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蓝光照射对生物钟基因表达的影响:黄疸新生儿外周血单核细胞中的Bmall和隐花色素1
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作者 王一飞 《世界核心医学期刊文摘(儿科学分册)》 2006年第A10期50-51,共2页
The purpose of this study was to investigate the effect of blue light phototherapy on the expression of circadian genes in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and plasma melatonin levels in neonates. Real- time ... The purpose of this study was to investigate the effect of blue light phototherapy on the expression of circadian genes in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and plasma melatonin levels in neonates. Real- time reverse- transcriptase polymerase chain reaction (RT- PCR) was used to determine the expression of Bmall and Cry1 in PBMC, and an enzyme linked immunosorbent assay was used to determine plasma melatonin levels in 32 breast- mi- lk jaundiced neonates before and after phototherrapy, compared with 29 control neonates. The results showed that the expression of Bmall was decreased and Cry1 increased significantly after phototherapy. Plasma melatonin levels were decreased after phototherapy. There was no statistical difference in Bmall and Cry1 gene expression and plasma melatonin levels in the control group. In conclusion, phototherapy does affect the expression of the circadian genes Bmall and Cry1 in PBMC and plasma melatonin concentration in jaundiced neonates. Our results suggest that phototherapy should be timed according to circadian rhythms when treating jaundiced neonates. 展开更多
关键词 蓝光照射 bmall 外周血单核细胞 生物钟基因 隐花色素 褪黑激素 生物钟节律 光照治疗 母乳喂养
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热疗对人胃癌细胞MKN28的细胞周期及节律基因Bmall影响的实验研究 被引量:3
2
作者 魏柏 熊枝繁 侯炜 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期22-25,共4页
目的研究加热对胃癌MKN28细胞周期变化是否与节律基因Bmall表达相关,为胃癌择时热疗提供理论依据。方法体外复苏和培养胃癌细胞MKN28;对照组37℃下培养,实验组43qC分别加热0.5h、1.0h和1.5h,用显微镜观察细胞形态变化,采用四甲... 目的研究加热对胃癌MKN28细胞周期变化是否与节律基因Bmall表达相关,为胃癌择时热疗提供理论依据。方法体外复苏和培养胃癌细胞MKN28;对照组37℃下培养,实验组43qC分别加热0.5h、1.0h和1.5h,用显微镜观察细胞形态变化,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞周期分布的变化;采用实时定量逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bmall基因表达变化。结果加热后细胞形态发生显著变化,MTT实验提示37℃加热对细胞生长无明显抑制,细胞43℃热疗0.5h、1.0h和1.5h后细胞抑制率分别为(21.76±4.36)%、(25.30±4.36)%和(27.62±3.78)%,处理后细胞的增殖均受到抑制且抑制趋势具有时间依赖性;流式细胞术显示43℃加热1h后GO^G1最短而G2/M最长,同时实时定量RT-PCR结果显示BmallmRNA表达最低,细胞周期GO-G1变化规律和BmallmRNA变化规律一致。结论热疗可改变胃癌细胞周期及钟基因Bmall表达,提示择时执疗的可行件. 展开更多
关键词 热疗 胃癌MKN28细胞 节律基因bmall 细胞周期
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三穗鸭Bmal1基因多态、表达差异与生物信息学分析 被引量:1
