Cytotoxicity study of ethanol extract of the stem bark of asam kandis (Garcinia cowa Roxb.) on T47D breast cancer cell line

Objective:To investigate the cytotoxic effect of ethanol extract of the stem bark of asam kandis[Garcinia cowa Roxb.(G.cowa)]on T47 D breast cancer cell line.Methods:The cytotoxicity of ethanol extract was carried out against human breast cancer cell line(T47D) by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide colorimetric assay.The extract was added at various concentrations(0.1.1,10 and 100 μg/mL).The level of cytotoxicity was determined by calculating the level of IC_(50),that was based on the percentage of the cell death after 24 h treatment with the extract.Cell morphological changes were observed by using inverted microscope.Results:The 3-(4.5-dimelhylthiazol-2-yl)-2.5-diphenyltelrazolium bromide assay showed that ethanol extract of G.cowa exhibited significant cytotoxic effect on T47 D with IC_(50) value of(5.10+1.68) μg/mL.Morphological alteration of the cell lines after exposure to ethanol extract of G.cowa was observed under phase contrast microscope in a dosc-dependent manner.ConclusionsThe results suggest the possible use of ethanol extract of asam kandis for preparing herbal medicine for cancer-related ailments.

5′-氮杂-2′-脱氧胞苷对T47D乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨去甲基化5′-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对T47D乳腺癌细胞株生长周期及凋亡的影响。方法分别使用浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、25.0、100.0μmol/L 5-Aza-CdR处理T47D细胞株。MTT法检测T47D细胞存活率。流式细胞仪检测T47D细胞生长周期,观察细胞凋亡情况。RT-PCR法检测处理前后抑癌基因p16 mR-NA表达。结果5-Aza-CdR作用后T47D细胞明显受抑,G0/G1期细胞明显增多,细胞阻滞于G1期,凋亡率明显增高;5-Aza-CdR处理后无p16表达的T47D细胞检测出p16基因的重新表达。结论5-Aza-CdR可抑制T47D细胞的生长,并促进其凋亡;其机制可能为消除某些抑癌基因启动子甲基化。

Effect of 1,25(OH)_2D_3 on the growth and apoptosis of breast cancer cell line MCF-7

Objective To study the effect of 1,25 dihydroxyvitamin D 3 (1,25(OH) 2D 3) on the growth and apoptosis of breast cancer cell line MCF 7 Methods Cell number was determined using the MTT method Flow cytometric analysis was performed on cell cycles, and the percentage of apoptosis was counted Apoptotic cells were quantified by terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL), and bcl 2 protein expression was estimated with Western blotting Results After incubation with 1,25(OH) 2D 3 10 7 mol/L for 48 hours, MCF 7 cells exhibited significant growth in a dose and time dependent manner Flow cytometric analysis indicated that cell numbers in G 0/G 1 increased along with increasing apoptotic peak and percentage With microscope and electron microscope observation, characteristics of apoptosis such as typical apoptotic bodies were commonly found TUNEL also showed that 1,25(OH) 2D 3 10 8 mol/L and 10 7 mol/L groups had significantly high apoptosis percentage than control group with dose dependence on induction apoptosis And Western blot showed that 1,25(OH) 2D 3 10 8 mol/L could down regulate bcl 2 protein and 10 7 mol/L could almost block bcl 2 protein expression Conclusions 1,25(OH) 2D 3 can inhibit cell growth with G 0/G 1 arrest, enhance the proliferation inhibition action of adriamycin, and induce apoptosis which may result from the down regulation of the anti apoptotic bcl 2 protein

D-δ-三烯生育酚抗乳腺癌细胞的活性

目的探讨D-δ-三烯生育酚抗人乳腺癌MCF-7细胞的生物学活性。方法将细胞分为对照组(无药物培养)和实验组,实验组设低、中、高剂量组,分别加入终浓度为30,40,50μmol·L-1的D-δ-三烯生育酚,药物干预MCF-7细胞24 h后,显微镜下观察各组细胞生长状态,四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪分析细胞增殖、周期与凋亡。结果 D-δ-三烯生育酚抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为(9.33±1.68)%,(32.47±3.18)%和(76.63±1.00)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);低、中、高剂量组G1期细胞所占比例分别为(54.34±1.50)%,(58.24±0.81)%和(62.11±1.12)%,与对照组[(43.34±2.51)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组贴壁细胞明显减少,漂浮死亡细胞明显增多,细胞早期凋亡率Q4分别为(10.87±0.50)%,(17.87±2.40)%和(25.83±3.76)%,与对照组[(1.93±0.25)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 D-δ-三烯生育酚能抑制MCF-7细胞增殖,阻滞细胞于G1期,诱导细胞凋亡,具有抗乳腺癌MCF-7细胞的生物学活性。

柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖与凋亡的影响

目的:探讨柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖与凋亡的影响。方法:设置对照组、150 mg·L-1柴胡皂苷D组、100 mg·L-1柴胡皂苷D组、50 mg·L-1柴胡皂苷D组和25 mg·L-1柴胡皂苷D组,采用CCK-8实验方法检测柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖的影响;采用流式细胞术检测柴胡皂苷D对人乳腺癌细胞株SK-BR-3的细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:柴胡皂苷D各浓度组细胞存活率分别为(85.3±4.13)%、(68.85±3.85)%、(45.28±3.25)%、(23.51±2.23)%,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。柴胡皂苷D各浓度组G1期细胞比例分别为(58.23±2.21)%、(55.51±2.34)%、(45.67±3.23)%、(33.55±4.12)%,S期细胞的比例分别为(12.67±2.32)%、(10.34±2.45)%、(8.23±3.12)%、(7.34±3.98)%,G2期细胞所占的比例分别为(29.10±2.25)%、(34.15±3.45)%、(46.10±3.01)%、(59.11±2.34)%。柴胡皂苷D各浓度组G2期细胞所占比例与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。柴胡皂苷D各浓度组细胞凋亡率分别为(9.00±1.35)%、(20.20±1.45)%、(38.50±2.50)%、(50.25±3.75)%,均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:柴胡皂苷D可明显阻滞SK-BR-3细胞株的增殖,将SK-BR-3细胞株的细胞周期阻滞于G2期,以促进该细胞的凋亡。

