MR T2^(*)mapping成像技术定量评价腰椎小关节炎软骨损伤

背景:腰椎小关节炎是引起下腰痛的一个主要原因,目前主要依靠MRI进行初步定性诊断,但仍有一定漏诊、误诊的概率发生,因此MR T2^(*)mapping成像技术有望成为定量检查腰椎小关节炎软骨损伤的重要检测手段。目的:探讨MR T2^(*)mapping成像技术在定量分析腰椎小关节炎软骨损伤退变中的应用价值。方法:收集南京医科大学第四附属医院2020年4月至2022年3月门诊或住院合并下腰痛共110例患者,设为病例组;同时招募无症状志愿者80例,设为对照组。对所有纳入对象L1-S1的小关节行3.0 T MR扫描,获取T2^(*)mapping横断位图像和T2WI图像,分别对所有小关节软骨进行Weishaupt分级及T2^(*)值测量,收集数据并行统计学分析。不同小关节Weishaupt分级之间小关节软骨T2^(*)值比较采用单因素方差分析。结果与结论:①经统计分析发现,病例组腰椎小关节软骨T2^(*)值(17.6±1.5)ms明显较对照组(21.4±1.3)ms降低,差异有显著性意义(P<0.05);②在病例组中,随着腰椎小关节Weishaupt分级增加,小关节软骨T2^(*)值也呈逐渐下降趋势,且这种差异有显著性意义(P<0.05);③提示T2^(*)mapping能够较好地显示腰椎小关节软骨损伤的早期病理变化,腰椎小关节软骨的T2^(*)值能够定量评估腰椎小关节的软骨损伤程度;T2^(*)mapping成像技术能为影像学诊断腰椎小关节炎软骨早期损伤提供很好的理论依据,具有重要的临床应用价值。

RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

1565nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊对斑秃小鼠IFN-γ信号及NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例的影响

目的研究1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊干预对斑秃小鼠干扰素-γ(IFN-γ)信号与NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞的影响。方法将50只雄性C3H/HeJ小鼠随机分为正常组、模型组、点阵激光组、侧柏叶酊组及点阵激光联合侧柏叶酊组,每组10只。除正常组外,其余组小鼠均采用环磷酰胺诱导斑秃。在造模期间,点阵激光组给予1565 nm非剥脱点阵激光治疗;侧柏叶酊组给予5%侧柏叶酊在脱毛部位轻微按摩2~3 min;点阵激光联合侧柏叶酊组给予1565 nm非剥脱点阵激光及5%侧柏叶酊按摩治疗。观察各组小鼠皮肤状态和毛发生长情况;实验第7天取血,流式细胞术检测血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例,Western blot法检测毛囊组织中IFN-γ及其受体IFNGR1和IFNGR2表达情况。结果模型组小鼠斑秃部位的毛发出现断裂、变细,裸露皮肤表面出现黑点;各干预组斑秃情况均较模型组轻,其中点阵激光联合侧柏叶酊组最轻。模型组血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例和毛囊组织中IFN-γ、IFNGR1、IFNGR2蛋白相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05)。点阵激光组、侧柏叶酊组仅毛囊组织中IFN-γ蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05),点阵激光联合侧柏叶酊组血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例和毛囊组织中IFN-γ、IFNGR1、IFNGR2蛋白相对表达量均明显低于模型组及点阵激光组、侧柏叶酊组(P均<0.05)。结论1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊外用可通过抑制IFN-γ信号通路和NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞的积累,从而有效改善斑秃。

miR-155/GATA3/CD4^(+)T细胞通路对变应性鼻炎发病机制的调控

变应性鼻炎(AR)指具有特异性体质的个体第二次接触相同致敏原后立即触发由免疫球蛋白E介导的Ⅰ型变态反应,其发病机制尚未明确,与多种基因、免疫细胞、细胞因子等密切相关。随着分子生物学和第二代基因测序技术快速发展,AR发病机制研究逐步深化、精准。研究发现miR-155和转录因子GATA3对AR发生发展有重要调控作用,进而影响CD4^(+)T淋巴细胞的优势分化趋势和ILC2增生。本文主要以miR-155/GATA3通路为中心,探讨相关上游基因和下游调控物质对AR发病机制的影响并进行综述。

