炎症前因子在缺血性脑卒中早期病情进展中作用研究

目的:探讨炎症前因子与缺血性脑卒中早期病情进展的关系。方法:检测37例进展性脑梗死、95例非进展性脑梗死患者周围血清中白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)、hs-CRP水平。结果:进展性脑梗死组血清IL-6、IL-18、hs-CRP水平明显高于非进展性脑梗死组,其中IL-18进入Logistic回归模型。结论:炎症前因子IL-6、IL-18、hs-CRP的高表达在缺血性脑卒中的发病中具有重要作用,特别是IL-18是进展性脑梗死发生发展的重要因素。积极的采取措施抑制这种炎症反应可能是抑制缺血性脑卒中早期神经功能缺损恶化的重要手段。

麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的探讨芳香开窍药麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响。方法Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用高效液相色谱法检测脑组织谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸。结果芳香开窍药可降低缺血区脑组织中的Asp,提高GABA、Gly的含量。结论芳香开窍药可降低脑缺血时的兴奋性神经递质Asp和升高抑制性神经递质GABA、Gly,以对抗兴奋性氨基酸的毒性,从而保护脑缺血后继发神经元的损伤,这可能是其芳香开窍机理之一。

局灶性脑缺血损伤后TNF-α、TGF-β_1表达的实验研究

目的:研究大鼠缺血性脑损伤后缺血区脑组织肿瘤坏死因α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的变化,探讨葛根素对缺血性脑损伤的神经保护机制。方法:90只雄性SD大鼠,用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为手术+葛根素组,手术组,假手术组(各30只)。每组又分五个不同时间点(6h,12h,24h,48h,72h),手术+葛根素组大鼠应用葛根素干预治疗,假手术组和手术组大鼠给予同等容量生理盐水对照。用SABA免疫组化染色观察各时间点缺血脑组织TNF-α、TGF-β1因子的表达。结果:与假手术组相比,手术组和手术+葛根素组脑缺血再灌注后TNF-α、TGF-β1蛋白的表达均显著增加(P<0.01)。手术+葛根素组脑缺血再灌注后不同时间点TNF-α的表达均较手术组显著下降(P<0.01,P<0.05);TGF-β1的表达均较手术组显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论:葛根素可能通过抑制TNF-α因子的表达,诱导TGF-β1因子的表达,从而抑制过度的炎症反应来发挥神经保护作用。

缺氧缺血性脑病新生儿听力筛查

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)对听力的影响及可能导致听力障碍的高危因素。方法应用丹麦耳声发射仪(TEOAE)对HIE患儿和正常儿出生后42d内进行听力筛查。结果HIE患儿TEOAE通过率61·5%,与对照组差异有显著性(P<0·05),且多因素Logistic回归分析提示,早产、HIE临床分度、高胆红素血症是其高危因素。结论新生儿HIE能引起新生儿听力障碍,早产、HIE临床分度、高胆红素血症可能是影响HIE新生儿TEOAE不通过的高危因素。

高血压对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响

目的:通过观察高血压对大鼠脑缺血再灌注后神经功能和细胞凋亡的影响,探讨高血压加重缺血性脑损伤的机制。方法:将Wistar雄性大鼠随机分为肾性高血压缺血再灌注组(HIR),正常血压缺血再灌注组(IR)和假手术组(N),采用大脑中动脉线栓法造成大脑缺血再灌注模型,缺血时间为2h,再灌注24h。进行神经功能评分后取脑,采用免疫组织化学技术检测脑组织bcl-2、Bax的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:正常血压缺血再灌注组神经功能评分低于肾性高血压缺血再灌注组(P<0.05)。肾性高血压缺血再灌注组与正常血压缺血再灌注组比较,bcl-2表达明显减少(P<0.05),Bax表达明显增多(P<0.05),神经细胞凋亡明显增多(P<0.05)。结论:高血压通过增加Bax表达、抑制bcl-2表达,促进脑细胞凋亡,加重缺血再灌注后脑损伤。

