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Investigation of the epidemiology,pathogenicity and immunogenicity of Bordetella bronchiseptica isolated from cats and dogs in China from 2021 to 2023 被引量:1
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作者 Qinghua Shang Wenhui Gao +7 位作者 Xiangting Zhang Jianqing Zhao Ying Wu Haoqi Li Ming Zhou Zhen F.Fu Chengguang Zhang Ling Zhao 《Animal Diseases》 CAS 2024年第3期156-172,共17页
Bordetella bronchiseptica(Bb)is recognized as a leading cause of respiratory diseases in dogs and cats.However,epidemiological data on Bb in dogs and cats in China are still limited,and there is no commercially availa... Bordetella bronchiseptica(Bb)is recognized as a leading cause of respiratory diseases in dogs and cats.However,epidemiological data on Bb in dogs and cats in China are still limited,and there is no commercially available vaccine.Live vaccines containing Bb that are widely used abroad are generally efective but can establish latency and potentially reactivate to cause illness in some immunodefcient vaccinated recipients,raising safety concerns.In this study,34 canine-derived and two feline-derived Bb strains were isolated from 1809 canine and 113 feline nasopharyngeal swab samples collected from eight provinces in China from 2021 to 2023.The PCR results showed that the percentage of positive Bb was 22.94%(441/1922),and more than 90%of the Bb isolates had four virulence factor-encoding genes(VFGs),namely,fhaB,prn,betA and dnt.All the isolated strains displayed a multidrug-resistant phenotype.The virulence of 10 Bb strains isolated from dogs with respiratory symptoms was tested in mice,and we found that eight isolates were highly virulent.Furthermore,the eight Bb isolates with high virulence were inactivated and intramuscularly injected into mice,and three Bb strains(WH1218,WH1203 and WH1224)with the best protective efcacy were selected.Dogs immunized with these three strains exhibited strong protection against challenge with the Bb feld strain WH1218.Ultimately,the WH1218 strain with the greatest protection in dogs was selected as the vaccine candidate.Dogs and cats that received a vaccine containing 109 CFU of the inactivated WH1218 strain showed complete protection against challenge with the Bb feld strain WH1218.This study revealed that Bb is an important pathogen that causes respiratory diseases in domestic dogs and cats in China,and all the isolates exhibited multidrug resistance.The present work contributes to the current understanding of the prevalence,antimicrobial resistance,and virulence genes of Bb in domestic dogs and cats.Additionally,our results suggest that the WH1218 strain is a promising candidate safe and efcacious inactivated Bb vaccine. 展开更多
关键词 bordetella bronchiseptica Epidemiological investigation PATHOGENICITY IMMUNOGENICITY Inactivated vaccine
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Immunoproteomic Analysis of Bordetella bronchiseptica Outer Membrane Proteins and Identification of New Immunogenic Proteins
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作者 LIU Yan QIN Feng-yan +4 位作者 BAO Guo-lian CHEN Hui XIAO Chen-wen WEI Qiang JI Quan-an 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第9期2010-2018,共9页