换热器T2紫铜管在水线部位的腐蚀机理研究

目的基于对换热器中T2紫铜管因受残留水作用而出现泄漏降压现象的研究,分析换热器T2紫铜管在水线部位的腐蚀机理。方法通过T2紫铜管的润湿试验,对腐蚀样品进行宏观和微观形貌观察,对点蚀坑部位的腐蚀产物进行EDS和XPS等表征手段分析,探究腐蚀产物的成分和结构,从而推导出反应机理。结果铜管水线上部位和下部位都以均匀腐蚀为主,但是颜色有所差异。水线部位以点蚀为主,肉眼即可见排成直线的斑点状腐蚀坑,腐蚀产物的颜色主要为黑色和绿色。根据表征分析结果可知,腐蚀体系中含有HCO_(3)^(-)和SO_(4)^(2-)。腐蚀产物的组成有,内层Cu_(2)O,外层CuO,水线部位和水线以下部位铜管表面还有一层CuCO_(3)Cu(OH)_(2)膜。结论根据腐蚀产物的元素分析可知,在HCO_(3)^(-)和SO_(4)^(2-)共同存在的环境中,铜具有很高的点蚀敏感性,T2紫铜管很容易发生局部腐蚀,加之氧浓差电池的作用,水线部位铜管发生严重的点蚀以致穿孔失效。

Tim-3靶向CD8^(+)T细胞调控TNF-α/IL-22/STAT3通路加重自身免疫性肝炎小鼠肝损伤

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域的分子3(Tim-3)对自身免疫性肝炎的影响及其机制。方法将30只小鼠分为3组:空白组、模型组和模型+Tim-3阻断组,每组10只。空白组经尾静脉注射等量生理盐水;其他两组尾静脉注射10 mg/kg刀豆蛋白A建立自身免疫性肝炎小鼠模型,造模成功后模型+Tim-3阻断组每天1次腹腔内注射液0.1 mg/ml Tim-3,注射7 d。HE染色观察小鼠肝组织病理改变;全自动生化分析仪检测血清AST、ALT;酶联免疫吸附法检测IL-22、TNF-α水平;流式细胞分析肝组织CD8^(+)T比例;实时荧光定量PCR检测肝组织Tim-3、IL-22、TNF-α、STAT3 mRNA相对表达;免疫印迹试验检测肝组织Tim-3、IL-22、TNF-α、STAT3蛋白相对表达。结果空白组小鼠肝脏组织无变化;模型组肝脏组织大面积性肝炎;模型+Tim-3阻断组见显著淋巴细胞浸润与大量空泡。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组ALT、AST、IL-22、TNF-α水平均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组ALT、AST、IL-22、TNF-α水平升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组CD8^(+)T细胞比例表达均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组CD8^(+)T细胞比例下降(P<0.05)。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组Tim-3、IL-22、TNFα、STAT3 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组Tim-3 mRNA及蛋白表达下降,IL-22、TNF-α、STAT3 mRNA及蛋白相对表达升高(P<0.05)。结论阻断Tim-3可下调CD8^(+)T细胞,促进TNF-α/IL-22/STAT3炎症信号表达,加重自身免疫性肝炎小鼠肝损伤。

激酶mTORC2在EAE模型中对致病性CD4^(+)T细胞的调控作用

目的研究mTORC2信号缺陷减轻EAE临床症状和其对致病性CD4^(+)T细胞的调控机制。方法通过MOG35-55肽免疫分别诱导Rictor^(fl/fl)CD4cre(Rictor^(-/-))和Rictor^(fl/fl)(WT)小鼠,记录其临床症状分数和体质量变化情况,应用流式细胞术检测致病性CD4^(+)T细胞亚群的数目、过氧化脂质水平和线粒体来源的ROS水平。结果Rictor^(-/-)小鼠中EAE临床症状比WT小鼠更轻,致病性CD4^(+)T细胞更少,且这群细胞更易发生铁死亡。结论mTORC2信号缺陷通过促使致病性CD4^(+)T细胞发生铁死亡来减轻EAE的临床症状。