小鼠大脑中动脉暂时性脑缺血模型的建立方法和时间窗探讨

目的:建立稳定的、可重复性的局灶性脑缺血再灌注动物模型。方法:采用插线法建立小鼠暂时性大脑中动脉栓塞模型。栓塞时间分别为30、60、90和120min。手术后24h分别对各组小鼠进行神经功能评分。完整端脑2mm冠状厚片行2%红四氮唑(TTC)染色,计算梗死体积。结果:栓塞120min组神经功能评分最高,且变化最小。TTC染色显示,栓塞120min可引起该侧大脑中动脉供血区域广泛的梗死灶,而且梗死灶大小适宜,稳定性好。结论:插线法是一种简单、可靠的制作小鼠暂时性大脑中动脉栓塞模型的方法,栓塞120min再灌注22h可引起稳定的梗死灶,适合于脑缺再灌注损伤的对照研究。

急性心肌缺血再灌注大鼠早期心脏舒张功能降低及心肌纤维化的研究

目的:探讨急性心肌缺血再灌注大鼠心功能的改变及心肌纤维化对其影响。方法:建立大鼠急性心肌缺血再灌注模型,利用心脏超声和血流动力学检测其心功能状态。用水解法检测心肌羟脯氨酸含量。分别用免疫印迹和酶联免疫吸附剂测定法检测心肌和血清中TNF-α的表达。结果:急性心肌缺血再灌注大鼠早期出现心脏舒张功能降低,在灌注第3天时尤为显著。心肌纤维化发生在缺血再灌注区,且该部位胶原容积分数显著增高,与心肌TNF-α表达规律相同。同时心肌羟脯氨酸含量和血清TNF-α在急性缺血再灌注时也显著增加。结论:急性心肌缺血再灌注大鼠心肌纤维化降低早期心脏舒张功能,而炎症因子TNF-α的异常增高是急性心肌缺血再灌注心肌纤维化的可能因素之一。

缺血预处理与心肌缺血/再灌注细胞凋亡及NF-κB表达的关系

目的:研究缺血预处理对心肌缺血/再灌注细胞凋亡及NF-κB表达的影响。方法:健康SD大鼠30只随机分为3组:对照组,缺血/再灌注组,缺血预处理组,每组10只。利用心肌缺血/再灌注模型,采用原位末端标记(TUNEL)法测定凋亡细胞,采用W estern-b lot法测定NF-κB的表达。结果:缺血再灌注组心肌细胞的凋亡百分数和NF-κB的表达均显著增加,与对照组相比有显著差异;而缺血预处理组与缺血/再灌注组相比,其凋亡心肌细胞百分数和NF-κB的表达均显著减少。结论:缺血预处理抑制心肌细胞的凋亡的作用机制与其抑制NF-κB的表达有关。

补阳还五汤及拆方对脑缺血再灌注模型血清、脑组织的SOD、MDA及NO含量影响

目的 揭示补阳还五汤及拆方抗脑缺血再灌注损伤的作用机理,并研究方剂配伍的意义。方法 通过四血管结扎法制作SD大鼠脑缺血再灌注模型,观察总方组与拆方黄芪组、活血组药物对模型血清、脑组织SOD、MDA及NO含量的影响。结果 模型组大鼠血清、脑组织MDA及NO含量明显增高,SOD含量明显降低;总方组与拆方黄芪组、活血组能降低MDA及NO含量,升高SOD含量,总方组作用最强。结论 补阳还五汤及拆方通过抗自由基,达到抗脑缺血再灌注损伤作用。总方组的疗效明显优于拆方组,符合方剂学“整体取性原理”。