Bordetella bronchiseptica is a Gram-negative pathogen that causes acute and chronic respiratory infection in a variety of animals. To identify useful antigen candidates for diagnosis and subunit vaccine of B. bronchis... Bordetella bronchiseptica is a Gram-negative pathogen that causes acute and chronic respiratory infection in a variety of animals. To identify useful antigen candidates for diagnosis and subunit vaccine of B. bronchiseptica, immunoproteomic analysis was adopted to analyse outer membrane proteins of it. The outer membrane proteins extracted from B. bronchiseptica were separated by two-dimensional gel electrophoresis and analyzed by Western blotting for their reactivity with the convalescent serum against two strains. Immunogenic proteins were identified by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight-mass spectrometry(MALDI-TOF-MS), a total of 14 proteins are common immunoreactive proteins, of which 1 was known antigen and 13 were novel immunogenic proteins for B. bronchiseptica. Putative lipoprotein gene was cloned and recombinantly expressed. The recombinant protein induced high titer antibody, but showed low protective indices against challenges with HB(B. bronchiseptica strain isolated from a infected rabbit). The mortality of mice was 80% compared to 100% of positive controls. The identification of these novel antigenic proteins is an important resource for further development of a new diagnostic test and vaccine for B. bronchiseptica. 展开更多
关键词 bordetella bronchiseptica outer membrane proteins immunoproteomic analysis
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Presence of <i>Actinobacillus pleuropneumoniae, Streptococcus suis, Pasteurella multocida, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus parasuis and Mycoplasma hyopneumoniae</i>in upper respiratory tract of swine in farms from Aguascalientes, Mexico 被引量:1
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作者 Abraham Loera-Muro Francisco J. Avelar-González +2 位作者 Víctor M. Loera-Muro Mario Jacques Alma L. Guerrero-Barrera 《Open Journal of Animal Sciences》 2013年第2期132-137,共6页
Respiratory diseases are one of the most important health problems in pig herds. The porcine respiratory disease complex (PRDC) is the term used to describe pneumonic diseases caused by multiple infectious agents that... Respiratory diseases are one of the most important health problems in pig herds. The porcine respiratory disease complex (PRDC) is the term used to describe pneumonic diseases caused by multiple infectious agents that provoke weight loss in animals or death. In the PRDC multiple pathogens (bacteria and/or viruses) work in combination to induce this respiratory disease. Within this complex, Actinobacillus pleuropneumoniae, Streptococcus suis, Pasteurella multocida, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus parasuis and Mycoplasma hyopneumoniae are the main bacterial pathogens involved in great economic losses to the swine industry. The aim of this work was to estimate the presence of A. pleuropneumoniae, S. suis, P. multocida, B. bronchiseptica, H. parasuis and M. hyopneumoniae in the upper respiratory tract of pigs in representative