王瓜葫芦素D的提取及其对大鼠乳腺癌细胞增殖、凋亡和体内成瘤作用的影响

目的从王瓜中提取葫芦素D,并观察其对大鼠乳腺癌细胞增殖、凋亡和体内成瘤作用的影响。方法采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析,结合硅胶柱色谱、高效液相色谱法(HPLC)对王瓜果实进行分离纯化,运用现代光谱技术(~1H-NMR)对提取化合物(葫芦素D)的结构进行鉴定。培养大鼠乳腺癌细胞株Walker256,将细胞分为实验1、2、3组和对照组,分别加入2、4、8μmol/L的葫芦素D和等量培养液。采用Ed U法观察细胞增殖情况,TUNEL法观察凋亡情况。将80只雌性SPF大鼠随机分为Con组、Sham组、IP-L组和IP-H组,各20只。Sham组、IP-L组和IP-H组取Walker256细胞制作大鼠乳腺癌骨转移瘤模型,Con组不制作模型;IP-L组经腹腔注射0.75mg/(kg·d)的葫芦素D,IP-H组经腹腔注射1.5 mg/(kg·d)的葫芦素D,Sham组腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续21 d。观察各组大鼠左侧胫骨组织病理变化,测量胫骨肿瘤瘤体大小,观察毒性反应发生情况。结果从王瓜提取物中分离出1个化合物,鉴定为葫芦素D。对照组及实验1、2、3组细胞增殖抑制率分别为5.32%±4.54%、46.17%±4.87%、57.37%±5.15%、64.61%±5.33%,细胞凋亡率分别为6.24%±4.31%、35.43%±5.09%、44.79%±4.92%、73.19%±4.86%,组间两两相比,P均<0.05。Con组、Sham组、IP-L组、IP-H组大鼠转移瘤代谢体积平均值分别为0、2.1、1.7、1.2 cm^3;IP-L组、IP-H组与Sham组相比,P均<0.05;IP-L组与IP-H组相比,P<0.05。Sham组大鼠胫骨骨组织结构紊乱,多处骨皮质缺损,骨髓腔内可见大量肿瘤细胞,骨小梁破坏明显;IP-L组与IP-H组骨质破坏较Sham组轻,IP-H组可见部分正常骨髓组织。Con组、Sham组、IP-L组、IP-H组分别有0、0、6、13只大鼠死亡;IP-L组、IP-H组死亡率与Con组、Sham组相比,P均<0.05;IP-L组死亡率与IP-H组相比,P<0.05。结论在王瓜中分离得到葫芦素D,其可抑制大鼠乳腺癌细胞株Walker256增殖,诱导其凋亡;葫芦素D对大鼠乳腺癌骨转移瘤有生长抑制作用,但可导致大鼠死亡率增加。

白花蛇舌草醇提取物对乳腺癌T-47D细胞株生长的抑制作用

目的:观察白花蛇舌草醇提取物对乳腺癌细胞T-47D生长的影响。方法:采用平皿克隆形成实验、软琼脂集落形成实验和BrdUrd(溴脱氧尿苷)掺入实验,观察不同浓度的白花蛇舌草醇提取物(1.0μg/mL,3.0μg/mL,10μg/mL,30μg/mL,100μg/mL)对T-47D细胞锚定依赖性生长和软琼脂集落形成能力及核酸合成的抑制作用。结果:①随着白花蛇舌草醇提取物浓度的升高,对T-47D细胞的生长呈现明显抑制作用;②白花蛇舌草醇提取物可呈浓度依赖性抑制对数生长期T-47D细胞核酸合成。结论:白花蛇舌草醇提取物可能通过影响肿瘤细胞核酸合成而抑制T-47D细胞生长。

山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L^(-1)、100 g·L^(-1)、200 g·L^(-1),400 g·L^(-1)、600 g·L^(-1)、800 g·L^(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L^(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L^(-1)、300g·L^(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(<200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(>200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。

人乳腺癌细胞株透明质酸酶的表达及其意义

目的 通过检测人乳腺癌细胞株透明质酸酶 (Hyse)水平的表达 ,并与雌激素受体(ER)、以及血管内皮生长因子 (VEGF)、基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和组织蛋白酶 D(Cath D)比较 ,探讨Hyse在乳腺癌侵袭、转移及预后评价中的作用。 方法 应用细胞培养技术、酶联免疫吸附测定和免疫组织化学等方法分别测定 10株人乳腺癌细胞的Hyse ,以及VEGF、MMP 9、和Cath D的表达。结果 10株人乳腺癌细胞Hyse的表达存在明显差异。ER(+ )细胞株Hyse表达低水平 ,ER(-)细胞株Hyse表达高水平 (P <0 .0 1)。Hyse高表达细胞株中VEGF、MMP 9和Cath D的表达明显高于Hyse低表达细胞株 (P <0 .0 5 )。结论 Hyse与乳腺癌的侵袭、转移潜能及预后有一定的相关性。