BRD4及其抑制剂在骨相关疾病中的研究进展

溴结构域蛋白4(bromodomain-containing protein 4,BRD4)是溴结构域和超末端结构域家族的成员,在调节基因转录、细胞增殖、凋亡和炎症方面发挥着重要作用。BRD4与各种疾病密切相关,包括癌症、神经系统疾病和病毒感染。虽然BRD4在癌症研究领域引起了广泛的关注,但是关于它在骨相关疾病中的影响,包括骨关节炎、椎间盘退变、骨质疏松和骨肿瘤等方面的研究还很有限。最近的研究表明BRD4参与骨相关疾病的发病机制,突出其重要作用。因此,笔者综述了近年来BRD4及其抑制剂在骨相关疾病中的研究进展。通过阐述BRD4的结构和功能以及BRD4及其抑制剂在骨相关疾病中的作用,提示BRD4可能是治疗骨相关疾病的潜在靶点。

BRD4在宫颈癌中的表达及其抑制剂JQ1对细胞增殖、迁移的影响

目的探究溴结构域蛋白4(Bromodomain-containing protein 4,BRD4)在宫颈癌中的表达及其抑制剂JQ1对细胞增殖和迁移的影响。方法收集51例宫颈癌患者及51例子宫良性病变患者的宫颈组织标本,应用免疫组织化学染色方法检测正常宫颈组织及宫颈癌组织BRD4的表达情况,并应用统计学方法分析BRD4表达与宫颈癌患者的FIGO分期、浸润间质深度、分化程度、盆腔淋巴结转移、淋巴脉管间隙浸润是否具有相关性;体外培养宫颈癌Hela和SiHa细胞,CCK-8实验探究JQ1对癌细胞增殖能力的影响,划痕实验探究JQ1对癌细胞迁移能力的影响。结果与正常宫颈组织相比,BRD4在宫颈癌组织中的表达明显增高(P<0.001),但与FIGO分期、盆腔淋巴结转移、浸润间质深度、淋巴脉管间隙浸润、分化程度均无相关性(P>0.05);JQ1对Hela和SiHa细胞增殖具有抑制作用(P<0.05);JQ1对Hela和SiHa细胞迁移也具有抑制作用(P<0.05)。结论BRD4在宫颈癌组织中高表达,其抑制剂JQ1能抑制细胞增殖和迁移能力。

喹啉酮类BRD4抑制剂的3D-QSAR研究

使用比较分子力场分析法(CoMFA)和比较分子相似性指数法(CoMSIA)对33个已报道的喹啉酮类BRD4抑制剂进行3D-QSAR模型建立,研究了其化学结构和生物活性间的关系,并用计算机辅助药物设计(computer-aided drug design,CADD)设计出7个喹啉酮类抑制剂。结果表明,建立的CoMFA(q^(2)=0.926,r^(2)=0.997,r^(2)_(pred)=0.744)和CoMSIA(q^(2)=0.939,r^(2)=0.991,r^(2)_(pred)=0.786)模型具有较好的预测能力,基于这些模型设计的7个新喹啉酮类BRD4抑制剂具有高活性,并对其进行ADMET性质评价和类药性分析。以上研究结果有助于改造和开发更加有效的喹啉酮类BRD4抑制剂。

甲状腺乳头状癌组织中VDR、BRD4、HOXB9的表达及其临床意义

目的 探讨甲状腺乳头状癌组织中VDR、BRD4、HOXB9的表达及其临床意义。方法 收集甲状腺乳头状癌患者150例,留取肿瘤组织以及癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测组织中VDR、BRD4、HOXB9的表达,并分析VDR、BRD4、HOXB9表达与甲状腺乳头状癌临床病理因素的关系,Pearson相关性分析VDR、BRD4、HOXB9蛋白的相关性。结果 甲状腺乳头状癌组织中VDR、BRD4阳性表达率(65.33%、65.33%)均显著高于癌旁组织(χ^(2)=89.955,P=0.000;χ^(2)=57.252,P=0.000),甲状腺乳头状癌组织中HOXB9阳性表达率(34.67%)显著低于癌旁组织(χ^(2)=77.912,P=0.000)。VDR阳性表达率在瘤体大小>1 cm、瘤体内钙化以及TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期患者中明显更高(P<0.05);BRD4阳性表达率在瘤体大小>1 cm、淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期患者中明显更高(P<0.05);HOXB9阳性表达率在瘤体大小>1 cm、淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期患者中明显更低(P<0.05)。HOXB9蛋白表达分别与VDR及BRD4蛋白表达呈负相关(γ=-0.291,γ=-0.412,P均<0.05),VDR蛋白表达与BRD4蛋白表达呈正相关(γ=0.406,P<0.05)。结论 VDR、BRD4在甲状腺乳头状癌中均呈现高表达,HOXB9在甲状腺乳头状癌中均呈现低表达,VDR、BRD4、HOXB9表达均与甲状腺乳头状癌发生和发展有关,对临床诊断及治疗均具有指导意义。

