糖尿病足的自体干细胞移植治疗

目的:观察自体干细胞移植治疗糠尿病足的可行性及安全性。方法:分别采集患者自体骨髓250～300ml或外周单个核细胞混悬液150ml,Ficoll分离液进一步分离,配制成单个核细胞混悬液,流式细胞仪计数CD+34细胞数,行下肢缺血部位多点肌肉注射进行移植,观察至少12周,进行临床评估。结果:自体干细胞移植后,患者下肢疼痛、冷感、间歇性跛行、皮肤温度、踝肱指数(ABI)及数字减影血管造影(DSA)治疗前后均有显著性差异。移植过程无不良反应发生。结论:采用自体干细胞移植治疗糖尿病足是可行的、安全的。

下颌下腺细胞裂解液诱导骨髓间充质干细胞向涎腺细胞转分化的实验研究

目的:用下颌下腺细胞裂解液体外诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs),观察BM-MSCs能否表达涎腺细胞的特异性分泌蛋白-α-淀粉酶。方法:分离并培养新生SD大鼠的下颌下腺细胞(submandubular gland cells,SMGCs),测定各代腺泡细胞分泌α-淀粉酶的量,取分泌量显著一代制成下颌下腺细胞裂解液;自新生SD大鼠股骨、胫骨中分离出BM-MSCs,培养至第3代时用含下颌下腺细胞裂解液的培养基培养1周,细胞免疫组织化学法鉴定诱导后的BM-MSCsα-淀粉酶的表达。结果:细胞免疫组化可检测到所培养的下颌下腺细胞中含α-淀粉酶,淀粉酶试剂盒测定结果显示,P2、P3代SMGCs分泌的α-淀粉酶较其它各代明显(P<0.01)。经下颌下腺细胞裂解液诱导BM-MSCs后,可见下颌下腺腺泡样细胞,免疫组化显示其表达淀粉酶,而对照组未表达淀粉酶。结论:下颌下腺细胞裂解液能体外模拟下颌下腺细胞微环境诱导BM-MSCs转分化为具有分泌α-淀粉酶蛋白能力的下颌下腺腺泡样细胞,为解决涎腺组织工程中种子细胞的来源提供一条新途径。

体外大鼠骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究

目的研究体外大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞等不同组织细胞多向分化的潜能。方法从SD大鼠股骨骨髓中获得间充质干细胞,原代培养后1∶2传代,传至第5代后分为普通传代培养组、神经细胞诱导组、成骨细胞诱导组和脂肪细胞诱导组。倒置相差显微镜下观察各组细胞生长情况、形态变化以及矿化结节和脂肪细胞的形成;流式细胞检测第5代大鼠骨髓间充质干细胞表面抗原CD29、CD44、CD90、CD31、CD34、CD45;免疫组织化学检测普通传代培养组和神经细胞诱导组细胞巢蛋白、微管相关蛋白-2、胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶等神经细胞相关蛋白的表达情况。结果大鼠骨髓间充质干细胞呈贴壁生长,细胞扩增至第5代时形态趋于一致,呈梭形。大鼠骨髓间充质干细胞表面抗原CD29(99.83%)、CD44(99.77%)、CD90(99.86%)均呈阳性表达,CD31(0.83%)、CD34(1.78%)、CD45(2.90%)无表达。在体外,普通传代培养细胞仅巢蛋白呈阳性表达;由神经细胞诱导的细胞巢蛋白、微管相关蛋白-2、胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶均呈阳性表达,且形态类似神经细胞;由成骨细胞诱导的细胞质内可见矿化结节形成;由脂肪细胞诱导的细胞质内出现多个猩红色呈簇状的脂肪滴。结论大鼠骨髓间充质干细胞易于提取、纯化和扩增,可于体外自发表达神经干细胞标志蛋白,并可通过诱导向神经细胞、成骨细胞及脂肪细胞分化。提示骨髓间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,而且可能具有自发向神经干细胞分化的特性。

妊娠滋养细胞肿瘤患者化疗骨髓抑制期病情观察及护理

目的总结妊娠滋养细胞肿瘤患者化疗骨髓抑制期病情观察及护理要点。方法 2009年1月～2011年9月对38例滋养细胞肿瘤患者实施放线菌素-D+5-氟尿嘧啶联合化疗。观察患者骨髓抑制期白细胞及中性粒细胞变化情况,并采取针对性的护理对策。结果化疗第7d至化疗结束7d内患者白细胞总数及中性粒细胞最低,其中26例患者出现Ⅰ度骨髓抑制,6例患者出现Ⅱ度骨髓抑制,3例患者出现Ⅲ度骨髓抑制,3例患者出现Ⅳ度骨髓抑制;骨髓抑制期19例患者出现轻度口腔炎;3例患者出现严重口腔炎伴高热,5例患者出现腹泻,1例患者出现会阴溃疡。结论妊娠滋养细胞肿瘤患者化疗骨髓抑制期间,应密切观察患者血象变化情况,减轻患者化疗的毒副反应,预防及控制患者由于抵抗力下降引起的感染,使患者顺利渡过化疗骨髓抑制危险期。

