黄芪甲苷与三七总皂苷配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的研究

目的观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)与三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的作用。方法采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,实验随机分为假手术组、模型组、单用冰片组、ASTⅣ配伍PNS(AP)组、ASTⅣ与PNS配伍冰片(APB)组,缺血2 h后再灌注48 h,神经功能评分、HE染色和尼氏染色检测脑组织功能和神经细胞损伤,HE染色检测肾脏损伤,通过肾脏质量指数和血肌酐以及血清中尿素氮含量评价肾脏功能,ELISA法检测血清IL-1β和IL-10含量,免疫组织化学检测肾组织NF-κB蛋白的表达,Western blot检测肾组织TLR4和MyD88蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能评分和神经细胞损伤率显著升高(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01),同时肾小管水肿、核固缩,肾脏质量指数降低(P<0.01),血清肌酐和尿素氮含量升高(P<0.01),提示脑缺血再灌注可诱发肾脏继发性损伤。与模型组比较,各药物组均能不同程度地降低神经功能评分(P<0.01),减少神经细胞损伤率(P<0.01或P<0.05),增加尼氏体数量(P<0.01),改善肾脏结构损伤,增加肾脏质量指数(P<0.01或P<0.05),降低血清肌酐和尿素氮含量(P<0.01或P<0.05),以ASTⅣ与PNS配伍冰片效果最佳。与假手术组比较,模型组血清IL-1β含量升高(P<0.01),肾组织NF-κB、TLR4和MyD88蛋白表达增高(P<0.01)。与模型组比较,各药物组血清IL-1β含量降低(P<0.01或P<0.05),血清IL-10含量升高(P<0.01或P<0.05),肾脏组织中NF-κB、TLR4和My D88的蛋白表达降低(P<0.01或P<0.05)。结论脑缺血后可诱发肾脏继发性损伤,ASTⅣ和PNS配伍冰片除可减轻脑缺血再灌注后脑组织损伤外,还可减轻脑缺血后继发性肾脏损伤,其作用与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路、抑制肾脏炎症有关。

冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束处方优选及体外抗肿瘤作用

目的 优化冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束的处方,考察其对鼠源脑胶质瘤细胞(C6)的体外毒性和对小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)体外靶向能力。方法 采用薄膜水化法构建冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束。Box-Behnken响应面法优化处方中影响包封率的3个因素[聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS1000)/总药量、聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、水化温度],高效液相色谱法对冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束中多烯紫杉醇与粉防己碱进行含量测定。体外考察不同胶束对C6细胞存活率的影响。采用荧光显微镜法考察不同胶束对bEnd.3细胞的主动靶向性。结果 优选后的处方为Soluplus 80 mg、TPGS100040 mg、多烯紫杉醇0.8 mg、粉防己碱3.2 mg,处方量为5 mL。冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束中多烯紫杉醇和粉防己碱的平均包封率为93.20%±0.35%和92.38%±0.08%。空白靶向胶束对C6细胞生长无显著影响;冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束能明显抑制C6细胞生长。细胞摄取实验显示,经冰片修饰的胶束摄取量显著提高。结论该实验成功优化用于制备冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束的处方,经冰片修饰的多烯紫杉醇/粉防己碱胶束,细胞毒性强于多烯紫杉醇胶束,对bEnd.3细胞有良好的主动靶向性。

天然冰片、艾片、合成冰片中残留溶剂测定及风险分析

目的对天然冰片、艾片、合成冰片纯化工艺中正庚烷、正己烷、环己烷、异辛烷、乙酸乙酯、乙醇残留量进行控制。方法建立顶空气相色谱法,DB-624毛细管柱(30 m×0.53 mm,3.0μm);FID检测器;程序升温。对34批天然冰片、12批艾片、34批合成冰片测定残留溶剂,并进行风险分析。结果天然冰片中部分批次检出乙醇,部分批次同时检出正己烷、环己烷、异辛烷和正庚烷,44%样品正己烷超标;艾片中部分批次检出正己烷、环己烷和异辛烷,残留量均符合规定;合成冰片中所有批次均同时检出正己烷、环己烷、异辛烷、正庚烷,残留量均符合规定。结论3种冰片中有机溶剂均有不同程度的残留,且残留量与其纯度有一定的关系。其中天然冰片中正己烷的残留带来的风险较高,建议在其质量标准中增加对正己烷的控制。

