长春市新装修居室空气质量检测及实验研究

目的探讨新装修房屋中主要挥发性有机物苯和甲醛对小鼠骨髓成纤维细胞的毒性作用。方法选择40户装修3个月内的居室检测空气中甲醛和苯浓度,共设87个检测点作为检测对象,并根据现场所测得的甲醛和苯浓度制定小鼠的染毒剂量。在静式染毒柜内对小鼠染毒。体外培养骨髓基质成纤维细胞。结果现场检测的87个检测点中,甲醛和苯的总体平均浓度均高于国家标准浓度,总体超标率为47%;对超标严重的检测点1年后复检,其甲醛仍有部分超标,超标率为18%;苯没有超标。骨髓基质成纤维细胞集落数随染毒剂量的增加明显减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲醛和苯仍然是现代装修的主要污染物之一,甲醛在苯致造血微环境毒性作用的过程中起辅助作用,具体机制有待进一步探讨。

正常人骨髓成纤维样基质细胞对HL-60/VCR耐药细胞增殖的影响

目的 观察正常人骨髓成纤维样细胞系HFCL对白血病多药耐药细胞HL-60／VCR增殖和分化的影响。方法 采用四唑氮蓝(MTT)法进行HL-60／VCR细胞药物敏感实验。建立HL-60／VCR细胞和HFCL细胞共培养体系,苔盼蓝拒染法测定生长曲线;硝基四氮唑蓝(NBT)确定细胞分化;流式细胞仪检测细胞周期和CD11b、CD13、CD14、CD33细胞表面抗原进一步鉴定细胞分化;Western blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)和P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)。结果 HL-60／VCR细胞对多种药物耐药。与HFCL细胞共培养后,HL-60／VCR细胞生长受抑,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用>用transwell组。同时发现HL-60／VCR细胞与HFCL细胞共培养后,G1期细胞增多,S期细胞减少;同时CD11b和CD14表达增高,CD13和CD33变化不大;且NBT阳性细胞轻度增多。Western blot检测结果显示,PCNA表达下调,以直接接触组为甚。但是P-gp表达无变化。结论 正常人骨髓成纤维样细胞HFCL能抑制白血病MDR细胞HL-60／VCR的增殖,抑制PCNA的表达,出现G1期阻滞,并部分向单核细胞分化。

HFCL细胞诱导HL-60细胞分化和改变其基因表达谱的研究

本研究探索正常人骨髓成纤维细胞样基质细胞(HFCL)对急性髓系白血病HL-60细胞增殖分化影响的分子机理。采用流式细胞仪检测细胞周期,NBT还原实验和CD11b、CD14、CD13、CD33细胞表面抗原的测定检测细胞的分化;应用基因芯片技术检测HL-60细胞与HFCL细胞共培养前后基因表达谱的改变,并采用半定量RT-PCR、Northernblot对芯片结果进一步验证。结果发现,HL-60细胞与HFCL细胞共培养后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少;NBT阳性细胞增高,CD11b和CD14的表达增多,并有明显的统计学意义;基因表达谱改变的研究发现,在与HFCL细胞共培养后,HL-60细胞中582个基因表达上调,1323个基因表达下调。结论:HFCL细胞能诱导HL-60细胞部分分化,并能明显改变HL-60细胞的基因表达谱,为研究基质细胞与白血病细胞之间的相互关系及重要信号分子传导途径或cross-talk等提供了新的线索。

正常人骨髓成纤维样基质细胞对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖的影响

为了观察正常人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL对多发性骨髓瘤细胞系RPMI82 2 6增殖的影响 ,建立了RPMI82 2 6细胞和HFCL细胞共培养体系 ,用MTT法测粘附率 ,台盼蓝拒染法测定生长曲线 ;流式细胞术 (FCM )检测细胞周期的变化 ,瑞氏 吉姆萨染色后进行分裂指数 (MI)测定 ,Westernblot检测增殖细胞核抗原 (PCNA)表达。结果显示 ,与HFCL细胞共培养 1小时后 ,RPMI82 2 6细胞的粘附率为 2 9.4 % ;生长曲线显示直接接触组RPMI82 2 6细胞生长受抑 ,而非直接接触组 (transwell组 )无变化 ;RPMI82 2 6细胞与HFCL细胞共培养后 ,直接接触组G1期细胞增高 ,S期细胞减少 ;其分裂指数表现为单独骨髓瘤细胞组大于与HFCL直接接触组 ;直接接触组PCNA表达下调。结论 :正常人骨髓成纤维样基质细胞HFCL能抑制骨髓瘤细胞系RPMI82 2 6的增殖 ,阻止其细胞周期的运行。

HFCL细胞对U937细胞的诱导分化作用

为了观察正常人骨髓成纤维样细胞系HFCL对急性单核细胞白血病U937细胞促分化作用,及其对经典诱导分化剂TPA诱导分化作用的影响,先建立U937细胞和HFCL细胞共培养体系,以细胞形态学改变、硝基四氮唑蓝(NBT)、流式细胞仪检测细胞周期和CD11b、CD13、CD14、CD33细胞表面抗原作为诱导分化指标Western印迹检测P38蛋白的表达变化。结果发现,与HFCL细胞共培养后,U937细胞出现分化成熟的形态学改变,且与HFCL细胞直接接触组的诱导分化作用大于用transwell组。同时发现U937细胞与HFCL细胞共培养后,G1期细胞增高,S期细胞减少;CD11b、CD13、CD14和CD33表达增高;且NBT阳性细胞增高至46.3％。Western印迹检测结果显示,直接接触组总P38蛋白表达增加。而且HFCL细胞还能增强TPA对U937的诱导分化作用。

HFCL细胞下调HL-60细胞cxcr4基因的表达及意义

目的:研究正常人骨髓成纤维样基质细胞HFCL对 急性髓细胞白血病HL 60细胞cxcr4基因表达的影响及意义. 方法:采用流式细胞仪检测细胞周期,NBT还原实验和 CD11b,CD14,CD13,CD33细胞表面抗原的测定作为细胞分 化的指标;采用半定量RT PCR,Northernblot检测cxcr4基因 的表达.结果:HL 60细胞与HFCL细胞共培养后,NBT阳性 细胞增高,CD11b和CD14的表达增多,并有明显的统计学意 义;而且cxcr4mRNA的表达下调.结论:HFCL细胞能诱导 HL 60细胞部分向单核细胞分化,并使趋化因子受体cxcr4表 达下调.