3
作者 陆曼 王旭平 +3 位作者 李博岩 柳诚刚 李潇蒙 杨胜林 《中国家禽》 北大核心 2017年第6期11-16,共6页
通过研究贵州三穗鸭损伤表皮调节因子(Bmal1)基因的多态性,寻找其SNP多态位点及分析其在组织中的表达差异。利用PCR-SSCP技术与直接测序技术相结合和荧光定量表达的方法对Bmal1基因进行SNPs位点筛选和遗传特性分析,根据测序结果拼接获... 通过研究贵州三穗鸭损伤表皮调节因子(Bmal1)基因的多态性,寻找其SNP多态位点及分析其在组织中的表达差异。利用PCR-SSCP技术与直接测序技术相结合和荧光定量表达的方法对Bmal1基因进行SNPs位点筛选和遗传特性分析,根据测序结果拼接获得的序列对该基因mRNA相关生物信息学进行分析。贵州三穗鸭Bmal1基因第一外显子存在两处SNP位点,且在脑组织中的表达量最高,2^(-△△CT)值为1.4431。Bmal1基因突变前后的等位基因频率估算有差异,但其mRNA二级结构预测,蛋白质二、三级结构预测分析均无差异。在心、肝、肾、胸肌、腿肌、脑、眼七个组织中表达存在差异,且各组间差异显著。 展开更多
关键词 三穗鸭 bmall基因 SNPS 表达差异 生物信息学
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高糖通过抑制Bmal1调控的自噬加重细胞缺氧复氧损伤 被引量:1
4
作者 高文蔚 袁泉 +2 位作者 江梦 刘恋 赵博 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第1期65-68,共4页
目的 探讨高糖诱导氧化应激后,Bmal1调控的自噬在细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法 采用随机数字表法将PC-12细胞分为4组(n=6):低糖组(NG组)、低糖缺氧复氧组(NH/R组)、高糖组(HG组)和高糖缺氧复氧组(HH/R组)。采用高糖刺激24 h建立高糖... 目的 探讨高糖诱导氧化应激后,Bmal1调控的自噬在细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法 采用随机数字表法将PC-12细胞分为4组(n=6):低糖组(NG组)、低糖缺氧复氧组(NH/R组)、高糖组(HG组)和高糖缺氧复氧组(HH/R组)。采用高糖刺激24 h建立高糖模型,缺氧3 h复氧6 h建立缺氧复氧损伤模型。LDH检测细胞活性;ROS,SOD和MDA检测氧化应激水平;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测Bmall,Beclin-1的表达;电镜观察自噬小体数量。结果 与NG组相比,NH/R组SOD、Bmall降低,LDH、ROS、MDA、凋亡率、Beclin-1升高,自噬小体增多(P<0.05);与NCG组相比,HCG组SOD、Bmall、Beclin-1降低,自噬小体减少,LDH、ROS、MDA、凋亡率升高(P<0.05);与NH/R组相比,HH/R组SOD、Bmall、Beclin-1降低,自噬小体减少,LDH、ROS、MDA、凋亡率升高(P<0.05);与IHG组相比,HH/R组SOD、Bmall降低,LDH、ROS、MDA、凋亡率升高(P<0.05),Beclin-1、自噬小体无统计学差异(P>0.05)。结论 高糖诱导的氧化应激抑制时钟基因Bmal1的表达,进而导致自噬功能降低,缺氧复氧损伤加重。 展开更多
关键词 高糖 氧化应激 时钟基因bmall 自噬 缺氧复氧
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冠心康对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠心脏时钟基因昼夜节律的影响 被引量:1
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作者 章怡祎 刘萍 +3 位作者 励冬斐 胡俊萍 毛美娇 蔡珏峰 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第8期1680-1683,共4页
目的:观察中药复方制剂冠心康对Apo E基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管壁保护及斑块的稳定作用及心脏时钟基因的调节,探讨中药干预高脂血症、动脉粥样硬化,防止心血管疾病发生的可能机制。方法:在12 h光照/黑暗条件下,54只Apo E-/-小鼠西... 目的:观察中药复方制剂冠心康对Apo E基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管壁保护及斑块的稳定作用及心脏时钟基因的调节,探讨中药干预高脂血症、动脉粥样硬化,防止心血管疾病发生的可能机制。方法:在12 h光照/黑暗条件下,54只Apo E-/-小鼠西方膳食饲料饲养至12周龄并随机分为3组,模型组、冠心康组以及辛伐他汀组,每组18只。另18只C57BL/6/J小鼠直接分至正常组。正常组及模型组每日给予生理盐水灌胃,辛伐他汀以及冠心康组每日分别予以相应药物灌胃。观察至19周龄取材。设定昼夜时点(Zeitgeber time,ZT),并根据ZT于ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16与ZT20依次取材;采用HE染色法观察载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠主动脉壁损伤情况;运用RT-PCR检测技术,检测载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠心脏时钟基因Bmal1、Per2 mRNA表达水平。