胶原诱导型关节炎大鼠的关节影像学特点

目的旨在分析CIA X线片四肢关节的破坏特点,揭示CIA大鼠关节破坏的规律,为规范评分方案提供依据。方法采用П型胶原和弗氏完全佐剂皮下注射清洁级Wistar大鼠,造模成功(每批10只,共3次)后第35天行全身X线钼靶照片,以正常组作为对照、每只大鼠评价96块骨破坏(erosion)和100个关节间隙(joint space narrowing,JSN);处死动物,取左前肢和右后肢近端第3足趾关节苏木素-伊红(HE)染色,评价中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润、滑膜增生和软骨破坏的情况。结果造模成功后CIA大鼠关节出现明显的红肿,活动受限;HE病理显示,CIA关节存在明显的中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,滑膜增生,纤维组织增生,软骨破坏;X线片分析结果显示:①广泛性骨质疏松,边缘性骨质侵蚀,关节间隙狭窄或增宽,部分踝关节间隙消失,关节相互融合甚至骨性强直。②67%的骨出现erosion,JSN影响为78%,关节破坏以中、重度为主;③远端、近端趾间关节和踝关节发病率高,损害严重,掌趾关节发病率低,破坏较轻。④后肢关节破坏重于前肢(P<0.01),左右肢没有显著性差异(P>0.05)。结论①滑膜是CIA炎症反应启动的主要病灶,与骨交界的滑膜和血管翳造成了CIA的骨质破坏;②CIA影像学表现关节破坏严重,以远端、近端趾间关节和踝关节为主,这些关节可作为评价破坏程度的选择。本研究对于深入CIA关节破坏的病因病理和进一步规范X线片评分方案具有一定意义。

人参皂甙对雄性小鼠细胞染色体的辐射防护作用

不同剂量的人参皂甙（１２．５～２００ｍｇ／ｋｇ）对０．５ＧｙＸ射线诱发小鼠骨髓细胞和初级精母细胞染色体畸变具有明显的防护作用，且以５０ｍｇ／ｋｇ防护效果最佳。５０ｍｇ／ｋｇ的人参皂甙对不同剂量（０．２５～１．０Ｇｙ）Ｘ射线诱发的小鼠骨髓细胞和初级精母细胞染色体畸变具有防护作用，可使Ｘ射线诱发的染色体畸变率、细胞畸变率明显降低。可以认为人参皂甙对雄性小鼠骨髓细胞和生殖细胞染色体均具有保护作用。

类风湿性关节炎中骨髓水肿与软骨损伤的MR研究

目的利用3.0T磁共振探讨类风湿性关节炎中腕骨骨髓水肿和软骨损伤之间的相关性。方法通过对38例类风湿性关节炎患者和28例正常对照者先后两年进行腕关节磁共振检查,对腕关节软骨损伤、骨髓水肿及骨侵蚀、滑膜炎进行评分并探讨其统计学意义。结果 RA与对照组之间两年MRI软骨评分在评分者1中P值为0.048,评分者2中P值为0.038,均具有统计学差异。两个时间点MRI软骨评分在RA中MRI软骨分数明显增加(评分者1和2分别P=0.046、P=0.033)并具有统计学意义。RA损伤各种影响因素分析结果发现MRI软骨评分(R^2=0.67)优于MRI骨侵蚀评分(R^2=0.47)。两年间分别出现在桡骨、月骨及舟状骨的骨髓水肿与相邻软骨的MRI软骨分数增加具有统计学意义(P值分别为0.0001、0.0012)。结论类风湿性关节炎中出现骨髓水肿和滑膜炎之前已经出现软骨损伤,因此软骨损伤可作为导致关节畸形的独立致病因素。