swine farms inAguascalientes,Mexico, using PCR technique. The study was performed in 14 swine farms. We obtained a total of 212 nasal swabs. Near 20% of samples were positive for A. pleuropneumoniae (located in the 79% of farms);17% were positive for S. suis (in 86% of farms), of these, 3% were S. suis serovar 2;30% were positive for H. parasuis (93% of farms);23% of the samples to P. multocida (in 79% of farms);and 19% to M. hyopneumoniae (in 64% of farms). B. bronchiseptica was not detected in this study. The results obtained show that bacterial pathogens of PRDC were present in the upper respiratory tract of pigs in all farms studied;therefore, these pathogens are widely disseminated in pig farms of Aguascalientes, Mexico. 展开更多
关键词 Porcine Respiratory Disease Complex ACTINOBACILLUS pleuropneumoniae Streptococcus SUIS PASTEURELLA multocida bordetella bronchiseptica HAEMOPHILUS parasuis Mycoplasma hyopneumoniae
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<i>Bordetella bronchiseptica</i>pneumonia in a woman with lymphoma: A case report
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作者 Aurélien Delluc Baptiste Hervier +4 位作者 Thi-Huong-Du Le Boutin Alain Le Coustumier Vincent Jarlier Zahir Amoura Florence Brossier 《Open Journal of Internal Medicine》 2012年第2期50-52,共3页
A 62-year-old woman with splenic marginal zone lymphoma presented with fever, cough and bilateral pneumonia 11 days after chemotherapy. A bronchoalveolar lavage showed numerous leukocytes and Gramnegative bacilli that... A 62-year-old woman with splenic marginal zone lymphoma presented with fever, cough and bilateral pneumonia 11 days after chemotherapy. A bronchoalveolar lavage showed numerous leukocytes and Gramnegative bacilli that were identified as Bordetella bronchiseptica in culture. An antibiotherapy with minocycline and ciprofloxacin helped her to stop coughing. This unusual micro-organism, which has mainly an animal reservoir, is a rarely cause of human infection, almost always in immunocompromised patients. The main problems in B. bronchiseptica infection are the difficulties of identification of this micro-organism and the recurrence of infection, which are a challenge for microbiologists and practitionners. 展开更多
关键词 bordetella bronchiseptica PNEUMONIA LYMPHOMA Case Report
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家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测
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作者 曹洪志 李成贤 +2 位作者 彭茜翎 其美拉姆 史纪强 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第5期70-76,共7页
为深入了解兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。通过Gram染色镜... 为深入了解兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。通过Gram染色镜检、分离培养、16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定,测定了该分离株的生长曲线、半数致死量、耐药性并对分离菌株进行β-内酰胺酶耐药基因的检测。结果表明:分离得到1株革兰氏阴性杆菌,命名为P201215,该分离株的16S rDNA基因序列与GenBank中支气管败血波氏杆菌(登录号为NR113628.1)的同源性为99%。分离株的对数生长期为2~9 h,9 h后进入平台期;对KM小鼠的半数致死量为1.19×107 CFU。药敏试验结果显示,分离株对部分头孢菌素类药物耐药,对大部分β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类及氨基糖苷类药物敏感,PCR检测未检出超广谱β-内酰胺酶耐药基因。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 分离鉴定 生长曲线 半数致死量 超广谱Β-内酰胺酶
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犬支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和灭活疫苗初步应用