基于BRD4/NF-κB/NLRP3通路介导的巨噬细胞焦亡探讨三石汤抑制痛风性关节炎的分子机制研究

目的:观察三石汤对BRD4/NF-κB/NLRP3通路介导的巨噬细胞焦亡的影响,从而阐明三石汤抑制痛风性关节炎的分子机制。方法:以佛波酯诱导THP-1人单核细胞株分化巨噬细胞,并分为空白组、模型组、三石汤低剂量、中剂量、高剂量和BRD4抑制剂组。除空白组外,余下各组以尿酸单钠结晶诱导构建痛风性关节炎细胞模型。分别采用CCK8检测巨噬细胞的活性,流式细胞术检测巨噬细胞焦亡水平,酶联免疫吸附法检测LDH的活性和IL-1β及IL-18的含量,Western blot检测BRD4/NF-κB/NLRP3通路中相关蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组巨噬细胞活性下降,焦亡水平、LDH活性、IL-1β与IL-18含量、BRD4、p-NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1 p20和IL-1β蛋白的表达均显著的上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,三石汤组巨噬细胞活性上调,焦亡水平、LDH活性、IL-1β与IL-18含量、BRD4、p-NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1 p20和IL-1β蛋白表达均显著的下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:三石汤通过抑制BRD4/NF-κB/NLRP3通路激活抑制巨噬细胞焦亡,从而改善痛风性关节炎的炎症水平。

CircCSNK1G1调节miR-381-3p/BRD4轴对喉癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨CircCSNK1G1调节miR-381-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对喉癌(laryngeal cancer,LC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测60例LC患者癌组织、癌旁组织及喉上皮细胞NP69及人LC细胞Hep-2、Tu212、M4E中CircCSNK1G1、miR-381-3p、BRD4蛋白表达;将人喉癌Hep-2细胞分为:control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircCSNK1G1组(转染si-CircCSNK1G1)、si-CircCSNK1G1+inhibitor-NC组(si-CircCSNK1G1和inhibitor-NC共转染)、si-CircCSNK1G1+miR-381-3p inhibitor组(si-CircCSNK1G1和miR-381-3p inhibitor共转染);RT-qPCR检测Hep-2细胞中CircCSNK1G1、miR-381-3p的表达水平;MTT法检测Hep-2细胞增殖;划痕实验检测Hep-2细胞迁移;Transwell小室检测Hep-2细胞侵袭;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡;western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及BRD4蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证CircCSNK1G1和miR-381-3p、miR-381-3p和BRD4的关系。结果:在LC组织和LC细胞中,CircCSNK1G1、BRD4蛋白高表达,miR-381-3p低表达,且在Hep-2细胞中CircCSNK1G1、BRD4蛋白水平最高,miR-381-3p表达最低(P<0.05),因此,选择Hep-2细胞进行转染;与control组、si-NC组比较,si-CircCSNK1G1组Hep-2细胞中CircCSNK1G1表达、OD490值、划痕愈合率、侵袭数、PCNA、MMP-2、Bcl-2、BRD4蛋白表达显著降低,miR-381-3p、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与si-CircCSNK1G1组、si-CircCSNK1G1+inhibitor-NC组比较,si-CircCSNK1G1+miR-381-3p inhibitor组Hep-2细胞中OD490值、划痕愈合率、侵袭数、PCNA、MMP-2、Bcl-2、BRD4蛋白表达显著升高,miR-381-3p、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);CircCSNK1G1靶向调控miR-381-3p表达,miR-381-3p靶向负调控BRD4表达。结论:敲低CircCSNK1G1可能通过靶向miR-381-3p来下调BRD4表达,进而抑制Hep-2细胞增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。