冰片在大鼠血清和脑组织中的药代动力学特征

以气相色谱法测定大鼠血清、脑组织中冰片浓度,把脑组织当作一个相对独立的系统,用PHARMFIT和PCNONLIN软件对冰片的体内过程进行动力学分析,探讨、比较冰片在脑内和血清中的药代动力学特征。研究结果表明,冰片在胃肠道吸收迅速,极易透过血脑屏障进入脑组织,冰片在脑内浓度与血清浓度有较高的比值,且冰片的脑内分布相半衰期是血清的三倍,但脑组织和血清冰片的消除速率常数相近,表现力冰片在脑组织和血清中的浓度同时平行下降,因此不会有冰片在脑内蓄积现象产生。

醒脑静对大鼠皮层神经细胞的保护作用

[目的]研究麝香、冰片等组成的醒脑静对神经细胞的保护作用。[方法]利用原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞,观察醒脑静对抗谷氨酸(10μmol·L-1,3h)对脑细胞的兴奋毒性作用。[结果]醒脑静能减少谷氨酸所造成的细胞内乳酸脱氢酶漏出量,减轻细胞的形态学改变。[结论]醒脑静能够对抗谷氨酸介导的兴奋性毒性,对培养的大鼠大脑皮层细胞具有保护作用。

石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用

[目的]探讨石菖蒲、冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用。[方法]在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤,测定空白对照组、模型对照组、石菖蒲挥发油组、冰片组、冰片+石菖蒲挥发油(低、中、高配比)组神经元细胞数、神经细胞支配面积。[结果]石菖蒲挥发油、冰片、冰片+挥发油(低、中、高配比)给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组。[结论]石菖蒲、冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用。

麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的探讨芳香开窍药麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响。方法Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用高效液相色谱法检测脑组织谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸。结果芳香开窍药可降低缺血区脑组织中的Asp,提高GABA、Gly的含量。结论芳香开窍药可降低脑缺血时的兴奋性神经递质Asp和升高抑制性神经递质GABA、Gly,以对抗兴奋性氨基酸的毒性,从而保护脑缺血后继发神经元的损伤,这可能是其芳香开窍机理之一。

冰片与川芎配伍抗脑缺血再灌注损伤作用机理的研究

【目的】探讨冰片与川芎配伍抗脑缺血再灌注损伤的作用机理。【方法】用结扎双侧颈总动脉法 ,造成大鼠脑缺血再灌注模型 ,观察冰片与川芎配伍对急性脑缺血再灌注脑组织中一氧化氮 (NO)及自由基含量的影响。【结果】冰片与川芎配伍使缺血再灌注脑组织过氧化脂质 (LPO)生成明显减少 (P<0 .0 1) ,并升高超氧化物歧化酶 (SOD)活性 (P <0 .0 1) ,对NO含量也有明显降低的作用 (P <0 .0 1) ,作用明显优于单用川芎或冰片。【结论】提示冰片与川芎配伍可能是通过减少缺血脑组织中NO的生成 ,减轻NO介导的神经毒性作用 ,提高自由基清除酶的活性 ,抑制脂质过氧化反应 ,而对缺血性脑组织损伤起保护作用 ,伍用冰片后可增强川芎对脑缺血再灌注损伤的保护作用。

芳香开窍法对急性缺血性中风治疗作用的临床观察

【目的】观察芳香开窍法对急性缺血性中风的治疗作用。【方法】将 4 4例急性缺血性中风的患者随机分为 2组 ,治疗组 2 0例 ,对照组 2 4例 ,两组均按中医辨证处方用药 ,每日 1剂 ,治疗组在此基础上加服通窍胶囊 (每粒胶囊含人工麝香0 0 4g ,冰片 0 1g) ,每次 1粒 ,每日 3次。对照组不用开窍药。疗程 2周。【结果】治疗组显效率为 80 0 % ,总有效率为95 0 % ,对照组显效率为 5 4 2 % ,总有效率为 91 6 % ,两组显效率差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而总有效率差异无显著性。意识障碍的改善比较 :治疗组的愈显率为 80 0 % ,对照组为 35 3% ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;治疗组的平均起效时间是(2 5 4 0± 2 3 10 )h ,而对照组为 (44 30± 2 5 30 )h ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。【结论】在辨证论治基础上早期配合芳香开窍法能明显提高急性缺血性中风的临床疗效 ,尤其在改善意识障碍、药物的起效时间上有积极的意义。

