活血化瘀汤对大鼠骨折愈合过程中血清骨钙素和Ⅰ型胶原表达的影响

目的:研究活血化瘀汤在骨折愈合过程中对骨钙素(bone gamma carboxyglutamate protein,BGP)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)表达的影响,探讨该方在骨折愈合中对软骨内成骨的作用。方法:选用雄性SD大鼠60只,造成左胫骨中段闭合折骨标准的骨折模型,术后采用髓内针固定。随机分成中药组(麻醉苏醒后灌服活血化瘀汤,n=30)和对照组(麻醉苏醒后灌服等量生理盐水,n=30),分别于灌胃后3、5、7、14、21d腹主动脉取血,然后取骨折端上下各0.5cm长的一段骨质。应用Elisa技术,动态观察骨钙素和Ⅰ型胶原表达的变化。结果:血清骨钙素、Ⅰ型胶原在骨折愈合过程中表达持续增高,且表达具有一致性;活血化瘀汤组血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达均较生理盐水组明显(P<0.05)。结论:活血化瘀汤能调控骨钙素和Ⅰ型胶原表达,可能通过影响大鼠骨折愈合过程中软骨内成骨,促进骨折愈合。

ω-3多不饱和脂肪酸对去卵巢大鼠骨钙素和白细胞介素-6的影响

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)治疗对去卵巢大鼠血清骨钙素(BGP)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将60只雌性大鼠随机分为去卵巢(OVX)组、雌二醇(E2)组、小剂量ω-3 PUFA组、中剂量ω-3 PUFA组、大剂量ω-3 PUFA组和假手术(Sham)组。用药90 d后,采血测定血清BGP和IL-6。结果:OVX组大鼠血清BGP有升高趋势,IL-6显著升高。E2组和ω-3 PUFA小、中、大剂量组BGP均有显著下降,IL-6均有下降趋势。结论:ω-3 PUFA能降低去卵巢大鼠血清BGP水平,从而改善骨质的高转换状态,减少绝经后的骨质丢失。

胰岛素与骨代谢的关系

糖尿病性骨质疏松是由于糖尿病晚期机体胰岛素绝对不足或相对缺乏,引起糖、脂肪、蛋白质三大物质在体内代谢紊乱及钙、磷、镁等元素代谢途径异常,引起机体骨组织显微结构破坏,致其生物力学性能受损,长骨脆性增加和骨基质含量减少,最终发生骨折,是一种全身性骨代谢异常性疾病。在由糖尿病引起的常见慢性并发症中,糖尿病性骨质疏松的发病率逐年递增,然而其具体的发生机制并未完全明确。胰岛素对维持骨基质含量、减少骨量丢失及预防骨折作用显著,早期补充外源性胰岛素可纠正糖尿病性骨质疏松引起的骨基质含量降低,逆转骨重建负平衡。本文通过研究糖尿病后骨代谢指标的变化,综述胰岛素与骨质疏松的关系及其研究现状。

妊娠期血清骨钙素和钙含量的变化及补充钙剂的评价

目的：观察正常孕妇１８３例、妊高征１２８例不同孕期的血清Ｃａ、ＢＧＰ水平及补充钙剂治疗后的变化。方法：正常孕妇及妊高征孕妇服钙剂治疗，另选未用药者作对照组，分别取静脉血３ｍｌ，自然凝固后２５００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，测血清ＢＧＰ、血清Ｃａ。结果：妊娠期血清Ｃａ、ＢＧＰ均低于正常，随妊娠进展降至最低点；妊高征患者血Ｃａ、ＢＧＰ又低于正常孕妇；妊高征程度越重，血Ｃａ下降越明显。结论：服用钙剂治疗后，血清Ｃａ、ＢＧＰ较用药前显上升，提示血Ｃａ下降与血压升高及先兆子痫发生有明显关系，补充钙剂不但可以降低妊高征的发生率，还可减轻妊高征的危险性。