细胞因子激活骨髓免疫细胞的实验研究

目的 :通过对骨髓单个核细胞在体外与不同细胞因子培养 ,了解不同细胞因子对骨髓淋巴细胞的激活能力和对骨髓干祖细胞的损伤情况。方法 :将IL 1、IL 2、Υ IFN、CD3单抗进行不同组合后 ,在体外与骨髓单个核细胞分成对照组、IL 2组、CD3 AK、CIK组进行培养。培养过程中观察细胞形态和数量的变化 ,并在培养后检测免疫活性细胞的细胞毒性和造血干细胞的保存情况。结果 :培养过程中对照组细胞数量减少 ;IL 2组细胞数量变化不明显 ;CD3 AK组、CIK组细胞数量显著增多 ,并出现较多的集聚成簇的淋巴样细胞 ,培养后其细胞毒性明显强于对照组及IL 2组 ,但细胞数量增加和细胞毒性无明性差异。培养后各组造血干细胞保存情况约 6 0 %～ 87%。结论 :IL 2、CD3单抗在体外与骨髓单个核细胞培养后 ,即能激活免疫细胞增殖 。

冠脉内移植两种自体骨髓干细胞对AMI模型的效果比较

目的探讨自体骨髓单个核细胞(BM-MNCs)与间充质干细胞(MSCs)移植治疗急性心梗心脏的可能性,观察其效果,并对比两种细胞移植效果的异同。方法通过介入方法建立心肌梗死(AMI)模型,将两种细胞移植入急性心梗模型的梗死相关动脉后,通过超声心动图观察其对心肌梗死后心脏的功能及结构改变的影响。结果两种干细胞移植后,与对照组比较均能改善心肌梗死后心脏的功能,减少心肌梗死后心脏的扩张。但两种细胞之间并未显示出差异。结论干细胞移植能够改善心梗后的心脏功能,抑制心室重构。

博莱霉素处理后免疫器官的形态学改变

目的观察博莱霉素（BLM）对免疫器官结构的影响。方法用BLM对SD大鼠进行一次性皮下注射，光镜下观察不同时期脾、淋巴结和骨髓组织结构和细胞成分改变。结果第4天，脾红髓与淋巴结髓质淋巴组织较疏松，淋巴结髓窦中内皮细胞大部分消失，骨髓内大量造血细胞与基质细胞坏死；第10-20天，脾白髓扩大，动脉周围淋巴鞘细胞增生，淋巴结次级淋巴小结增多，副皮质区变薄，基质细胞大量增多，骨髓中性粒细胞增生为主；第30天，脾白髓与淋巴结皮质淋巴组织萎缩，淋巴结皮质基质细胞增多，髓索浆细胞大量增多等慢性炎症现象发生。结论BLM毒性作用引起免疫器官内先后出现大量细胞被破坏、淋巴细胞迅速增生和后期淋巴组织萎缩等改变。

微型骨凿在口腔外科手术中应用体会

目的对比两种骨凿的使用特点和患者接受程度。方法136名研究对象，男性病人78例，女性58例，随机接微型窄和普通宽骨凿进行操作。研究组在窄骨凿去骨术中，利用其窄刃和锐薄的特点，使用一般宽骨凿的敲击力度1／4即可断裂骨皮质；对照组取常规力度和方法使用完成断离去骨、切削铲除、挤入扩展等操作。结果震动感、操作控制性、和助手间接感知三项指标，微型骨凿与普通骨凿相比较有统计学差异（P〈0．05）。结论微型骨凿在实现精细操作方面有独到之处，其在轻敲力度下实现切割更给患者体现人文关怀。

窄牙槽嵴牙种植手术的研究进展

炎症破坏和生理性吸收均可导致牙齿拔除后牙槽骨明显萎缩形成窄牙槽嵴,严重影响后期种植体的正常植入。随着口腔种植技术的发展,目前已有多种手术方案可解决牙槽嵴水平向骨量不足的问题,包括引导骨再生术、骨劈开术和自体骨移植术等骨增量技术,但术中和术后并发症以及其他危险因素仍难以避免。钛锆合金在口腔种植材料中的应用拓展了窄直径种植体的适应证。因此,在窄牙槽嵴患者种植术中,临床医师更倾向于选择窄直径种植体。窄直径种植体的应用虽可简化复杂的种植手术,但其长期稳定性仍需进一步研究。

