卡因+Erastin组Fe^(2+)水平升高,而布比卡因+Fer-1组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,布比卡因组细胞色素C蛋白表达增高,Bax/Bcl-2、xCT、GPX4表达,以及PI3K p85α/PI3K、p-AKT(Thr308)/AKT、p-AKT(Ser473)/AKT和p-mTOR(Ser2448)/mTOR比值降低,差异有统计学意义(P<0.001)。验证实验结果显示,与对照组比较,布比卡因+740Y-P组细胞活力和GSH水平升高,Fe^(2+)水平和细胞色素C蛋白表达降低(P<0.001)。结论 布比卡因可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活诱导膀胱癌细胞凋亡和铁死亡。