去SUMO化酶SENP5的表达、纯化、活性测定及复合物重组

SENP5参与转录调控、蛋白质稳态、DNA修复和细胞分裂等重要生命过程,与癌症、发育缺陷和神经变性等疾病密切相关.SENP5包含N端的无规则卷曲和C端的催化结构域.研究对SENP5的催化结构域(SENP5CD)进行了表达和纯化.C末端水解活性实验表明SENP5CD对SUMO2前体(pSUMO2)的切割活性大于SUMO1前体(pSUMO1).分子筛实验证明,SENP5能够与SUMO1和SUMO2的前体、RanGap1-SUMO1和RanGap1-SUMO2形成稳定的复合物.实验构建了SUMO1-PA和SUMO2-PA活性探针,这2种活性探针都能与SENP5CD反应形成共价结合的复合物.通过比较AlphaFold预测的SENP5CD-pSUMO1和SENP5CD-pSUMO2复合物结构,发现pSUMO2与SENP5CD的结合比pSUMO1更紧密.研究表达、纯化了SENP5,鉴定了酶活性,获得了SENP5CD与底物的复合物,为进一步研究SENP5奠定了基础.

减毒沙门菌携带CWP2-S基因抗贾第虫口服疫苗的免疫原性

构建重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1-CWP2-S,对其免疫效果进行检测。酶切连接法构建重组质粒p VAX1-CWP2-S,以电击转染的方式转入减毒沙门菌SL7207。体外连续培养检测重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1-CWP2-S对质粒p VAX1-CWP2-S的携带稳定性;以重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1作为对照,经口服喂饲的方式免疫清洁级雌性BALB/c小鼠,8周后处死,检测各组试验鼠血清中和小肠灌洗液中特异性Ig G和SIg A的水平。结果是重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1-CWP2-S连续培养168 h后,质粒携带率为90%;口服免疫小鼠8周后,与对照组相比,重组减毒沙门菌SL7207/p VAX1-CWP2-S免疫组血清特异性Ig G抗体增高约4.4倍,小肠灌洗液中特异性SIg A抗体增高约6.67倍。表明重组CWP2-S减毒沙门菌株具有良好的免疫原性。

弓形虫P30与佐剂CTA_2/B复合基因酵母表达载体的构建与生物信息学分析

目的构建含有弓形虫主要表面抗原P30与免疫佐剂CTA2/B复合基因的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组P30CTX蛋白奠定基础。方法PCR扩增P30CTX复合基因,产物回收后与pMD18T载体连接,转化大肠埃希菌DH5α,经氨苄抗性筛选及测序,建立克隆载体pMD18T P30CTX;克隆载体与表达载体双酶切后,回收1313bp的P30CTX基因,亚克隆入酵母表达载体,转化大肠埃希菌DH5α,筛选、测序后建立酵母表达载体PGAPZαA P30CTX。重组质粒分别以PCR、酶切及测序鉴定。使用生物信息软件分析P30CTX复合基因,预测编码蛋白结构。结果重组质粒经PCR可得1313bp的特异条带,EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切获得1313bp和3085bp的条带,与预期大小一致,测序结果证实为pGAP P30CTX基因,序列分析同源性为99.82%,P30CTX蛋白结构折叠无明显改变。结论成功构建了含有弓形虫主要表面抗原P30与免疫佐剂CTA2/B复合基因的克隆载体及酵母表达载体,预测毕赤酵母表达系统对P30CTX的抗原性不会产生影响。

电影作品的作者身份确认及权利归属研究

电影不仅是众多创作者集体合作、专业分工形成的版权作品,也是文化创意产业时代发展形成的文化产品。因此,在作者身份确认制度中,有必要确认电影作品的合作作品性质,建立参与创作人员成为作者的标准;在权利归属的制度安排中,可以确认电影作品的演绎作品性质,以目的解释角度规定使用的方式和范围;在权利人与作者的利益分配体系中,应当顺应各国的立法趋势和当前的司法实践的要求,确立已有作品作者的平等受偿权。

公平分配的实现过程

公平分配的实现状况直接关系到和谐社会建设的成败,正确地认识公平分配的实现过程至关重要,现阶段,解决公平问题的重点在初次分配,而不是二次、三次分配,实现公平是一个渐进的过程,要分阶段按层面进行,不能一刀切,大体可以分为三个阶段、两个层面。由于涉及问题众多,涉及部门无数,每一个问题、每一个部门有不同特点,所以解决分配问题要形式多样,没有固定的模式。