结果:病理研究结果提示冠心康具有一定的抗动脉粥样硬化作用。ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠心脏时钟基因昼夜表达节律与正常组比较,显著改变,提示Bmal1、Per2存在昼夜表达异常;冠心康可显著调节Bmal1及Per2基因表达昼夜节律。其中与模型组相比,冠心康组小鼠心脏Per2基因在早上8点、下午16点以及午夜0点表达含量有显著差异,P<0.05。其中在下午16点表达显著升高,而在上午8点及午夜0点表达显著降低。与模型组相比,冠心康组小鼠心脏Bmal1基因在早上8点及午夜0点表达含量均显著升高,P<0.05,其基因表达水平与正常组较为相似。结论:冠心康对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠存在抗动脉粥样硬化的作用;冠心康对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠心脏时钟基因Bmal1、Per2基因表达节律存在干预作用,可能是中药干预动脉粥样硬化的分子机制之一。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 冠心康 ApoE基因敲小鼠 时钟基因 BMAL1 PER2
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生物节律及其基因研究进展 被引量:6
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作者 秦冰 李刚 杨树利 《河南医学高等专科学校学报》 2016年第6期563-566,共4页
大量研究结果表明,生物节律的紊乱与多种疾病的发生风险密切相关,如糖尿病、代谢失调、睡眠障碍、肥胖、抑郁症以及多种恶性肿瘤等。因此,国内外对生物钟系统的研究已经成为一个热点,包括在机体器官和组织中的具体定位、物质代谢、胞内... 大量研究结果表明,生物节律的紊乱与多种疾病的发生风险密切相关,如糖尿病、代谢失调、睡眠障碍、肥胖、抑郁症以及多种恶性肿瘤等。因此,国内外对生物钟系统的研究已经成为一个热点,包括在机体器官和组织中的具体定位、物质代谢、胞内和胞间信使的网络偶联以及调控分子的表达等。尤其是昼夜节律对机体的作用机制的研究,已经成为各个研究领域的热点。本文检索相关文献,综述如下。 展开更多
关键词 生物钟 生物节律基因 CLOCK基因 bmall基因
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Bmal1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 魏柏 熊枝繁 陈景三 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第9期855-857,共3页
目的探讨钟基因Bmal1在胃癌和癌旁组织中的表达及其临床意义。方法收集15例胃癌和癌旁非癌新鲜手术标本,以实时荧光定量PCR检测Bmal1 mRNA表达。收集64例胃癌和癌旁组织,以免疫组化方法检测Bmal1表达,用图像分析技术分析Bmal1在不同组... 目的探讨钟基因Bmal1在胃癌和癌旁组织中的表达及其临床意义。方法收集15例胃癌和癌旁非癌新鲜手术标本,以实时荧光定量PCR检测Bmal1 mRNA表达。收集64例胃癌和癌旁组织,以免疫组化方法检测Bmal1表达,用图像分析技术分析Bmal1在不同组织中的表达差异,结合临床资料探讨其与胃癌临床病理的相关性。结果胃癌组织中Bmal1 mRNA转录量为1.02±0.05,癌旁组织中为0.57±0.03,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Bmal1蛋白在癌旁组织中主要位于细胞的胞核,平均吸光度值为0.1041±0.0543,而在胃癌组织中主要位于胞质,平均吸光度值0.1816±0.0128,Bmal1在胃癌组织与癌旁组织差异有统计学意义(P<0.05)。Bmal1表达强度与年龄、胃癌分化程度相关(P<0.05),Bmal1与性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论 Bmal1蛋白在胃癌组织中表达移位和表达上调可能与胃癌发生、发展相关,可能成为影响胃癌预后的重要因素。 展开更多
关键词 BMAL1 胃癌 实时荧光定量RT-PCR 免疫组织化学
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节律基因Bmal1对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响 被引量:1
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作者 魏柏 熊枝繁 陈景三 《山东医药》 CAS 2013年第21期10-13,共4页
