博来霉素A6和平阳霉素抗大肠癌实验研究

本研究应用体外细胞毒试验，小鼠结肠癌移植瘤及裸鼠移植人大肠癌模型，观察博来霉素A6（A6）和平阳霉素（PYM）对大肠癌的疗效。结果发现2种药物在体外对人大肠癌细胞有较强的活性。在1／9LD50等毒性剂量下，A6和PYM对小鼠结肠癌26皮下和盲肠移植瘤的生长有明显的抑制作用，2次实验结果：对小鼠结肠癌皮下移植瘤，A6的抑瘤率分别为87％和88％，PYM为86％和91％，丝裂霉素C（MMC）为64％和25％，5—氟脲嘧啶（5—FU）为45％和27％；对盲肠移植瘤，A6抑瘤率分别为99％和97％，PYM为100％和97％，MMC为77％和25％，5—FU均为44％。同样A6和PYM对裸鼠移植的人结肠癌HT－29的生长也有较强的抑制作用，A6对肿瘤生长的抑制率为82％，PYM为78％，MMC为53％，5—FU为12％。表明A6和PYM对小鼠结肠癌的裸鼠移植的人结肠癌的生长抑制作用均明显较MMC和5—FU为强，A6的作用似略较PYM为强，但二者间无明显差别；在抑制肿瘤生长的同时，A6和PYM还使肿瘤的组织学发生变化，肿瘤坏死明显增加和核分裂数减少。在治疗剂量下A6和PYM对带瘤小鼠和荷瘤裸鼠的骨髓有核细胞数均无明显影响。

大鼠单克隆抗体与博来霉素A6偶联物治疗人大肠癌实验研究

用Dextran T-40为中介体偶联大鼠抗人大肠癌单克隆抗体R19和博来霉素A6。体外实验显示R19与A6偶联物对人盲肠癌细胞Hce-8693抑制50%克隆生成浓度(IC_(50))为0.019μmol/L;游离A6及无关单抗与A6偶联物M3-A6分别为1.05和1.00μmol/L;对人结肠HT-29细胞IC_(50)为0.078μmol/L,而游离A6为4.0μmol/L。同时加入R19单抗能阻断R19-A6偶联物的细胞毒性。体内实验显示:R19-A6偶联物对裸鼠移植的人盲肠癌生长的抑制率达90%,而同等剂量的游离A6,R19与A6混合物和M3-A6的抑制率分别为52,34和48%。结果表明单抗R19与A6偶联物对人大肠癌的抑制作用明显比游离A6强。

单克隆抗体博来霉素A6偶联物对白血病细胞特异性结合与内化

抗CCT2单克隆抗体博来霉素A6偶联物可吸附胶体金颗粒(McAb-A6-Au)。电镜观察表明,在4℃,1h,表面有McAb-A6-Au颗粒的CEM细胞最高达78%;在37℃,4h,内化McAb-A6-Au颗粒的CEM细胞高达72%。而抗原性无关的U937细胞仅为14%。并且McAb-A6-Au颗粒能直接穿过细胞膜、核膜进入细胞浆和细胞核。37℃,1h已有10～18%的CEM细胞核内有McAb-A 6-Au颗粒。实验结果提示了单抗与博来霉素A6的偶联物与选择性地结合靶细胞,而且进入细胞速度快、穿透力强,有可能成为治疗白血病药物。

单克隆抗体与博来霉素A6偶联物对肝癌的实验研究

用Dextran T40为中介体的方法偶联抗人肝癌单抗Hlll和博来霉素A6,体外实验显示Hlll与A6偶联物对人肝癌细胞抑制90%克隆生成浓度(IC_(90))为0.17μmol/L:游离A6以及无关抗体与A6偶联物M3-A6分别为17/μmol/L和7μmol/L;同时加入Hlll单抗明显降低Hill-A6偶联物的细胞毒性;体内实验证明:Hlll-A6偶联物对裸鼠移植的人肝癌抑制率达78%,等剂量A6,M3-A6偶联物和Hlll与A6混合物的抑制率均约为30%。结果表明单抗Hlll与A6偶联物对肝癌的抑制作用明显比游离A6强。

抗CCT_2单克隆抗体和争光霉素A_6结合物的抗白血病细胞活性

应用N-琥珀酰胺-3-(2-二硫吡啶)丙酸与T淋巴细胞分化抗原的单克隆抗体(CCT_2McAb)和争光霉素A_6交连制备抗CCT_2 McAb-争光霉素A_6结合物。此结合物经免疫荧光测定与人白血病CEM细胞,小鼠白血病L_(1210)和P_(388)细胞呈特异性结合,但不与小鼠SP 2/0骨髓瘤细胞结合。此结合物在体外培养中对CEM细胞显示很强的抑制作用,约为游离争光霉素A_6的12倍。结果提示,这种免疫结合物对靶细胞具有选择性细胞毒作用。争光霉素A-6对造血和免疫功能毒性很低,这种结合物可能较安全地用于白血病化疗。

博来霉素A_6对小鼠肺毒性的电子显微镜观察

用电子显微镜观察比较博来霉素A_6和目前临床使用的博来霉素(复合物)对小鼠的肺毒性。博来霉素A_6和博来霉素分别以相当于1/40、1/20和1/10 LD_(50)剂量给小鼠ip 7d或10 d。病变表现为肺毛细血管的损伤,内皮细胞胞浆空泡、皂泡样变、网状化、伪足样突起、血小板粘着和微血栓形成等最为常见。博来霉素A_6引起的肺病变明显地较博来霉素为轻,提示博来霉素A_6有可能成为肺毒性较低的博来霉素类抗癌药物。

764—3对博莱霉素引起的肺泡巨噬细胞形态学改变的影响

用电子显微镜及电子计算机图象分析、体视学方法观察肺泡巨噬细胞(alveolar mac-rophage,AM)的形态学变化。结果表明764-3对正常AM形态结构无明显影响,但可减轻博莱霉素A_6(bleomycin A_6,BLM-A_6)作用后AM体积、比表面积、形状因子及细胞内溶酶体体密度的增加,并明显抑制AM在玻片上的铺展能力。提示764-3可对抗BLM-A_6体外激活AM的作用。

ANTITUMOR ACTIVITY OF IMMUNOCONJUGATES COMPOSED OF BOANMYCIN AND MONOCLONAL ANTIBODY

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＡＣＴＩＶＩＴＹＯＦＩＭＭＵＮＯＣＯＮＪＵＧＡＴＥＳＣＯＭＰＯＳＥＤＯＦＢＯＡＮＭＹＣＩＮＡＮＤＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＹ￥ＺｈｅｎＹｏｎｇｓｕ；（甄永苏）；ＰｅｎｇＺｅ（彭泽）；ＤｅｎｇＹｏｎｇｃｈｕａｎ；（邓甬川）Ｘｕ...