镝(Dy)-L-苯丙氨酸-5-氟尿嘧啶三元配合物的合成及与牛血清白蛋白相互作用的研究

利用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱法,在Tris-HCl缓冲溶液中考查了不同温度下镝(Dy)-L-苯丙氨酸-5-氟尿嘧啶三元配合物与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。实验表明,配合物对BSA的内源荧光猝灭为静态猝灭过程,并测定该反应在不同温度下的结合常数KA,且配合物与BSA以物质的量比1∶1结合。根据计算出的热力学参数表明,配合物和BSA之间的作用力主要是静电作用。用同步荧光技术考察了配合物对BSA构象的影响,结合位点接近于酪氨酸残基。

流动注射在线氧化荧光法结合透析采样研究盐酸硫利达嗪与牛血清白蛋白的结合作用

利用流动注射在线氧化结合在线透析采样技术建立了荧光法测定血浆中游离盐酸硫利达嗪的新方法,并将其应用于盐酸硫利达嗪与牛血清白蛋白作用机制的研究.将盐酸硫利达嗪与牛血清白蛋白以不同比例混合并在37℃下培养,以流动注射透析采样技术从混合液中分离出游离盐酸硫利达嗪,在线氧化为强荧光化合物后测定其浓度;应用Scrathard方程分析所测数据,求得盐酸硫利达嗪和牛血清白蛋白的结合常数为1·2×104L/mol,结合位点数为0·98;根据热力学参数推断,盐酸硫利达嗪与牛血清白蛋白之间以疏水作用力为主;进一步基于荧光猝灭现象和Fster非辐射能量转移理论,得到盐酸硫利达嗪小分子与牛血清白蛋白之间的能量转移效率(E=0·497)和结合距离(r0=3·27nm).

丹参酮Ⅱ_A重组脂蛋白仿生载体的制备

目的:模拟天然脂蛋白的超分子结构制备丹参酮Ⅱ_A白蛋白环绕脂核的仿生重组载体。方法:以乳化-蒸发法制得的纳米结构脂质载体作为脂核,后续物理孵育牛血清白蛋白,使其呈现类似于天然脂蛋白形貌的仿生载体结构。选择粒径和包封率为评价指标筛选丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体的最优处方。采用碘化钾荧光猝灭法,对牛血清白蛋白与脂核的孵育温度、时间以及蛋白结合量进行考察。结果:采用最优处方工艺制得的丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体,粒径为(42.1±2.1)nm,包封率为(100.60±1.93)%,Zeta电位为(-28.52±0.34)mV。采用最佳孵育条件制得的丹参酮Ⅱ_A重组脂蛋白仿生载体粒径为(185.3±1.2)nm,Zeta电位为(-18.26±0.70)mV,透射电镜显示牛血清白蛋白孵育到纳米结构脂质载体上。结论:制备的丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体粒径小,分布均匀,对丹参酮Ⅱ_A实现良好的包封。与牛血清白蛋白孵育后,呈现出类似于天然脂蛋白重组超分子结构的基本形态。