不同直径钛锆合金种植体用于牙周炎患者后牙种植修复2年随访观察

目的观察评估钛锆合金3.3 mm/4.1 mm直径种植体分别用于牙周炎患者水平骨量轻、中度不足的前磨牙/磨牙区并采用单冠固定修复2年后的临床效果和种植体周边缘骨水平变化情况,以期为临床提供参考。方法选自2018年5月至2021年7月在北京大学口腔医院牙周科行后牙种植治疗并伴种植区水平骨量不足的牙周炎患者30名。在前磨牙/磨牙分别植入直径3.3 mm/4.1 mm的Roxolid?钛锆合金种植体共47颗。术后4个月采用螺丝固位氧化锆全瓷冠修复并负重。种植术后3个月、修复后即刻、3个月、6个月、1年及2年进行临床检查和维护治疗,种植术后即刻、修复后即刻、1年及2年进行影像学检查。通过问卷记录患者术后反应。使用广义线性混合模型比较不同随访时间点各临床指标及边缘骨水平的变化。结果共25名患者、40颗种植体完成2年复查。所有病例术后肿痛反应轻微。与修复体戴入即刻的基线比较,负重1年及2年后边缘骨水平变化量极少,分别为-0.02±0.14 mm、0.01±0.17mm;种植体周黏膜炎发生率分别为23.8%、18.4%;无种植体周炎。机械学并发症发生率2.5%。种植体成功率100%。结论对于后牙区水平骨量轻、中度不足的牙周炎患者,钛锆合金3.3 mm/4.1 mm直径种植体分别用于前磨牙/磨牙是简便可行的治疗选择。2年随访期内边缘骨水平保持稳定,机械学并发症发生率较低,软组织相关指标基本稳定。

引导骨再生术、骨劈开术、牙槽嵴扩张术三联治疗上颌前牙狭窄牙槽嵴种植患者的效果

目的:观察引导骨再生术(GBR)、骨劈开术、牙槽嵴扩张术三联治疗上颌前牙狭窄牙槽嵴种植患者的效果。方法:选取72例上颌前牙狭窄牙槽嵴种植患者为研究对象,按照随机数字表法分为观察组与对照组各36例。对照组给予骨劈开术联合牙槽嵴扩张术治疗,观察组在对照组基础上给予GBR治疗。比较两组牙槽骨高度、牙槽骨骨量、种植床骨密度、种植成功率、红色美学指数(PES)评分、白色美学指数(WES)评分和治疗满意度。结果:术后3个月,两组牙槽骨高度、牙槽骨骨量、种植床骨密度均高于术前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组种植成功率为100.00%,明显高于对照组的83.33%,差异有统计学意义(P<0.05);术后12个月,观察组PES和WES评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组固位功能、咀嚼功能、舒适度满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GBR、骨劈开术、牙槽嵴扩张术三联治疗上颌前牙狭窄牙槽嵴种植患者可提高牙槽骨高度、牙槽骨骨量、种植床骨密度、PES评分、WES评分,提高种植成功率和治疗满意度,效果优于骨劈开术联合牙槽嵴扩张术治疗。

滑脱钉棒系统在腰椎滑脱、不稳伴继发性椎管狭窄减压植骨内固定术中的应用

目的:探讨腰椎滑脱、不稳伴继发性椎管狭窄的手术要点及滑脱钉棒系统在术中的作用。方法:总结2002年8月-2011年7月采用滑脱钉棒系统治疗腰椎滑脱、不稳伴继发性椎管狭窄切开复位,减压植骨融合内固定治疗32例患者的临床资料。结果:32例随访6～24月,平均12.5月。术后跛行改善者32例(100%),下肢肌力障碍恢复22例(68.75%),10例肌萎缩均有不同程度恢复。16例感觉障碍术后均有恢复,6例完全恢复,10例部分恢复。结论:在腰椎滑脱患者中,滑脱钉棒系统内固定植骨术对腰椎滑脱的患者可起到使滑脱椎体复位或部分复位,相邻椎体间稳定的作用,并可使摘除椎间盘后的相关间隙高度得到维持,减少残余或变性的组织向椎管内脱出。

联合应用骨劈开、骨挤压术、引导骨组织再生技术并同期种植手术方案的短期临床疗效分析

目的评价牙槽嵴唇（颊）鄂（舌）向宽度不足的患者联合应用骨劈开、骨挤压术及引导骨组织再生（GBR）技术并同期种植的短期临床疗效。方法选取2009—2014年就诊于中国医科大学附属口腔医院种植中心的患者24例,联合应用骨劈开、骨挤压术,植入54枚种植体后同期植入骨粉,行GBR技术,术后4~6个月内完成上部结构修复。将54枚种植体按不同植入部位分为上颌前牙区、上颌后牙区、下颌前牙区及下颌后牙区4组,通过临床检查、X线片及锥形束CT（CBCT）等观察比较4组种植体手术前后及术后半年牙槽骨宽度的变化,修复后6个月及1年的骨高度变化等。结果种植手术当天至修复后1年的临床随访检查显示,无种植体松动,全部种植体行使功能良好,存留率100%。种植术后牙槽骨宽度与术前相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。牙槽骨宽度在术后与术后半年的对比中,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后半年,比较4组植入部位的骨宽度变化,差异无统计学意义（P〉0.05）。修复后6个月及1年,比较4组植入部位的骨高度变化,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论对牙槽嵴唇（颊）鄂（舌）向宽度不足的患者,联合应用骨劈开、骨挤压术和GBR技术并同期种植,可增加骨量,达到牙槽嵴宽度的水平扩增。不同种植部位对种植体周围骨组织吸收量没有明显影响。