2型糖尿病肾病不同分期血清N端骨钙素、I型胶原氨基端延长肽、β-胶原降解产物的变化

目的观察2型糖尿病肾病不同分期血清N端骨钙素(N-MID)、I型胶原氨基端延长肽(PINP)、β-胶原降解产物(β-CTX)水平的变化。方法收集2型糖尿病患者108例,根据尿微量白蛋白/肌酐比值及血清肌酐水平分为无微量蛋白尿组,微量白蛋白尿组,临床蛋白尿组,肾功能不全代偿组和肾功能不全失代偿组。记录其年龄、性别、病程、身高、体重、腰围、体重指数(BMI),测定血清N-MID、PINP、β-CTX水平。结果糖尿病肾病组的年龄、性别构成、腰围、臀围及BMI与无糖尿病肾病组比较,差别无统计学意义(P>0.05),而病程在各组间差别有统计学意义(P<0.05),其中微量白蛋白尿组病程最短为(8.3±3.5)年,肾功能不全失代偿组最长为(18.9±7.4)年。糖尿病肾病组的血清N-MID和PINP水平降低(P<0.05),随着糖尿病肾病分期的进展,血清N-MID和PINP水平有逐渐降低的趋势,但差别无统计学意义(P>0.05)。糖尿病肾病组的血清β-CTX较无糖尿病肾病组增高,差别有统计学意义(P<0.05),肾功能不全失代偿期时进一步明显增高,为(519.49±89.65)pg/ml。结论糖尿病肾病可引起骨的吸收增加,形成减少,通过监测骨代谢指标,有助于糖尿病肾病患者骨质疏松的早期诊断和干预,减少发生骨质疏松骨折的风险。

血清骨钙素与骨密度检测在中老年健康体检者中的应用及相关性分析

目的：研究中老年人群不同性别之间血清骨钙素水平是否存在差异，以及骨钙素水平与骨质疏松指标、其它骨代谢指标是否存在相关性。方法选取2011年1～8月中老年健康体检者270名，排除恶性肿瘤及慢性基础性疾病，其中男性101例，年龄50～89岁，中位年龄68岁，女性169例，年龄50～89岁，中位年龄64岁。使用骨密度仪进行骨密度检测，检测指标为T值；分别进行血清标本中骨钙素、25-羟维生素D、钙和磷检测。不同性别之间骨钙素水平的比较采用 Mann-Whitney检验，将骨钙素水平与骨质疏松风险指数、年龄、钙、磷和25-羟维生素 D的相关性进行 Spearman秩相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。结果270例中老年健康体检者的T值、骨钙素、25-羟维生素D、钙和磷水平范围分别为－3.5～－0.7（中位水平－1.6 ng／ml），3.59～264.90 ng／ml（中位水平12.84 ng／ml），4.0～34.0 ng／ml（中位水平10.5 ng／ml），1.79～2.69 mmol／L（中位水平2.36 ng／ml），0.43～2.89 mmol／L（中位水平1.12 ng／ml）；不同性别之间骨钙素存在差异，女性水平显著高于男性（P＝0.001）；血清骨钙素与血清磷水平存在相关性，相关系数为0.243（P＝0.001）；与骨质疏松风险指数存在负相关，相关系数为－0.197（P＝0.002）；与年龄（相关系数－0.157，P＝0.056），25-羟维生素D（－0.156， P＝0.194）、血清钙（相关系数0.055，P＝0.368）均无相关性。结论在中老年人群中，女性骨钙素水平明显高于男性，在应用该指标时应该考虑性别因素；骨钙素与骨质疏松风险指数T存在相关性，可以用于评估骨质疏松。

脉冲电磁场对大鼠胫腓骨骨折愈合的影响

目的研究脉冲电磁场对大鼠胫腓骨骨折愈合的影响，并探讨其作用机制。方法选择30只Sprague—Dawley雄性大鼠，建立右侧胫腓骨中段骨折模型后随机分为刺激组与对照组。刺激组大鼠接受频率为15Hz、强度为1．0mT的脉冲电磁场刺激。分别于术后第1，2，3，4，5周末，拍摄X线片评价骨折愈合情况；相同时间点鼠尾静脉取血，采用对硝基苯磷酸盐法检测血清碱性磷酸酶（ALP）活性，酶联免疫吸附分析法检测大鼠骨钙素（BGP）含量，偶氮胂Ⅲ法测定钙离子含量，磷钼酸盐复合物直接分析法测定磷离子含量。于术后第3，5周末行病理学切片检查，观察骨痂组织学变化。结果与对照组相比，刺激组骨折部位骨痂的形成量增加，骨折线消失加快，血清中ALP活性提高（P〈0．05），血清中BGP的含量增加（P〈0．05），骨痂中软骨内化骨和成熟小梁骨提前出现，骨痂中胶原基质的含量增加，骨痂塑形进程加快。结论频率15Hz、强度1．0mT的脉冲电磁场对大鼠胫腓骨骨折愈合有显著的促进作用。