Lactuside B对缺血性脑损伤的影响

目的:初步探讨Lactuside B的抗脑缺血作用。方法:采用小鼠断头法,测定小鼠喘气时间;采用大鼠不完全性脑缺血模型,测定大鼠脑组织的含水量、MDA、SOD和NO值。结果:Lactuside B各剂量组均能明显延长小鼠断头张口喘气时间;Lactuside B各剂量组能显著降低脑缺血后脑组织的含水量,其中高剂量组强于阳性药物对照组;Lactuside B各剂量组能显著降低脑缺血后脑组织MDA的含量,升高SOD和NO的含量。该药高剂量组对NO的升高作用优于尼莫地平。结论:Lactuside B具有较好的抗脑缺血作用。

双嘧达莫对兔心肌缺血预处理心电生理效应的影响

目的：观察双嘧达莫对兔心肌缺血预处理心电生理效应的影响。方法：采用新西兰兔建立心肌缺血再灌注模型，随机分为４组，其中１组为对照组，其余３组分别予以缺血预处理、双嘧达莫０２５ｍｇ／ｋｇ静脉注射和两者联合处理。应用心脏程序电刺激技术测定心室电生理参数及心室颤动阈值。结果：缺血预处理明显降低缺血再灌注损伤后心室有效不应期离散度、心室恢复时间离散度及双极心室电图ＱＴ间期离散度（分别为１５０ｍｓｖｓ２３６ｍｓ，Ｐ＜００１，１０６ｍｓｖｓ２２１ｍｓ，Ｐ＜００１，１３１ｍｓｖｓ２２９ｍｓ，Ｐ＜００１），提高心室颤动阈值（３０８ｍＡｖｓ２０６ｍＡ，Ｐ＜００１），减少室颤发生；联合应用双嘧达莫使有效不应期的离散度进一步下降（８８ｍｓｖｓ１５０ｍｓ，Ｐ＜００５），心室颤动阈值进一步提高（３６４ｍＡｖｓ３０８ｍＡ，Ｐ＜００５）。结论：缺血预处理增加心肌缺血再灌注损伤后心室电稳定性。

心肌缺血时迷走神经对房室传导调节功能的研究

研究右冠状动脉阻塞时迷走神经对房室传导调节功能的影响。在离断自主神经的猫上,剌激双侧迷走神经,在结扎右冠状动脉造成缺血前后,通过模板匹配方法检测心腔的心房波,His束波和心室波,并自动测量AA,AH,HV间期。结果:在正常及缺血状态下,剌激迷走神经均可使AA、AH间期增大,HV间期不变,在起搏控制心率的情况下,这种作用更加明显。在正常供血时,剌激迷走神经使AH间期在未起搏与起搏时分别增加14%±5%和22%±7%;而在缺血时,剌激迷走神经使AH间期在未起搏与起搏时增加18%±7%和38%±14%,后者比前者提高了增加幅度的28%和73%(P<0.05)。结论:在急性右冠状动脉阻塞时,迷走神经对心脏房室传导调节功能增强。

葛根素对局灶脑缺血大鼠脑组织内LPO含量影响的研究

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血不同脑组织中脂质过氧化物(LPO)的表达及葛根素的保护作用。方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉持续局灶性脑缺血模型,在缺血后2h、12h、24h给予葛根素进行干预,运用TTC染色观察脑梗死体积的变化,荧光探针乙酰乙酸盐-2,7-二氯氢化荧光素(2,7-dichlorofluorescindiacetate,D-399)标记,激光共聚焦扫描显微镜观察不同组别活体脑片细胞内LPO含量的变化。结果:2h和12h干预组脑梗死体积明显小于对照组,24h干预组与对照组比较,梗死体积无统计学差异;缺血2h组梗死侧皮质、纹状体区LPO含量增加,随缺血时间的延长,荧光强度逐渐增强,24h组最强,与假手术组比较差异显著;干预组与对照组比较皮质和纹状体区荧光强度均下降,有统计学意义。结论:脑缺血后早期即出现脂质过氧化损伤,随时间延长损伤逐渐加重,应用葛根素可通过减轻脂质过氧化损伤起到脑保护作用。