论公平分配的实现过程

公平分配的实现状况直接关系到和谐社会建设的成败,正确地认识公平分配的实现过程至关重要。现阶段,解决公平问题的重点在初次分配,而不是所谓的二次、三次分配。实现公平是一个渐进的过程,要分阶段按层面进行,不能一刀切,大体可以分为三个阶段、两个层面。由于涉及问题众多,涉及部门无数,每一个问题、每一个部门均有不同特点,所以解决分配问题要形式多样,没有固定的模式。

人体胆汁及胆囊癌组织的同步辐射显微红外光谱研究

同步辐射红外光源的亮度是普通光源的100~1 000倍,在测试微小样品时具有更高的空间分辨率和信噪比。本文利用同步辐射显微红外比较了患有良性和恶性肿瘤病人的胆汁样品,在测试过程中将新鲜胆汁滴在基片上,能无损测试样品。通过比较发现患良性肿瘤病人的胆汁样品中具有更高含量的脂类,而患恶性肿瘤病人的胆汁样品则含有较高含量的磷酸脂,且两者含有的胆红素和蛋白质在组成和结构上有较大的差异。同时,利用同步辐射显微红外对患胆囊癌病人的癌症组织和癌旁组织进行微区成像,并且利用层次聚类分析可知,癌症组织比癌旁组织具有更高的脂质含量。

《体育科学研究》2015-2020年载文及作者情况分析

运用文献资料法和数理统计法,对《体育科学研究》2015—2020年的收稿量、载文量、基金论文比例、作者职称情况、作者单位情况、论文出版时滞等指标进行统计分析。结果表明:《体育科学研究》的收稿量近两年上升明显;刊发论文量保持平稳、略有下降;基金论文比保持在稳定的水平;作者职称、学历呈上升的趋势;作者的单位以高等院校为主;出版时滞有待进一步缩减。在此基础上提出建议:扩大宣传,让广大作者更加了解刊物;依托优势学科和闽台区位,办出特色栏目;加大约稿力度,培养优秀青年作者群体,以期提高刊物质量。

以人为本统筹解决医疗卫生人员短缺问题

本文从医疗卫生机构编制严重滞后,导致医务人员明显短缺,致使医疗机构大量临时聘用人员,产生同工不同酬等问题进行研究分析,提出了取消公立医院人员编制,建立养事不养人和以病人为中心,资金跟着病人走的医疗服务补偿机制,改革分配制度。

国际脊柱外科领域中相同贡献作者情况的调查分析

[目的]在一些医学领域中,共同第一作者和共同通讯作者等对研究具有相同贡献作者的情况越来越多见。然而,在脊柱外科是否存在这种现象目前仍不清楚。本研究的目的是调查主要脊柱外科杂志中相同贡献作者的比例和特征,分析其趋势及其原因和存在的问题。[方法]选取国际脊柱外科3本主要的专业杂志,包括The Spine Journal、Spine和European Spine Journal。利用手工浏览杂志官网和翻阅纸质期刊的方式,获取2006～2013年发表在这3本杂志上有相同贡献作者的文章。统计相同贡献作者的数量、位置、作者总数、发表时间和地区分布。[结果]在这3本杂志中均发现相同贡献作者的情况,并且2013年发表的文章中相同贡献作者的文章比例均高于2006年（The Spine Journal,6.2%：0.0%;Spine,7.2%：0.5%;European Spine Journal,7.5%：0.8%）。每年发表相同贡献作者文章的比例呈现明显增加的趋势（P〈0.05）。相同贡献作者几乎出现在了每一个作者位置。其中,以前2个作者为最多。相同贡献作者的文章来自世界各地。然而,这三本杂志并没有在投稿须知中对相同贡献作者情况给出相应的指南。[结论]相同贡献作者的现象在国际脊柱外科中越来越常见。作者应该恰当使用相同贡献作者,而杂志应该提供相应的指导。

2类典型学术论文署名不端行为及其防范策略

科研诚信治理进入深水区,学术论文的不端署名行为因其可操作性强及隐蔽性深,成为科研诚信治理中最突出的难题之一。本文重点研究署名中的作者身份操纵和同等贡献作者滥用问题,分析其表现形式、成因及危害,提出学术期刊遏制不端署名的应对策略:首先,参照国内外标准,制定署名指南,明确署名规则;其次,利用期刊网络和新媒体平台,宣传署名规范,提高科研人员正确署名的自觉性;最后,根据作者身份信息和贡献声明,定性审查作者署名资格、同等贡献署名是否合理等。