目的探讨节律基因Bmal1对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响。方法构建针对Bmal1序列的shRNA,用脂质体介导转染人胃癌细胞BGC-823,G418筛选稳定细胞株(转染组),同时设对照组(空白组)。用克隆形成率检测细胞生长,用流式细胞术检测细胞凋... 目的探讨节律基因Bmal1对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响。方法构建针对Bmal1序列的shRNA,用脂质体介导转染人胃癌细胞BGC-823,G418筛选稳定细胞株(转染组),同时设对照组(空白组)。用克隆形成率检测细胞生长,用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR及Western blot法检测相关基因及蛋白表达。结果转染组克隆形成率低于对照组(P<0.05)。与对照组比较,转染组Bmal1总凋亡率升高(P<0.05),其细胞周期再分布出现G1期缩短(P<0.05),G2期延长(P<0.05),同时发现Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05),c-Myc mRNA表达上调(P<0.05)。结论 Bmal1可以抑制胃癌细胞BGC-823增殖,促进细胞凋亡,有可能成为诱导胃癌细胞凋亡的新靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 BMAL1 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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Expression of Clock genes in the pineal glands of newborn rats with hypoxic-ischemic encephalopathy 被引量:1
9
作者 Bin Sun Xing Feng +4 位作者 Xin Ding Li Bao Yongfu Li Jun He Meifang Jin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第28期2221-2226,共6页
Clock genes are involved in circadian rhythm regulation, and surviving newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy may present with sleep-wake cycle reversal. This study aimed to determine the expression of the cloc... Clock genes are involved in circadian rhythm regulation, and surviving newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy may present with sleep-wake cycle reversal. This study aimed to determine the expression of the clock genes Clock and Bmall, in the pineal gland of rats with hypoxic-ischemic brain damage. Results showed that levels of Clock mRNA v^re not significantly changed within 48 hours after cerebral hypoxia and ischemia. Expression levels of CLOCK and BMAL1 protein were significantly higher after 48 hours. The levels of Bmall mRNA reached a peak at 36 hours, but were significantly reduced at 48 hours. Experimental findings indicate that Clock and Bmall genes were indeed expressed in the pineal glands of neonatal rats. At the initial stage (within 36 hours) of hypoxic-ischemic brain damage, only slight changes in the expression levels of these two genes were detected, followed by significant changes at 36-48 hours. These changes may be associated with circadian rhythm disorder induced by hypoxic-ischemic brain damage. 展开更多
关键词 brain hypoxia cerebral ischemia neonatal rats pineal gland CLOCK bmall MRNA PROTEIN BRAIN neural regeneration
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生物钟基因与哺乳动物生殖 被引量:10
10
作者 李瑞文 成姝婷 王正荣 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期67-70,共4页