半胱氨酰白三烯受体拮抗剂对全脑缺血再灌注慢性损伤的作用

目的:研究半胱氨酰白三烯受体(Cys LTR)拮抗剂普鲁司特和HAMI3379对全脑缺血再灌注慢性损伤的保护作用及相关作用机制。方法:40只体质量为45~65 g的清洁级健康雄性长爪沙鼠分为手术对照组、模型对照组、普鲁司特组和HAMI 3379组,每组10只。采用结扎双侧颈总动脉10 min再灌注法制作全脑缺血再灌注损伤模型。普鲁司特组和HAMI 3379组于术前30 min和术后30 min、4 h、12 h分别腹腔注射普鲁司特和HAMI 3379,第二天起每天分别给药一次,连续给药5 d。于全脑缺血再灌注24 h和14 d时对各组的神经症状和功能进行评分;尼氏染色法观察再灌注14 d时各组大脑皮层神经元的形态和数量;免疫组织化学染色检测再灌注14 d时各组大脑皮层小胶质细胞和星形胶质细胞激活情况。结果:30只长爪沙鼠中,21只造模成功,其中模型对照组7只,普鲁司特组6只,HAMI 3378组8只。与模型对照组比较,普鲁司特组和HAMI 3379组术后24 h神经症状评分降低(均P<0.01),术后14 d普鲁司特组和HAMI 3379组的神经症状评分较模型对照组亦有改善的趋势,但差异均无统计学意义(均P>0.05);普鲁司特组和HAMI 3379组在这两个时间点的神经功能评分均高于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。普鲁司特组和HAMI 3379组大脑皮层神经元损伤较模型对照组减轻,存活神经元密度与模型对照组差异有统计学意义(均P<0.01)。普鲁司特组和HAMI 3379组大脑皮层小胶质细胞和星形胶质细胞增生情况较模型对照组改善(均P<0.01)。结论:普鲁司特和HAMI 3379对长爪沙鼠全脑缺血慢性损伤模型具有较持久的神经保护作用。

甘木通提取物对家兔心肌缺血的保护作用

目的:探讨甘木通提取物对家兔急性心肌缺血的影响。方法:结扎家兔冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血模型,40只健康家兔平均分为假手术组、模型组、丹参对照组与甘木通不同剂量组。甘木通组分别给予浓度为100%的甘木通提取液灌胃(剂量分别为1ml/kg和2ml/kg),连续5d,丹参对照组于缺血前从耳缘静脉注射给药(0.2mg/kg)。记录心肌缺血前后标准肢体导联心电图,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)活性与脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量。结果:与模型组相比,甘木通提取物可明显对抗结扎家兔冠状动脉左前降支引起的急性心肌缺血时心电图S-T段的异常偏移及T波抬高,减慢心率;显著降低血清LDH、CK水平及MDA含量和升高SOD水平(P<0.05或P<0.01)。结论:甘木通提取物对家兔急性心肌缺血有明显的保护作用。

中药益智胶囊对大鼠全脑缺血后海马CA1区神经元迟发性死亡的影响

目的 观察中药益智胶囊对大鼠全脑缺血后海马CA1区神经元迟发性死亡及学习功能的影响。方法 以四血管闭塞(4-VO)法制成大鼠急性全脑缺血再灌注模型。采用免疫组织化学方法计数脑缺血再灌注脑损伤后1、2、4、8及40d后,大鼠海马CA1区正常神经元数目;用Morris水迷宫实验观察脑缺血再灌注脑损伤后40d时各组大鼠的学习记忆功能。结果 从缺血再灌注后第2天起,益智胶囊(100mg/kg·b.w.)组大鼠海马CA1区正常神经元数量显著高多于缺血对照组大鼠(P<0.01)。全脑缺血再灌注脑损伤后40d时,益智胶囊(100mg/kg·b.w.)组大鼠记忆功能明显好于缺血对照组大鼠(P<0.01)。结论 益智胶囊对全脑缺血后大鼠海马CA1区神经元具有保护作用,并可改善大鼠的记忆功能障碍。