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作者 王潘龙 赵悦 +10 位作者 孙强 周昊 尹月 曲雪婷 原昆鹏 栾庆东 陈淑贞 卢艳敬 臧立玉 韩海峰 尹燕博 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期41-48,共8页
某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序... 某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序,对分离细菌进行鉴定,并对部分菌株进行药敏试验。选取1株致病性强的分离菌株制备支气管败血波氏杆菌蜂胶佐剂灭活疫苗,进行免疫保护试验,分别采用1.0和0.5 mL剂量免疫小鼠,免疫后21 d攻毒;对养殖场临床发病犬和同群健康犬进行紧急免疫接种,剂量为4月龄以上犬每只1.0 mL、2~4月龄犬每只0.5 mL。对临床病死犬和攻毒死亡小鼠进行组织病理学观察。结果显示,从临床发病犬的鼻腔拭子、肺脏、气管和鼻腔黏液状分泌物共分离鉴定获得30株支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,临床分离菌株对环丙沙星和米诺环素高度敏感,但临床治疗效果不明显。免疫保护试验中,1.0 mL和0.5 mL蜂胶佐剂灭活疫苗对小鼠的保护率均可达100%;紧急免疫接种后,临床发病犬逐渐恢复,同群健康犬无新发病个体,疫苗免疫效果良好。组织病理学观察发现,临床病死犬和攻毒死亡小鼠均表现典型的支气管肺炎和肺气肿病变,肝细胞呈水泡样变。结果表明,支气管败血波氏杆菌是导致该场部分犬出现呼吸道疾病的病原体,蜂胶灭活疫苗可有效防控实验用比格犬支气管败血波氏杆菌感染。 展开更多
关键词 比格犬 支气管败血波氏杆菌 16S rRNA 组织病理学观察 蜂胶佐剂灭活疫苗
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从接触宠物感染支气管炎的痰液检出支气管炎博德特菌(B.bronchiseptica) 被引量:1
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作者 刘连沫 刘静 +1 位作者 姜冬梅 徐迪诚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2004年第2期184-186,共3页
从接触宠物感染支气管炎的痰液培养检出两株支气管炎博德特菌。按Bergey细菌分类进行系统鉴定 ,用血清凝集试验证明它们具有博德特菌属的共同“O”抗原因子。提出了有关工作的建议。
关键词 宠物 支气管炎 痰液 支气管炎 博德特菌 菌株
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猫疱疹病毒Ⅰ型、猫杯状病毒、支气管败血波氏杆菌多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 周红蕾 程淑琴 +3 位作者 李佳鹏 刘涵 姚志兰 张蕾 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期130-138,共9页
旨在建立检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1,FHV-1)、猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)多重TaqMan荧光定量PCR方法。基于FHV-1的胸苷激酶(TK)基因、FCV的衣壳蛋白VP1基因... 旨在建立检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1,FHV-1)、猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)多重TaqMan荧光定量PCR方法。基于FHV-1的胸苷激酶(TK)基因、FCV的衣壳蛋白VP1基因、Bb的皮肤坏死毒素基因(DNT1)序列保守区域设计并合成TaqMan荧光定量PCR引物和探针,以FHV-1、FCV、Bb、猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌为模板验证引物和探针的特异性。制备重组质粒pMD18T-FHV-TK、pMD18T-FCV-VP1、pMD18T-Bb-DNT1作为标准品,经矩阵法确定最佳反应体系。以10倍梯度稀释的标准品为模板检测方法的灵敏性。应用建立的方法对32份临床具有上呼吸道感染症状的猫眼、口、鼻拭子检测,以评估该方法的可行性。结果显示:该方法可特异性检出FHV-1、FCV、Bb,且与猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌无交叉反应;灵敏度试验表明该方法对FHV-1、FCV、Bb的最低检出限分别为10、10和100拷贝/μL;应用该方法从32份猫临床样品中检测出FHV-1阳性11份、FCV阳性21份、Bb阳性4份,并经PCR测序验证。本研究初步建立了FHV-1、FCV、Bb多重TaqMan荧光定量PCR检测方法,具有特异性强、敏感性高的特点,为临床猫上呼吸道疾病病原的分子检测提供参考。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒Ⅰ型 猫杯状病毒 支气管败血波氏杆菌 TaqMan荧光定量PCR
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规模化猪场常见呼吸道细菌性病原的调查 被引量:1
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作者 王治方 徐引弟 +9 位作者 焦文强 朱文豪 张青娴 李海利 张立宪 白红杰 许峰 王克领 张彬 娄治国 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期181-185,共5页
为了掌握河南规模化猪场猪呼吸道疾病综合征主要细菌性病原的感染情况,本研究采集了临床有明显呼吸道症状猪的肺脏或气管分泌物病料样品284份,采用细菌分离纯化、形态学观察、PCR鉴定和药敏试验等方法对感染细菌进行分离鉴定。结果共分... 为了掌握河南规模化猪场猪呼吸道疾病综合征主要细菌性病原的感染情况,本研究采集了临床有明显呼吸道症状猪的肺脏或气管分泌物病料样品284份,采用细菌分离纯化、形态学观察、PCR鉴定和药敏试验等方法对感染细菌进行分离鉴定。结果共分离鉴定出432株病原菌,其中猪链球菌132株,支气管败血波氏杆菌145株,副猪嗜血杆菌129株,胸膜肺炎放线杆菌10株,多杀性巴氏杆菌16株,分别占30.6%、33.6%、29.8%、2.3%和3.7%。单一细菌感染为147份,占52%;混合感染为137份,占48%。分离菌株对14种常用抗生素均表现出不同程度的耐药性,且表现严重的多重耐药现象。结果表明猪呼吸道疾病综合征临床病例中细菌感染非常严重,混合感染或继发感染比较普遍,分离菌株耐药明显。该结果为今后规模化猪场猪呼吸道疾病综合征的防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪链球菌 支气管败血波氏杆菌 副猪嗜血杆菌 多杀性巴氏杆菌 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 药敏试验