BRD4在多种肿瘤中表达情况的研究进展

溴蛋白结构域4(BRD4)是BET(Bromodomain and extraterminal domain)家族成员之一,可以通过BRD结构域结合乙酰化修饰的组蛋白以及与P-TEFb蛋白结合发生磷酸化来增加RNA聚合酶Ⅱ的转录活性,以此激活下游基因的表达。有研究表明其在多种肿瘤中呈现过表达状态,本篇综述主要讨论BRD4在多种肿瘤中的表达情况进展。

NDRG2通过BRD4/c-Myc通路抑制黏液表皮样癌细胞增殖及迁移侵袭的机制研究

目的:研究NDRG2基因抑制人黏液表皮样癌细胞增殖及迁移侵袭的调控机制。方法:建立MC3细胞过表达NDRG2和MEC1细胞敲降NDRG2模型,用Westernblot和Real-timePCR检测c-Myc蛋白和mRNA的表达;荧光素酶报告基因实验检测c-Myc启动子活性;染色质免疫共沉淀(ChIP)检测BRD4与c-Myc启动子结合活性;CCK-8试剂盒检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移侵袭。结果:过表达NDRG2的MC3细胞中c-MycmRNA和蛋白表达减少、c-Myc启动子活性降低、BRD4与c-Myc启动子结合活性降低;敲降NDRG2的MEC1细胞中c-MycmRNA和蛋白表达增加、c-Myc启动子活性升高、BRD4与c-Myc启动子结合活性升高;过表达NDRG2的MC3细胞增殖和转移能力降低,而同时过表达c-Myc后细胞活力恢复,敲降NDRG2的MEC1细胞增殖和转移能力增加,而同时敲降c-Myc表达后细胞活力被抑制。结论:NDRG2通过抑制BRD4与c-Myc结合抑制c-Myc表达,抑制黏液表皮样癌细胞的增殖和迁移侵袭能力。

靶向BRD4的ATTECs设计、合成与降解活性研究

目的基于自噬小体绑定化合物(ATTEC)策略,设计并合成靶向BRD4的自噬降解剂,验证其降解活性。方法以化合物伊斯平斯(ispinesib)为LC3配体,通过不同长度的linker与化合物JQ1相连,产物结构经1H NMR、13C NMR与ESI-MS确证,并使用蛋白印迹法(Western Blot)技术测试其在不同细胞系中诱导BRD4的降解活性。结果获得5个首次报道的BRD4-ATTEC分子,化合物4在不同细胞系中显示出一定的BRD4降解活性。结论本研究发现了新型BRD4自噬降解剂,拓展了靶向自噬降解的适用范围。

Mechanism of Sanshi decoction inhibits macrophage pyroptosis by inhibiting BRD4/NF-κB/NLRP3 pathway in the treatment of gouty arthritis

Objective:To observe the effect of Sanshi decoction on BRD4/NF-κB/NLRP3 pathwaymediated macrophage pyroptosis,so as to elucidate the molecular mechanism of Sanshi decoction in the treatment of gouty arthritis.Methods:THP-1 was induced into macrophages with foboside and the divided into the control group,model group,low-dose,medium-dose,high-dose group of Sanshi decoction,and BRD4 inhibitor group.Except for the control group,the remaining groups were induced with monosodium urate crystals to construct a gouty arthritis cell model.The activity of macrophages was detected by CCK8,the level of macrophage pyroptosis was detected by flow cytometry,the activity of LDH,the content of IL-1β and IL-18 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay,and the expression of related proteins in the BRD4/NF-κB/NLRP3 pathway was detected by Western blot.Results:Compared with the control group,macrophage activity was decreased in the model group,and the level of pyroptosis,LDH activity,contents of IL-1β and IL-18,expression levels of BRD4,p-NF-kB p65,NLRP3,Caspase-1 p20,and IL-1β protein were significantly up-regulated,the differences were statistically significant(P<0.05 and P<0.01).Compared with the model group,macrophage activity was up-regulated in the Sanshi Decoction,and the level of pyroptosis,LDH activity,IL-1β and IL-18 contents,expression levels of BRD4,p-NF-kB p65,NLRP3,Caspase-1 p20,and IL-1β protein were significantly decreased with statistically significant differences(P<0.05 and P<0.01).Conclusion:Sanshi decoction inhibits macrophage pyroptosis by inhibiting BRD4/NF-κB/NLRP3 pathway activation,thus improving the inflammation level of gouty arthritis.