正常范围内CD4^(+)T细胞水平对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响

目的探讨正常范围内CD4^(+)T细胞水平对2型糖尿病(T2DM)患者胰岛素抵抗的影响。方法招募2021年9月至2022年6月徐州医科大学附属医院收治的T2DM患者269例,依据正常范围内的CD4^(+)T细胞水平将其分为4组:A组58例,414~670个/μl;B组78例,671~927个/μl;C组74例,928~1183个/μl;D组59例,1184~1440个/μl。对研究对象的干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-17(IL-17)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、C反应蛋白(CRP)等指标进行检测。行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放试验,计算稳态模型胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和Matsuda指数评估胰岛素敏感性IS(ISI_(M)),分析各指标间的关联性。结果四组CRP、INF-γ、IL-17、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹血糖(FPG)、HOMA-IR、ISI_(M)比较差异有统计学意义(P<0.05),且CRP、INF-γ、IL-17、HbA_(1c)、FPG、HOMA-IR与CD4^(+)T细胞水平呈正关联,ISI_(M)与CD4^(+)T细胞水平呈负关联。Spearman秩相关性分析结果显示,HOMA-IR与CD4^(+)T细胞、CRP、HbA_(1c)、FBG、IL-17、INF-γ呈显著正相关(P<0.05),与ISI_(M)呈显著负相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,CD4^(+)T细胞、FBG、IL-17、INF-γ水平与HOMA-IR水平呈正关联(P<0.05)。控制FPG及其他混杂因素(CRP、HbA_(1c)、IL-17、INF-γ)后,偏相关分析结果显示,HOMA-IR与CD4^(+)T细胞呈正相关(r=0.343,P<0.05)。结论在CD4^(+)T细胞正常水平范围内,T2DM患者的CD4^(+)T细胞水平越高,其胰岛素抵抗越重,外周组织对胰岛素的敏感性也更低。

基于PET/CT探讨汉族与维吾尔族2型糖尿病受检者肠道^(18)F-氟代脱氧葡萄糖摄取差异及影响因素

目的:基于正电子发射断层扫描(PET)/CT,探讨汉族及维吾尔族2型糖尿病(T2DM)患者对^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)生理性摄取差异及影响因素。方法:选取医院收治的180例T2DM患者,按照是否口服二甲双胍(MET)分为口服MET组和未口服MET组,每组90例(其中维吾尔族与汉族各45例);另选取同期进行体检的90名健康检查者为健康对照组(其中维吾尔族与汉族各45名)。所有受检者均行^(18)F-FDGPET/CT扫描,比较不同组别、不同民族受检者肠道对^(18)F-FDG的最大标准化摄取值(SUV_(max)),同时比较3组不同民族受检者一般临床资料及相关血液学指标与肠道SUV_(max)的相关性。结果:健康对照组、未口服MET组及口服MET组3组中的维吾尔族受检者SUV_(max)均明显高于汉族,差异有统计学意义(t=-2.89,t=-5.06,t=-4.84;P<0.05)。3组汉族及维吾尔族受检者的SUV_(max)比较有统计学意义(F=15.64,F=15.88;P<0.05)。口服MET组汉族及维吾尔族受检者SUV_(max)均明显高于健康对照组汉族及维吾尔族受检者(t=9.43,t=8.87;P<0.05);口服MET组的两族受检者的SUV_(max)均明显高于未口服MET组(t=8.99,t=9.38;P<0.05)。健康对照组中,汉族及维吾尔族受检者SUV_(max)与甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及体脂率呈正相关性(r_(TG)=0.295,r=0.323;r_(LDL)=0.373,r=0.437;r_(体脂率)=0.475,r=0.544;P<0.05),与高密度脂蛋白(HDL)呈负相关性(r=-0.302,r=-0.38;P<0.05)。未口服MET组中,汉族及维吾尔族受检者^(18)F-FDG的摄取与空腹血糖(BG)及糖化血红蛋白(Hb A1c)均呈负相关性(r_(BG)=-0.284,r=-0.364;r_(HbA1c)=-0.336,r=-0.402;P<0.05)。BG≤8 mmol/L的汉族及维吾尔族的受检者SUV_(max)显著高于BG>8 mmol/L的受检者(t=6.71,t=6.44;P<0.05);HbA1c≤7.0%汉族及维吾尔族的受检者SUV_(max)高于HbA1c>7.0%的受检者(t=4.86,t=8.31;P<0.05)。结论:健康人群中,维吾尔族肠道SUV_(max)值较汉族明显增高。口服MET的T2DM患者血糖控制水平与^(18)F-FDG摄取水平具有相关性。行^(18)F-FDG检查时需考虑民族差异、是否患有T2DM以及是否服用MET。

CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞与2型糖尿病肾病的关系

目的探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)与2型糖尿病肾病之间的关系,为2型糖尿病肾病的预防和治疗提供新的思路。方法采用流式细胞仪胞内染色技术测定60例2型糖尿病患者和15例正常对照组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率。结果①CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率在2型糖尿病组和对照组之间无显著性差异。②微量蛋白尿组和大量蛋白尿组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率较对照组有显著性降低(P<0.05),而且大量蛋白尿组较微量蛋白尿组表达率降低更明显(P<0.05)。③病程与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率呈显著负相关;UAER分级的等级变量与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率之间有显著的负相关性。结论CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞可能参与了2型糖尿病肾病的发生和发展。

阿尔茨海默病脑铁沉积的3．0T磁共振T2^＊测量研究

目的比较阿尔茨海默病(AD)患者和正常对照者多个脑结构的T2*值,以探讨T2*值测量的临床应用价值。资料与方法19名AD患者及17名年龄相匹配的健康对照者均在3.0TMR系统中进行头部检查。所有AD患者均有轻度到中度认知功能缺损。采用一个多回波快速场回波序列获得T2*图,测量双侧海马、颞叶皮层、枕叶皮层、丘脑、壳核及苍白球所画感兴趣区的T2*值,并计算相应的R2*值。结果与正常对照组比较,AD患者组海马、颞叶皮层及苍白球的T2*值减低,颞叶皮层及苍白球的R2*值明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论通过对T2*值的测定可以估测AD患者脑内的铁沉积,这将为AD的活体诊断及病情监测提供一定的帮助。

服用扶正抗癌方后非小细胞肺癌晚期患者CD8^+T细胞表达NKG2D和NKG2A受体的变化

目的:探索服用扶正抗癌方后非小细胞肺癌(NSCLC)晚期患者CD8^+T细胞表达NKG2D和NKG2A受体的变化。方法:NSCLC晚期患者共31例,根据不同的临床因素(服用扶正抗癌方前后、病理类型、TNM分期和性别)进行分组,流式细胞术检测外周血CD4^+T、CD8^+T细胞绝对值以及CD8^+T细胞表达NKG2D和NKG2A受体的变化。结果:Ⅲ期患者NKG2D^+NKG2A^-CD8^+T细胞占百分比显著高于Ⅳ期,Ⅲ期患者NKG2D^-NKG2A^+CD8^+T细胞占百分比显著低于Ⅳ期。服用扶正抗癌方后下列指标的变化:NKG2D^+NKG2A^-CD8^+T细胞占百分比显著升高,而NKG2D^-NKG2A^+CD8^+T细胞所占百分比显著降低,而且上述两群细胞所占百分比呈负相关;伴随着CD8^+T细胞表达NKG2D的升高和NKG2A的下降,大部分患者的生存质量稳中有升;鳞癌的NKG2D^+NKG2A^+CD8^+T细胞所占百分比显著低于腺癌;CD8^+T细胞NKG2D和NKG2A的表达无男女差别。结论:服用扶正抗癌方后NSCLC晚期患者CD8^+T细胞表达NKG2D升高NKG2A下降,有助于改善患者的生存质量和预后。