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猪源支气管败血波氏杆菌对庆大霉素异质性耐药的研究 被引量:2
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作者 樊浩然 高树基 +5 位作者 王海堃 袁朔 张小玲 赵战勤 张慧 汪洋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期801-806,共6页
为分析临床分离的52株猪源支气管败血波氏杆菌(Bb)在纸片扩散法(K-B)药敏试验中出现的庆大霉素(GEN)异质性耐药(HR)情况,本研究采用微量肉汤稀释法检测52株Bb分离株对GEN的最小抑菌浓度(MIC);采用K-B法检测分离株对GEN的敏感性;通过观... 为分析临床分离的52株猪源支气管败血波氏杆菌(Bb)在纸片扩散法(K-B)药敏试验中出现的庆大霉素(GEN)异质性耐药(HR)情况,本研究采用微量肉汤稀释法检测52株Bb分离株对GEN的最小抑菌浓度(MIC);采用K-B法检测分离株对GEN的敏感性;通过观察抑菌环内是否有菌落初步筛选疑似GEN HR菌株;采用菌落谱性分析法(PAP)测定初筛菌株的MIC与最大不抑菌浓度(MNIC)的比值,以及耐药亚群菌株的发生频率,验证初筛的HR菌株。结果显示:52株猪源Bb对GEN耐药的菌株占13.46%(7/52),多数分离株的MIC值为2μg/mL~8μg/mL,对GEN表现为敏感或中介,占全部菌株的86.54%(45/52),其中Bb48株的MIC为2μg/mL,抑菌环直径为16 mm属于GEN敏感菌株。通过观察纸片法药敏试验中的抑菌环内是否存在菌落,初步筛选对GEN HR的菌株。结果显示,有7株疑似HR菌株;PAP试验结果显示,6株疑似HR菌株的MIC/MNIC比值均小于8,为假阳性HR菌株,只有Bb48株的MIC/MNIC值为16且耐药亚群发生频率为1.3×10^(-6),按照标准判定其为GEN HR Bb菌株。从PAP试验验证的Bb48株中有菌落生长的最高浓度GEN平板上随机挑3株耐药亚群菌株,37℃培养12 h,每小时测一次菌落数,共测12 h连同Bb48株一起绘制生长曲线;将上述试验选取的3株耐药亚群菌株连续传50代,每5代测其MIC值判定耐药亚群菌株的耐药遗传稳定性。生长曲线结果显示Bb48株及其耐药亚群菌株的生长速率均无显著差异(P>0.05);耐药遗传稳定性试验结果显示,将Bb48株中的3株耐药亚群菌株传代,其中两株菌各代次的MIC均为32μg/mL,1株菌的MIC为8μg/mL~32μg/mL。表明耐药亚群菌株对GEN的耐药性能够有效遗传。上述结果表明,52株猪源Bb中的Bb48为GEN HR菌株,Bb48及其耐药亚群菌株的生长速率基本一致,且对GEN的耐药性能够稳定遗传。本研究首次得到了罕见的对GEN HR的Bb菌株,提示临床中应合理使用GEN,并监测HR菌株的出现,对临床使用GEN治疗猪源Bb感染具有重要指导意义。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 庆大霉素 异质性耐药 临床治疗
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四川省猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因和毒力基因检测分析
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作者 赵梦溪 聂民财 +2 位作者 徐雷 朱玲 徐志文 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期212-219,共8页
【目的】为了解四川省猪源呼吸道疾病支气管败血波氏杆菌的流行情况及菌株生物特性。【方法】采集56份病料进行支气管败血杆菌的分离纯化、药敏及相关耐药基因和毒力基因的筛选。【结果】分离到10株支气管败血波氏杆菌,分离率为17.86%... 【目的】为了解四川省猪源呼吸道疾病支气管败血波氏杆菌的流行情况及菌株生物特性。【方法】采集56份病料进行支气管败血杆菌的分离纯化、药敏及相关耐药基因和毒力基因的筛选。【结果】分离到10株支气管败血波氏杆菌,分离率为17.86%。分离菌对青霉素、氨苄西林、羧苄西林、林可霉素、复方新诺明和头孢氨苄的耐药率为100%,对新霉素、氯霉素、氧氟沙星和左氧氟沙星高度敏感。共检出耐药基因9种,其中gyrA、sul1和tetC的检出率超过50%;共检出毒力基因6种,其中fla、dnt、prn和fhaB的检出率高达100%。小鼠致病试验结果显示大部分菌株具有较强的致病性。【结论】四川省主要流行的支气管败血波氏杆菌多重耐药情况严重,耐药机制复杂,耐药基因和耐药表型符合率较低,毒力基因检出率较高,且对小鼠呈现较强的致病性。研究结果可为四川省支气管败血波氏杆菌的防控和治疗提供参考。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 分离鉴定 耐药基因 毒力基因
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猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:31
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作者 赵战勤 裴洁 +7 位作者 薛云 汤细彪 吴斌 何华 周学利 程相朝 何启盖 陈焕春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期4209-4217,共9页
【目的】探讨2003~2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 05... 【目的】探讨2003~2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌。经生化鉴定,药敏试验、血凝试验及动物试验等方法进行检测和分析。【结果】在中国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%~14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%~11.8%之间;2003~2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系。Bb最常见的共感染菌依次是链球菌(55.9%)、副猪嗜血杆菌(50.0%)、大肠杆菌(43.1%)、巴氏杆菌(25.5%)、绿脓杆菌(17.6%)和沙门氏菌(11.8%)。在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌。对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验。结果表明:各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死。【结论】在中国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 流行病学 协同感染 毒力因子