新型小分子抑制剂15h通过靶向BRD4诱导弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞凋亡

目的研究一种靶向溴结构域蛋白4(bromodomain-containing protein 4,BRD4)的新型小分子抑制剂15h(简称15h)对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)细胞凋亡的影响并探索其作用机制。方法首先运用Alphascreen实验探索15h对BET主要家族成员的靶向抑制作用、MTT法检测15h对几种血液系统恶性肿瘤细胞株细胞活力的影响。其次采用流式细胞术检测15h对DL BCL细胞凋亡的影响。最后利用Western blot和qRT-PCR分析15h对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和转录因子C-Myc的调控作用。结果15h主要靶向抑制BET蛋白家族成员BRD4,对OCI-LY10细胞活力的抑制作用呈现时间和浓度依赖性。与对照组相比,细胞凋亡率从(4.612±0.13)%逐渐增加到(50.7±4.35)%。Western blot和qRT-PCR检测结果表明经15h处理后的OCI-LY10细胞,其转录因子C-Myc表达被抑制,促凋亡蛋白Bax上调、抗凋亡蛋白Bcl-2下调。结论新型小分子抑制剂15h可能通过靶向抑制BRD4与转录因子C-Myc的结合,抑制C-Myc基因转录,进而上调Bax、下调Bcl-2,最终诱导DLBCL细胞凋亡。

BRD4沉默联合吉西他滨为治疗三阴性乳腺癌提供新的治疗方案

背景与目的:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤,其发病率和死亡率逐渐上升,特别是三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)缺乏有效的治疗靶点,死亡率更高。在以往的研究中,BRD4在多种肿瘤的进展中起到重要的作用。该研究旨在研究BRD4在耐吉西他滨的TNBC中所起到的作用,联合BRD4沉默和吉西他滨治疗TNBC的效果。方法:分别应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-453在吉西他滨治疗中表达变化。BRD4被sh BRD4沉默后,通过体内和体外实验验证BRD4在耐药的TNBC中所起到的作用。结果:在TNBC中,BRD4在吉西他滨诱导后表达量明显的升高(P<0.05)。沉默BRD4基因后,吉西他滨的半数抑制率明显降低,BRD4沉默联合吉西他滨使细胞的凋亡率明显升高(P<0.05);在体外实验中,BRD4沉默联合吉西他滨可以使肿瘤的生长速度明显降低(P<0.05)。结论:BRD4在耐药的TNBC中起到重要的作用,BRD4沉默联合吉西他滨为治疗TNBC提供新的治疗方法。

Brd4与HPV-16病毒E2在宫颈脱落细胞中的表达及意义

目的:探讨宿主蛋白Brd4与HPV-16病毒E2蛋白在宫颈脱落细胞中的表达与临床意义。方法:收集150例HPV-16阳性的宫颈脱落细胞标本,细胞学分组:正常组30例、ASCUS组46例、LSIL组23例、HSIL组31例、宫颈癌组20例。其中细胞学诊断为ASCUS及以上级别的病例120例,经组织病理学分组:宫颈炎组21例、CINⅠ组25例、CINⅡ/Ⅲ组45例、宫颈浸润癌组29例。Western blot检测标本中Brd4和E2蛋白的表达,比较两者在各组中的表达差异。结果:细胞学分级ASCUS及以上各组与正常组比较,Brd4和E2蛋白的阳性表达率均降低;在HSIL组和宫颈癌组的阳性表达率低于ASCUS组和LSIL组(P<0.05)。Brd4和E2蛋白在宫颈炎组和CINⅠ组的表达差异无显著性(P>0.05);从CIN到宫颈浸润癌,其表达呈下降趋势(P<0.05)。Brd4与E2蛋白的表达缺失用于筛查ASCUS中潜在高级别病变的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为0.93、0.94、0.88、0.98与0.80、0.95、0.86、0.93。结论:Brd4-E2复合体的解体,E2的表达缺失,在HPV诱导宫颈细胞癌变的过程中起重要作用。检测Brd4与HPV-16E2蛋白的表达对ASCUS的分流、宫颈癌的筛查有一定的参考价值。

miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌上皮间质转化的影响

目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达水平;构建miRNA-NC和miRNA-200a稳定细胞系,采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析miRNA-200a和BRD4的靶向关系;pcDNA空载和pcDNA-BRD4过表达载体分别转染miRNA-NC和miRNA-200a细胞,采用Western blot检测miRNA-200a靶向BRD4对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响;采用Transwell分析miRNA-200a靶向BRD4对NSCLC细胞侵袭能力的影响。结果:miRNA-200a在NSCLC组织中的相对表达水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析表明BRD4可能是miRNA-200a的一个作用靶点;双荧光素酶报告基因结果显示,在过表达BRD4-WT的细胞中,miRNA-200a组细胞的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-NC组细胞(P<0.05);而在过表达BRD4-MUT的细胞中,miRNA-200a组和miRNA-NC组细胞的相对荧光素酶活性无显著性差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞BRD4和Vimentin的蛋白表达水平显著下降,E-cadherin的蛋白表达显著增加(P<0.05);与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组细胞中Vimentin的蛋白表达水平明显回升,E-cadherin的蛋白表达显著回落,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞的侵袭个数显著下降[(83.66±9.25)个比(32.73±6.02)个,P<0.05];与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组个细胞的侵袭个数明显回升,差异有统计学意义[(35.06±5.84)个比(62.02±7.28)个,P<0.05]。结论:miRNA-200a在NSCLC组织中高表达,过表达miRNA-200a可靶向下调BRD4的表达,从而抑制NSCLC中BRD4诱导的EMT和侵袭迁移。

基于药效团的BRD4靶向小分子抑制剂虚拟筛选

BRD4靶点和多种肿瘤密切相关,是具有良好成药性的热门靶点。本文选取活性较好且结构差异较大的BRD4小分子抑制剂作为训练集分子,基于配体小分子共同特征(HipHop)方法使用Discovery Studio 3.0分子模拟软件构建了药效团。药效团通过测试集验证、ROC曲线验证(SE(sensitivity)=0.93765、SP(specificity)=0.89500、(AUC)=0.956),结果表明构建得到的药效团具有较强的可靠性和较高的可信度。药效团模型含有1个芳环中心、1个疏水基团、2个氢键受体四个药效特征元素。此药效团被用于ZINC数据库进行虚拟筛选,共筛选了861203个分子,命中率为0.782%。再对筛选得到的分子经过分子对接、ADMET成药性预测、构象分析并讨论分子-蛋白相互作用模式,最终得到了21个有潜力的BRD4小分子抑制剂。

BRD4抑制剂JQ1联合醋酸甲羟孕酮对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨BRD4抑制剂JQ1与醋酸甲羟孕酮(MPA)单独或联合作用对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:JQ1与MPA单独或联合作用于孕激素敏感的子宫内膜癌Ishikawa细胞和孕激素不敏感的子宫内膜癌HEC-1A细胞。MTT法和流式细胞仪检测药物对子宫内膜癌细胞的增殖抑制作用和凋亡作用。Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase 3、PARP、cleaved PARP及mTOR/Akt通路等相关蛋白的表达。利用siRNA沉默BRD4后,MTT法检测BRD4 siRNA与MPA联用对子宫内膜癌细胞的生长抑制作用。结果:在孕激素敏感的Ishikawa细胞中,与对照组比较,JQ1组、MPA组、JQ1+MPA组的细胞增殖率显著降低(P均<0.05),其中JQ1+MPA组的细胞增殖率最低,析因分析提示JQ1与MPA有交互作用(P<0.05);JQ1组、MPA组、JQ1+MPA组的细胞凋亡率显著增加(P均<0.05),凋亡相关蛋白变化明显,其中JQ1+MPA组的细胞凋亡率增加最为显著(P<0.05),凋亡相关蛋白变化最大。利用siRNA沉默BRD4后观察联合MPA的作用显示,与对照组比较,BRD4 siRNA组、MPA组、BRD4 siRNA+MPA组的细胞增殖率显著降低(P均<0.05),其中BRD4 siRNA+MPA组的细胞增殖率最低。结论:BRD4抑制剂JQ1联合MPA对孕激素敏感的子宫内膜癌细胞有较好的增殖抑制及凋亡作用,其可能机制与抑制mTOR/AKT通路有关。