冰片与川芎配伍对脑缺血再灌注损伤的保护作用

用结扎双侧颈总动脉法 ,造成大鼠脑缺血再灌注模型 ,观察冰片与川芎配伍对急性脑缺血再灌注脑组织含水量、形态学及超微结构的影响。结果显示 ,冰片与川芎配伍可明显减轻缺血再灌注脑组织含水量 ;明显减轻细胞间质水肿和神经细胞的损伤 ;对脑缺血再灌注所致脑组织超微结构的破坏也有明显的保护作用。提示冰片与川芎配伍可通过保护血管内皮细胞功能、基膜的完整性 ,改善微循环 ,减轻脑水肿程度 ,从而对脑缺血再灌注损伤起保护作用。冰片与川芎配伍后 。

合成冰片对大鼠肝CYP450酶含量及CYP3A1 mRNA表达的影响

[目的]研究冰片对大鼠肝脏细胞色素氧化酶(cytochrom e P450,CYP450)含量及其亚型CYP3A1m RNA表达的影响。[方法W]istar大鼠合成冰片(设0.3gk/g和0.03gk/g剂量组,1次d/,连续7d)灌胃,以溶媒羧甲基纤维素纳(CM C-Na)和苯巴比妥钠为对照组,钙沉积法提取肝微粒体,紫外分光光度法测定CYP450含量,实时定量RT-PCR法检测肝脏CYP3A1m RNA的表达。[结果]0.3gk/g合成冰片口服可诱导大鼠肝脏CYP450酶含量增高(P<0.05),CYP3A1m RNA表达上调(P<0.05)。[结论]高剂量合成冰片口服可能影响肝脏药物代谢。

芳香开窍药药效物质基础研究进展

通过对芳香开窍药麝香、冰片、苏合香、安息香的药效物质基础研究进展的整理、分析,探索其共性,拟为深入研究该类药的共性物质—药性—开窍醒神效应之间的关联性提供科学参考。结果表明,四味芳香开窍药主含挥发油,均含有脂环化合物,并存在一些共有成分,如龙脑冰片与苏合香挥发油中均含有倍半萜类成分石竹烯;苏合香和安息香皆为树脂类中药,两者均含有香荚兰醛成分,尚含树脂酯,香脂酸等。

天然冰片、冰片和艾片的鉴别

目的:分析天然冰片、冰片和艾片的鉴别方法,为其质量控制及合理应用提供参考。方法:采用性状鉴别、薄层鉴别、旋光测定及气相色谱法对天然冰片、冰片和艾片进行鉴别。结果:天然冰片、冰片和艾片的药材性状相似度较大,但在形状大小和色泽方面存在微小差异;天然冰片和艾片的薄层色谱及气相色谱较接近,但冰片与二者有明显区别;三者的旋光度有较大差异。结论:综合性状鉴别、薄层鉴别、旋光测定和气相色谱鉴定分析,可以达到区分、检测天然冰片、冰片和艾片的目的,为其质量控制及合理应用提供参考依据。

薄荷冰片和麝香对鼻气道阻力及鼻感觉的影响

祖国医学常将薄荷、冰片作为改善鼻通气药以治疗鼻阻塞，但其作用机理尚不清楚。本实验在５２名受试者中研究了吸入薄荷冰、冰片、麝香对鼻气流阻力及鼻感觉的影响。结果发现这３种具有挥发性的药物都能够不同程度的引起鼻气道通畅的感觉，但对鼻气道阻力却无明显影响。因此作者认为此类药物可称为假性鼻通气药。