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猪源支气管败血波氏杆菌百日咳杆菌黏附素基因的原核表达及其抗体检测ELISA方法 被引量:8
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作者 赵战勤 薛云 +6 位作者 吴斌 汤细彪 陈焕春 李增强 胡睿铭 张建民 段龙川 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期330-336,共7页
[目的]以猪源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)百日咳杆菌黏附素(PRN)基因的原核表达产物为抗原建立检测PRN抗体的间接ELISA方法。[方法和结果]利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统对PRN基因在大肠杆菌中进行融合表达... [目的]以猪源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)百日咳杆菌黏附素(PRN)基因的原核表达产物为抗原建立检测PRN抗体的间接ELISA方法。[方法和结果]利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统对PRN基因在大肠杆菌中进行融合表达。SDS-PAGE和Westernblot检测证实该基因获得高效表达,产物易于纯化且具有良好的免疫学活性。通过凝血酶酶切GST-PRN并回收,获得不含GST载体蛋白的PRN蛋白片段。以PRN蛋白片段为抗原建立检测天然PRN抗体的间接ELISA方法。该方法对猪巴氏杆菌病等7种常见细菌性疾病阳性血清的检测结果均为阴性,其敏感性比乳胶凝集试验提高4~128倍,能检测到人工感染14d后的仔猪血清抗体IgG,对临床送检的1,229份猪血清的检测阳性率为32.7%。ELISA方法对阳性猪场的监测结果预示了保育期仔猪的合群导致猪群大量感染支气管败血波氏杆菌。[结论]该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于猪群PRN抗体水平监测和猪波氏菌病流行病学调查。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 百日咳杆菌黏附素 ELISA
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兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测 被引量:8
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作者 王伟 朱瑞良 +2 位作者 李新苍 胡晓娜 王永花 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期897-900,920,共5页
2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、... 2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。 展开更多
关键词 波氏杆菌 鉴定 (G+C)mol% 16SrRNA 免疫
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猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立 被引量:8
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作者 袁翠霞 罗阿东 +5 位作者 徐景峨 唐源 李建华 文明 李永明 周碧君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期896-899,共4页
对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其... 对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。 展开更多
关键词 猪萎缩性鼻炎 支气管败血波氏杆菌 PCR方法 检测
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兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用 被引量:11
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作者 范志宇 魏后军 +5 位作者 胡波 宋艳华 王芳 薛家宾 徐为中 苏国清 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期376-381,共6页
根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊... 根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊断方法。该方法检出的最小多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌菌数分别为40 CFU和4 CFU;对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。用该方法对中国4个省份采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测,结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为25.56%,支气管败血波氏杆菌阳性率为34.55%,双阳性率为13.20%。该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌,为临床疾病检测和流行病学调查提供了技术保障。 展开更多
关键词 兔支气管败血波氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 复合PCR
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兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 被引量:8
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作者 李长安 方艳琴 +1 位作者 陈晓霖 张耀相 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期16-19,共4页