近日节律是生物节律中最重要的一种。它是一种以近似24 h为周期的自主振荡器,普遍存在于生物界中。近日节律主要受生物钟基因的调控,在哺乳动物中已发现时钟基因(Clock)、周期基因(Period,Per)家族、隐花色素基因(Cryptochrome1,Cry)家... 近日节律是生物节律中最重要的一种。它是一种以近似24 h为周期的自主振荡器,普遍存在于生物界中。近日节律主要受生物钟基因的调控,在哺乳动物中已发现时钟基因(Clock)、周期基因(Period,Per)家族、隐花色素基因(Cryptochrome1,Cry)家族、Bmal1(Brain and muscle ARNT-like 1)在内的多种重要的生物钟基因。这些基因及其蛋白质产物构成的反馈调节环是生物钟运行的分子基础。研究表明,生物钟基因不仅仅在近日节律的中枢系统中存在表达,在外周组织中也存在表达。而且生物钟基因与哺乳动物生殖密切相关,提示可能在生殖领域中具有重要的调控作用。主要从几个关键生物钟基因的发现、在近日节律和非近日节律中的调节作用、以及与哺乳动物生殖的关系做一综述。 展开更多
关键词 生物钟 CLOCK基因 Bmal1基因 Per基因 CRY基因 生殖
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泽泻提取物对自发性糖尿病大鼠Bmal1(Arntl)、Acsl5、Gpx1基因表达的影响 被引量:7
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作者 陶雪涛 姚立 施宁川 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第4期833-836,共4页
目的:通过观察泽泻提取物对自发性糖尿病(GK)大鼠Bmal1(Arntl)、Acsl5、Gpx1基因表达的影响,以期揭示泽泻降低血糖、血脂可能的基因基础从而为临床应用提供理论依据。方法:GK大鼠随机分为泽泻组(n=9)和空白组(n=9),泽泻组给予提取物0.1 ... 目的:通过观察泽泻提取物对自发性糖尿病(GK)大鼠Bmal1(Arntl)、Acsl5、Gpx1基因表达的影响,以期揭示泽泻降低血糖、血脂可能的基因基础从而为临床应用提供理论依据。方法:GK大鼠随机分为泽泻组(n=9)和空白组(n=9),泽泻组给予提取物0.1 mL(30 mg)每100 g大鼠体重灌胃,1 d2次(约为人用量30 g.d-1),空白组给予等体积生理盐水。给药30 d后,麻醉取肝脏,抽提总RNA,反转录后,定量RT-PCR分析各基因mRNA表达量。结果:泽泻提取物极显著抑制了Bmal1基因的高表达(P<0.001),而对Acsl5、Gpx1的表达无显著影响(P>0.05)。结论:泽泻降低血糖、血脂并用于糖尿病治疗的机制可能与其抑制Bmal1的高表达有关。泽泻对GK大鼠Bmal1、Acsl5、Gpx1基因的调控方式与中医"治未病"以及"治本"的理念相一致。 展开更多
关键词 糖尿病 泽泻 Bmal1(Arntl) Acsl5 Gpx1(GSH-Px) GK大鼠 基因
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雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠下丘脑视交叉上核Bmal1、Clock表达的调节作用 被引量:4
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作者 王少贤 李振彬 《风湿病与关节炎》 2020年第7期1-6,19,共7页
目的:观察胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠下丘脑视交叉上核(SCN)生物钟基因Bmal1、Clock的表达变化,以及雷公藤多苷的调节作用。方法:建立CIA大鼠模型,随机分为模型对照组、醋酸泼尼松组、雷公藤多苷组,并设空白对照组,每组8只。醋酸泼尼松... 目的:观察胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠下丘脑视交叉上核(SCN)生物钟基因Bmal1、Clock的表达变化,以及雷公藤多苷的调节作用。方法:建立CIA大鼠模型,随机分为模型对照组、醋酸泼尼松组、雷公藤多苷组,并设空白对照组,每组8只。醋酸泼尼松组、雷公藤多苷组分别于20:00灌胃给药,雷公藤多苷用药量10.5 mg·kg^-1·d^-1,醋酸泼尼松片用药量1.5 mg·kg^-1·d^-1;空白对照组、模型对照组灌服生理盐水。连续给药6周。观测各组大鼠足爪、关节肿胀情况,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,qRT-PCR和Western-blot法检测SCN Bmal1、Clock基因和蛋白表达。结果:①实验结束,与空白对照组比较,CIA模型大鼠左后踝关节围长、足跖厚度、足趾容积、关节炎指数(AI)评分均明显增加(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05),下丘脑SCN Bmal1、Clock蛋白和基因表达均明显下降(P<0.05)。②与模型对照组比较,醋酸泼尼松组、雷公藤多苷组均能明显改善大鼠足爪、关节肿胀程度,降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,增加SCN Bmal1、Clock蛋白和基因表达(P<0.05),雷公藤多苷组对SCN Bmal1表达的调节作用优于醋酸泼尼松组(P<0.05)。结论:关节炎的发病影响了血清炎性细胞因子和下丘脑SCN生物钟的表达;雷公藤多苷治疗CIA模型大鼠关节炎症的作用机制与调控下丘脑SCN核心钟基因表达和外周炎性细胞因子分泌水平相关。 展开更多
关键词 胶原诱导性关节炎 雷公藤多苷 下丘脑视交叉上核 生物钟 BMAL1 CLOCK 大鼠
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D-Ser2-Oxyntomodulin改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱
