鹅不食草的生药鉴定研究

目的:对鹅不食草药材进行鉴别研究。方法:采用系统的中药鉴定的方法对鹅不食草的性状、组织显微进行研究,并以短叶老鹳草素为对照品对鹅不食草进行薄层鉴别。结果:确定了鹅不食草的药材性状、组织显微鉴别特征以及薄层色谱鉴定方法。结论:首次以短叶老鹳草素为对照品对鹅不食草进行薄层色谱鉴别,与性状、组织显微鉴别综合应用,提高了对鹅不食草鉴别的准确度,方法简单、快速。

灯盏花素通过调节PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体功能诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡

目的研究灯盏花素对HeLa细胞增殖、凋亡、ROS产生和线粒体功能障碍的作用及其相关作用机制。方法采用人宫颈癌细胞系HeLa为研究对象。分别采用MTT法、流式细胞术、DCFH⁃DA探针和线粒体肿胀试验检测灯盏花素对HeLa细胞增殖、凋亡、ROS产生和线粒体功能的影响。应用Western blot检测线粒体功能障碍的特异性蛋白以及PINK1/Parkin途径表达。应用小干扰RNA(siRNA)技术敲低PINK1表达以验证灯盏花素作用机制。结果灯盏花素以剂量依赖性方式抑制细胞活力、诱导细胞凋亡和促进细胞内ROS的产生(P<0.01)。随着灯盏花素浓度的增加,HeLa细胞线粒体肿胀逐渐增加(P<0.001)。在HeLa细胞中,Bax/Bcl⁃2的比例、Cyt C和Cleaved caspase⁃3随灯盏花素浓度的增加而上调(P<0.01)。同时,灯盏花素处理后,Cyto Cyt C的释放显著增强(P<0.01),而Mito Cyt C的水平明显降低(P<0.01)。与对照组相比,灯盏花素治疗后PINK1和Parkin蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。进一步功能学评价显示,PINK1基因敲低与灯盏花素治疗产生了类似的抑制HeLa细胞活力,提高凋亡细胞百分率和促进ROS产生等体外活性结果。结论灯盏花素治疗抑制了PINK1/Parkin通路,从而抑制HeLa细胞活力,提高凋亡细胞百分率和促进ROS产生。

HPLC/UV测定鹅不食草中五种倍半萜内酯成分含量

目的:建立高效液相同时测定鹅不食草中5种倍半萜内酯成分:山金车内酯D、山金车内酯C、minimolideF、小堆心菊素C和短叶老鹳草素的含量测定方法。方法:采用AlltimaTMC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1,检测波长223nm,柱温35℃。结果:在线性范围内5个成分线性良好(r≥0.9999),精密度RSD均小于2%;重现性RSD均小于3%;平均回收率94.09%~106.32%,RSD均小于2%。10批样品中5种成分含量范围为:423.3~1437.2、144.1~498.0、29.8~159.2、66.8~188.8、1290.1~3476.4μg·g^-1。5种成分在不同批次的药材中的含量差异显著,短叶老鹳草素和山金车内酯D的含量较高,可作为鹅不食草质量控制指标性成分。结论:该方法操作简单、准确、灵敏度高、重复性好,对鹅不食草的质量评价与控制具有一定的参考意义。

不同采收时间鹅不食草中2种倍半萜内酯的含量测定

目的采用高效液相色谱法测定鹅不食草中的山金车内酯C、短叶老鹳草素两种倍半萜内酯的含量。方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（48：52）,流速为0.4 ml·min-1,检测波长为220nm,柱温为25℃。结果山金车内酯C和短叶老鹳草素的线性范围分别为0.042～0.42μg（r=0.999 8）和0.23～2.30μg（r=0.999 7）。平均回收率分别为98.20%（RSD=1.8%）和98.89%（RSD=2.2%）。不同采收时间鹅不食草药材中山金车内酯C、短叶老鹳草素的含量范围分别为0.19～0.61,2.00～5.29 mg·g-1。结论该方法操作简单、快速,重复性好,可同时测定鹅不食草中山金车内酯C、短叶老鹳草素的含量;确定最佳采收时间为8月开花期。