海藻糖高产株Brevibacterium sp SY361海藻糖磷酸化酶(EC2.4.1.64)的纯化

目的研究分离纯化海藻糖高产株Brevibacterium sp SY361中海藻糖磷酸化酶的工艺,获得高纯度的海藻糖磷酸化酶。方法大量培养细菌Brevibacterium sp SY361,超声粉碎细胞,通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-SephadexA-25柱层析和Sephadex G-200凝胶过滤等步骤纯化其海藻糖磷酸化酶,并通过SDS-PAGE检测纯化效果。结果经纯化后的海藻糖磷酸化酶纯度提高了35.6倍,比活力达到7.48U/mg,SDS-PAGE呈1条带。结论纯化后的海藻糖磷酸化酶已达到纯度要求,可用于酶性质的研究。