冰片联合灯盏花素对缺氧/复氧损伤血脑屏障通透性的影响

目的观察冰片联合灯盏花素对缺氧/复氧下血脑屏障(BBB)通透性的影响,探讨其保护BBB的作用机制。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞(BMEC),在缺氧培养箱中缺氧2 h,再复氧24 h,建立单层BMEC体外BBB模型。实验分为正常对照组、模型组、冰片组、灯盏花素组、冰片+灯盏花素组,各给药组给予相应药物干预,检测各组跨内皮细胞电阻(TEER)值和辣根过氧化物酶(HRP)的通透性,ELISA、Western blot检测BMEC中紧密连接蛋白ZO-1及Claudin-5蛋白表达。结果缺氧/复氧损伤导致TEER值降低,HRP通透率增加,ZO-1及Claudin-5蛋白表达降低;冰片联合灯盏花素可明显改善上述损伤。结论冰片联合灯盏花素对缺氧/复氧下BBB的损伤具有保护作用,其机制可能与上调ZO-1、Claudin-5蛋白表达有关。

清咽利喉胶囊的质量标准研究

目的建立清咽利喉胶囊(丁香、甘草、诃子等)的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中丁香、冰片、甘草、诃子予以鉴别;丁香酚、甘草酸的定量测定采用高效液相色谱法。应用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,丁香酚以甲醇-0.14%磷酸溶液(65∶35)为流动相,体积流量为1 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃;甘草酸以甲醇-0.2 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相,体积流量为1 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果薄层色谱检出了丁香、冰片、甘草、诃子,特征斑点分离清晰,阴性对照无干扰。丁香酚在0.248～1.490μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.999 9;平均回收率为98.27%,RSD为1.06%(n=9)。甘草酸在0.098 5～0.344 6μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.999 8;平均回收率为98.53%,RSD为1.09%(n=9)。结论该方法灵敏准确、专属性强、重复性好,可用于清咽利喉胶囊的质量控制。

合成冰片对大鼠海马神经元GABA_A受体介导电流的作用

目的:研究冰片对培养的大鼠海马神经元GABAA受体介导电流的调控。方法:采用全细胞膜片钳方法。结果:在培养的海马锥体神经元上,给予GABA可引起一具有明显脱敏的内向电流(IGABA),此电流能被b icucu llin所阻断,说明该电流为GABAa受体所介导。冰片以open-channel b locker的方式抑制IGABA,且这种抑制作用是可逆的,即洗去冰片后,抑制作用迅速消失。结论:冰片可能通过抑制GABAA受体提高中枢神经系统的兴奋性而发挥其醒脑作用。

化瘀止痛散的薄层鉴别研究

按照新的药品注册管理办法要求,研究了化瘀止痛散的薄层鉴别方法.通过实验考察了供试品前处理工艺、筛选薄层鉴别的色谱条件,建立了化瘀止痛散中血竭、冰片、三七的薄层色谱方法.实验结果表明:该方法简便,专属性强,重现性好,可用于化瘀止痛散的定性质量控制.

大七厘散的质量标准研究

目的：研究大七厘散质量标准。方法：建立大黄、当归、冰片、三七及骨碎补的薄层鉴别项。采用HPLC法对血竭中的主要成分血竭素进行含量测定,供试品溶液以12%磷酸甲醇溶液为溶媒的制备,流动相：乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（50∶50）;检测波长440 nm。结果：血竭素在0.774~77.415μg·m L^-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9999。加样回收率为100.2%,相对标准偏差（RSD）=1.8%（n=9）。结论：本法分离效果好,准确可靠,适用于大七厘散的质量控制。

复方氯霉素滴鼻液的研制及质量控制

目的制备复方氯霉素滴鼻液并建立其质量控制方法。方法以溶剂为指标筛选处方;分别用紫外分光光度法、双波长分光光度法、薄层色谱加重量法测定氯霉素、地塞米松磷酸钠和冰片的含量。结果氯霉素质量浓度在5～30mg/L范围内与吸收度线性关系良好,平均回收率为100.4%,RSD=0.10%(n=5);地塞米松磷酸钠在2.06～12.36mg/L范围内与△A线性关系良好,平均回收率为100.2%,RSD=0.08%(n=5);冰片薄层斑点清晰,重现性好,平均回收率为98.77%,RSD=0.48%(n=5)。结论制剂处方合理,质量稳定,质量控制方法可行。