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作者 赵今 原媛 +3 位作者 张蕊 王昌图 王丽 王晓晖 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期305-312,共8页
目的:观察胃泌酸调节素类似物D-Ser2-Oxyntomodulin(Oxy)是否可以改善β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致的小鼠昼夜节律紊乱,探讨Oxy改善Aβ31-35所致昼夜节律紊乱的细胞分子机制。方法:(1)选取6~8周龄C57BL/6雄性小鼠进行跑轮行为学实验... 目的:观察胃泌酸调节素类似物D-Ser2-Oxyntomodulin(Oxy)是否可以改善β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致的小鼠昼夜节律紊乱,探讨Oxy改善Aβ31-35所致昼夜节律紊乱的细胞分子机制。方法:(1)选取6~8周龄C57BL/6雄性小鼠进行跑轮行为学实验,分析Oxy改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱的作用。(2)选取小鼠海马HT22神经细胞,CCK8法检测细胞存活率,Real-time PCR检测不同时间点钟基因Bmal1和Per2 mRNA的变化趋势,Western Blot分别检测CT20时Bmal1蛋白和CT16时Per2蛋白的表达情况。结果:(1)Aβ31-35引起小鼠昼夜节律紊乱,与对照组相比,自由运转周期显著延长。Oxy预处理再给予Aβ31-35后小鼠的昼夜节律紊乱情况有所改善,与Aβ单独给予相比,自由运转周期显著降低。(2)Aβ31-35引起HT22细胞存活率显著降低,Oxy预处理后有效逆转Aβ31-35诱导的细胞存活率下降,且具有剂量依赖性。(3)经Aβ31-35处理后,HT22细胞的Bmal1和Per2 mRNA水平分别在CT20和CT16较对照组明显降低;而Oxy预处理组Bmal1和Per2的异常表达均得到显著改善。(4)与对照组相比,Aβ31-35组CT20时Bmal1和CT16时Per2蛋白水平显著降低;而与Aβ31-35组相比,Oxy预处理组Bmal1和Per2蛋白水平有所升高。结论:Oxy可能通过调整Bmal1和Per2的表达改善Aβ31-35所致C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱。 展开更多
关键词 昼夜节律 OXY Aβ31-35 钟基因/蛋白Bmal1 PER2 小鼠
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古方半夏秫米汤对正常小鼠最大给药量及其对失眠模型大鼠作用的实验研究 被引量:2
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作者 刘玉凤 黄枚 +3 位作者 南丽红 许晓丽 谢玉玲 郑立升 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期12-18,共7页
目的:观察半夏秫米汤对失眠模型大鼠的治疗作用及其对生物钟基因和神经递质的影响,初步探究其药效物质基础及安全性,阐释临床使用大剂量半夏秫米汤治疗失眠的理论基础,有利于指导临床合理及安全用药。方法:测定半夏秫米汤最大给药量并... 目的:观察半夏秫米汤对失眠模型大鼠的治疗作用及其对生物钟基因和神经递质的影响,初步探究其药效物质基础及安全性,阐释临床使用大剂量半夏秫米汤治疗失眠的理论基础,有利于指导临床合理及安全用药。方法:测定半夏秫米汤最大给药量并利用广泛靶向代谢组技术确定其化学成分;采用氯苯丙氨酸(PCPA)诱导大鼠失眠模型,观察半夏秫米汤对失眠模型大鼠的治疗作用及下丘脑组织病理学变化的影响;采用ELISA法检测大鼠下丘脑组织5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、褪黑色素(MT)含量;Western blot法及qRT-PCR法检测大鼠下丘脑组织昼夜运动输出周期(Clock)、脑和肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白1(BMAL1)蛋白及mRNA的表达。结果:半夏秫米汤小鼠最大给药量为810 g/kg。鉴定出999种半夏秫米汤代谢物,主要代谢物为氨基酸及其衍生物类(49.81%)、核苷酸及其衍生物类(16.62%)。与正常对照组相比,模型对照组大鼠体质量增加较少,睡眠潜伏期明显延长,睡眠持续时间显著缩短(P<0.01);同时神经元染色变深,细胞大小不一,形状变长,核皱缩;下丘脑5-HT、MT的含量明显降低,DA含量明显升高,Clock、BMAL1表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,半夏秫米汤8.1、16.2、32.4 g/kg组大鼠体质量增加较大,睡眠潜伏期缩短和睡眠持续时间明显延长(P<0.05或P<0.01),神经元损伤改善;半夏秫米汤16.2、32.4 g/kg组MT的含量明显升高,而DA的含量明显降低(P<0.05或P<0.01);半夏秫米汤32.4 g/kg组5-HT的含量显著升高(P<0.01);半夏秫米汤8.1、16.2、32.4 g/kg组Clock、BMAL1蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:半夏秫米汤安全范围较大,其代谢产生的氨基酸类和核苷酸类代谢产物可能是其药理作用的重要物质基础。半夏秫米汤具有较好的抗失眠作用,该作用可能与其降低大鼠下丘脑组织中DA含量,增加5-HT、MT含量,抑制下丘脑ClOCK、BMAL1表达有关。 展开更多