骨髓基质干细胞联合血管束植入构筑血管化组织工程骨修复兔大段骨缺损

目的研究兔骨髓基质干细胞（BMSCs）联合动静脉血管束植入异种脱蛋白松质骨（XDCB）构筑血管化组织工程骨修复兔桡骨中远段完全骨膜骨缺损的能力。方法从兔髂嵴抽骨髓培养制备免BMSCs，将第5代BMSCs种植于多孔XDCB并进行成骨诱导2周制备组织工程骨，手术中分离兔桡动、静脉血管束。动物模型为制备24只兔双侧桡骨中远段完全骨膜骨缺损1．5cm共48侧，分4组修复（n=12），A组为空白术治疗组，B组为单纯材料＋血管束植入组（XDCB＋VB），C组为组织工程骨组（XDCB＋BMSCs），D组为组织工程骨＋血管束植入组（XDCB＋BMSCs＋VB），各组交叉配对。分别于术后4、8、12周行X线片、大体解剖、组织切片、生物力学等检查，观察各组骨缺损修复效能及移植物血管化情况。结果D组骨缺损修复效能（术后12周新骨面积比2．02％±0．16％）及血管化情况（术后12周血管面积比6．89％±0．32％）优于C组（1．50％±0．28％和3．17％±0．19％），而C组又优于B组（1．59％±0．19％和6．52％±0．23％），A组骨缺损未修复，各组结果差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BMSCs联合动静脉血管束植入构筑的血管化组织工程骨能促进成骨过程和新生骨的血管化，显著提高组织工程骨修复大段骨缺损的能力.

窄直径种植体小间隙后牙缺失修复临床疗效评估

目的:观察分析窄直径种植体用于小间隙后牙缺牙修复的临床效果。方法:选取种植手术患者32例,均为单颗牙缺失;其中实验组16例植入窄直径种植体,对照组16例植入常规直径种植体。统计分析两组患者种植术后1、3、6个月种植体边缘骨吸收量,及术后12个月并发症发生率以及植体成功率和视觉模拟评分法(visual analogue scale/score,VAS)患者上部冠修复后6个月主观满意程度。结果:两组种植体平均周围骨吸收量在术后1、3、6个月差异无统计学意义(P>0.05)。两组种植术后并发症发生率和种植体留存率无明显差异,患者主观满意度评价均满意。结论:精确的术前评估分析和熟练的手术技巧,可使窄直径种植体非翻瓣微创种植修复获得与常规种植体同样的临床效果。

窄直径种植体在上颌后牙缺失修复中的临床应用

目的:对比评估窄直径种植体应用于小间隙上颌后牙缺失修复,并同期行上颌窦内提升术的临床效果。方法:依照缺牙区近远中牙槽嵴间隙分为:4.1~5.5 mm窄直径种植体组(观察组);>5.5 mm常规种植体组(对照组),两组上颌后牙剩余骨量为2.1~5.6 mm,种植术中同期行上颌窦内提升术,术中未行骨增量技术。两组患者均于术后6个月行上部牙冠修复。不同时期随访观察,经临床和影像学检查,及满意度调查,评价临床成功率。结果:两组种植体并发症及种植体存留率无明显差异。结论:利用窄直径种植体应用于小间隙上颌后牙缺失修复,并同期行上颌窦内提升术,具有手术创伤小、恢复快、患者舒适度好等优点,手术操作简便,易于临床推广应用。

异体骨粉黏骨膜下填充治疗萎缩性鼻炎疗效观察

目的探讨用异体骨粉行鼻腔黏骨膜下填充治疗萎缩性鼻炎的临床疗效。方法对46例确诊为中、重度萎缩性鼻炎的患者实施异体骨粉鼻中隔或下鼻甲黏骨膜下植入填充,观察其临床疗效。结果本组显效率73.9%,有效率26.1%,总有效率100%,无并发症发生。结论采用异体骨粉行鼻腔黏骨膜下填充是治疗萎缩性鼻炎一种较理想的方法。