BRD4抑制剂JQ1对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和侵袭作用的研究

目的:探讨溴结构域蛋白4(BRD4)抑制剂JQ1对宫颈癌HeLa细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响,以及JQ1的抗肿瘤作用机制。方法:采用0、0.01、0.1、1μmol/L的JQ1处理宫颈癌HeLa细胞,分别于处理后24、48、72、120h采用CCK8检测细胞增殖情况,同时采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测0.5μmol/L和1μmol/L JQ1处理48h后的HeLa细胞凋亡情况,采用划痕试验检测细胞侵袭能力,实时定量PCR检测不同浓度JQ1处理48h后c-Myc及Bcl-2的表达情况。结果:与对照组相比,接触CCK-8试剂48h后,接受JQ1处理的HeLa细胞增殖受到明显抑制,具有剂量—时间依赖性(P<0.05)。对照组HeLa细胞凋亡率为20.38%,而JQ1(0.5μmol/L)组和JQ1(1μmol/L)组凋亡率分别为26.90%和40.33%,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕试验提示JQ1对HeLa细胞的侵袭能力产生显著的抑制作用。经JQ1处理后的HeLa细胞c-Myc及Bcl-2表达量下降,并且随着JQ1浓度的增加mRNA表达量逐渐下降。结论:JQ1可以显著抑制HeLa细胞的增殖、侵袭能力,诱导HeLa细胞凋亡并抑制c-Myc及Bcl-2的表达,是一种对宫颈癌具有潜在抗肿瘤能力的药物。

HPV-18病毒E2、E6与Brd4在宫颈癌及癌前病变的表达与意义

目的探讨HPV-18病毒E2、E6与宿主蛋白Brd4在CIN和宫颈癌中的表达与临床意义。方法 RT-PCR检测HPV-18阳性的宫颈炎15例、CINⅠ19例、CINⅡ17例、CINⅢ20例、宫颈浸润癌24例的标本中E2和E6mRNA的表达,Western blot检测E2蛋白和Brd4的表达,比较上述指标在各组中的表达差异。结果 HPV-18E2和E6 mRNA在宫颈炎和CINⅠ的表达差异无显著性(P>0.05);从CIN到宫颈浸润癌,E2 mRNA的表达呈下降趋势;E6 mRNA的表达呈增加趋势(P<0.05);E6 mRNA和E2 mRNA的表达呈负相关(P<0.01)。E2蛋白和Brd4在宫颈炎和CINⅠ的表达差异无显著性(P>0.05);从CIN到宫颈浸润癌,其表达呈下降趋势(P<0.05)。结论 Brd4-E2复合体的解体,E2的表达缺失和E6的过度表达,可能是HPV-18诱导宫颈细胞恶性转型的关键环节,在宫颈癌的演变中起重要作用。检测HPV-18E2、E6与Brd4的表达对早期预测CIN的预后有一定的参考价值。

BRD4抑制剂JQ1对膀胱癌细胞增殖与凋亡的作用及其机制研究

目的探讨BRD4抑制剂JQ1对膀胱癌细胞株的作用及其作用机制。方法以浓度分别为0.0032、0.016、0.08、0.4、2、10μmol/L JQ1处理膀胱癌细胞株,在24、48、72h用CCK8法检测JQ1对膀胱癌细胞增殖的影响并计算JQ1在膀胱癌细胞中的IC50值,之后选取浓度为0.5、1μmol/L的JQ1,采用流式细胞仪检测JQ1对膀胱癌细胞凋亡及周期作用,Transwell侵袭实验检测JQ1对膀胱癌细胞侵袭能力的影响,qRT-PCR法检测癌基因C-MYC及抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果 JQ1抑制膀胱癌细胞的增殖,促进膀胱癌细胞凋亡,阻滞细胞于G0/G1期,抑制膀胱癌细胞侵袭,下调癌基因C-MYC及抗凋亡基因Bcl-2的表达。结论 JQ1可以抑制膀胱癌细胞株的生长,其作用机制可能与JQ1抑制癌基因C-MYC及抗凋亡基因Bcl-2表达有关。

Brd4在HPV E2蛋白转录调节中的作用

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)引起的宫颈癌患者日益增加,而HPV E2蛋白在宫颈癌发生和发展过程中起着重要作用,对其功能尚在研究中,本文就近年对Brd4在HPV E2蛋白转录调节中的作用研究作一综述。