3.0T磁共振T2^(*) mapping成像分区评估膝关节软骨的应用价值

目的:探讨3.0T磁共振T2^(*)mapping成像分区定量评估膝关节软骨的应用价值。方法:回顾性分析本院30例膝关节软骨损伤的患者的常规MRI和T2^(*)mapping影像资料,将股骨、胫骨平台及髌骨软骨分为14个亚区,共获取420个软骨亚区,通过矢状位质子密度加权成像(PDWI)脂肪抑制序列图像分析软骨形态和信号改变,将420个软骨亚区分为正常组、轻度损伤组及重度损伤组,另将正常组分为承重区及非承重区,测量其T2^(*)值并进行对照分析。结果:软骨正常组332个,轻度损伤组41个,重度损伤组47个。轻度及重度损伤组的T2^(*)平均值均高于正常组(P<0.05),重度损伤组的T2^(*)平均值高于轻度损伤组,但2组间差异无统计学意义(P=0.12)。另外,正常组的承重区和非承重区的T2^(*)值差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:T2^(*)mapping成像可用于定量评估膝关节软骨,能更直观地区分正常和损伤的软骨,对膝关节软骨损伤的定量诊断具有重要的临床应用价值。

结核性与恶性胸腔积液中CD_4^+ CD_(25)^+调节性T细胞及相关因子的检测

目的检测结核性胸腔积液及恶性胸腔积液中CD4+ CD25+调节性T细胞的分布与可溶性白介素-2受体(sIL-2R)及转化生长因子β1(TGF-β1)浓度,并探讨良恶性胸腔积液患者的局部免疫机制。方法47例结核性胸腔积液及34例肺癌并恶性胸腔积液患者于第1次抽液时留取胸腔积液,ELISA法检测sIL-2R及TGF-β1的浓度,Ficoll梯度离心分离单个核细胞,抗体标记后应用流式细胞仪分析CD4+ CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例。结果47例结核性胸腔积液与34例肺癌并恶性胸腔积液中CD4+ CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例分别为(8.7±0.6)%(、21.1±2.3)%,有显著性差异(P<0.05);结核性胸腔积液与恶性胸腔积液中sIL-2R浓度分别为(563.2±92.61)ng/ml,(390.12±101.12)ng/ml,有显著性差异(P<0.05);恶性胸腔积液中TGF-β1的水平(88.4±16.7mg/L),显著高于结核性胸腔积液组(40.3±3.6mg/L),结核性胸腔积液中sIL-2R、TGF-β1浓度与CD4+ CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例均无明显相关关系(P>0.05)。结论CD4+ CD25+调节性T细胞,sIL-2R及TGF-β1可作为判定结核或恶性胸腔积液的辅助诊断指标。

钩吻素子对小鼠CD4^+T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响

目的研究钩吻素子(Koumine,Kou)对小鼠CD4+T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响。方法分离纯化小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,经刀豆球蛋白A(ConcanavalinA,ConA)刺激诱生细胞因子,然后加入不同浓度的Kou,继续培养24小时后离心收集细胞培养上清。用酶联免疫法(ELISA法)检测细胞上清中Th1类细胞因子IL2、IFNγ以及Th2类细胞因子IL4、IL10的含量变化情况,观察药物对CD4+T淋巴细胞因子表达的影响。结果对于Th1型细胞因子,各浓度组Kou作用24h后均可显著降低IL2、IFNγ的水平,并呈剂量依赖性;对于Th2型细胞因子,Kou对IL4表达影响不大,但中浓度组Kou(100μg/ml)可显著升高IL10的水平。结论对CD4+T细胞Th细胞因子分泌的调节可能是Kou治疗银屑病等T细胞活化异常炎症性疾病的免疫药理机制之一。