对陕西商洛某养殖场病死兔解剖、无菌采取病料,从病料中分离到1株革兰阴性小杆菌,经生物学特性试验和生理生化试验鉴定,为兔支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果表明,该分离菌株对环丙沙星、氟哌酸、氧氟沙星等抗生素高度敏感;对氯霉素、... 对陕西商洛某养殖场病死兔解剖、无菌采取病料,从病料中分离到1株革兰阴性小杆菌,经生物学特性试验和生理生化试验鉴定,为兔支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果表明,该分离菌株对环丙沙星、氟哌酸、氧氟沙星等抗生素高度敏感;对氯霉素、红霉素、四环素等抗生素耐药。外毒素试验和动物致病性试验对小白鼠均有致病作用。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 分离 鉴定 药敏试验 致病性
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兔源支气管败血波氏杆菌和肺炎克雷伯菌的分离鉴定及其对抗菌药物的敏感性分析 被引量:12
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作者 张自强 王佳佳 +3 位作者 任玉莹 朱慧杰 张倩文 刘玉梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2254-2264,共11页
兔感染支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)后,常引起兔多发性呼吸道疾病,严重危害家兔养殖业。作者剖检河南省某兔场疑似病死兔,并采集组织分离鉴定病原菌,然后进行药敏试验,以期确... 兔感染支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)后,常引起兔多发性呼吸道疾病,严重危害家兔养殖业。作者剖检河南省某兔场疑似病死兔,并采集组织分离鉴定病原菌,然后进行药敏试验,以期确定引起兔呼吸困难、腹泻的病原。结果显示,经细菌分离培养得到1株革兰阴性、两端钝圆的小杆状可疑致病菌及1株革兰阴性、卵圆形的可疑致病菌;其16S rRNA基因序列扩增片段大小分别为1492和1494 bp,与B.bronchiseptica AU 12671和K.pneumoniae菌株F5feb.57相似性分别为99.85%和100.00%,即该兔场患病兔为B.bronchiseptica和K.pneumoniae混合感染。药敏试验结果显示所分离的B.bronchiseptica和K.pneumoniae同时对庆大霉素、头孢曲松、头孢唑啉3种药物敏感,对其他药物有不同程度的耐药性。综上表明,此次分离的细菌为B.bronchiseptica和K.pneumoniae,本试验为家兔B.bronchiseptica和K.pneumoniae混合感染的分离鉴定及科学用药提供参考。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 肺炎克雷伯菌 腹泻 呼吸道疾病 耐药性
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呼吸道综合征的猪肺中支气管败血波氏杆菌的分离、鉴定及特性分析 被引量:8
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作者 张彦兵 黎倩倩 +7 位作者 石元元 魏建超 李蓓蓓 刘珂 邵东华 马志永 孙延鸣 邱亚峰 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第2期61-65,共5页
临床上猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)大多为多种病原微生物共感染所致,支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)为PRDC的常见病原,但其在PRDC发生中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作... 临床上猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)大多为多种病原微生物共感染所致,支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)为PRDC的常见病原,但其在PRDC发生中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作用,本研究聚焦于PRDC的猪肺中Bb的分离、鉴定及特性分析。首先,利用16S rRNA基因序列对分离的细菌进行鉴定,结果从15头已鉴定为PRDC的猪肺中共获得5株Bb分离菌株。随后,对Bb相关毒力因子包括皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT)、百日咳杆菌粘附素(bordetellaad hesin,PRN)以及鞭毛蛋白(flagellin,fla B)进行PCR鉴定,结果发现所有分离株上述毒力因子都为阳性。最后,对Bb分离株进行18种抗生素的药敏实验,发现所有分离株对阿莫西林、头孢噻呋、链霉素、氨苄西林等8种药物高度耐药,而对卡那霉素、美罗培南以及庆大霉素高度敏感;此外,部分菌株对红霉素、氟苯尼考、强力霉素以及阿米卡星耐药。总之,本研究从PRDC的猪肺中分离到5株支气管败血波氏杆菌,这些分离株显示出不同的耐药特性,同时,分离株含有的与毒力相关的毒力因子,暗示了其致病特性。 展开更多
关键词 猪呼吸道综合征 支气管败血波氏杆菌 16S rRAN 毒力因子 耐药性
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猪支气管败血波氏杆菌PCR诊断方法的建立及应用 被引量:7
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作者 杨咏洁 鲁承 +1 位作者 赵达卓 金美伶 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-32,共4页
根据支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)鞭毛蛋白基因的上游序列设计了1对引物fla1和fla2,扩增出大小为237 bp的目的基因片段,建立了快速检测支气管败血波氏杆菌的PCR方法。特异性和敏感性试验表明,该方法对大肠埃希氏菌、... 根据支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)鞭毛蛋白基因的上游序列设计了1对引物fla1和fla2,扩增出大小为237 bp的目的基因片段,建立了快速检测支气管败血波氏杆菌的PCR方法。特异性和敏感性试验表明,该方法对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和D型多杀性巴氏杆菌均无交叉性反应;最低能够检出112.5 pg的模板DNA。用该PCR法检测了从延边州采集的48份表现不同临床症状的猪鼻黏液;结果,检出支气管败血波氏杆菌阳性42例,阳性率为87.5%。同时与传统的细菌检查法、微量凝集法进行了比较;结果显示,该PCR法的检出率是细菌检查法的5.25倍,是微量凝集法的1.75倍。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 猪传染性萎缩性鼻炎 聚合酶链式反应
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