异氟醚对未成熟兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1、核因子-κB表达的影响

目的:探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1,NF-κB的影响及其对心肌缺血再灌注保护的作用机制。方法:取32只日本大耳白幼兔随机分为4组,假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组:结扎30 min,再灌注2h;异氟醚预处理组:缺血前吸入1.1%异氟醚30min,洗脱15min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组:异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5m g/kg后处理同异氟醚预处理组。观察心肌细胞凋亡和细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达情况,电镜观察超微结构。结果:异氟醚预处理组细胞凋亡较缺血再灌注组和格列苯脲组明显减少(P<0.05),异氟醚预处理组细胞间黏附分子-1,NF-κB的表达明显较缺血再灌注组和格列苯脲组低(P<0.05),电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组。结论:异氟醚预处理对幼兔缺血再灌注心肌损伤有明显的保护作用,其机制通过下调细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达并与促K+ATP通道开放有关。

胰岛素对大鼠局灶缺血脑组织c-fos基因表达的影响

目的：观察胰岛素对局灶缺血脑组织ｃｆｏｓ基因表达的影响。方法：３０只肾血管性高血压大鼠（ＲＨＲ）随机分４组，在大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）后即予胰岛素（２．１ＩＵ／ｋｇ，Ａ组）、葡萄糖（２ｇ／ｋｇ）和低剂量胰岛素（２．１ＩＵ／ｋｇ，Ｂ组）、葡萄糖（４ｇ／ｋｇ）和高剂量胰岛素（４．５ＩＵ／ｋｇ，Ｃ组）、生理盐水（Ｄ组），采用原位杂交技术检测各组ＭＣＡＯ后３ｈ脑组织ｃｆｏｓ基因的表达。结果：低剂量胰岛素组（Ａ、Ｂ组）ｃｆｏｓｍＲＮＡ未出现明显变化（Ｐ＞００５），而Ｃ组ｃｆｏｓｍＲＮＡ则有统计学意义的增加（Ｐ＜００１）。结论：胰岛素促进缺血脑组织ｃｆｏｓ基因表达，可能是其神经保护作用机制之一。

老年男性心肌缺血患者心率变异分析(附67例报告)

采用正常博动ＲＲ间期的标准差（ＳＤ）及心率变异指数（ＨＲＶｉｎｄｅｘ）作为指标，分析６７例老年男性心肌缺血患者的心率变异，并与正常老年男性组及正常青壮年男性组进行了对比，发现前组的ＲＲ间期ＳＤ、ＨＲＶｉｎｄｅｘ均明显低于后两组，其结果有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）。提示心肌缺血可破坏交感与迷走神经的均衡性，造成心率变异降低。

不同低温对大鼠永久性大脑中动脉闭塞后NF-кB、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探讨不同低温对大鼠永久性大脑中动脉闭塞后NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响。方法:84只雄性SD大鼠随机分为三组:常温组(37℃),轻度低温组(34℃),中度低温组(32℃),每组分缺血2,4,6,12h共四个亚组。采用栓线法制作永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,各组大鼠分别于缺血2,4,6,12h后置于常温操作台和冰毯机上,分别保持肛温为37±0.5℃,34±0.5℃和32±0.5℃12h。在各自规定时间点处死大鼠,作免疫组织化学染色。结果:与常温组相比,除轻度低温组缺血4h外,其余各时间点两低温组的NF-κB蛋白水平均显著低于常温组(P<0.01)。除轻度低温组缺血2h、4h、12h外,其余各时间点两低温组的Bcl-2蛋白水平较常温组有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。除中度低温组缺血4h,轻度低温组缺血4h、12h外,其余各时间点两低温组的Bax蛋白水平较常温组有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论:低温治疗显著抑制NF-κB的蛋白表达,使NF-κB蛋白表达高峰前移;显著降低了Bax蛋白水平。这些改变可增强缺血后神经元对凋亡的耐受。