应用SCF+IL-2等细胞因子从脐血CD34^+细胞扩增T细胞

肿瘤和艾滋病 (AIDS)的基因治疗或免疫治疗的研究需要大量的T细胞克隆。尽管T细胞来源于CD34+细胞 ,但由于需要胸腺组织的参与 ,使其在体外扩增大量细胞克隆非常困难。本研究用脐血单个核细胞作为辅助细胞 ,在SCF +IL 2等细胞因子的作用下 ,人脐血CD34+在此培养条件下 ,不断产生CD4 +或CD8+T细胞至少持续 3周。在培养扩增过程中 ,发现CD4 +和CD8+T细胞的比例有一个不断变化的动态过程 ,培养体系中可以检测到CD4和CD8双阳性细胞的存在 ;RT PCR可检测到负责TCR重排的RAG 2基因的表达 ,说明所获得的T细胞来源于CD34+细胞。本研究为从CD34+细胞获得大量的T细胞克隆提供了一个简便的体外培育体系。

佛波醇酯加离子霉素诱导脐血和成人外周血CD4^+CD25^+ T细胞分泌IL-2的相关机制研究

目的:以佛波醇酯加离子霉素作为刺激剂,验证CD4+CD25+调节性T细胞本身并不存在分泌IL-2障碍;同时通过对脐血和成人外周血的比较性研究,了解脐血CD4+CD25+T细胞的成熟度。方法:以autoMACS从足月婴儿脐血(CB)和成人外周血(PB)分选CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,以PDB+ionomycin作为刺激剂,培养45h后流式细胞术检测各组细胞表达CD69和CD25水平,并以Luminex多重细胞因子检测技术检测培养上清中7种细胞因子的浓度。结果:经PDB+ionomycin刺激后,CB、PB的CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均发生增殖,但在培养45h后CD4+CD25+T细胞均出现细胞状态变差或死亡倾向。CB、PB的CD4+CD25+T细胞活化后CD25分子表达进一步上调,高于CD25-细胞活化后的CD25分子密度。经PDB+ionomycin刺激后,PB CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均分泌高水平的IFN-γ、IL-2和TNF-α,但CD25+细胞分泌IL-5、IL-4和IL-10水平远远高于CD25-细胞;CBCD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞亦分泌高水平的IL-2和TNF-α,但IFN-γ水平远远低于PB,基本不分泌IL-5、IL-4和IL-10。结论:CD4+CD25+T细胞本身并不存在合成和分泌IL-2障碍,其可能具有与传统T细胞不同的T细胞受体信息转导模式;脐血CD4+CD25+T细胞功能尚未完全成熟。

新生儿细菌感染时CD4^+T细胞表面IL-2R的表达

为探讨新生儿CD4+ T细胞表面白介素_2受体 (interleukin_2receptor,IL_2R)的表达对临床诊断新生儿细菌感染的意义 ,用全血法标记CD4 +T细胞表面IL_2R三条肽链CD25、CD122和CD132 ,借助流式细胞仪分别测定19例正常足月新生儿 (对照组 )和17例细菌感染足月新生儿 (感染组 )治疗前后CD25、CD122和CD132的表达。并将对照组和感染组首次样本结果及感染组治疗前后样本结果进行统计学检验。结果显示 ,对照组新生儿脐血CD4 +T细胞表面CD25、CD122和CD132的表达较低 ,分别为3.84 %±3.61 %、0.74 %±0.53%和12.70 %±8.54% ,与治疗前感染组(分别为9.89%±9.66 %、5.79 %±11.14%和21.78 %±11.34 %)相比差异有显著性(P<0.05) ;而细菌感染组治疗后新生儿CD4 +T细胞表面CD25、CD122和CD132的表达量为11.11 %±7.06%、6.35 %±6.23%和27.41 %±17.19 % ,治疗前后相比差异无显著性(P均>0.05)。提示CD25、CD122和CD132在脐血CD4 +T细胞上的表达较低 ,细菌感染组治疗前CD4 +T细胞表面CD25、CD122和CD132表达的升高 ,表明CD4 +T细胞活化 ,故在临床上可以考虑将CD25。