关键词 半夏秫米汤 失眠 最大给药量 褪黑色素 昼夜运动输出周期 脑和肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白1
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异钩藤碱对血管平滑肌细胞中Baml1、Clock基因表达的调节作用 被引量:5
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作者 曾武 张振服 +3 位作者 刘启德 杨蕾 宓穗卿 王宁生 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期251-254,共4页
目的研究异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)中时钟基因(Bmal1、Clock)昼夜节律表达变化的调节作用。方法以AngⅡ诱导胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)建立节律变化模型。实验分AngⅡ诱导组、异钩藤碱组、正常对照组... 目的研究异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)中时钟基因(Bmal1、Clock)昼夜节律表达变化的调节作用。方法以AngⅡ诱导胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)建立节律变化模型。实验分AngⅡ诱导组、异钩藤碱组、正常对照组。AngⅡ诱导组以终浓度为100 nmol.L-1的AngⅡ诱导24 h,异钩藤碱组加入终浓度为100 nmol.L-1的AngⅡ和12 mg.L-1异钩藤碱处理24 h。采用Real-time PCR方法检测不同时间点VSMC中Bmal1、Clock基因表达水平,比较各组之间节律参数的差异。结果异钩藤碱通过调节AngⅡ诱导的A7r5细胞中的Baml1、Clock基因表达,改变其中值、振幅及峰相位,使A7r5昼夜节律发生改变。结论异钩藤碱对A7r5细胞中Baml1、Clock基因的昼夜节律的表达有调节作用。 展开更多
关键词 异钩藤碱 昼夜节律 Baml1基因 CLOCK基因
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钟基因Bmal1对褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌的作用研究 被引量:3
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作者 钱琳 韩静静 +4 位作者 郭依晨 严锐 童建 肖卫 张洁 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期35-39,40,共6页
目的研究褪黑素对TM3细胞睾酮分泌节律的影响,探讨钟基因Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌的作用。方法运用地塞米松诱导小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)内源性节律的产生,通过ELISA试剂盒和实时定量RT-q PCR检测TM3细胞睾酮及类固醇... 目的研究褪黑素对TM3细胞睾酮分泌节律的影响,探讨钟基因Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌的作用。方法运用地塞米松诱导小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)内源性节律的产生,通过ELISA试剂盒和实时定量RT-q PCR检测TM3细胞睾酮及类固醇急性调节基因St AR水平,研究褪黑素对睾酮节律性分泌的作用。运用siRNA干扰技术,下调钟基因Bmal1的表达,研究Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌过程中的作用。结果10-6mol/褪黑素处理后,TM3细胞的睾酮浓度在ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20和ZT24各授时时点(zeitgeber time,ZT,光照开始的时间为ZT0)与对照组相比均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),St AR水平在ZT0、ZT4、ZT8和ZT12时点较对照组显著降低(P<0.05)。余玄分析结果显示,地塞米松作用后TM3细胞的睾酮分泌及St AR基因表达具有一定的节律性,峰值时间分别为ZT11:40和ZT8:06。褪黑素处理后,褪黑素组睾酮及St AR的节律均发生变化,表现为中值分别下降36.53%和32.09%,振幅分别减弱18.54%和44.44%。Bmal1干扰后,与对照组相比,褪黑素作用于Bmal1低表达的细胞,睾酮浓度、St AR水平及睾酮分泌节律改变差异均无统计学意义(P>0.05);对St AR节律性表达的影响减小。结论适当剂量的褪黑素不仅可抑制TM3细胞中睾酮水平及St AR的转录水平,而且能改变两者的节律性表达。钟基因Bmal1在褪黑素抑制TM3细胞睾酮节律性分泌过程中发挥了一定的调控作用。 展开更多
关键词 褪黑素 昼夜节律 睾酮 BMAL1
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