电磁场防治去卵巢小鼠骨质疏松的实验研究

目的 评价电磁场防治去卵巢小鼠骨质疏松的效果及作用机制.方法 将60只雌性小鼠分为正常组（A组）、模型组（B组）、电磁场防治组（C组）及尼尔雌醇防治组（D组）.除A组外其余各组均切除双侧卵巢,C组小鼠接受15 Hz、1.0 mT电磁场刺激,D组小鼠接受尼尔雌醇1.5 ms/kg体重灌胃,1次/周.实验结束前检测腰椎骨密度.分别于术后第4,8,12周进行内眦静脉丛取血,采用碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒和小鼠骨钙蛋白（BGP）酶联免疫吸附反应（ELISA）检测试剂盒检测血清ALP活性及BGP含量,并检测血清钙和雌二醇（E_2）含量,于术后第6,12周末行腰椎椎体病理学切片检查,观察并分析骨小梁形态及数量的变化.结果 与B组相比,C组血清中ALP活性明显提高（P〈0.05）,血清中BGP和血清钙含量增加（P〈0.05）,腰椎椎体骨小梁的吸收减少.结论 15 Hz、1.0 mT的电磁场对去卵巢小鼠骨质疏松有显著的防治作用.

大鼠未羧化骨钙素融合蛋白的表达纯化及活性鉴定

目的研究表达和纯化大鼠未羧化骨钙素融合蛋白并鉴定其活性。方法将大鼠的骨钙素(BGLAP)基因克隆到p Sumo-Mut表达载体中,构建小泛素相关修饰物-骨钙素质粒(p Sumo-BGLAP)并进行质粒酶切及测序鉴定。质粒在大肠杆菌的表达系统中转化后,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),11℃低温诱导方法,表达出小泛素相关修饰物-骨钙素(Sumo-BGLAP)融合蛋白。融合蛋白通过Ni亲和纯化方法被纯化,通过胰岛素分泌实验被鉴定生物活性。结果质粒的酶切及测序结果显示与目的基因的序列和蛋白分子量吻合,表明质粒p Sumo-BGLAP构建成功。经转化、诱导和纯化后较高纯度的Sumo-BGLAP融合蛋白被获得。胰岛素分泌实验结果显示,16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖下,胰岛素分泌为(37.64±3.80)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.03 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(63.91±4.67)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.3 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(68.47±5.83)μU·L^(-1)(均P<0.01)。结论大鼠未羧化骨钙素的融合蛋白被成功表达和纯化,并且有生物活性,能用于进一步研究其对葡萄糖代谢的调节作用。

2型糖尿病患者不同HbA1c水平和骨代谢指标的关系

目的 观察2型糖尿病患者不同HbA1c水平对骨代谢指标骨γ-羧谷氨酸包含蛋白（骨钙素）、Ⅰ型胶原交联羧基端肽（CTX-Ⅰ）、碱性磷酸酶（ALP）的影响.方法 选取2013年10月—2014年1月在哈尔滨医科大学附属第二医院内分泌科住院的120例男性2型糖尿病患者和来自体检中心的40名健康男性作为研究对象.将120例2型糖尿病患者根据HbA1c水平分为为HbA1c≤7％组、HbA1c 7％- 9％组、HbA1c≥9％组,将40名健康男性作为对照组.采集其年龄、体重指数、病程及血钙、血磷、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶等临床指标,检测血清HbA1c、骨钙素、CTX-Ⅰ、ALP等指标.对4组间HbA1c水平与骨钙素、CTX-Ⅰ、ALP进行相关性和回归分析.结果 与对照组相比,HbA1c≤7％组、HbA1c 7％-9％组及HbA1c≥9％组血清骨钙素水平显著降低（F=7.211,P＆lt;0.05）,血清ALP、CTX-Ⅰ水平显著升高（F=4.382、809.475,P＆lt;0.05）;与HbA1c≤7％组相比,HbA1c7％- 9％组和HbA1c≥9％组血清ALP水平显著降低（P＆lt;0.05）,血清CTX-Ⅰ水平显著升高（P＆lt;0.05）;与HbA1c7％-9％组相比,HbA1c≥9％组血清骨钙素水平显著降低（P＆lt;0.05）,血清CTX-Ⅰ水平显著升高（P＆lt;0.05）.Spearman相关分析发现,骨钙素与空腹血糖（r=-0.249,P=0.002）、糖化白蛋白（GA,r=-0.321,P=0.000）、HbA1c（r=-0.288,P=0.000）水平呈负相关,ALP、CTX-Ⅰ与空腹血糖（r=0.218、0.321）、GA（r =0.302、0.291）、HbA1c（r =0.321、0.238）水平呈正相关（P均＆lt;0.01）.进一步经线性回归分析发现,骨钙素水平与GA（β=-0.086,P=0.008）、HbA1c（β=-0.502,P=0.001）呈负相关,CTX-Ⅰ水平与空腹血糖（β=0.042,P =0.003）、GA （β=0.007,P=0.015）、HbA1c（β=0.037,P=0.009）呈正相关.结论 2型糖尿病患者存在骨代谢指标异常,且HbA1 c与骨钙素、CTX-Ⅰ水平相关.