抗CD25单克隆抗体对CD^4+CD25^(high)调节性T细胞的影响

目的评价抗CD25单克隆抗体对活体肾移植受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的影响。方法观察14例活体肾移植受者外周血CD4+CD25highT细胞百分比和FoxP3mRNA表达水平的变化,应用流式细胞仪FACSCalibur和CellQuest软件行双色流式细胞计数和结果分析,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对肾移植受者外周血单个核细胞(MNC)的FoxP3基因水平进行检测。结果在移植术后3d、13d,CD4+CD25highT细胞占CD4+比例显著升高;在移植后1个月内,CD4+CD25highT细胞比例升高约至原来的3倍。移植术后13d、17d、27d时外周血FoxP3mRNA表达明显高于移植术后3d。在肾移植术后的不同时间抗CD25单克隆抗体使用组受者的CD25+T细胞百分比明显低于对照组(未使用抗CD25单克隆抗体)。抗CD25单克隆抗体使用组与对照组两组间比较,术后3d、13d,抗CD25单克隆抗体组CD4+CD25highT细胞占CD4+的比例明显降低,术后3d对照组、抗CD25单克隆抗体使用组分别为1.24%±0.15%、2.25%±0.24%,P=0.00;术后13d为3.75%±0.38%、7.28%±0.51%,P=0.00。然而,术后17d、27d后,抗CD25单克隆抗体使用组的CD4+CD25highT恢复到对照组水平,两组间CD4+CD25highT细胞占CD4+的比例无统计学差异,即第17d为3.72%、0.26%、4.43%、0.44%,P=0.17,27d为9.00%±0.30%、8.31%±0.33%,P=0.16。在肾移植术后不同时间,受者外周血FoxP3mRNA表达水平在两组之间相似,无统计学差异,说明FoxP3mRNA表达水平并没有受到体内注射抗CD25单克隆抗体影响。结论抗CD25单克隆抗体的使用对活体肾移植受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞在一定时间具有暂时性的影响,而FoxP3mRNA表达水平没有受到影响。

初诊2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者外周血CD4^+T细胞亚群的比例变化

目的比较初诊2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)及T2DM合并非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者外周血中CD4^+T细胞亚群的变化,探讨其免疫炎症机制。方法初诊T2DM患者56例,根据是否合并NAFLD分为T2DM组和T2DM合并NAFLD组。另取同期健康体检者29例为对照组。收集3组患者基本资料,测定代谢相关指标及炎症指标C反应蛋白(CRP)。根据空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)值计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),评价胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)水平;同时计算动态胰岛素分泌指数(MBCI)、胰岛素分泌指数(HOMA-β),评价胰岛素分泌功能。超声检测肝脏内脂肪含量(LFC),流式细胞仪检测静脉血中CD4^+T细胞亚群的比例,比较各组间指标的差异,探讨其在T2DM合并NAFLD发病中的作用。结果与对照组相比,T2DM组与T2DM合并NAFLD组外周血各Th细胞亚群占总CD4^+T细胞的比例均有不同程度升高,以Th22细胞的水平升高为著,具有统计学差异(P<0.05)。且Th22细胞比例与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正相关,与胰岛素分泌指数(HOMA-β)呈负相关(P<0.01)。结论CD4^+T细胞亚群比例变化,尤其是Th22细胞的水平升高,表明在T2DM合并NAFLD患者中该异常可进一步加重。Th22细胞比例与HOMA-IR呈正相关,与HOMA-β呈负相关,可部分阐释免疫炎症机制在T2DM合并NAFLD发病中的作用,可能会成为诊断T2DM合并NAFLD的早期敏感指标之一。